周佩新獸藥那西肽專家講座

飼料安全是綠色環(huán)境保護食品基本點，我國是一個人口大國，伴隨人們生活水平提升，人們對健康越來越重視，所以開發(fā)無殘留無污染綠色飼料用添加劑是十分必要，周佩新獸藥那西肽專家講座第1頁年7月農(nóng)業(yè)部頒發(fā)了《飼料藥品添加劑使用規(guī)范》通知，并列出了33種符合規(guī)范飼料藥品添加劑，那西肽是33種要求飼料藥品添加劑之一，它是一個新型非吸收型飼用抗生素周佩新獸藥那西肽專家講座第2頁那西肽，又名諾西肽，英文名Nosiheptide，是生物工程產(chǎn)物，由Streptomyces

actuosus發(fā)酵產(chǎn)生，為含硫多肽類抗生素，其結(jié)構為12種氨基酸及衍生物合成多肽，分子量為1222。周佩新獸藥那西肽專家講座第3頁那西肽結(jié)構周佩新獸藥那西肽專家講座第4頁那西肽國外研究概況那西肽系國外1961年發(fā)覺化合物，20世紀70年代法國朗普洛克企業(yè)進行研究，80年代末日本三菱企業(yè)開發(fā)1987年12月25日被日本政府同意為法定飼料添加劑，列入了日本飼料安全法，其商品名為PrilnofaX（Hess＆Clark）周佩新獸藥那西肽專家講座第5頁

那西肽國內(nèi)研究概況本課題1990年由復旦大學（原上海醫(yī)科大學）立項1991年列入上海市科學基金發(fā)展項目（913213094）1992年7月被列入國家農(nóng)業(yè)部“八.五”攻關項目(85-016-01-05-03)1994年6月經(jīng)過農(nóng)業(yè)部組織教授驗收，教授一致認為那西肽是綠色飼料添加劑，有潛在應用價值。周佩新獸藥那西肽專家講座第6頁1995年開始進行新藥證書申報工作1998年獲國家農(nóng)業(yè)部頒發(fā)三類新獸藥證書（原料和予混劑）經(jīng)中國獸藥監(jiān)察所對那西肽樣品測試判定，產(chǎn)品質(zhì)量與國外同類產(chǎn)品完全一致。周佩新獸藥那西肽專家講座第7頁周佩新獸藥那西肽專家講座第8頁周佩新獸藥那西肽專家講座第9頁年由上海市高新技術結(jié)果轉(zhuǎn)化辦公室主持，邀請相關教授對那西肽項目進行評審，認定那西肽項目為高新技術結(jié)果轉(zhuǎn)化項目。周佩新獸藥那西肽專家講座第10頁周佩新獸藥那西肽專家講座第11頁年杭州匯能生物技術有限企業(yè)和復旦大學簽署合作協(xié)議，由杭州匯能企業(yè)獨家生產(chǎn)、經(jīng)營銷售和推廣應用，復旦大學擔任技術支撐，并繼續(xù)進行產(chǎn)品活力提升研究。周佩新獸藥那西肽專家講座第12頁

那西肽當前生產(chǎn)情況

當前國外由日本三菱企業(yè)生產(chǎn)。1997年日本三菱企業(yè)擬將該產(chǎn)品在農(nóng)業(yè)部登記注冊，進入中國市場，但因檢驗不合格而被拒絕。當前國內(nèi)只有浙江匯能生物技術企業(yè)生產(chǎn)，產(chǎn)品名稱—諾農(nóng)

周佩新獸藥那西肽專家講座第13頁那西肽發(fā)酵生產(chǎn)：菌種斜面孢子↓種子罐↓發(fā)酵罐↓終止發(fā)酵、提取周佩新獸藥那西肽專家講座第14頁初始階段我們采取傳統(tǒng)誘變技術使菌種活力提升到1200mg/L，采取原生質(zhì)體再生和基因組重排等伎倆，改變菌種代謝并采取基因工程伎倆，將透明顫菌血紅蛋白基因VHb基因整合（轉(zhuǎn)化）至那西肽產(chǎn)生菌染色體上，利用血紅蛋白在貧氧狀態(tài)下可提升氧利用率特點，改進了那西肽產(chǎn)生菌能量代謝，使工業(yè)生產(chǎn)上那西肽產(chǎn)量大幅度提升。周佩新獸藥那西肽專家講座第15頁

