第五章中藥制劑中各類化學(xué)成分分析課件

第五章

中藥制劑中各類化學(xué)成分分析

第五章

中藥制劑中各類化學(xué)成分分析

掌握中藥制劑中生物堿、黃酮、三萜皂苷、醌類成分的定性、定量原理與方法。熟悉中藥制劑中揮發(fā)性成分、木質(zhì)素類成分的定性、定量原理與方法。了解其他成分（有機(jī)酸類、環(huán)烯醚萜類、香豆素類、單萜及二萜類、多糖類）的分析方法?！灸康囊蟆空莆罩兴幹苿┲猩飰A、黃酮、三萜皂苷、醌類成分的定性、定量原第五章中藥制劑中各類化學(xué)成分分析學(xué)習(xí)方法結(jié)構(gòu)性質(zhì)分析方法結(jié)構(gòu)：母核、官能團(tuán)、分子量等物理化學(xué)性質(zhì)：溶解性、酸堿性、揮發(fā)性、氧化還原性、旋光性、光譜特性等分析方法：總類成分：化學(xué)分析法、分光光度法單一成分：各種色譜法（GC、HPLC、HPCE、TLCS、SFC等）第五章中藥制劑中各類化學(xué)成分分析學(xué)習(xí)方法結(jié)構(gòu)：母核、官能一、概述1、概念：生物堿是生物界除生物體必需的含氮化合物（如氨基酸、蛋白質(zhì)和B族維生素等）之外的所有含氮有機(jī)化合物，因其結(jié)構(gòu)中氮原子上的未共享電子對(duì)而大多具有堿性。2、含生物堿成分的常用中藥：第一節(jié)生物堿類成分分析一、概述第一節(jié)生物堿類成分分析中藥名稱主要生物堿成分中藥名稱主要生物堿成分山豆根制川烏馬錢子延胡索苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、金雀花堿烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿馬錢子堿、番木鱉堿（士的寧）、偽馬錢子堿、偽番木鱉堿延胡索乙素、延胡索甲素、原阿片堿、黃連堿苦參麻黃黃連黃柏防己苦參堿、槐定堿、槐果堿、氧化苦參堿麻黃堿、偽麻黃堿、去甲麻黃堿、甲基麻黃堿小檗堿、巴馬丁、藥根堿、黃連堿小檗堿、藥根堿、木蘭花堿粉防己堿、防己諾林堿、輪環(huán)藤酚堿、木蘭堿中藥名稱主要生物堿成分中藥名稱主要生物堿成分山豆根苦參第一節(jié)生物堿類成分分析二、理化性質(zhì)1、溶解性大多數(shù)生物堿難溶于水，易溶于氯仿、乙醚、乙醇、丙酮及苯等有機(jī)溶劑；與酸結(jié)合成鹽后水溶性增加，但酸不同，生成的鹽水溶性有差異；季銨型生物堿、有氮氧配位鍵的生物堿易溶于水液體生物堿及一些小分子固體生物堿則既溶于水也可溶于有機(jī)溶劑；含有酸性官能團(tuán)或酯鍵的生物堿還可溶于一些堿液或熱苛性堿液。第一節(jié)生物堿類成分分析二、理化性質(zhì)第一節(jié)生物堿類成分分析二、理化性質(zhì)2、沉淀反應(yīng)大多數(shù)生物堿在酸性水溶液中可以與某些試劑生成不溶于水的復(fù)鹽或分子復(fù)合物。生物堿沉淀劑：碘化物復(fù)鹽、重金屬鹽、大分子有機(jī)酸

馬錢子散中生物堿成分的鑒別取馬錢子散1g，加濃氨試液數(shù)滴及氯仿10ml，浸泡數(shù)小時(shí)，濾過(guò)，取濾液1ml蒸干，殘?jiān)酉←}酸1ml使溶解，加碘化鉍鉀試液1~2滴，即生成黃棕色沉淀。

