中藥歸經(jīng)形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)研究

中藥歸經(jīng)形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)研究

在文獻(xiàn)中，對經(jīng)典回歸自然的概念和歷史進(jìn)步有了更一致的認(rèn)識，但在評價經(jīng)典和作用的物質(zhì)基礎(chǔ)方面沒有達(dá)成全面共識。有關(guān)歸經(jīng)的實驗研究雖取得了一定成果，但將中醫(yī)臟腑等同于解剖學(xué)器官組織、用個別成分代替中藥整體、以中藥成分的分布代替其作用等是目前中藥歸經(jīng)研究中存在的主要問題。本研究在吸收借鑒前人工作的基礎(chǔ)上，利用涵蓋所有藥性的單味中藥為研究對象和1材料和方法1.1實驗材料1.1.1g/g3BI/F1代小鼠，清潔級，雌雄各半，體重18～22g,528只。購于Sino-BritishSippr/BkLabAnimalLtdCo.動物合格證號：SCXK（滬）2003-0002。1.1.2車前子、花本、草、本桂枝、羌活、防風(fēng)、柴胡、大薊、蔓荊子、垂盆草、連翹、玄參、白薇、地骨皮、黃芩、黃柏、苦參、大黃、郁李仁、茯苓、豬苓、車前子、茵陳蒿、赤小豆、烏藥、佛手、綠萼梅、香附、獨活、秦艽、丹參、水蛭、牛膝、白茅根、女貞子、山楂、雞內(nèi)金、海藻、附子、肉桂、珍珠母、地龍、僵蠶、鉤藤、牡蠣、酸棗仁、金錢草、白芍藥、何首烏、鹿茸、肉蓯蓉、仙茅、罌粟殼、土茯苓、芒硝、薏苡仁、代赭石、川芎、鶴草芽、凌霄花、蒲黃、吳茱萸、高良姜。購于上海虹橋藥業(yè)有限公司中藥飲片廠。1.1.3x線膠片、定影粉、u3000C-脫氧葡萄糖，AmershamBiosciencesUKLimitedCo.產(chǎn)品（批號：54,56）;X線膠片顯影粉（P61-04-1）、定影粉（P62-04），上海冠龍照相器材公司出品；醫(yī)用X射線膠片（11″×14″），伊士曼柯達(dá)公司在美國制造，柯達(dá)（中國）股份有限公司分裝；整體切片機(jī)：康威牌12寸半自動切片機(jī)[型號：KW-300（Ⅱ）]；數(shù)碼相機(jī)，柯達(dá)D×4900，中美合資柯達(dá)股份有限公司產(chǎn)品。1.2動物分組及處理把60味中藥從1～60編號。然后，根據(jù)臨床用藥劑量按體表面積計算給藥劑量，按臨床中藥煎煮方法制成湯劑。將小鼠稱重，性別和體重均衡后，隨機(jī)分成兩批，每批61組：空白對照組1組（24只），給藥組60組（每組4只）。給藥組每組小鼠給予一味中藥灌胃，60組共給予60味中藥?？瞻讓φ战M給予同體積（按0.1ml/10g體重）蒸餾水。第一批于給藥后2h，第二批于給藥后4h，所有實驗動物尾靜脈注射1.3藥物成分的測定數(shù)碼照相機(jī)拍攝整體組織切片及X線自顯影膠片。通過在整體組織切片上各組織器官的位置，確定相應(yīng)X線自顯影膠片上各組織器官的位置，利用PHOTOSHOP軟件，獲取其影像的平均發(fā)光度，換算成吸光度值，數(shù)據(jù)歸一化處理。t檢驗比較用藥動物與空白對照組，差異顯著（P<0.05）者，以用藥組的平均吸光度增加百分率，表示該藥物對該器官組織的作用，正數(shù)表示促進(jìn)作用，負(fù)數(shù)表示抑制作用；差異不顯著（P>0.05）者，賦值以0，表示作用不明顯。藥物的歸經(jīng)按2000版藥典記載，有該歸經(jīng)的，賦值以1，否則賦值以0。建立歸經(jīng)與器官組織的相關(guān)數(shù)據(jù)矩陣，進(jìn)行聚類分析。2中藥歸經(jīng)作用對象的認(rèn)識以中藥的歸經(jīng)為變量，器官組織為樣本，kmeans聚類分析為探索性分類工具，對歸經(jīng)與器官組織機(jī)能變化的相關(guān)數(shù)據(jù)矩陣進(jìn)行快速分類。