細菌代謝產(chǎn)物的檢測及鑒定

細菌的分類及鑒定細菌的生物化學試驗原理：由于細菌各自的酶系統(tǒng)不同，新陳代謝的產(chǎn)物也有所不同，而這些產(chǎn)物又各具有不同的生物化學特性。為此，可利用生物化學的方法來鑒別細菌的類別，這種試驗稱為細菌的生化反應(yīng)試驗常用檢查方法碳水化合物代謝試驗氨基酸和蛋白質(zhì)代謝試驗碳源利用試驗呼吸酶類試驗抑菌試驗碳水化合物代謝試驗糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗原理由于細菌含有發(fā)酵不同糖類的酶，故分解糖的能力不同，終末產(chǎn)物亦不全都。應(yīng)用鑒定細菌最主要的試驗，格外對腸桿菌科細菌的鑒定尤為重要。氧化一發(fā)酵試驗(O／F試驗)原理氧化型：僅在有氧環(huán)境中分解葡萄糖發(fā)酵型：在有氧或無氧環(huán)境中都能分解葡萄糖產(chǎn)堿型：在有氧或無氧環(huán)境中都不能分解葡萄糖結(jié)果：兩支培育基均無變化為產(chǎn)堿型；兩支培育基均產(chǎn)酸為發(fā)酵型；若不加石蠟的培育基產(chǎn)酸為氧化型。應(yīng)用：腸桿菌科細菌（發(fā)酵型）非發(fā)酵菌（產(chǎn)堿型/氧化型）葡萄球菌（發(fā)酵型）微球菌（氧化型）β-半乳糖苷酶試驗原理：有的細菌可產(chǎn)生β-半乳糖苷酶，能分解鄰-硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG)，而生成黃色的鄰-硝基酚，在很低濃度下也可檢出。結(jié)果：菌懸液呈現(xiàn)黃色為陽性反應(yīng)，一般在20～30min內(nèi)顯色。應(yīng)用：飛快及遲緩分解乳糖的細菌ONPG試驗為陽性，而不發(fā)酵乳糖的細菌為陰性。本試驗主要用于遲緩發(fā)酵乳糖菌株的快速鑒定。七葉苷水解試驗原理：七葉苷七葉素黑色化合物培育基：七葉苷培育基、膽汁七葉苷培育基。細菌枸櫞酸鐵結(jié)果：培育基變?yōu)楹谏珵殛栃裕蛔兩邽殛幮?。?yīng)用：D群鏈球菌（+）其它鏈球菌（-）甲基紅試驗原理：葡萄糖丙酮酸混合酸（pH)

醇酮醛（pH)紅色反應(yīng)（+）橘黃色（-）細菌甲基紅試劑培育基：葡萄糖蛋白胨水培育基。應(yīng)用：大腸埃希菌（+）產(chǎn)氣腸桿菌（-）腸桿菌科中沙門菌屬、志賀菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬等為陽性，而腸桿菌屬則為陰性。V-P試驗

原理：葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰紅色化合物（+）培育基：葡萄糖蛋白胨水培育基細菌OH-O胍基結(jié)果：在數(shù)分鐘內(nèi)消滅紅色為陽性；如無紅色消滅且于35℃4h后仍如故者即為陰性。應(yīng)用：常與甲基紅試驗一起使用，由于前者陽性的細菌，后者通常為陰性。產(chǎn)氣腸桿菌（+）大腸埃希菌（-）蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗吲哚試驗原理色氨酸吲哚玫瑰吲哚（紅色）應(yīng)用腸道桿菌的鑒定。大腸埃希菌（+）沙門菌屬（-）對二甲基氨基苯甲醛硫化氫試驗原理含硫氨基酸硫化氫硫化鉛/硫化亞鐵（黑色）應(yīng)用腸桿菌科菌屬間的鑒定。

細菌醋酸鉛/硫酸亞鐵尿素（脲）酶試驗原理：無色尿素氨紅色應(yīng)用：腸桿菌科中變形桿菌屬的鑒定。細菌苯丙氨酸脫氨酶試驗原理

苯丙氨酸苯丙酮酸10%氯化鐵綠色化合物應(yīng)用：腸桿菌科的鑒定變形桿菌屬、摩根菌屬、普羅威登斯菌屬（+）氨基酸脫羧酶試驗原理：氨基酸特異性脫羧酶胺＋CO2指示劑變色應(yīng)用：腸桿菌科細菌的鑒定。如肺炎克雷伯菌賴氨酸為陽性，鳥氨酸為陰性。明膠液化試驗原理：明膠明膠酶氨基酸失去凝固力應(yīng)用：腸桿菌科細菌的鑒定。如沙雷菌、一般變形桿菌、陰溝腸桿菌等。碳源利用試驗枸櫞酸鹽利用試驗原理枸櫞酸鹽碳酸鹽+氨（pH)溴麝香草酚藍綠色深藍色應(yīng)用：腸桿菌科細菌的鑒定埃希菌屬、志賀菌屬、愛德華菌屬（-）呼吸酶類試驗細胞色素氧化酶試驗原理鹽酸二甲基對苯二銨醌類化合物（深紫色）應(yīng)用奈瑟菌屬、假單胞菌屬（+）腸桿菌科（-）細菌Cyt氧化酶過氧化氫酶（觸酶）試驗原理某些細菌分泌過氧化氫酶，使過氧化氫生成水和初生態(tài)氧，繼而形成氧分子消滅氣泡。應(yīng)用金黃色葡萄球菌、奈瑟菌屬（+）鏈球菌屬（-）（血漿）凝固酶試驗原理金葡血漿凝固酶應(yīng)