HIV檢測(cè)質(zhì)量保證杭州

HIV檢測(cè)的質(zhì)量控制

中國(guó)CDC性艾中心肖瑤xiaoyao@

規(guī)范化的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范，2009修訂版艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室安全通用要求臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)質(zhì)量保證指南HIV－1病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南HCV檢測(cè)指南？嬰幼兒HIV檢測(cè)指南？02年 03年 04年 05年 06年07年抗體 CD4病毒載量亞型 BED耐藥

2009

20062006全國(guó)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控體系發(fā)展20062008質(zhì)量控制

質(zhì)量控制：是指為確保實(shí)驗(yàn)工作正常進(jìn)行而在每一次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須采取的各種措施。以保證檢驗(yàn)結(jié)果達(dá)到允許的準(zhǔn)確度。實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制

正確的標(biāo)本采集和處理正確及時(shí)的運(yùn)送樣品實(shí)驗(yàn)前正確地處理和保存樣品實(shí)驗(yàn)中質(zhì)量控制

選擇正確的檢測(cè)方法質(zhì)控品的準(zhǔn)備開(kāi)展質(zhì)控圖質(zhì)控Levey-Jennings（或“即刻法”質(zhì)控）。

實(shí)驗(yàn)后質(zhì)量控制①實(shí)驗(yàn)后準(zhǔn)確填寫(xiě)檢驗(yàn)結(jié)果；②及時(shí)發(fā)出報(bào)告；③正確地解釋檢驗(yàn)結(jié)果的臨床意義。質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制正確的標(biāo)本采集和處理檢測(cè)目的（抗體（BED），VL，CD4，DBS等）抗凝和不抗凝數(shù)量正確及時(shí)的運(yùn)送樣品運(yùn)輸包裝檢測(cè)目的檢測(cè)方法

實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制運(yùn)輸采用WHO提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)

第一層容器：裝樣品，要求防滲漏第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護(hù)第一層容器，可以裝若干個(gè)第一層容器。第三層容器：放在一個(gè)運(yùn)輸用外層包裝內(nèi)，應(yīng)易于消毒觀察窗溫度計(jì)實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制正確地保存樣品

長(zhǎng)期（血清，血漿，全血），短期，不保存

問(wèn)題：抗體：短期（？）保存2－8C。長(zhǎng)期（？）度保存CD4：全血最長(zhǎng)時(shí)間（？）處理好樣品怎樣保存？VL：（？）分離血漿長(zhǎng)期（？）中期（？）短期（？）保存時(shí)間凍溶不能超過(guò)（？）次實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制選擇正確的檢測(cè)方法不同檢測(cè)方法對(duì)樣品有不同要求檢測(cè)方法提高準(zhǔn)確性質(zhì)控品的準(zhǔn)備商用和自制開(kāi)展質(zhì)控圖質(zhì)控（Levey-Jennings，或“即刻法”質(zhì)控）。

中部三省27個(gè)VCT點(diǎn)10310名咨詢者樣本檢測(cè)結(jié)果檢測(cè)策略與WB+符合率漏檢（數(shù)）RT192.57%1RT291.94%3RT1+RT298.72%1RT1+RT2+EIA99.74%第四代EIA試劑的使用現(xiàn)場(chǎng)調(diào)研時(shí)發(fā)現(xiàn)，在CDC實(shí)驗(yàn)室工作中存在著HIV漏檢的潛在危險(xiǎn)因素，應(yīng)引起高度重視。許多血站開(kāi)始開(kāi)始使用第四代EIA，CDC仍然用第三代EIA復(fù)檢，因此，有導(dǎo)致窗口期漏檢的可能。建議：確證實(shí)驗(yàn)室對(duì)來(lái)自血站的篩查陽(yáng)性的樣品使用第四代試劑進(jìn)行復(fù)檢。HIV發(fā)病率研究的方法BED計(jì)算發(fā)病率與隊(duì)列觀察發(fā)病率比較文獻(xiàn)列表

