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第二講免疫器官的觀察與免疫細(xì)胞的分離第1頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月第二講
免疫器官的觀察與
免疫細(xì)胞的分離第2頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月實驗?zāi)康恼莆招“资蟮淖侥门c處死方法掌握免疫細(xì)胞分離的方法及其效果的判斷熟悉血細(xì)胞計數(shù)板的構(gòu)造及使用方法第3頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月免疫器官的觀察第4頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月免疫細(xì)胞種類第5頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月免疫細(xì)胞分離技術(shù)
密度梯度離心法免疫吸附分離法熒光激活細(xì)胞分選儀分離法磁珠分離法抗原肽-MHC分子四聚體技術(shù)花環(huán)沉降法第6頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月外周血單核細(xì)胞的分離離心前離心后稀釋抗凝血淋巴細(xì)胞分離液血漿單個核細(xì)胞粒細(xì)胞紅細(xì)胞密度梯度離心法第7頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月淋巴細(xì)胞及其亞群的分離第8頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月抗原肽-MHC分子四聚體技術(shù)
T第9頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月小白鼠的抓取和固定通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上,在小鼠向前掙扎爬行時,用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚,翻轉(zhuǎn)后將小鼠置于左手掌心、無名指和小指夾其背部皮膚和尾部,即可將小鼠完全固定。第10頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月小白鼠的抓取和固定第11頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月小白鼠的抓取和固定第12頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月小白鼠的處死方法頸椎脫臼法:用拇指和食指用力往下按住鼠頭,另一只手抓住鼠尾,用力稍向后上方一拉,使之頸椎脫臼,造成脊髓與腦髓斷離,動物立即死亡。第13頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月小白鼠的處死法(頸椎脫臼法)
第14頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月倒T字開腹
第15頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月小白鼠脾臟第16頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月小白鼠脾臟第17頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月小白鼠脾臟
第18頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月小白鼠胸腺第19頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月小白鼠胸腺第20頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月【實驗器材】
小白鼠手術(shù)器械,解剖臺,血細(xì)胞計數(shù)板,顯微鏡0.2%的臺盼藍(lán)染液第21頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月【實驗步驟】頸椎脫臼法處死小白鼠,取其脾臟將脾臟放入適量(約15ml)生理鹽水中,除去筋膜取綠豆大小的脾臟,用玻片研磨制成10ml細(xì)胞懸液取1ml細(xì)胞懸液于試管中,加入1滴臺盼藍(lán)染液混勻后靜置3分鐘,低倍鏡觀察第22頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月【臺盼蘭拒染法原理】
通透性著色顏色體積
死細(xì)胞
高
易藍(lán)大
活細(xì)胞
低
難無色小活細(xì)胞死細(xì)胞第23頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月注意事項脾臟去凈筋膜,棄邊緣,取其中間部分研磨時不可用力過大,時間不宜過長染色時間不宜過長或過短血細(xì)胞計數(shù)板的使用方法(10倍鏡、暗視野)第24頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月血細(xì)胞記數(shù)板
細(xì)胞計數(shù)池第25頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月血細(xì)胞計數(shù)池的構(gòu)造
白細(xì)胞計數(shù)區(qū):
紅細(xì)胞計數(shù)區(qū):無效計數(shù)區(qū)第26頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月【計數(shù)原則】
1、2、“”形隨機(jī)計數(shù)S計左不計右,計上不計下√
×√√第27頁,課件共30頁,創(chuàng)作于2023年2月【實驗結(jié)果】
第28頁,課件共30頁,創(chuàng)作
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