背角無齒礦中血細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能

背角無齒礦中血細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能

目前，山羊美學(xué)的研究主要集中在對其血漿的分類和作用上。關(guān)于貝殼貝殼的分類有許多報(bào)道，但對貝殼血漿的類型和數(shù)量的描述存在很大差異。松棗和菲律賓沙棗的紅細(xì)胞通常分為兩種。圓仁亞美和淺溝貝殼的紅細(xì)胞分為三種。海灣貝殼工人的紅細(xì)胞分為四種類型。此外，文獻(xiàn)中還報(bào)道了四種類型的淡水貝類文獻(xiàn)、漢江河豚殼、橢圓形背景艦和三角帆殼的血漿。本作者將背部無齒貝訓(xùn)的紅細(xì)胞分類給水生百合屬植物，并對其進(jìn)行了透射電視分析，以為本生物它們的提供理論依據(jù)。1材料和方法1.1材料表面背角無齒蚌于2008年10—12月分批采集于江西省鄱陽湖,體長6~12㎝.室溫下,在水簇箱內(nèi)暫養(yǎng)3~5d后開始試驗(yàn).1.2方法1.2.1血淋巴之混合、制備取健康蚌,用2.5mL(0.6×25針頭)注射器從后閉殼肌取血.血淋巴以1∶2比例與Alsever’s液(葡萄糖20.8g/L,檸檬酸三鈉8.0g/L,氯化鈉22.5g/L,pH7.2)混合,備用.1.2.2活佛紅細(xì)胞的檢測取血淋巴2.5mL滴于載玻片上,蓋上蓋玻片,靜置約20min,用OlympusCX41顯微鏡觀察.1.2.3中性樹膠電泳取血淋巴2.5mL滴于載玻片上,靜置30min,吸去上層清液,晾干,滴加Wrights染色液染色10min,加入等量的PBS,染色10min,PBS沖洗,50%乙醇分色,晾干,中性樹膠封片后觀察.1.2.4-三甲基-5-戊二醛的合成取血淋巴20mL,分裝于2個(gè)10mL的離心管內(nèi),3000r/min離心10min,除去血清,加2.5%戊二醛,固定1~2h,以0.1mol/mL的二甲胂酸緩沖液洗滌,1%OsO4后固定、酒精脫水,Epon包埋、VltracutE型超薄切片機(jī)切片,在日立H-600型電子顯微鏡下觀察.加速電壓為60kV.1.2.5紅細(xì)胞計(jì)數(shù)取30只健康蚌,每只蚌抽血1次,抗凝處理,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù).每毫升血細(xì)胞數(shù)=測得血細(xì)胞數(shù)×50000×稀釋倍數(shù).1.2.6紅細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞直徑.取抗凝血淋巴2.5mL,滴于載玻片上,蓋上蓋玻片,在27℃培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20min,用帶目鏡測微尺的光學(xué)顯微鏡測量血細(xì)胞直徑和核直徑,細(xì)胞直徑以除偽足外的最長軸為準(zhǔn),核直徑以核的最長軸為準(zhǔn).每種細(xì)胞各測100個(gè).測量數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行多層比較分析.2顆粒細(xì)胞非構(gòu)造細(xì)胞的形態(tài)特征顯微鏡下,背角無齒蚌明顯有兩大類型的血細(xì)胞:顆粒細(xì)胞和無顆粒細(xì)胞.顆粒細(xì)胞和無顆粒細(xì)胞又有不同的形態(tài)特征.根據(jù)細(xì)胞和胞質(zhì)內(nèi)顆粒的大小特征可以將顆粒細(xì)胞分為大顆粒細(xì)胞和小顆粒細(xì)胞.根據(jù)細(xì)胞大小和核質(zhì)比的差異特征又可將無顆粒細(xì)胞分成透明細(xì)胞和淋巴樣細(xì)胞.2.1wmaxs染色的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞器特性顆粒細(xì)胞明顯的特征是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有許多顆粒,細(xì)胞核相對較小,核偏位,核質(zhì)比低.