超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測不同色素等干擾物的基質(zhì)中19種農(nóng)藥殘留

超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測不同色素等干擾物的基質(zhì)中19種農(nóng)藥殘留

由于農(nóng)藥的大量使用，農(nóng)業(yè)殘渣問題變得越來越受到重視。本實驗根據(jù)蔬菜、果樹廣泛使用的殺菌劑和殺蟲劑,比如多菌靈、吡蟲啉、苯醚甲環(huán)唑等,以及中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第194號1實驗部分1.1水、電、優(yōu)產(chǎn)品質(zhì)量UPLC-MS/MSXEVOTQ超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(美國Waters公司);U-3900紫外-可見分光光度計(日本Hitachi公司);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士Buchi公司);立式大容量高速離心機(jī)(日本Hitachi公司);Milli-Q全自動超純水制水機(jī)(美國Millipore公司)。甲醇、乙腈、乙酸銨(HPLC級,美國ThermoFisherScientific公司);乙酸、甲苯(HPLC級,美國J.T.Baker公司);C固相萃取柱:TPS柱(1000mg,6mL,天津博納艾杰爾科技有限公司);PC/NH19種農(nóng)藥標(biāo)樣均購于農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心(天津),規(guī)格為1mL,1000mg/kg,根據(jù)需要用甲醇配成合適的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,于-20℃冰箱中保存。1.2基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)基質(zhì)效應(yīng)主要由基質(zhì)成分和目標(biāo)化合物在電噴霧離子源進(jìn)行離子化時相互競爭造成,包括基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)和基質(zhì)抑制效應(yīng)。在液相色譜-質(zhì)譜的定性定量分析中,基質(zhì)效應(yīng)影響儀器的靈敏度和重復(fù)性,是影響準(zhǔn)確定性及定量的重要因素,因而在建立檢測方法時應(yīng)考慮基質(zhì)效應(yīng)的影響并采取措施進(jìn)行消除1.3ms模式1.3.1流動相l(xiāng)s-l-4-三甲基色譜柱:HSST3柱(100mm×2.1mm,1.8μm,美國Waters公司);柱溫:40℃;流動相:A為乙腈,B為0.1%乙酸+4mmol/L乙酸銨水溶液;梯度洗脫程序:0~2min,10%A,2~4min,90%A,4~5.5min,10%A;流速:0.4mL/min;進(jìn)樣量:5μL。1.3.2多反應(yīng)監(jiān)測msm電噴霧離子源(ESI);掃描方式:正負(fù)離子模式自動切換;檢測方式:MRM(多反應(yīng)監(jiān)測);離子源溫度:150℃;去溶劑氣溫度:350℃;去溶劑氣和錐孔氣均為高純氮氣,流速分別為650L/h和50L/h;碰撞氣:高純氬氣,流速0.14mL/min。優(yōu)化的質(zhì)譜參數(shù)見表1。1.4樣品前處理方法1.4.1乙腈-甲苯法分別稱取25g試樣于250mL燒杯中,加入50mL乙腈,用高速組織搗碎機(jī)攪拌2min,濾紙過濾,濾液收集到裝有5~7g氯化鈉的100mL具塞量筒中,濾液收集完畢后劇烈振蕩2min,靜置30min,使乙腈和水相完全分層,取乙腈層10mL,在40℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干,加入3mL淋洗液乙腈-甲苯(3∶1)待凈化;分別采用TPS柱、PC/NH1.4.2psa+c的制備稱取10g試樣于50mL離心管中,加入10mL乙腈,充分搖勻2min,加入2~3g氯化鈉,4g無水硫酸鎂,充分搖勻2min,置于高速離心機(jī)中,10000r/min離心3min,吸取5mL上清液加入裝有0.5gPSA+C2結(jié)果與討論2.1ps聚合物柱TPS柱是專門針對難以凈化的基質(zhì)研制的一款新型固相萃取柱,其填料中含有高比例的進(jìn)口石墨化碳黑以及PS聚合物(聚苯乙烯二乙烯基苯),既能有效去除色素等雜質(zhì),又易洗脫目標(biāo)物,避免了對目標(biāo)物的過度吸附,所以該柱比市場上常見的PC/NHTPS柱和PC/NH關(guān)于QuEChERS方法,只在提取液中加入PSA和C2.24不同基質(zhì)的凈化效果不同2.2.14種去除方法對色素的去除效果如圖1所示,從外觀可以明顯看出,TPS柱對色素的吸附效果最強(qiáng),其次是PC/NH2.2.2種凈化方式對色素的凈化效果圖1是4種凈化方式對不同基質(zhì)的凈化效果照片,為進(jìn)一步驗證4種凈化方式對色素的凈化效果,利用紫外-可見分光光度計對凈化后4種基質(zhì)的提取液進(jìn)行波長掃描,對比了4種凈化方式對色素的凈化效果。因為影響農(nóng)藥殘留測定的最大干擾物是色素2.2.34種去除方法對4種基質(zhì)的凈化效果的色度圖除了色素,樣品中含有的其他干擾物也會影響農(nóng)藥殘留的檢測,如韭菜中含有脂肪酸、酚類和硫醚類化合物,番茄中含有脂肪酸和酚類2.3線性范圍考察針對韭菜、姜、番茄和蘋果4種基質(zhì),分別配制19種農(nóng)藥質(zhì)量濃度依次為5,10,20,50,100μg/kg的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,以目標(biāo)組分的峰面積對相應(yīng)的質(zhì)量濃度進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明,19種農(nóng)藥在5~100μg/kg質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)均大于0.99。根據(jù)信噪比S/N=3計算檢出限(LOD),S/N=10計算定量下限(LOQ),使用工作站軟件中的Peak-to-Peak方式進(jìn)行計算2.4柱凈化過的4種主要農(nóng)藥的回收率分別對韭菜、姜、番茄和蘋果4種基質(zhì)中的19種農(nóng)藥進(jìn)行濃度為15μg/kg和50μg/kg的加標(biāo)回收實驗,重復(fù)測定3次,計算方法的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。經(jīng)TPS柱凈化過的4種基質(zhì)中,19種農(nóng)藥的回收率為72%~107%(見表2);經(jīng)PC/NH關(guān)于經(jīng)PC/NH同時發(fā)現(xiàn),雖然涕滅威亞砜和辛硫磷的回收率符合標(biāo)準(zhǔn),但番茄、韭菜和姜中普遍出現(xiàn)該兩種農(nóng)藥的回收率小于80%。關(guān)于涕滅威亞砜回收率偏低的情況,分析可能有兩點原因:一是由于涕滅威亞砜的