第一節(jié)生物堿類成分分析二、理化性質(zhì)馬錢子散中生物堿成分的第一節(jié)生物堿類成分分析二、理化性質(zhì)3、顯色反應(yīng)生物堿在一定pH條件下可與一些酸性染料（多為磺酸肽類）生成有色絡(luò)合物，可被氯仿等有機(jī)溶劑定量提出結(jié)構(gòu)中具有酯鍵的酯堿如烏頭堿等可與異羥肟酸鐵試劑反應(yīng)產(chǎn)生紫紅色；這些特點(diǎn)可用于中藥制劑中生物堿成分的分析第一節(jié)生物堿類成分分析二、理化性質(zhì)第一節(jié)生物堿類成分分析二、理化性質(zhì)4、紫外光譜特性結(jié)構(gòu)中具有共軛體系的生物堿均有紫外吸收結(jié)構(gòu)中的氮原子與發(fā)色團(tuán)直接連接或參與發(fā)色團(tuán)的生物堿，其吸收峰位置與測(cè)定時(shí)溶劑的pH有關(guān)。第一節(jié)生物堿類成分分析二、理化性質(zhì)第一節(jié)生物堿類成分分析三、定性鑒別1、一般理化鑒別沉淀反應(yīng)是生物堿理化鑒別常用方法，此反應(yīng)一般在酸性水溶液中進(jìn)行制備樣品供試液時(shí)必須凈化處理，防止假陽(yáng)性結(jié)果

第一節(jié)生物堿類成分分析三、定性鑒別第一節(jié)生物堿類成分分析三、定性鑒別2、薄層色譜法①吸附劑：硅膠、氧化鋁；②展開(kāi)劑：多以氯仿、苯等低極性溶劑，加入其他溶劑調(diào)整展開(kāi)劑的極性；③由于硅膠顯弱酸性，強(qiáng)堿性的生物堿在硅膠色譜板上能形成鹽，使Rf值很小或拖尾、形成復(fù)斑等。④顯色劑：常用改良碘化鉍鉀試劑，有時(shí)噴碘化鉍鉀試劑之后再噴硝酸鈉試劑，可使樣品斑點(diǎn)更加清晰。如有熒光，不用顯色⑤亦可用碘蒸汽、硫酸鈰、碘鉑酸等其他的試劑顯色。討論：如何改進(jìn)？第一節(jié)生物堿類成分分析三、定性鑒別討論：如何改進(jìn)？第一節(jié)生物堿類成分分析三、定性鑒別3、紙色譜法可用于生物堿鹽或游離堿的鑒別4、HPLC：保留時(shí)間定性5、GC：可用于小分子生物堿的鑒別第一節(jié)生物堿類成分分析三、定性鑒別第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定（一）總生物堿的含量測(cè)定1、化學(xué)分析法①主要使用酸堿滴定法。②強(qiáng)堿滴定生物堿鹽時(shí)，在70%~90%的乙醇介質(zhì)中終點(diǎn)比在水中明顯，因此常將生物堿鹽溶于90%乙醇，再用標(biāo)準(zhǔn)堿乙醇液滴定。③若選擇的溶劑及指示終點(diǎn)方法合適，還可用非水滴定法進(jìn)行④要求：總生物堿的純度較高，用于藥味少成分簡(jiǎn)單制劑的測(cè)定第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定（一）總生物堿的含量測(cè)定2、分光光度法（1）直接測(cè)定法①不經(jīng)過(guò)化學(xué)反應(yīng)、利用生物堿物質(zhì)自身的光吸收直接進(jìn)行比色測(cè)定的方法。②一般用于藥味較少、干擾小的中藥制劑中總生物堿的含量測(cè)定。第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定（一）總生物堿的含量測(cè)定（2）酸性染料比色法（例題P124）原理：

BH++In-

→BH+·In-（水相）→BH+·In-（有機(jī)相）關(guān)鍵：酸性染料的選擇：甲基橙、溴麝香草酚蘭（BTB）和溴甲酚綠等；pH值的選擇：與生物堿和酸性染料的性質(zhì)有關(guān)。有機(jī)溶劑的選擇：一般用氯仿、二氯甲烷水分的干擾及消除第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定（一）總生物堿的含量測(cè)定（3）雷氏鹽比色法（注意事項(xiàng)p126）原理：

