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放射免疫分析1放射免疫分析1掌握放射免疫分析的基本原理了解放射免疫分析實(shí)驗(yàn)室配置掌握質(zhì)量控制目的與要求2掌握放射免疫分析的基本原理目的與要求2必須掌握放免分析的基本原理一.基本原理3必須掌握放免分析的基本原理一.基本原理3基本試劑抗體(高親和力、高特異性、高滴度)標(biāo)記抗原(比活性和放化純度、抗原原特性)標(biāo)準(zhǔn)品分離試劑(雙抗體,聚乙三醇,葡萄球菌A蛋白等)4基本試劑抗體(高親和力、高特異性、高滴度)4基本步驟
加樣孵育分離測(cè)放射性數(shù)據(jù)處理5基本步驟加樣5劑量反應(yīng)曲線認(rèn)識(shí)標(biāo)準(zhǔn)曲線的形態(tài)結(jié)合率(%)Ag劑量6劑量反應(yīng)曲線結(jié)合率(%)Ag劑量6掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率對(duì)測(cè)定的影響標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率對(duì)放射免疫分析方法的靈敏度和精密度均有影響。影響標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率的因素:1、親和常數(shù)K2、標(biāo)記抗原和標(biāo)準(zhǔn)抗原的用量3、特異性抗體的用量掌握Bo(總結(jié)合)、T(總管)、NSB的概念7掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率對(duì)測(cè)定的影響標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率對(duì)放射免疫分析二.非放射性標(biāo)記技術(shù)與自動(dòng)化酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(原理及優(yōu)缺點(diǎn))化學(xué)發(fā)光免疫分析(原理及優(yōu)缺點(diǎn))電化學(xué)發(fā)光免疫分析(原理及優(yōu)缺點(diǎn))時(shí)間分辨熒光免疫分析(原理及優(yōu)缺點(diǎn))8二.非放射性標(biāo)記技術(shù)與自動(dòng)化酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(原理及優(yōu)缺點(diǎn))ADVIACentaur以吖啶酯為發(fā)光物質(zhì),在堿性條件下遇到過(guò)氧化物便發(fā)生單光子發(fā)射,缺點(diǎn)是只能一次短時(shí)間內(nèi)發(fā)光.9ADVIACentaur以吖啶酯為發(fā)光物質(zhì),在堿性條件下遇BECKMANCOULTER10BECKMANCOULTER10Elecys20210以三丙胺為發(fā)光物質(zhì),三價(jià)釕化合物為底物,在電極作用下可多次反復(fù)發(fā)光,檢測(cè)靈敏度極高.11Elecys20210以三丙胺為發(fā)光物質(zhì),三價(jià)釕化合物為底IMMULITE12IMMULITE12IMMULITE100013IMMULITE100013AUTODELFIA以鑭系元素為標(biāo)記物,在激發(fā)光的作用下,發(fā)光長(zhǎng)壽命的特異熒光,檢測(cè)靈敏度可達(dá)10-18m
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