結(jié)果表明，按照器官組織對歸經(jīng)作用的反應(yīng)程度，用藥后2h，器官組織分為10類；用藥后4h，器官組織分為9類時，心經(jīng)、肝經(jīng)、脾經(jīng)、肺經(jīng)、腎經(jīng)等歸經(jīng)變量之間有最大的顯著性差異，而器官組織形成的類別最少。（表1)單次用藥后2h后，除歸膽經(jīng)、三焦經(jīng)、心包經(jīng)之外，其他歸經(jīng)均對下脊髓有促進(jìn)作用，其中歸膀胱經(jīng)對下脊髓的促進(jìn)作用最大；除歸膀胱經(jīng)之外，其他歸經(jīng)均抑制前肢肌，其中歸三焦經(jīng)對其抑制作用最明顯。而且，在單次用藥后2h時間點上，對性腺促進(jìn)作用最大的是歸三焦經(jīng)作用，對結(jié)腸功能起最明顯促進(jìn)作用的是歸膽經(jīng)作用，對大腦起到最明顯促進(jìn)作用的是歸腎經(jīng)作用。（表2)單次用藥后4h后，各歸經(jīng)變量的差異性集中體現(xiàn)在對小腦、直腸、膀胱、脾臟、后肢肌、大腦、間腦、心臟、腎臟等器官組織的影響上，其中對小腦促進(jìn)作用最明顯的是歸三焦經(jīng)作用，對直腸膀胱促進(jìn)作用最明顯的是歸小腸經(jīng)作用，對脾臟促進(jìn)作用最明顯的是歸三焦經(jīng)作用，對后肢肌促進(jìn)作用最明顯的是歸肝經(jīng)作用。而且，歸臟經(jīng)主要影響大腦、間腦、心臟，部分影響小腦，歸腑經(jīng)主要影響小腦。除歸心經(jīng)、胃經(jīng)、三焦經(jīng)以外，其他歸經(jīng)均對腎臟起抑制作用，其中作用最明顯的是歸大腸經(jīng)作用。（表3)3討論隨著對中藥作用機(jī)理研究的不斷擴(kuò)展和深入，人們逐漸認(rèn)識到中藥對機(jī)體的作用不是單一途徑，而是多方面多層次的。中藥的歸經(jīng)作用是這種多層次多方面作用的歸納，歸納的原則是要求符合中醫(yī)藥對臟腑功能生理病理變化的理性認(rèn)識?？梢姡瑲w經(jīng)作用的對象是中醫(yī)藥的臟腑經(jīng)絡(luò)。因此，研究中藥歸經(jīng)作用對象的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)，有助于打開中醫(yī)藥對機(jī)體認(rèn)識的“黑箱”，將有益于從根本上完成與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的結(jié)合。為了探討歸經(jīng)作用對象的空間結(jié)構(gòu)即作用部位，許多學(xué)者通過實驗對中藥歸經(jīng)與現(xiàn)代解剖學(xué)相應(yīng)的器官組織之間的對應(yīng)性進(jìn)行了研究。一些研究者認(rèn)為中藥歸經(jīng)與現(xiàn)代解剖學(xué)同名器官不完全一致，亦有學(xué)者認(rèn)為基本一致。值得注意的是，有很多學(xué)者已從理論上論證，中醫(yī)的臟腑經(jīng)絡(luò)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)解剖學(xué)的器官組織并無直接的對應(yīng)關(guān)系。如，中醫(yī)所說的“臟腑脾”就是與解剖學(xué)上的肝具有明顯的相關(guān)性與同一性，而與解剖學(xué)上的脾臟并無明顯的相關(guān)性目前中藥歸經(jīng)的概念，普遍認(rèn)為是中藥對機(jī)體空間結(jié)構(gòu)的一種選擇性作用，本研究結(jié)果提示還不僅如此。歸經(jīng)并不固定作用于一個器官組織，而是遵循一定作用規(guī)律的動態(tài)過程，是時間效應(yīng)和空間效應(yīng)的結(jié)合。為清晰記識，結(jié)合單次用藥后1h的結(jié)果中藥歸經(jīng)是通過對臟腑生理機(jī)能與病理變化的影響或改善而被認(rèn)識的，因此對中藥作用的歸納往往以臟腑名稱作為標(biāo)志。而臨床上的臟腑病證包含了“是動病”及“所生病”等經(jīng)絡(luò)病證研究中藥的歸經(jīng)作用，首先要盡量在平行的條件下了解中藥對機(jī)體多層次多方面的作用，這在目前的實際操作上有一定