BH++[Cr(NH3)2(SCN)4]-→

BH[Cr(NH3)2(SCN)4]測(cè)定方法：（復(fù)鹽沉淀）復(fù)鹽沉淀→溶于丙酮（或甲醇）→直接比色測(cè)定樣品＋定量過(guò)量的雷氏鹽→過(guò)濾→濾液→比色測(cè)定λmax=520nm（4）異羥肟酸鐵比色法用于含有酯鍵結(jié)構(gòu)的生物堿的測(cè)定第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定（二）單體生物堿成分含量測(cè)定1、TLCS①生物堿不具有紫外吸收或揮發(fā)性時(shí)可用本法測(cè)定；②選用的吸附劑、展開(kāi)劑及顯色方法與鑒別相似；③使用改良碘化鉍鉀等作為顯色劑時(shí)，必須完全揮干展開(kāi)劑后（尤其在堿性環(huán)境下展開(kāi)的）才可噴灑，否則背景深、反差小，影響測(cè)定。第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定（二）單體生物堿成分含量測(cè)定2、HPLC(例題P128)①以反相高效液相色譜應(yīng)用較多；②在反相高效液相色譜中，由于硅膠表面殘留硅醇基的影響，使生物堿分析易產(chǎn)生保留時(shí)間延長(zhǎng)、峰形變寬、拖尾；③可在流動(dòng)相中加入硅醇基抑制劑、離子對(duì)試劑等措施以克服游離硅醇基的影響，滿足定量分析的要求；④中藥制劑中生物堿成分進(jìn)行高效液相色譜法測(cè)定時(shí)，使用較多的是紫外檢測(cè)器。第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定（二）單體生物堿成分含量測(cè)定3、GC①只適用于有揮發(fā)性的，遇熱不分解的生物堿類，如麻黃堿、檳榔堿、苦參堿和顛茄類生物堿等②制備供試品溶液時(shí)一般應(yīng)采用冷提取，凈化過(guò)程也要避免加熱以防成分的流失，最后需用氯仿等低極性有機(jī)溶劑為溶媒制備成供試液。第一節(jié)生物堿類成分分析四、含量測(cè)定第一節(jié)生物堿類成分分析五、常見(jiàn)生物堿成分分析化合物名稱結(jié)構(gòu)式理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)及光譜特征常用定量分析方法小檗堿（黃連素）Berberine(Umbellatine)（C20H18NO4；336.37）異喹啉類原小檗堿型生物堿、季銨型生物堿、有共軛體系。黃色結(jié)晶、堿性較強(qiáng)，易溶于熱水或熱乙醇，微溶或不溶于苯、氯仿、丙酮，其鹽酸鹽水中溶解度小。mp：1450℃UV：225，270，331。重量法、滴定法分光光度法薄層掃描法薄層熒光掃描法高效液相色譜法脈沖極譜法流動(dòng)色譜分析法酶法第一節(jié)生物堿類成分分析五、常見(jiàn)生物堿成分分析化合物名稱第一節(jié)生物堿類成分分析五、常見(jiàn)生物堿成分分析化合物名稱結(jié)構(gòu)式理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)及光譜特征常用定量分析方法士的寧（番木鱉堿）Strychnine（C21H20N2O2;334.40）單萜吲哚類生物堿、環(huán)叔胺顯堿性、酰胺不顯堿性。難溶于水，可溶于乙醇，甲醇。易溶于氯仿，微溶于乙醚。mp：268～290℃。UV：282。重量法滴定法分光光度法一階導(dǎo)數(shù)分光光度法薄層掃描法高效液相色譜法第一節(jié)生物堿類成分分析五、常見(jiàn)生物堿成分分析化合物名稱結(jié)第一節(jié)生物堿類成分分析五、常見(jiàn)生物堿成分分析化合物名稱結(jié)構(gòu)式理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)及光譜特征常用定量分析方法烏頭堿Aconitine（C34H47NO11;645.76）二萜類酯型生物堿。易溶于氯仿、苯、無(wú)水乙醇和乙醚，難溶于水、微溶石油醚mp：204℃UV:281,273,230,202．滴定法酸性染料比色法一階導(dǎo)數(shù)紫外分光光度法薄層掃描法高效液相色譜法第一節(jié)生物堿類成分分析五、常見(jiàn)生物堿成分分析化合物名稱結(jié)練習(xí)練習(xí)練習(xí)2005版練習(xí)2005版練習(xí)2010版練習(xí)2010版練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)第二節(jié)黃酮類成分分析一、概述1、定義：黃酮類化合物是指基本母核為2-苯基色原酮（2-phenylchromone）類化合物，現(xiàn)在則是泛指兩苯環(huán)通過(guò)中央三碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的一系列化合物。2、含黃酮類成分的常見(jiàn)中藥第二節(jié)黃酮類成分分析一、概述中藥名稱主要黃酮類成分中藥名稱主要黃酮類成分黃芩黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷、漢黃芩素、千層紙素山柰山柰酚、山柰素槐米蘆丁、槲皮素廣藿香商陸素、芹菜素葛根葛根素、大豆苷、大豆苷元、7-木糖苷葛根素白果山奈酚、槲皮素、蘆丁枳實(shí)橙皮苷、川陳皮素、新橙皮苷、5-鄰-去甲基川陳皮素高良姜高良姜素、山奈素、槲皮素茵陳茵陳黃酮、芫花素、槲皮素補(bǔ)骨脂補(bǔ)骨脂查耳酮、異補(bǔ)骨脂查耳酮山楂槲皮素、金絲桃苷金線草槲皮素、山奈酚中藥名稱主要黃酮類成分中藥名稱主要黃酮類成分黃芩黃芩第二節(jié)黃酮類成分分析二、結(jié)構(gòu)特征及理化性質(zhì)1、結(jié)構(gòu)特征苯甲?；鹌；?40~280nm300~400nm第二節(jié)黃酮類成分分析二、結(jié)構(gòu)特征及理化性質(zhì)苯甲?；诙?jié)黃酮類成分分析二、理化性質(zhì)2、溶解度①黃酮類化合物的溶解度因結(jié)構(gòu)及存在狀態(tài)（苷或苷元、單糖苷、雙糖苷或三糖苷）不同而有很大差異。②游離苷元難溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有機(jī)溶劑及稀堿液中；③黃酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等強(qiáng)極性溶劑中，但難溶或不溶于苯、氯仿等。第二節(jié)黃酮類成分分析二、理化性質(zhì)第二節(jié)黃酮類成分分析二、理化性質(zhì)3、酸堿性酸性：黃酮類化合物因分子中多有酚羥基，故顯酸性，可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。酸性強(qiáng)弱：7,4‘-二羥基>7-或4‘-羥基>一般酚>5-羥基堿性氧原子的性質(zhì)

