微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.概述腸桿菌屬包括陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、阪崎腸桿菌、格高腸桿菌、中間腸桿菌、河生腸桿菌、日溝腸桿菌、生癌腸桿菌和梨形腸桿菌等14個種。2.標(biāo)本類型痰液、腦脊液、穿刺液、膿液、血液等標(biāo)本。3.鑒定3.1形態(tài)與染色革蘭陰性粗短桿菌，有周身鞭毛，無芽胞，與其他腸桿菌科細(xì)菌相似。3.2培養(yǎng)特性在血瓊脂平板上菌落呈灰白色，不溶血；在麥康凱等培養(yǎng)基上因發(fā)酵乳糖形成紅色、較大菌落；在中國藍(lán)瓊脂平板上形成中等大小、藍(lán)色菌落。3.3生化反應(yīng)氧化酶試驗(yàn)陰性，TSI為A/A；發(fā)酵葡萄糖、乳糖、山梨醇等多種糖類，不發(fā)酵衛(wèi)矛醇；IMViC--++，動力、鳥氨酸脫羧酶、精氨酸雙水解酶和硝酸鹽還原試驗(yàn)均陽性，H2S、賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)陰性。3.4鑒別要點(diǎn)3.4.1本菌特征：發(fā)酵葡萄糖等多種糖類，IMViC--++，動力、鳥氨酸脫羧酶和精氨酸雙水解酶試驗(yàn)均為陽性。3.4.2陰溝腸桿菌與成團(tuán)泛菌的鑒別陰溝腸桿菌鳥氨酸脫羧酶、精氨酸雙水解酶試驗(yàn)均陽性，賴氨酶脫羧酶試驗(yàn)陰性；成團(tuán)泛菌鳥氨酸脫羧酶、精氨酸雙水解酶、賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)均陰性，并產(chǎn)黃色色素。3.4.3陰溝腸桿菌與產(chǎn)氣腸桿菌的鑒別陰溝腸桿菌精氨酸雙水解酶試驗(yàn)陽性，賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)陰性；產(chǎn)氣腸桿菌相反。3.4.4產(chǎn)氣腸桿菌與成團(tuán)泛菌的鑒別前者鳥氨酸脫羧酶和賴氨酶脫羧酶試驗(yàn)陽性，而后者相反。3.5操作步驟3.5.1氧化酶試驗(yàn)參見氧化酶試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。3.5.2從麥康凱瓊脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鑒定儀或傳統(tǒng)生化法進(jìn)行細(xì)菌鑒定。4.藥敏參見藥物敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程及CLSIM100-S20最新版本文件。5.質(zhì)量控制參見質(zhì)量管理程序。檢驗(yàn)結(jié)果解釋與分析陰溝腸桿菌既存在ESBLs問題，有存在AmpC酶的問題，故耐藥情況嚴(yán)重，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)和耐藥機(jī)制檢測報(bào)告選藥。如果檢出上述兩種酶，體外試驗(yàn)對對青霉素類、頭孢菌素類或氨曲南敏感，也應(yīng)報(bào)告對其耐藥；同時對頭霉素、酶抑制劑也耐藥。重癥感染者首先碳青酶烯類抗生素治療。產(chǎn)氣腸桿菌與陰溝腸桿菌一樣，臨床上使用三代頭孢菌素治療的過程易產(chǎn)生耐藥性，通常在治療3-4日左右即轉(zhuǎn)化為耐藥菌株，因此應(yīng)定期復(fù)查菌株的敏感性。臨床意義陰溝腸桿菌廣泛存在于水、土壤等外界環(huán)境和腸道中，也是一種條件致病菌，可引起尿道感染、腎盂腎炎、呼吸道和傷口感染，以及敗血癥等。鑒定流程尿、痰、血液等尿、痰、血液等麥康凱瓊脂平板呈粉紅色菌落儀器或手工鑒定并做藥敏試驗(yàn)?zāi)c桿菌屬氧化酶-參考文獻(xiàn)[1]中國合格評定國家認(rèn)可委員會.CNAS-CL23:2008醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明.2