3.14.3③155001092IDU中國(guó)8.88.2③4247534225IDU中國(guó)1.13.4③447528267FSW中國(guó)1.76.1③..39151鄉(xiāng)村居民非洲917.3②..113594IDUc泰國(guó)3.43.5①②d2349589123234VA試驗(yàn)非洲4.612.2①19397.19FSW非洲1.361.44①.1113..入伍官兵泰國(guó)0.51①19482216FSW非洲3.12.91①1271805101111MSMaFSWb北美荷蘭隊(duì)列觀察發(fā)病率/100人年BED計(jì)算發(fā)病率/100人年BED檢測(cè)樣本來(lái)源隊(duì)列血清陽(yáng)轉(zhuǎn)人數(shù)隊(duì)列隨訪人數(shù)新感染數(shù)BED檢測(cè)的樣本量人群地區(qū)標(biāo)注：①隊(duì)列中期和隨訪間隔；②樣本來(lái)自隊(duì)列篩檢人群；③與隊(duì)列目標(biāo)人群相同的橫斷面調(diào)查；a:男同性戀人群；b:商業(yè)女性工作者；c:靜脈吸毒人群d:該文獻(xiàn)給出隊(duì)列篩檢人群由BED-CEIA計(jì)算的發(fā)病率6.0/100人年

“.”表示數(shù)據(jù)缺失實(shí)驗(yàn)中質(zhì)量控制質(zhì)控圖1、抗體檢測(cè)2、抗原檢測(cè)3、病毒載量檢測(cè)4、免疫表型（CD4＋T淋巴細(xì)胞）的檢測(cè)EIA檢測(cè)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控內(nèi)部對(duì)照：試劑盒提供外部對(duì)照：自己制備或購(gòu)買用質(zhì)控圖監(jiān)測(cè)變化趨勢(shì)試劑盒內(nèi)部對(duì)照試劑盒內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控品陽(yáng)性和陰性對(duì)照血清用于判斷每次實(shí)驗(yàn)的有效性，但不能作為室內(nèi)質(zhì)控品使用。每一次檢測(cè)臨床樣品時(shí)，必須有試劑盒內(nèi)部對(duì)照，而且只能在同批號(hào)的試劑盒中使用。內(nèi)部對(duì)照結(jié)果無(wú)效，必須重新試驗(yàn)。室內(nèi)質(zhì)控品為非試劑盒組份的外部質(zhì)控品，是為了監(jiān)控檢測(cè)的重復(fù)性而設(shè)置的，包括強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性和陰性質(zhì)控血清。也可以只設(shè)置一個(gè)弱陽(yáng)性質(zhì)控，以該試劑盒臨界值（Cut-off）的2～3倍為宜。外部質(zhì)控品的是判斷該批臨床樣品檢測(cè)的有效性，因此，每次實(shí)驗(yàn)必須包含室內(nèi)質(zhì)控品，其結(jié)果無(wú)效，必須重新試驗(yàn)。室內(nèi)質(zhì)控品可以是商品或?qū)嶒?yàn)室自行制備。

EIA質(zhì)控圖算術(shù)平均值X：至少20天測(cè)得的外部對(duì)照血清S/CO值結(jié)果的平均值標(biāo)準(zhǔn)差S：是描述樣品于均值之間離散程度的指標(biāo)，是與對(duì)照血清S/CO值有關(guān)的預(yù)測(cè)范圍。

變異系數(shù)CV：是反映各次S/CO值相對(duì)于均值離散程度的?？梢杂脕?lái)衡量檢測(cè)的重復(fù)性和精密性。實(shí)驗(yàn)中質(zhì)量控制質(zhì)控圖

XX+SX-SX-2SX+2SWestgard標(biāo)準(zhǔn)

多標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控13S標(biāo)準(zhǔn)均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s1234567891022S標(biāo)準(zhǔn)均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s1234567891041S標(biāo)準(zhǔn)均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s12345678910R4S標(biāo)準(zhǔn)均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s12345678910CD4＋T淋巴細(xì)胞檢測(cè)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控：內(nèi)部對(duì)照：廠家提供外部對(duì)照：購(gòu)買用質(zhì)控圖監(jiān)測(cè)變化趨勢(shì)流式細(xì)胞儀檢測(cè)質(zhì)控圖質(zhì)控圖質(zhì)控圖VL質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控：每次實(shí)驗(yàn)需同時(shí)使用試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品以及一個(gè)HIV-1RNA為5000-15000拷貝/毫升的外部質(zhì)控品內(nèi)部對(duì)照：廠家提供外部對(duì)照：自制，個(gè)別實(shí)驗(yàn)室使用實(shí)驗(yàn)后質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)后準(zhǔn)確填寫(xiě)檢驗(yàn)結(jié)果；及時(shí)發(fā)出報(bào)告；正確地解釋檢驗(yàn)結(jié)果的臨床意義。抗體檢測(cè)中的問(wèn)題初篩實(shí)驗(yàn)中的假陽(yáng)性血液惡性病變自身免疫性疾病多發(fā)性膽汁型肝硬化酒精性肝炎疫苗接種（流感，乙肝）多發(fā)性骨髓瘤腎移植或慢性腎衰竭瘧疾或絲蟲(chóng)病其他