第二節(jié)黃酮類成分分析二、理化性質(zhì)第二節(jié)黃酮類成分分析二、理化性質(zhì)4、顯色反應(yīng)鹽酸-鎂粉（鋅粉）反應(yīng)金屬鹽類試劑的配合反應(yīng)可用于鑒別，但要避免假陽(yáng)性結(jié)果

5、紫外光譜特征

第二節(jié)黃酮類成分分析二、理化性質(zhì)第二節(jié)黃酮類成分分析三、定性鑒別1、理化鑒別鹽酸-鎂粉（鋅粉）反應(yīng)金屬鹽類試劑的配合反應(yīng)2、色譜鑒別吸附劑：硅膠、聚酰胺硅膠色譜分離弱極性化合物較好；聚酰胺色譜分離含游離酚羥基的黃酮及其苷為佳；纖維素薄層則適用于分離多糖苷混合物。顯色反應(yīng)：采用在紫外光下觀察熒光和噴顯色劑相配合的方法。第二節(jié)黃酮類成分分析三、定性鑒別第二節(jié)黃酮類成分分析四、含量測(cè)定1、總成分的含量測(cè)定直接測(cè)定：常用蘆丁作對(duì)照測(cè)定顯色測(cè)定：常用鋁鹽做顯色劑2、單體黃酮成分的含量測(cè)定TLCSHPLC（05版以后藥典全部使用此法）五、常見(jiàn)黃酮類成分（略）第二節(jié)黃酮類成分分析四、含量測(cè)定練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)多種中藥制劑均以黃芩苷作為質(zhì)控指標(biāo)合理性？練習(xí)多種中藥制劑均以第三節(jié)三萜皂苷類成分分析一、概述1、概念2、含三萜皂苷類成分的常用中藥