大顆粒細(xì)胞(Lg):活體細(xì)胞為圓形或橢圓形,體積比其他血細(xì)胞大.細(xì)胞內(nèi)有折光率高的大顆粒.細(xì)胞一般不伸出偽足或伸出很短的偽足.細(xì)胞核常被大顆粒所覆蓋.大顆粒細(xì)胞通常易破裂,出現(xiàn)脫顆粒現(xiàn)象(封三圖1-A).Wrights染色后胞質(zhì)內(nèi)顆粒為嗜酸性,呈現(xiàn)紫紅色或鮮紅色,細(xì)胞核藍(lán)紫色(封三圖1-a).電鏡觀察發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)內(nèi)有許多電子密度高的大顆粒.細(xì)胞核呈橢圓形或圓形,染色質(zhì)均勻.胞質(zhì)內(nèi)可見內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基器等細(xì)胞器(封三圖2-a).小顆粒細(xì)胞(Sg):活體細(xì)胞呈圓形、橢圓形或不規(guī)則形狀,細(xì)胞易變形,細(xì)胞伸出指狀或根狀偽足.小顆粒細(xì)胞明顯小于大顆粒細(xì)胞,胞質(zhì)內(nèi)含有較多的小顆粒,折光率較高(封三圖1-B).Wrights染色后細(xì)胞表現(xiàn)出嗜酸性和嗜堿性兩種,嗜酸性小顆粒細(xì)胞的胞質(zhì)為淡紅色,顆粒呈深紅色,細(xì)胞核深藍(lán)色.嗜堿性小顆粒細(xì)胞的胞質(zhì)呈淡藍(lán)色,顆粒呈深藍(lán)色,細(xì)胞核藍(lán)黑色(封三圖1-b,c).電鏡觀察發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)內(nèi)有許多電子密度高的小顆粒,細(xì)胞核呈圓形或腎形,染色質(zhì)較均勻.細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基器等細(xì)胞器(封三圖2-b).2.2w水生植物細(xì)胞生物學(xué).無顆粒細(xì)胞明顯的特征是胞質(zhì)內(nèi)不含有顆粒或含有少量的顆粒,細(xì)胞核較大,核質(zhì)比高.透明細(xì)胞(HC):活體細(xì)胞呈圓形或不規(guī)則形狀,伸出的偽足呈片狀或根狀.胞質(zhì)內(nèi)無顆?；蛴猩倭款w粒,細(xì)胞核呈圓形或橢圓形(封三圖1-C).Wrights染色發(fā)現(xiàn)部分細(xì)胞呈嗜酸性,胞質(zhì)為淡紅色,核為深藍(lán)色;另一部分細(xì)胞呈嗜堿性,胞質(zhì)為淡藍(lán)色,核為深藍(lán)色(封三圖1-d,e).電鏡觀察到胞質(zhì)內(nèi)無明顯的顆粒,但有高爾基體,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器.細(xì)胞核橢圓形,內(nèi)有濃縮的染色質(zhì)(封三圖2-c).淋巴樣細(xì)胞(LY):活體細(xì)胞為圓形,很少伸出偽足,細(xì)胞體積相對其他血細(xì)胞的體積小,細(xì)胞內(nèi)無顆粒,細(xì)胞核圓形,居中(封三圖1-D).Wrights染色發(fā)現(xiàn)細(xì)胞呈嗜堿性,胞質(zhì)為淡藍(lán)色,核為深藍(lán)色(封三圖1-f).電鏡觀察到細(xì)胞中電子密度低,無顆粒,細(xì)胞核為橢圓形或圓形,有濃縮的染色質(zhì).胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器少(封三圖2-d).2.3細(xì)胞類型和分布測得背角無齒蚌血細(xì)胞濃度為(2.42±0.38)×106/mL,其中小顆粒細(xì)胞和透明細(xì)胞為主要的細(xì)胞類型,所占比例分別為59.28%和27.74%.大顆粒細(xì)胞和淋巴樣細(xì)胞相對較少,所占比例分別為4.28%和8.7%.2.4紅細(xì)胞直徑和核質(zhì)比從表1可以看出,4種血細(xì)胞中大顆粒細(xì)胞的直徑最大,淋巴樣細(xì)胞的直徑最小.