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血清堿性磷酸酶活性測(cè)定(磷酸苯二鈉法)三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院生化教研室血清堿性磷酸酶活性測(cè)定1引言酶活性測(cè)定是目前臨床酶學(xué)分析最為常用的方法。酶測(cè)定約占目前臨床生化總工作量的14到1/2。用于診斷的酶類(lèi)已超過(guò)100多種,常用的數(shù)十種。引言2引言一些酶在不同器官、組織、細(xì)胞內(nèi)的分布和定位存在明顯差異,而且在細(xì)胞內(nèi)外有明顯濃度梯度差。正常情況下血清中酶活性相對(duì)恒定。但一些病理情況常導(dǎo)致血清中酶活性的改變。性別、年齡、運(yùn)動(dòng)、妊娠、人種及環(huán)境因素等可引起人血清中某些酶的生理性變化。所以酶與其它指標(biāo)相比具有更高的診斷特異性和靈敏度。引言3診斷常用血清酶的來(lái)源血清酶符號(hào)來(lái)源鳥(niǎo)氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶OCT卵磷脂膽固醇?;D(zhuǎn)移酶LCAT谷氨酸脫氫酶GLDH山梨醇脫氫酶SDH肝肝肝肝丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALT肝、腎、心異檸檬酸脫氫酶ICD肝、胎盤(pán)、心y-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶GT肝、膽、腎、小腸5′-核苷酸酶nt肝、膽道單胺氧化酶肝、腎、腦天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶心、肝、骨骼肌肌酸激酶CK骨骼肌、心、腦乳酸脫氫酶LDH腎、骨骼肌、肝、肺堿性磷酸酶LP骨骼、牙齒、肝、腎酸性磷酸酶ACP前列腺、紅細(xì)胞、血小板淀粉酶S胰、唾液腺脂肪酶LPS胰診斷常用血清酶的來(lái)源4堿性磷酸酶(Alkalinephosphatase,ALPorAKPALPisahydrolaseenzymeresponsibleforremovingphosphategroupsfrommanytypesofmolecules,includingnucleotidesandproteinsmosteffectiveinanalkalineenvironmentALP幾乎存在于機(jī)體各個(gè)組織,但以骨骼、牙齒、肝臟和腎臟中含量較多,兒童期含量尤其多。臨床上測(cè)定ALP活性主要用于肝臟疾病和骨骼疾病的診斷。堿性磷酸酶(Alkaline5堿性磷酸酶的臨床意義1生理性增加:如兒童、妊娠期、進(jìn)食高糖、高脂肪食物等均可使血清ALP活性增高。2病理性改變:升高(1)肝膽疾病。主要見(jiàn)于阻塞性黃疸,急、慢性黃疸性肝炎,肝癌等均可引起血清ALP活力不同程度的升高,其中以癌性梗阻最明顯。2)各種骨骼疾病。ALP主要由成骨細(xì)胞產(chǎn)生,故骨骼病特別是有新生骨質(zhì)生成時(shí),血液內(nèi)ALP活性增加,以促進(jìn)磷酸鹽的沉積。如佝僂病、纖維性骨病、成骨不全癥、骨轉(zhuǎn)移癌和骨折修復(fù)愈合期等均引起血清ALP升高降低:主要見(jiàn)于呆小癥,磷酸酶過(guò)少癥等。堿性磷酸酶的臨床意義6問(wèn)題如何測(cè)定酶活性?問(wèn)題7酶活性的概念酶活性:酶催化某一化學(xué)反應(yīng)的能力常用單位時(shí)間內(nèi)底物的減少量或產(chǎn)物的生成量(即酶促反應(yīng)速度)來(lái)表示酶活性大小注:在實(shí)際測(cè)定酶促反應(yīng)速度時(shí),以測(cè)定單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物的生成量為好。酶活性的概念8酶活性的測(cè)定方法終止測(cè)定法(或定時(shí)法):通常是酶作用一段時(shí)間后,加入強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、蛋白沉淀劑等終止酶促反應(yīng),測(cè)定這段時(shí)間內(nèi)底物的減少量或產(chǎn)物的生成量,計(jì)算酶促反應(yīng)的平均速度。連續(xù)監(jiān)測(cè)法:連續(xù)監(jiān)測(cè)法是指每隔一定時(shí)間(2~60s),連續(xù)多次測(cè)定酶反應(yīng)過(guò)程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物量隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù),求出酶反應(yīng)初速度,間接計(jì)算酶活性濃度的方法。適用于自動(dòng)生化分析儀目前已取代終止測(cè)定法而成為臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定酶活性濃度最常用的方法酶活性的測(cè)定方法9向題:測(cè)酶活性應(yīng)注意哪些方面?向題:10肝肺堿性磷酸酶ALP骨骼課件11肝肺堿性磷酸酶ALP骨骼課件12肝肺堿性磷酸酶ALP骨骼課件13肝肺堿性磷酸酶ALP骨骼課件14肝肺堿性磷酸酶ALP骨骼課件15肝肺堿性磷酸酶ALP骨骼課件16肝肺堿性

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