第三節(jié)三萜皂苷類成分分析一、概述第三節(jié)三萜皂苷類成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)甘草酸人參皂甙(A型)1、溶解度：①可溶于水，易溶于熱水、含水稀醇、熱甲醇和熱乙醇中，幾不溶于或難溶于乙醚、苯等極性小的有機(jī)溶劑；②在含水丁醇或戊醇中溶解度較好第三節(jié)三萜皂苷類成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)甘草酸人參皂甙第三節(jié)三萜皂苷類成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)甘草酸人參皂甙(A型)1、溶解度皂甙元—能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等皂甙—可溶于水，易溶于熱水、含水稀醇等，在丁醇、戊醇中溶解性較好。2、紫外光譜特征第三節(jié)三萜皂苷類成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)甘草酸人參皂甙第三節(jié)三萜皂苷類成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)3、顯色反應(yīng)醋酐-濃硫酸反應(yīng)冰醋酸-乙酰氯反應(yīng)氯仿-硫酸反應(yīng)金屬鹽類反應(yīng)：+鉛、鋇、銅鹽→沉淀第三節(jié)三萜皂苷類成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)3、顯色反應(yīng)第三節(jié)三萜皂苷類成分分析三、定性鑒別1、理化鑒別①泡沫反應(yīng)：多用于檢驗(yàn)含有皂苷的原料藥；②化學(xué)顯色反應(yīng)：僅在組成藥物較少的中藥制劑中使用。2、TLC吸附劑：硅膠，氧化鋁、硅藻土等。展開(kāi)劑：氯仿-甲醇-水（13：7：2）（10℃以下放置，下層）氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）（同上）顯色劑：不同濃度的硫酸乙醇液最常用。第三節(jié)三萜皂苷類成分分析三、定性鑒別1、理化鑒別第三節(jié)三萜皂苷類成分分析四、定量分析（一）總成分分析1、重量法

