小柴胡湯對肺炎鏈球菌感染模型動物的治療作用

小柴胡湯對肺炎鏈球菌感染模型動物的治療作用

發(fā)燒是臨床上常見的癥狀。引起發(fā)燒的原因很多，治療方法也很復(fù)雜。小柴胡湯源于張仲景所創(chuàng),療效肯定,應(yīng)用廣泛,被歷代奉為經(jīng)典,目前仍是臨床使用概率最高的方劑之一。文獻(xiàn)記載,小柴胡湯主治病癥中,以發(fā)熱最多。有作者調(diào)查了1984-2002年間關(guān)于小柴胡湯治療發(fā)熱的報(bào)道,顯示小柴胡湯所治療的發(fā)熱以高熱居多,適合疾病種類廣泛,其中感染性發(fā)熱較多,同時對非感染性發(fā)熱(包括癌性發(fā)熱、免疫系統(tǒng)等引起的發(fā)熱)和不明原因發(fā)熱亦有效。為進(jìn)一步了解小柴胡湯抗感染、解熱作用及其可能的機(jī)理,筆者復(fù)制動物感染及發(fā)熱模型,觀察其對細(xì)菌感染及內(nèi)毒素誘導(dǎo)發(fā)熱實(shí)驗(yàn)動物的影響。1材料和方法1.1動物、藥品和試劑實(shí)驗(yàn)動物健康昆明小鼠45只,體重18~22g,雌雄各半;健康SD大鼠30只,體重220~250g,雌雄各半,我院動物中心提供。在室溫(20±2)℃環(huán)境下飼養(yǎng),光照12h。1.1.2藥品和試劑小柴胡湯(柴胡12g,黃芩9g,半夏9g,生姜9g,人參9g,甘草6g,大棗9g),由我院中藥房提供。肺炎鏈球菌、大腸埃希菌內(nèi)毒素,均購自中國藥品生物制品檢定所。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1中藥生藥試驗(yàn)小柴胡湯及板藍(lán)根按常規(guī)由本院中藥制劑室協(xié)助配制,制成水溶液,經(jīng)55.16kPa高壓蒸汽滅菌后備用,試驗(yàn)時稀釋濃度為每毫升含中藥生藥1g。1.2.2分組及研究方法小鼠在實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)環(huán)境飼養(yǎng)3d后,隨機(jī)分為小柴胡湯組、板藍(lán)根組、模型對照組,每組各15只。各組小鼠腹腔注射最小致死劑量的肺炎鏈球菌菌液(15×109CFU/ml),小柴胡湯及板藍(lán)根組分別灌胃中藥(用量相當(dāng)于成人臨床有效劑量的10倍),模型對照組灌胃等量蒸餾水,連續(xù)給藥7d,1次/d,記錄動物死亡數(shù)。1.2.3基礎(chǔ)體溫測定大鼠適應(yīng)環(huán)境飼養(yǎng)3d后,合格大鼠(1d內(nèi)間隔1h連續(xù)兩次測得肛溫變化≤0.3℃,連續(xù)3d)隨機(jī)分為小柴胡湯組、板藍(lán)根組、模型對照組,每組各10只。實(shí)驗(yàn)前10h開始禁食,排空直腸后測肛溫兩次,每次間隔1h,取平均值作為基礎(chǔ)體溫。各組大鼠實(shí)驗(yàn)當(dāng)天均腹腔注射大腸埃希菌內(nèi)毒素溶液10EU/kg,小柴胡湯及板藍(lán)根組分別灌胃中藥(劑量同前),模型對照組灌胃等量蒸餾水,分別于給藥后1、2、3、4、6、8h測肛溫,比較各測點(diǎn)大鼠體溫變化情況,計(jì)算各組大鼠體溫最高溫差ΔT(發(fā)熱時體溫與基礎(chǔ)體溫的差值)。1.2.4統(tǒng)計(jì)方法計(jì)量資料采用t檢驗(yàn),記數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),統(tǒng)計(jì)資料由SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。2小柴胡湯對小鼠致病性的影響2.1小柴胡湯對肺炎鏈球菌感染小鼠的保護(hù)作用小柴胡湯和板藍(lán)根沖劑對肺炎鏈球菌所致小鼠感染均有一定的保護(hù)作用,可顯著降低感染小鼠的死亡率(P<0.05);小柴胡湯組死亡數(shù)少于板藍(lán)根組,但中藥組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。