腎穿活檢組織標(biāo)本制作與染色課件

腎穿活檢組織標(biāo)本

制作與染色

余姚市人民醫(yī)院

腎穿活檢組織標(biāo)本

制作與染色

余姚市人民醫(yī)院

1一﹑取材腎活檢標(biāo)本經(jīng)皮質(zhì)穿刺取檢，分皮質(zhì)和髓質(zhì)，在解剖顯微鏡下，腎皮質(zhì)組織色較淡，腎小球為如針尖大小的紅色小點，不規(guī)則分布。穿刺所得的組織，一般包括以下幾種成分：皮質(zhì)組織；皮髓交界組織；皮質(zhì)-髓質(zhì)-皮質(zhì)組織。

一﹑取材腎活檢標(biāo)本經(jīng)皮質(zhì)穿刺取檢，分皮質(zhì)和髓質(zhì)，在解剖顯2固定

固定液：

常規(guī):１０％中性福爾馬林。

電鏡:3%戌二醛。

固定時間：最好不低于8小時。脫水、包埋、切片

隨常規(guī)脫水機脫水，盡量用小包埋模塊包埋，以利于連續(xù)切片。切片厚度１－２um，烤片溫度60℃。1小時。

固定

固定液：

常規(guī):１０％中性福爾馬林。

電鏡:3%3HE染色：

觀察組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)形態(tài)，通過它能顯示整個疾病的全貌，明確病變的性質(zhì)和分布的特點染色結(jié)果

腎小球輪廓清晰，細(xì)胞核、質(zhì)藍(lán)紅對比鮮明，各種細(xì)胞成分著色鮮艷。HE染色：

觀察組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)形態(tài)，通過它能顯示整個疾病的全4特殊染色

六氨銀染色腎小球腎炎的病變主要表現(xiàn)在腎小球，尤其是腎小球基膜的改變。常規(guī)HE染色不能清晰地顯示基膜，主要通過PAMS染色才能將基膜清晰地顯示出來。特殊染色

六氨銀染色腎小球腎炎的病變主要表現(xiàn)在腎小球，尤5染色原理：

腎小球基膜富含粘多糖，必須經(jīng)過氧化才能暴露醛基，醛基把六胺銀還原為黑色的金屬銀。試劑配制（1）1%高碘酸水溶液（2）5%鉻酸水溶液（3）2%草酸水溶液（4）3%六次甲基四胺水溶液（5）5%硝酸銀水溶液（6）5%硼砂水溶液（7）0.1%氯化金水溶液（8）3%硫代硫酸鈉水溶液染色原理：

腎小球基膜富含粘多糖，必須經(jīng)過氧化才能暴露醛基，6方法（1）1%高碘酸氧化10min，蒸餾水洗。（2）5%鉻酸氧化20min，蒸餾水洗。（3）2%草酸泡洗1min，蒸餾水洗三次。（4）新鮮配制六胺銀溶液（六胺銀染液：3%六次甲基四胺水20ml，5%硝酸銀1ml，四硼酸鈉2.4ml）用50ml規(guī)格的染色玻璃缸750W微波爐的中低檔預(yù)熱。（5）將切片置入六胺銀溶液中于60度水浴箱中孵育15～25min（6）蒸餾水漂洗3次。（7）0.1%氯化金調(diào)色1～2min，蒸餾水洗。（8）3%硫代硫酸鈉處理1～2min，蒸餾水洗。（9）復(fù)染蘇木素，伊紅（10）常規(guī)脫水，中性樹膠封固方法（1）1%高碘酸氧化10min，蒸餾水洗。（2）5%7腎穿活檢組織標(biāo)本制作與染色ppt課件8Masson

三色染色

Masson

三色染色

9Masson三色染色主要是用來觀察腎小球嗜復(fù)紅蛋白沉積物（免疫復(fù)合物）及腎臟內(nèi)膠原纖維增生等。

我科采用改良后方法，通過組織切片的補充固定，試劑濃度的改良組合、調(diào)整染色時間。對腎穿活檢切片進行了新舊兩種方法的試驗比較，取得了較為滿意的效果Masson三色染色主要是用來觀察腎小球嗜復(fù)紅蛋白沉積物（免10腎穿活檢組織標(biāo)本制作與染色ppt課件11高碘酸-無色品紅在腎小球疾病中，常導(dǎo)致腎小球基底膜的