①該法主要用于含皂苷的原料藥質(zhì)量控制。②在中藥制劑中，當(dāng)處方中藥味含皂苷類成分較多時(shí)，常用正丁醇作溶劑，測(cè)定正丁醇浸出物。2、比色法：①常用顯色劑有：香草醛-硫酸、香草醛-高氯酸、醋酐-硫酸、高氯酸、濃硫酸以及亞甲藍(lán)等。②注意測(cè)定單體皂苷（或皂苷元）與總皂苷的關(guān)系2010藥典已不用第三節(jié)三萜皂苷類成分分析四、定量分析（一）總成分分析20第三節(jié)三萜皂苷類成分分析四、定量分析（二）單體成分分析1、TLC薄層洗脫-比色法薄層掃描法2、HPLCHPLC-UV：人參皂苷、三七皂苷等可利用其在紫外區(qū)的末端；有紫外吸收的甘草酸、遠(yuǎn)志皂苷，靈敏度高。HPLC-ELSD：檢測(cè)三萜皂苷類成分的應(yīng)用日漸廣泛五、常見(jiàn)三萜皂苷類成分第三節(jié)三萜皂苷類成分分析四、定量分析（二）單體成分分析思考哪些藥物是需要進(jìn)行鑒別？哪些藥物需要需要進(jìn)行含量測(cè)定？練習(xí)練習(xí)練習(xí)陳皮練習(xí)陳皮練習(xí)甘草練習(xí)甘草練習(xí)甘草人參練習(xí)甘草練習(xí)白術(shù)練習(xí)白術(shù)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)第四節(jié)醌類成分分析一、概述1、概念：中藥中醌類化合物主要有苯醌、萘醌、菲醌和蒽醌四種類型可游離存在，也可與糖結(jié)合成苷，稱為蒽苷。2、含醌類成分的常用中藥第四節(jié)醌類成分分析一、概述第四節(jié)醌類成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)丹參醌I(xiàn)IA大黃素1、物理性質(zhì)：存在的形態(tài)，升華性，光不穩(wěn)定性2、溶解性：游離醌類多溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有機(jī)溶劑，微溶于或不溶于水。結(jié)合成苷后極性增大，易溶于甲醇、乙醇中，在熱水中也可溶解，幾乎不溶于苯、乙醚、氯仿等非極性溶劑中。第四節(jié)醌類成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)丹參醌I(xiàn)IA大黃素1第四節(jié)醌類成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)3、酸性：酚羥基的酸性→堿提酸沉法4、顯色反應(yīng)羥基蒽醌+堿→橙，紅，紫紅，藍(lán)+Pb2+/Mg2+→配合物9、10位未取代的羥基蒽酮化合物+對(duì)亞硝基二甲基苯胺→紫，綠，藍(lán)，灰第四節(jié)醌類成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)第四節(jié)醌類成分分析三、定性鑒別1、顯色反應(yīng)2、升華法3、TLC吸附劑：硅膠展開(kāi)劑：乙酸乙酯-甲醇-水（100︰16.5︰13.5）適于分離蒽醌苷元和蒽醌苷，不含水或甲醇的混合溶媒適合于分離蒽醌類的苷元。顯色方法：噴堿性試劑，噴醋酸鎂甲醇液、氨氣熏及在紫外燈下觀察熒光，可見(jiàn)光下直接觀察色斑。第四節(jié)醌類成分分析三、定性鑒別練習(xí)練習(xí)第四節(jié)醌類成分分析四、含量測(cè)定1、游離蒽醌的測(cè)定：弱極性溶劑提取后，加堿比色2、結(jié)合蒽醌的測(cè)定：極性溶劑提取，水解測(cè)苷元先酸水解后，非極性溶劑提取苷元后測(cè)定3、單體成分的含量測(cè)定TLCSHPLC-UV第四節(jié)醌類成分分析四、含量測(cè)定第四節(jié)醌類成分分析四、含量測(cè)定例1、牛黃解毒片中游離蒽醌和總蒽醌的測(cè)定—混合堿液比色法對(duì)照品溶液測(cè)定：以1，8-二羥基蒽醌為對(duì)照品，精密稱取10mg于100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度（100μg/mL）。取1mL對(duì)照品液于10mL量瓶中，在水浴上蒸干，加5%氫氧化鈉-2%氫氧化銨混合堿溶解并稀釋至刻度，放置1小時(shí)，以5%氫氧化鈉-2%氫氧化銨混合堿液為空白，在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定。樣品測(cè)定：⑴游離蒽醌的測(cè)定：取牛黃解毒片10片，刮去糖衣，精密稱定重量，研細(xì)。稱取一片重，置于具塞三角瓶中，精密加入氯仿100mL，稱重，水浴上回流4小時(shí)，取下，加塞，放冷，稱重，用氯仿補(bǔ)充至原重量，濾過(guò)，吸取濾液50mL于分液漏斗中，用蒸餾水20mL洗滌數(shù)次，至水層無(wú)色，棄去水液。氯仿層用5%氫氧化鈉-2%氫氧化銨混合堿液振搖萃取數(shù)次，直至混合堿液無(wú)色，合并堿液，用20mL氯仿洗滌數(shù)次，至氯仿層無(wú)色，棄去氯仿層。將混合堿液在水浴上加熱數(shù)分鐘至氯仿?lián)]盡，冷卻，移入100mL量瓶中，并稀釋至刻度，放置1小時(shí)，以5%氫氧化鈉-2%氫氧化銨混合堿液為空白，在510nm處測(cè)定，計(jì)算游離蒽醌的含量（相當(dāng)于1，8-二羥基蒽醌含量）。第四節(jié)醌類成分分析四、含量測(cè)定第四節(jié)醌類成分分析四、含量測(cè)定例1、牛黃解毒片中游離蒽醌和總蒽醌的測(cè)定—混合堿液比色法⑵總蒽醌的測(cè)定：精密稱取游離蒽醌項(xiàng)下的牛黃解毒片粉一片置于150mL燒瓶中，加2.5mol/L硫酸30mL直火回流4小時(shí)，放冷，加入氯仿20mL，水浴回流0.5小時(shí)，放冷，吸出氯仿液，再加氯仿，反復(fù)操作至氯仿無(wú)色為止。合并氯仿層液，用蒸餾水洗滌數(shù)次，至水層無(wú)色，棄去水液。氯仿液用5%氫氧化鈉-2%氫氧化銨混合堿液振搖萃取數(shù)次，至堿液無(wú)色，合并，用20mL氯仿洗滌數(shù)次，至氯仿層無(wú)色，棄去氯仿液。將堿液置水浴上加熱至氯仿?lián)]盡，冷卻，移入50mL量瓶中，用混合堿液稀釋至刻度，放置1小時(shí)，以5%氫氧化鈉-2%氫氧化銨液為空白，在510nm處測(cè)定，計(jì)算游離蒽醌的含量（相當(dāng)于1，8-二羥基蒽醌含量）。⑶結(jié)合蒽醌的計(jì)算：每片含結(jié)合蒽醌量=每片含總蒽醌量—每片含游離蒽醌量。第四節(jié)醌類成分分析四、含量測(cè)定第四節(jié)醌類成分分析四、含量測(cè)定例2、復(fù)方丹參片中丹參酮ⅡA含量測(cè)定—高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水（73：27）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。對(duì)照品溶液的制備：精密稱取丹參酮ⅡA對(duì)照品10mg，置50mL棕色量瓶中用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5mL，置25mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得（每1mL中含丹參酮ⅡA40μg）供試品溶液的制備：取本品10片，糖衣片除去糖衣，精密稱定，研細(xì)，取1g，精密稱定，精密加入甲醇25mL，稱定重量，超聲處理15分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。第四節(jié)醌類成分分析四、含量測(cè)定第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分化合物名稱