PCRBamHI/EcoRIBamHI/EcoRIBamHI/HindIIIBamHI/HindIIIvhb轉(zhuǎn)化表示質(zhì)粒構建周佩新獸藥那西肽專家講座第16頁NdeⅠ/Hind

NdeⅠ/HindⅢ

EcoRⅠ

EcoRⅠ

含vhb整合載體構建周佩新獸藥那西肽專家講座第17頁采取正交設計和星點設計方法，利用完全國產(chǎn)原料優(yōu)化出發(fā)酵培養(yǎng)基最正確配比和發(fā)酵工藝周佩新獸藥那西肽專家講座第18頁那西肽作用那西肽對革蘭氏陽性菌均含有較高活性，尤其是對葡萄球菌、枯草桿菌。對一些革蘭氏陰性菌如巴氏桿菌和萘瑟氏球菌也很有效周佩新獸藥那西肽專家講座第19頁那西肽作用機制那西肽作用機制是妨礙細菌蛋白質(zhì)合成，在低濃度時呈抑菌作用，在高濃度時呈殺菌作用。因為那西肽阻抑了腸內(nèi)有害細菌生長，使腸道管壁吸收機能正常，因而促進了動物生長，提升了飼料利用率。周佩新獸藥那西肽專家講座第20頁那西肽飼料添加劑含有以下特點：有顯著促進畜禽生長及改進飼料利用率效果。用量低，雞為2.5-5.0ppm，豬為2.5-20ppm就能夠促進生長。水產(chǎn)為0.5-2.0ppm。動物專用。只有抑菌作用而無殺菌作用。對革蘭氏陽性菌有效。不產(chǎn)生由R—質(zhì)粒所引發(fā)耐藥性，不被消化道吸收，無殘留問題。對動物尤其對人是安全，對環(huán)境影響小，屬環(huán)境保護型飼料添加劑。周佩新獸藥那西肽專家講座第21頁那西肽飼料添加劑應用當前國外那西肽在歐洲共同體和美國、日本和東南亞等被廣泛使用。我國已在豬、雞、鴨及水產(chǎn)方面推廣應用，且在四川、廣西、廣東、湖南、湖北、黑龍江、遼寧等地使用，取得良好社會效益和一定經(jīng)濟效益。周佩新獸藥那西肽專家講座第22頁動物應用驗證性試驗：對肉仔雞應用效果和對豬應用效果與日本三菱企業(yè)報道完全一致。

擴大動物應用范圍試驗:對肉鴨、鱸魚、羅非魚、南美白對蝦進行應用試驗

周佩新獸藥那西肽專家講座第23頁那西肽對雞應用效果據(jù)日本三菱企業(yè)報道，那西肽可促進肉仔雞增重，改進飼料酬勞，提升雛雞成活率。1995年本課題組對那西肽進行了雞籠養(yǎng)飼喂試驗，那西肽（mg/kg）1.52.55.010增重提升%9.212.812.612.6飼料酬勞提升%1.7、12.1、15.3、17.6全期成活率提升9.1%-14.9%；那西肽添加2.5-5.0mg/kg為最正確。周佩新獸藥那西肽專家講座第24頁

年浙江大學飼料研究所等單位對諾農(nóng)（那西肽）進行肉雞試驗諾農(nóng)mg/kg1.252.55.0日增重提升%2.044.016.05（空白）2.084.063.06（黃霉素5mg/kg）料重比降低%7.737.2210.82（空白）

3.351.68（黃霉素5mg/kg

顯示出很好促進增重、提升飼料轉(zhuǎn)化率效果周佩新獸藥那西肽專家講座第25頁

經(jīng)濟效益分析

效美素晶綠福諾農(nóng)空白飼料轉(zhuǎn)化率2.082.061.992.26

(F/G)飼料成本1.62411.60631.62001.6000(元/kg）增重成本3.37813.30903.22383.61(元/kg）節(jié)約成本0.47580.61400.7844（元/2kg雞）獲取利潤4.7586.1407.844（萬元/10萬雞）諾農(nóng)日增重和飼料利用率最高、經(jīng)濟效益最好周佩新獸藥那西肽專家講座第26頁