2.2小柴胡湯對LPS致大鼠發(fā)熱的影響小柴胡湯和板藍(lán)根沖劑均能抑制LPS所致大鼠體溫的升高,與對照組比較在不同時間點(diǎn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),小柴胡湯組降溫效果略優(yōu)于板藍(lán)根組,但中藥組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表2。3小柴胡湯的臨床應(yīng)用感染性疾病是臨床幾大常見疾病之一,嚴(yán)重危害人類的生命和健康。抗菌藥物的出現(xiàn)與應(yīng)用在預(yù)防和治療感染性疾病方面發(fā)揮了巨大的作用,但同時抗菌藥物的濫用也帶來了嚴(yán)重的問題,如越來越多細(xì)菌耐藥及抗菌藥物不良反應(yīng)。中醫(yī)藥是我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的寶庫,中藥制劑在感染性疾病治療方面有著特殊的優(yōu)勢。許多中藥制劑同時具有抗菌、抗病毒及提高免疫等多重功效,臨床療效好、不良反應(yīng)小。小柴胡湯出自《傷寒論》,原文記載:“少陽之為病,口苦,咽干,目眩也?！?“傷寒五六日,中風(fēng),往來寒熱,胸脅苦滿,嘿嘿不欲飲食,心煩喜嘔,……小柴胡湯主之”;“傷寒中風(fēng),有柴胡證,但見一證便是,不必悉具”。明確了小柴胡湯臨床應(yīng)用的要領(lǐng),既用于邪入少陽,居于半表半里。方中柴胡為君,宣散透邪,使邪從太陽而解;黃芩為臣,清熱燥濕,瀉火除煩,清半里之邪;二藥合用,既能宣透清解半表半里之邪,又能使氣機(jī)升降復(fù)常;半夏降逆止嘔;姜、棗調(diào)和營衛(wèi),甘草調(diào)和藥性;邪入少陽,兼有正氣不足,故以人參扶正。通過治療宣透疏泄,使氣機(jī)外達(dá),邪從太陽而解;清熱利膽,以絕邪入陽明之路;補(bǔ)脾益氣,升清降濁,防止邪犯太陰,而有氣機(jī)壅滯之變。全方寒溫并用,升降協(xié)調(diào),有疏利三焦,調(diào)達(dá)上下,宣通內(nèi)外之功。小柴胡湯臨床應(yīng)用廣泛,涉及到內(nèi)、外、婦、兒各科疾病,其中以發(fā)熱性疾病居多,包括感染性發(fā)熱,也包括非感染性發(fā)熱,對于治療細(xì)菌性及病毒性高熱,小柴胡湯療效較好,有報(bào)道2d治愈率可約達(dá)85%;對不明原因性和疑難性發(fā)熱亦有明顯療效?，F(xiàn)代藥理研究也顯示柴胡、黃芩有顯著的抗炎及抗病毒作用,柴胡對感冒病毒、肝炎病毒及牛痘病毒等多種病毒有抑制作用;黃芩能增強(qiáng)白細(xì)胞和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能,對多種細(xì)菌有明顯的抑制效果。內(nèi)毒素是革蘭陰性菌細(xì)胞壁外膜中的脂多糖(LPS)成分,是效應(yīng)性很強(qiáng)的細(xì)菌致熱原,微量LPS就能引起劑量依賴性發(fā)熱,其發(fā)熱是由血液循環(huán)中內(nèi)生致熱原(EP)所介導(dǎo)的,LPS激活單核巨噬細(xì)胞,誘生EP釋放入血,因此在藥效學(xué)中常用于觀察發(fā)熱的病機(jī)及藥物療效。中醫(yī)對內(nèi)毒素早期臨床表現(xiàn)常辯證為實(shí)熱,認(rèn)為內(nèi)毒素是“熱毒”的物質(zhì)基礎(chǔ)。板藍(lán)根為常用的清熱解毒中藥,廣泛用于多種感染性疾病,并被報(bào)道有抗內(nèi)毒素作用。為了解小柴胡湯體內(nèi)抗感染及解熱作用,本研究以肺炎鏈球菌為感染源、內(nèi)毒素為發(fā)熱致熱原,板藍(lán)根為陽性對照,觀察了小柴胡湯對內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠發(fā)熱的抑制效果及肺炎鏈球菌感染小鼠的保護(hù)作用,發(fā)現(xiàn)小柴胡湯有較好的抗感染及