抗體檢測(cè)中的問(wèn)題

初篩實(shí)驗(yàn)中的假陰性窗口期免疫移植換血輸血惡性腫瘤免疫功能喪失（B細(xì)胞功能缺損）其他（試劑或操作原因）影響CD4細(xì)胞數(shù)的因素1.季節(jié)性和晝夜差異：如每日最低水平在中午12點(diǎn)30分，峰值在下午8點(diǎn)30分（JAIDS，1990，3：144）。2.腎上腺皮質(zhì)激素對(duì)CD4細(xì)胞數(shù)有較大的影響，短期服用可能使CD4從900/ul下降到300/ul.Clinimmunopath,1983,28:101).3.合并感染HTLV-1的病人可能造成CD4的假性升高（AnnInternMed,1993,119:55).4.急性改變可能由于淋巴細(xì)胞在外周循環(huán)和骨髓、脾及淋巴結(jié)中的再分布(ClinExpimmunol,1990,80:460)。影響CD4細(xì)胞數(shù)的因素

免疫缺陷狀況也可以有輔助性T-淋巴細(xì)胞數(shù)量減少的結(jié)果:

-丙球蛋白缺乏癥

-胸腺發(fā)育不全(DiGeorge氏綜合癥)

-嚴(yán)重的聯(lián)合免疫缺陷影響CD4細(xì)胞數(shù)的因素檢測(cè)的儀器PT與室內(nèi)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控是對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的即時(shí)性評(píng)價(jià)，通過(guò)對(duì)室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果的連續(xù)觀察，監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。PT是對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的回顧性評(píng)價(jià)，其主要目的是評(píng)價(jià)和修正實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，并與各參評(píng)單位結(jié)果比較，了解本室結(jié)果的偏倚程度，是發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)誤差的重要手段之一。HIV抗體檢測(cè)診斷依據(jù)：金標(biāo)準(zhǔn)？謝謝第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理第二節(jié)活塞式空壓機(jī)的結(jié)構(gòu)和自動(dòng)控制第三節(jié)活塞式空壓機(jī)的管理復(fù)習(xí)思考題單擊此處輸入你的副標(biāo)題，文字是您思想的提煉，為了最終演示發(fā)布的良好效果，請(qǐng)盡量言簡(jiǎn)意賅的闡述觀點(diǎn)。第六章活塞式空氣壓縮機(jī)

piston-aircompressor壓縮空氣在船舶上的應(yīng)用：

1.主機(jī)的啟動(dòng)、換向；

2.輔機(jī)的啟動(dòng)；

3.為氣動(dòng)裝置提供氣源；

4.為氣動(dòng)工具提供氣源；

5.吹洗零部件和濾器。

排氣量:單位時(shí)間內(nèi)所排送的相當(dāng)?shù)谝患?jí)吸氣狀態(tài)的空氣體積。單位：m3/s、m3/min、m3/h第六章活塞式空氣壓縮機(jī)

piston-aircompressor空壓機(jī)分類：按排氣壓力分：低壓0.2～1.0MPa；中壓1～10MPa；高壓10～100MPa。按排氣量分：微型<1m3/min；小型1～10m3/min；中型10～100m3/min；大型>100m3/min。第六章活塞式空氣壓縮機(jī)

piston-aircompressor第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理容積式壓縮機(jī)按結(jié)構(gòu)分為兩大類：往復(fù)式與旋轉(zhuǎn)式兩級(jí)活塞式壓縮機(jī)單級(jí)活塞壓縮機(jī)活塞式壓縮機(jī)膜片式壓縮機(jī)旋轉(zhuǎn)葉片式壓縮機(jī)最長(zhǎng)的使用壽命-