結(jié)構(gòu)式

理化特征

常用定量方法

大黃酸(Rhein)（C15H8O6，284.21）

為黃色針狀結(jié)晶（升化法），mp321℃～322℃，330℃分解。幾乎不溶于水，溶于堿和吡啶，略溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚。UVλmaxMeOHnm(ε)：229(36800),258(20100),435(11100)。高效液相色譜法薄層掃描法

第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分化合物名稱結(jié)構(gòu)式理第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分化合物名稱

結(jié)構(gòu)式

理化特征

常用定量方法

大黃素(Emodin)（C15H10O5，270.23）為橙色針狀結(jié)晶，mp265℃～267℃。幾乎不溶于水，溶于乙醇及氫氧化鈉、碳酸鈉、氨水等堿液中。25℃時(shí)溶于（g/100mL）:乙醚0.140、氯仿0.071、四氯化碳0.010、二硫化碳0.009。UVλmaxEtOHnm(Logε)：220（4.55），252（4.26），265（4.34），289（4.34），437（4.10）。

高效液相色譜法薄層掃描法

第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分化合物名稱結(jié)構(gòu)式理第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分第四節(jié)醌類成分分析五、常見(jiàn)醌類成分第五節(jié)揮發(fā)性成分分析一、概述揮發(fā)性成分是指中藥中一類具有芳香氣并易揮發(fā)的成分，其化學(xué)組成復(fù)雜，主要包括揮發(fā)油類成分和其他分子量較小、易揮發(fā)的化合物。萜類化合物芳香族化合物脂肪族化合物含揮發(fā)油成分的常用中藥第五節(jié)揮發(fā)性成分分析一、概述中藥名稱

揮發(fā)油中主要成分

中藥名稱

揮發(fā)油中主要成分

厚樸辛夷肉桂陳皮川芎薄荷廣霍香β-桉油醇、α-蒎烯、檸檬烯、醋酸龍腦酯檸檬烯、丁香酚、桉油精、α-蒎烯桂皮醛、桂皮酸、乙酸苯丙酯檸檬烯、檸檬醛藁本內(nèi)酯、3-丁叉苯酞、香檜烯薄荷酮、薄荷腦、乙酸薄荷酯廣霍香醇、苯甲醛、丁香酚、桂皮醛羌活

細(xì)辛

豆蔻

丁香

α-蒎烯、β-蒎烯、檸檬烯、萜品烯醇-4、甲基丁香酚、黃樟醚、細(xì)辛醚優(yōu)香芹酮、α-蒎烯、β-蒎烯桉油精、龍腦、樟腦、草烯松油烯、蒎烯丁香酚、水楊酸甲酯、α-蒎烯、β-蒎烯、乙酰丁香酚中藥揮發(fā)油中主要成分中藥名稱揮發(fā)油中主要成分厚樸β-桉第五節(jié)揮發(fā)性成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)薄荷醇桂皮醛檸檬烯1、溶解性：易溶于有機(jī)溶劑2、顯色反應(yīng)：酚類+三氯化鐵→藍(lán)，藍(lán)紫，綠羰基+苯肼、羥胺→結(jié)晶體醛類+硝酸銀胺→銀鏡內(nèi)酯類+亞硝酰鐵氰化鈉+NaOH→紅色并逐漸消失第五節(jié)揮發(fā)性成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)薄荷醇桂皮醛檸檬烯第五節(jié)揮發(fā)性成分分析三、定性鑒別TLC吸附劑：硅膠、氧化鋁展開(kāi)劑：石油醚、正己烷（加少量乙酸乙酯或苯）顯色劑：茴香醛-濃硫酸試劑（通用型），若干擾較多，選用專屬性強(qiáng)的顯色劑GC：對(duì)照品對(duì)照法定性GC-MSGC-FTIR第五節(jié)揮發(fā)性成分分析三、定性鑒別TLC第五節(jié)揮發(fā)性成分分析四、定量分析總成分分析：蒸餾法單體成分分析：GC（首選）HPLCTLCSGC-MSGC-FTIR第五節(jié)揮發(fā)性成分分析四、定量分析總成分分析：蒸餾法第六節(jié)木脂素成分分析一、概述木脂素是一類在生物體內(nèi)由二分子苯丙素衍生物聚合而成的化合物。含木脂素類成分的常用中藥：中藥名稱主要成分中藥名稱主要成分五味子