統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn),4種血細(xì)胞的直徑存在顯著差異.淋巴樣細(xì)胞的細(xì)胞核直徑最大,小顆粒細(xì)胞的細(xì)胞核直徑最小,血細(xì)胞的核直徑之間沒有顯著差異.另外,淋巴樣細(xì)胞的核質(zhì)比最大,大顆粒細(xì)胞的核質(zhì)比最小.3背角無齒鉗細(xì)胞的細(xì)胞分析貝類血細(xì)胞的分類通常依據(jù)血細(xì)胞的形態(tài)特征進(jìn)行.由于其形態(tài)特征存在較大變化,因此,建議結(jié)合血細(xì)胞的生理生化特性及其功能進(jìn)行分類.Cheng認(rèn)為貝類血細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中含有許多顆粒的是顆粒細(xì)胞,胞質(zhì)中沒有或有少量顆粒的是無顆粒細(xì)胞.事實(shí)上,貝類血細(xì)胞存在許多過渡類型.根據(jù)血細(xì)胞和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)顆粒的大小,顆粒細(xì)胞還能夠分成大顆粒細(xì)胞和小顆粒細(xì)胞.劉東武等利用流式細(xì)胞儀分析菲律賓蛤仔(Ruditapesphilippinarum)的血細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)除了大顆粒細(xì)胞和小顆粒細(xì)胞外,還有介于兩者之間的血細(xì)胞,稱為中顆粒細(xì)胞.另外,根據(jù)細(xì)胞內(nèi)顆粒的組織化學(xué)特性還能夠?qū)㈩w粒細(xì)胞分為大嗜酸性顆粒細(xì)胞和小嗜酸性顆粒細(xì)胞或嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞.筆者發(fā)現(xiàn)背角無齒蚌的顆粒細(xì)胞除了細(xì)胞和顆粒大小有較大差異外,顆粒細(xì)胞的形態(tài)及伸展情況也存在較大的差別.有些細(xì)胞很少伸出偽足,而另一些則常伸出根狀偽足,因此,筆者將背角無齒蚌的顆粒細(xì)胞分為大顆粒細(xì)胞和小顆粒細(xì)胞.Zhang等和羅文等通過透射電子顯微鏡發(fā)現(xiàn)大顆粒細(xì)胞內(nèi)含有電子密度高的大顆粒.在背角無齒蚌的大顆粒細(xì)胞中同樣發(fā)現(xiàn)了許多直徑較大的顆粒,電子密度也較高.Nakayama等與沈亦平等描述的漿液細(xì)胞也具有大顆粒細(xì)胞的類似特征,可能與本研究中的大顆粒細(xì)胞是同一類細(xì)胞.此外,Zhang等發(fā)現(xiàn)大顆粒細(xì)胞是多核細(xì)胞,而本研究與陳全震等僅觀察到單核的大顆粒細(xì)胞,并且發(fā)現(xiàn)大顆粒細(xì)胞容易出現(xiàn)脫顆粒的現(xiàn)象.小顆粒細(xì)胞是背角無齒蚌血細(xì)胞中數(shù)量最多的一類血細(xì)胞,細(xì)胞體積小于大顆粒細(xì)胞,胞質(zhì)內(nèi)含有大量的小顆粒,這與Zhang等發(fā)現(xiàn)的小顆粒細(xì)胞特征一致.筆者發(fā)現(xiàn)的小顆粒細(xì)胞吞噬細(xì)菌的能力強(qiáng)于其他3類血細(xì)胞,因此,認(rèn)為小顆粒細(xì)胞是背角無齒蚌免疫防御的主要血細(xì)胞.多數(shù)研究者認(rèn)為,無顆粒細(xì)胞可以分為更多的亞群,其中一類亞群細(xì)胞的體積較大,細(xì)胞核較小,偏位,細(xì)胞數(shù)量也較多,細(xì)胞核內(nèi)沒有明顯的顆粒,通常稱之為透明細(xì)胞或大透明細(xì)胞.筆者觀察到的透明細(xì)胞同樣具有這些特征.此類細(xì)胞在背角無齒蚌血細(xì)胞中的比例僅次于小顆粒細(xì)胞,并具有吞噬能力,可能也是背角無齒蚌免疫防御的主要血細(xì)胞之一.另外,在貝