----低轉(zhuǎn)速（1460RPM），動(dòng)件少（軸承與滑片），潤(rùn)滑油在機(jī)件間形成保護(hù)膜，防止磨損及泄漏，使空壓機(jī)能夠安靜有效運(yùn)作；平時(shí)有按規(guī)定做例行保養(yǎng)的JAGUAR滑片式空壓機(jī)，至今使用十萬(wàn)小時(shí)以上，依然完好如初，按十萬(wàn)小時(shí)相當(dāng)于每日以十小時(shí)運(yùn)作計(jì)算，可長(zhǎng)達(dá)33年之久。因此，將滑片式空壓機(jī)比喻為一部終身機(jī)器實(shí)不為過(guò)。滑(葉)片式空壓機(jī)可以365天連續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)并保證60000小時(shí)以上安全運(yùn)轉(zhuǎn)的空氣壓縮機(jī)1.進(jìn)氣2.開(kāi)始?jí)嚎s3.壓縮中4.排氣1.轉(zhuǎn)子及機(jī)殼間成為壓縮空間，當(dāng)轉(zhuǎn)子開(kāi)始轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，空氣由機(jī)體進(jìn)氣端進(jìn)入。2.轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動(dòng)使被吸入的空氣轉(zhuǎn)至機(jī)殼與轉(zhuǎn)子間氣密范圍，同時(shí)停止進(jìn)氣。3.轉(zhuǎn)子不斷轉(zhuǎn)動(dòng)，氣密范圍變小，空氣被壓縮。4.被壓縮的空氣壓力升高達(dá)到額定的壓力后由排氣端排出進(jìn)入油氣分離器內(nèi)。4.被壓縮的空氣壓力升高達(dá)到額定的壓力后由排氣端排出進(jìn)入油氣分離器內(nèi)。1.進(jìn)氣2.開(kāi)始?jí)嚎s3.壓縮中4.排氣1.凸凹轉(zhuǎn)子及機(jī)殼間成為壓縮空間，當(dāng)轉(zhuǎn)子開(kāi)始轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，空氣由機(jī)體進(jìn)氣端進(jìn)入。2.轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動(dòng)使被吸入的空氣轉(zhuǎn)至機(jī)殼與轉(zhuǎn)子間氣密范圍，同時(shí)停止進(jìn)氣。3.轉(zhuǎn)子不斷轉(zhuǎn)動(dòng)，氣密范圍變小，空氣被壓縮。螺桿式氣體壓縮機(jī)是世界上最先進(jìn)、緊湊型、堅(jiān)實(shí)、運(yùn)行平穩(wěn)，噪音低，是值得信賴的氣體壓縮機(jī)。螺桿式壓縮機(jī)氣路系統(tǒng)：

A

進(jìn)氣過(guò)濾器

B

空氣進(jìn)氣閥

C

壓縮機(jī)主機(jī)

D

單向閥

E

空氣/油分離器

F

最小壓力閥

G

后冷卻器

H

帶自動(dòng)疏水器的水分離器油路系統(tǒng)：

J

油箱

K

恒溫旁通閥

L

油冷卻器

M

油過(guò)濾器

N

回油閥

O

斷油閥冷凍系統(tǒng)：

P

冷凍壓縮機(jī)

Q

冷凝器

R

熱交換器

S

旁通系統(tǒng)

T

空氣出口過(guò)濾器螺桿式壓縮機(jī)渦旋式壓縮機(jī)

渦旋式壓縮機(jī)是20世紀(jì)90年代末期開(kāi)發(fā)并問(wèn)世的高科技?jí)嚎s機(jī)，由于結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、零件少、效率高、可靠性好，尤其是其低噪聲、長(zhǎng)壽命等諸方面大大優(yōu)于其它型式的壓縮機(jī)，已經(jīng)得到壓縮機(jī)行業(yè)的關(guān)注和公認(rèn)。被譽(yù)為“環(huán)保型壓縮機(jī)”。由于渦旋式壓縮機(jī)的獨(dú)特設(shè)計(jì)，使其成為當(dāng)今世界最節(jié)能壓縮機(jī)。渦旋式壓縮機(jī)主要運(yùn)動(dòng)件渦卷付，只有磨合沒(méi)有磨損，因而壽命更長(zhǎng)，被譽(yù)為免維修壓縮機(jī)。