那西肽對豬應用效果據(jù)日本三菱企業(yè)報道，5-20mg/kg那西肽能顯著促進仔豬和生長豬增重，并能提升飼料轉(zhuǎn)化率，預防腹瀉，提升仔豬存活率。Cromwell（1984）試驗報道，結(jié)果：

在6.8mg/kg時，可使生長豬日增重提升5.3%，在5.5mg/kg時料肉比提升13.1%。且在冬天環(huán)境條件下尤其有效。周佩新獸藥那西肽專家講座第27頁

年5.28—6.24在170頭杜長大三元雜交豬進行試驗組別空白那西肽mg/kg維吉尼亞mg/kg2.551020試驗頭數(shù)3434343434初重（kg)24.724.924.724.824.9末重（kg)41.944.044.244.943.2日增重（g）617.8680.9695.1717.5660.7料肉比2.492.272.202.122.17周佩新獸藥那西肽專家講座第28頁

對肉鴨應用效果年那西肽預混劑對肉鴨喂養(yǎng)試驗

那西肽mg/kg金霉素mg/kg硫酸抗敵素mg/kg

0.5126020增重%4.885.155.673.971.93其中那西肽組增重顯著優(yōu)于金霉素組和硫酸抗敵素組。擴大規(guī)模試驗，結(jié)果深入表明，在肉鴨飼料中添加0.5mg/kg和1mg/kg那西肽可顯著促進肉鴨生產(chǎn)，提升飼料效率。周佩新獸藥那西肽專家講座第29頁

那西肽在水產(chǎn)應用效果年對寶石鱸魚幼魚生長性能影響（50天）。添加1.25mg/kg那西肽組，同空白對照組相比日增重提升7.14%.同2.5mg/kg黃霉素組相比日增重提升4.65%；添加1.25mg/kg那西肽試驗組，鱸魚餌料系數(shù)顯著低于兩對照組。肥滿度同兩對照組差異不顯著臟體比稍低于空白對照組。

試驗結(jié)果表明，飼料中添加1.25mg/kg那西肽能夠顯著促進鱸魚生長。周佩新獸藥那西肽專家講座第30頁那西肽對寶石鱸腸道絨毛影響

由圖1、2可見，那西肽組寶石鱸魚小腸絨毛發(fā)育完整、分布均勻，大小一致，而空白對照組絨毛相互之間有差異，且小腸絨毛表面部分絨毛脫落；從圖3、4可見，那西肽組寶石鱸小腸絨毛平均高度大于空白對照組，排列愈加緊密、規(guī)則，而空白對照絨毛高低不等，相互之間間隙顯著較大，且凌亂、萎縮。

周佩新獸藥那西肽專家講座第31頁周佩新獸藥那西肽專家講座第32頁

那西肽對南美白對蝦喂養(yǎng)效果

年對南美白對蝦喂養(yǎng)試驗飼料中添加1.25-2.5mg/kg，能夠很好促進南美白對蝦生長，而且能提升南美白對蝦對于飼料利用效率，降低餌料系數(shù)。飼料中添加2.0mg/kg那西肽效果顯著。那西肽含有抑制有害菌群促進有益菌群生長作用，從而能夠促進腸道對營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收，提升了南美白對蝦對飼料利用率。周佩新獸藥那西肽專家講座第33頁

那西肽在動物體內(nèi)不殘留日本小林功等（1988）報道，給雞添加那西肽0-250ppm，連續(xù)8周，給豬添加最大量10倍以上（200ppm），連續(xù)90天，在給藥中間以及停頓給藥后0-7天屠宰，檢測結(jié)果顯示，肝、肌肉、脾、心臟等殘留量均小于0.025ppm（臨界值以下）。顯示臟器和組織內(nèi)無殘留。周佩新獸藥那西肽專家講座第34頁本課題組對喂養(yǎng)那西肽2.5ppm、5ppm肉雞在停藥16、48以及72小時后屠宰，對雞肌肉、肝、脾、腎、心等臟器進行了不一樣方法檢測，結(jié)果顯示，那西肽殘留均低于0.01ppm（儀器和試驗可檢出最低劑量）。周佩新獸藥那西肽專家講座第35頁對C14