牛蒡子連翹遠(yuǎn)志

五味子甲素五味子乙素五味子醇甲五味子醇乙牛蒡子苷牛蒡子苷元拉帕酚連翹脂素連翹脂苷中國(guó)遠(yuǎn)志脂酚厚樸細(xì)辛杜仲黑芝麻厚樸酚

和厚樸酚細(xì)辛脂素

芝麻脂素（+）-1-羥基松脂素葡萄糖苷芝麻脂素第六節(jié)木脂素成分分析一、概述中藥名稱主要成分中藥名稱第六節(jié)木脂素成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)CH3CH3OCH3OCH3H3COH3COH3COH3CO牛蒡子苷(元)五味子甲素1、溶解性游離—易溶于苯、乙醚、氯仿、丙酮、乙醇等成苷時(shí)—可溶于甲醇、乙醇等第六節(jié)木脂素成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)CH3CH3OCH第六節(jié)木脂素成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)2、紫外光譜特征λmax=250-350nm3、顯色反應(yīng)通用型顯色劑：磷鉬酸乙醇、硫酸乙醇Labat反應(yīng)：+硫酸+沒(méi)食子酸→藍(lán)綠Ecgrine反應(yīng)：+硫酸+變色酸→藍(lán)紫第六節(jié)木脂素成分分析二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)2、紫外光譜特征第六節(jié)木脂素成分分析三、定性分析TLC吸附劑：硅膠展開(kāi)劑：親脂性溶劑（苯、氯仿，加甲醇等）顯色：香草醛試液，濃硫酸試液，磷鉬酸乙醇溶液、碘熏四、含量測(cè)定總成分：變色酸比色法單體成分：TLCSHPLC第六節(jié)木脂素成分分析三、定性分析第六節(jié)木脂素成分分析五、常見(jiàn)木脂素類成分第六節(jié)木脂素成分分析五、常見(jiàn)木脂素類成分第七節(jié)其他成分分析一、香豆素類成分香豆素是具有苯駢吡喃酮母核的內(nèi)酯類衍生物廣泛存在于蕓香科和傘形科的植物中。1、主要結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)補(bǔ)骨脂素茵陳內(nèi)酯異羥肟酸鐵反應(yīng)：酚羥基-三氯化鐵顯色反應(yīng)：紫外光譜特性：λmax=300nm，母核有供電子基團(tuán)取代可產(chǎn)生熒光第七節(jié)其他成分分析一、香豆素類成分補(bǔ)骨脂素茵陳內(nèi)酯異羥肟第七節(jié)其他成分分析一、香豆素類成分2、定性鑒別熒光法薄層熒光鑒別七寶美髯顆粒中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素的鑒別取本品10g，研細(xì)，加醋酸乙酯20ml、鹽酸0.5ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)哟姿嵋阴?.5ml使溶解，作為供試品溶液。薄層條件：硅膠G薄層板，展開(kāi)劑正已烷—醋酸乙酯（4:1），顯色劑為10%氫氧化鉀甲醇溶液，紫外光燈365nm下檢視。第七節(jié)其他成分分析一、香豆素類成分七寶美髯顆粒中補(bǔ)骨脂素第七節(jié)其他成分分析一、香豆素類成分3、含量測(cè)定可見(jiàn)-紫外分光光度法：熒光光度法：專屬性強(qiáng)TLCS：薄層熒光掃描HPLC：C18，甲醇-水，UVDorFDGC：分子量小，具有揮發(fā)性第七節(jié)其他成分分析一、香豆素類成分第七節(jié)其他成分分析一、香豆素類成分烏蛇止癢丸中蛇床子素的含量測(cè)定色譜條件固定相：OV-1，2m×3mmID玻璃柱；氣體流速：N230ml/min，H250ml/min，Air500ml/min；柱溫：200℃；進(jìn)樣器和檢測(cè)器溫度：260℃。供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備精密稱取內(nèi)標(biāo)物正廿三烷適量，加氯仿溶解，制成每1ml約含6mg的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。取烏蛇止癢丸適量，研成細(xì)粉，精密稱取約5g，置索氏提取器中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液5.0m