火炬樹葉片丙酮浸提液對植物病原菌的抑制作用

火炬樹葉片丙酮浸提液對植物病原菌的抑制作用

0火炬樹葉片丙酮浸提液的動(dòng)態(tài)特性作為一種綠化樹種，火炬樹具有許多良好的生物學(xué)特性，并具有許多入侵物種的特點(diǎn)。除關(guān)注其入侵特性外,近年來,國內(nèi)研究人員對火炬樹形態(tài)結(jié)構(gòu)該文通過對火炬樹葉片丙酮浸提液抑菌作用的研究,了解不同濃度的火炬樹浸提液對不同受體植物病原菌菌絲生長的影響,為其在抑制植物病害等方面的利用提供依據(jù)。1材料和方法1.1病原菌的保鮮火炬樹(Rhustyphina)葉片采集于河南科技學(xué)院校園,棉花枯萎病菌(Fusariumoxysporum),棉花紅腐病菌(Fusariummoniliforme),蔥黑斑病菌(Stemphyliumbortyosum)由河南科技學(xué)院院植物病理實(shí)驗(yàn)室保存。1.2測試方法1.2.1提取時(shí)間的確定火炬樹葉采回后洗凈、粉碎,取粉末50g,用丙酮于室溫下提取3次,時(shí)間分別為72,48,24h。合并3次濾液在40℃以下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮然后轉(zhuǎn)入刻度試管,用丙酮定容為2g/mL,密封,保存于4℃的冰箱中備用。1.2.2瓊脂糖添加量水1000mL,馬鈴薯200g,用水煮沸10~20min,然后用紗布過濾補(bǔ)水到1000mL,煮沸后加入蔗糖和瓊脂各20g,pH自然。用移液管分別量取相應(yīng)的浸提液于三角瓶中,配成浸提液含量分別為0.1、0.2、0.3g/mL的培養(yǎng)基。為檢測丙酮對菌絲生長的影響,在另一組PDA培養(yǎng)基中加入丙酮,丙酮含量和含有相應(yīng)濃度浸提液的培養(yǎng)基相同,另設(shè)PDA培養(yǎng)基作為對照。常規(guī)高壓滅菌,在無菌條件下將三角瓶中的培養(yǎng)基分裝在直徑90cm的培養(yǎng)皿中,冷卻凝固備用。每處理3次重復(fù)。1.2.3共感染1.2.4抑制率相對抑制率計(jì)算觀察菌落的生長狀況,并記錄菌落的生長速度,每24h記錄1次,用十字交叉法測量供試真菌菌落的生長直徑(取3次重復(fù)的平均值),用下述公式計(jì)算抑制率相對抑制率=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/對照菌落直徑×100%。菌落直徑(cm)=測量菌落直徑平均值-0.5(菌餅直徑)。棉花枯萎病菌和蔥黑斑病菌培養(yǎng)7天、棉花紅腐病菌培養(yǎng)6天后結(jié)束培養(yǎng),拍照記錄菌絲生長情況、對相同時(shí)間內(nèi)不同濃度的浸提液對菌絲生長的影響進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,同時(shí)觀察比較相應(yīng)濃度的丙酮對菌絲生長的影響。2結(jié)果與分析2.1火炬樹浸提液對棉花枯病病原菌生長的影響火炬樹葉片丙酮浸提液對棉花枯萎病菌菌絲生長的抑制作用見表1,培養(yǎng)7天后的菌絲生長情況見圖1。從表1可以看出,和對照組(空白)相比,含量為0.1、0.2、0.3g/mL火炬樹浸提液對棉花枯萎病菌菌絲生長均有顯著的抑制作用,隨浸提液濃度增加抑菌作用加強(qiáng),隨著菌絲生長時(shí)間的延長,抑制逐漸減弱。圖1顯示,和對照相比,不同處理對菌絲生長的影響除菌落直徑大小有差異外,含量為0.2g/mL和0.3g/mL火炬樹浸提液培養(yǎng)形成的棉花枯萎病菌菌落中菌絲較為稀疏。2.2火炬樹葉片浸提液對棉花紅腐病菌植物芽孢桿菌生長的影響火炬樹葉片丙酮浸提液對棉花紅腐病菌菌絲生長的抑制作用見表2和圖2。從表2可以看出,和對照組(空白)相比,含量為0.1,0.2,0.3g/mL的火炬樹葉片浸提液對棉花紅腐病菌的菌絲生長有顯著的抑制作用,隨浸提液濃度升高,抑制作用加強(qiáng);隨著菌絲生長時(shí)間的延長,抑制作用逐漸減弱。培養(yǎng)6天時(shí),火炬樹浸提液對棉花紅腐病菌菌絲的抑菌率最低仍達(dá)到60.37%,和對照組相比有顯著的差異。圖2顯示,和不同含量火炬樹浸提液處理相比,對照組菌絲生長旺盛,除菌落直徑明顯較大外,菌絲密度較大,出現(xiàn)自然扭結(jié)現(xiàn)象。2.3葉片浸提液對蔥測定結(jié)果的影響火炬樹葉片丙酮浸提液對蔥黑斑病菌菌絲生長的影響見表3和圖3。從表3可以看出,和對照組相比,在同一時(shí)間內(nèi)含量為0.1,0.2,0.3g/mL的火炬樹葉片浸提液對蔥黑斑病菌菌絲生長有不同的抑制作用,但和前兩種菌絲的生長情況相比,相對抑制率低,最高抑制率僅為52.7%。隨著菌絲生長的時(shí)間延長,抑制作用逐漸減弱。圖3顯示,和不同含量的火炬樹葉片浸提液處理相比,對照組菌絲除菌落直徑較大外,菌絲顏色較深。綜合表1~3,火炬樹葉片丙酮浸提液對供試的3種植物病原菌菌絲生長均具有抑菌作用,但相同濃度的浸提液對不同病原菌的抑制作用不同,其中,對棉花紅腐病菌菌絲的抑制作用最強(qiáng),對蔥黑斑病菌菌絲生長抑制作用最弱。2.4丙酮浸提液對火炬樹植物病原菌病原菌生長的影響丙酮對3種菌絲生長的影響見圖4-1、4-2、4-3。從圖4-1、4-2、4-3可以看出,相應(yīng)濃度的丙酮浸提液對3種菌絲生長的抑制作用小于相應(yīng)濃度的浸提液,進(jìn)一步說明火炬樹葉片中含有菌絲生長的抑制物質(zhì)。3丙酮浸提液抑菌效果丙酮是植物抑菌活性物質(zhì)提取中較常使用的溶劑,在火炬樹葉片抑菌物質(zhì)提取中亦有效?；鹁鏄浔嵋航?jīng)過高溫滅菌過程仍具有抑菌活性,說明其抑菌物質(zhì)具有熱穩(wěn)定性。郭義等火炬樹葉片丙酮浸提液對菌絲生長的抑制作用顯示其葉片內(nèi)含有抑菌活性物質(zhì),但相同濃度下,浸提液對不同菌絲生長的抑制效果差異較大。試驗(yàn)中,棉花紅腐病菌菌絲生長受火炬樹浸提液的抑制作用最明顯,棉花紅腐病是影響棉花產(chǎn)量和質(zhì)量的重要病害之一外來植