由于渦旋式壓縮機(jī)運(yùn)行平穩(wěn)、振動(dòng)小、工作環(huán)境安靜，又被譽(yù)為“超靜壓縮機(jī)”。

渦旋式壓縮機(jī)零部件少，只有四個(gè)運(yùn)動(dòng)部件,壓縮機(jī)工作腔由相運(yùn)動(dòng)渦卷付形成多個(gè)相互封閉的鐮形工作腔，當(dāng)動(dòng)渦卷作平動(dòng)運(yùn)動(dòng)時(shí)，使鐮形工作腔由大變小而達(dá)到壓縮和排出壓縮空氣的目的?；钊娇諝鈮嚎s機(jī)的外形第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理一、理論工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）工作循環(huán)：4—1—2—34—1吸氣過(guò)程

1—2壓縮過(guò)程

2—3排氣過(guò)程第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理一、理論工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）

壓縮分類：絕熱壓縮：1—2耗功最大等溫壓縮：1—2''耗功最小多變壓縮：1—2'耗功居中功＝P×V（PV圖上的面積）加強(qiáng)對(duì)氣缸的冷卻，省功、對(duì)氣缸潤(rùn)滑有益。二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）1.不存在假設(shè)條件2.與理論循環(huán)不同的原因：1）余隙容積Vc的影響Vc不利的影響—?dú)埓娴臍怏w在活塞回行時(shí)，發(fā)生膨脹，使實(shí)際吸氣行程（容積）減小。Vc有利的好處—

（1）形成氣墊，利于活塞回行；（2）避免“液擊”（空氣結(jié)露）；（3）避免活塞、連桿熱膨脹，松動(dòng)發(fā)生相撞。第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理表征Vc的參數(shù)—相對(duì)容積C、容積系數(shù)λv合適的C：低壓0.07-0.12

中壓0.09-0.14

高壓0.11-0.16

λv＝0.65—0.901）余隙容積Vc的影響C越大或壓力比越高，則λv越小。保證Vc正常的措施：余隙高度見(jiàn)表6-1壓鉛法—保證要求的氣缸墊厚度2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理2）進(jìn)排氣閥及流道阻力的影響吸氣過(guò)程壓力損失使排氣量減少程度，用壓力系數(shù)λp表示：保證措施：合適的氣閥升程及彈簧彈力、管路圓滑暢通、濾器干凈。λp

（0.90-0.98）2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理3）吸氣預(yù)熱的影響由于壓縮過(guò)程中機(jī)件吸熱，所以在吸氣過(guò)程中，機(jī)件放熱使吸入的氣體溫度升高，使吸氣的比容減小，造成吸氣量下降。預(yù)熱損失用溫度系數(shù)λt來(lái)衡量（0.90-0.95）。保證措施：加強(qiáng)對(duì)氣缸、氣缸蓋的冷卻，防止水垢和油污的形成。2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理4）漏泄的影響內(nèi)漏：排氣閥（回漏）；外漏：吸氣閥、活塞環(huán)、氣缸墊。漏泄損失用氣密系數(shù)λl來(lái)衡量（0.90-0.98）。保證措施：氣閥的嚴(yán)密閉合，氣缸與活塞、氣缸與缸蓋等部件的嚴(yán)密配合。5）氣體流動(dòng)慣性的影響當(dāng)吸氣管中的氣流慣性方向與活塞吸氣行程相反時(shí)，造成氣缸壓力較低，氣體比容增大，吸氣量下降。保證措施：合理的設(shè)計(jì)進(jìn)氣管長(zhǎng)度，不得隨意增減進(jìn)氣管的長(zhǎng)度，保證濾器的清潔。2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理上述五條原因使實(shí)際與理論循環(huán)不同。4）漏泄的影響5）氣體流動(dòng)慣性的影響1）余隙容積Vc的影響2）進(jìn)排氣閥及流道阻力的影響3）吸氣預(yù)熱的影響2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理3.排氣量和輸氣系數(shù)理論排氣量Vt----單位時(shí)間內(nèi)活塞所掃過(guò)的氣缸容積。實(shí)際排氣量Q：Q=Vt

λ輸氣系數(shù)λ

：λ＝λtλv

λ

pλl漏泄的影響余隙容積Vc的影響進(jìn)排氣閥及流道阻力的影響吸氣預(yù)熱的影響二、實(shí)際工作循環(huán)（