實驗5微生物大小及數(shù)量測定課件

CentralLaboratoryofBiology實驗五微生物大小及數(shù)量測定微生物學(xué)實驗頌?zāi)∽磔^活疹股株性么督芥隘蛻馴協(xié)溝卞德顯柳紐跡畸屆魄簍擾撮纂歹瑟實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件CentralLaboratoryofBiology實1課前提問與目的要求【課前提問】1.顯微測微尺測量微生物大小的原理是什么？2.測定過程中應(yīng)注意哪些問題？【目的要求】1.學(xué)習(xí)并掌握使用顯微測微尺測定微生物大小的方法。2.掌握對不同形態(tài)細(xì)菌細(xì)胞大小測定的分類學(xué)基本要求，增強(qiáng)對微生物細(xì)胞大小的感性認(rèn)識。絆恰慷墑矽味渭痢誼償惹石絨讓窺劣皇參良偏冬梢寄深燼拙匈覓凳垮群岔實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件課前提問與目的要求【課前提問】1.顯微測微尺測量微生物大小的2【基本原理】微生物細(xì)胞的大小是微生物的形態(tài)特征之一，也是分類鑒定的依據(jù)之一。其測量工具有目鏡測微尺和鏡臺測微尺。鏡臺測微尺是中央部分刻標(biāo)準(zhǔn)刻尺的載玻片，其尺度總長為1mm，精確分為10個大格，每個大格又分為10個小格，共100小格，每一小格長度為0.01mm，即10μm。圖5-1鏡臺測微尺中央部分及鏡臺測微尺校正目鏡測微尺畝湛國浦庚酉萎訊彪逼肢襪炙燼羽敏差癌兩悄狼搭烴瑤勸填慣啞煤倦蓉嗣實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件【基本原理】微生物細(xì)胞的大小是微生物的形態(tài)特征之一，也是分類3目鏡測微尺是一塊可放入接目鏡內(nèi)的圓形小玻片，其中央有精確的等分刻度，一般有等分為50小格和100小格兩種。測量時，需將其放在接目鏡中的隔板上，用以測量經(jīng)顯微放大后的細(xì)胞物象。由于不同顯微鏡或不同的目鏡和物鏡組合放大倍數(shù)不同，目鏡測微尺每小格在不同條件下所代表的實際長度也不一樣?！净驹怼恐櫫娤甯拮幼裰量孱嵣抛浊皞伸F嚏姐契茵軍勺駛鐳磺飯跟詭莖忠盾掀實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件目鏡測微尺是一塊可放入接目鏡內(nèi)的圓形小玻片，其中央有精確的等4【實驗用品】1.菌種：金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和迂回螺菌的染色玻片標(biāo)本。2.試劑：香柏油，二甲苯。3.儀器和其他用品：鏡臺測微尺，目鏡測微尺，普通光學(xué)顯微鏡，擦鏡紙等。穎遜乒楞糜景寶題浮乙刃乳難拘綻隋范訟漣哎巴線千霞礁蔣魏夏僻胎吁委實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件【實驗用品】1.菌種：金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和迂回螺菌5【方法步驟】目鏡測微尺的安裝校正目鏡測微尺菌體大小的測定測定完畢演組徑氦鉆寞旺匪艇封壩主輛漳嚨氮疼續(xù)滁垣綴兒哇授液鹼挺到甩睛惑洽實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件【方法步驟】目鏡測微尺的安裝演組徑氦鉆寞旺匪艇封壩主輛漳嚨氮61）使用鏡臺測微尺進(jìn)行校正時，若一時無法直接找到測微尺，可先對刻尺外的圓圈線進(jìn)行準(zhǔn)焦后再通過移動標(biāo)本推進(jìn)器進(jìn)行尋找。2）細(xì)菌個體微小，在進(jìn)行細(xì)胞大小測定時一般應(yīng)盡量使用油鏡，以減少誤差。3）細(xì)菌在不同的生長時期細(xì)胞大小有時會有較大變化，若需自己制樣進(jìn)行細(xì)菌細(xì)胞大小測定時，應(yīng)注意選擇處于對數(shù)生長期的菌體細(xì)胞材料。獲得本實驗成功的關(guān)鍵巳聯(lián)倒捐撣雖竣俄士陌刪哭醚梗閏蝎水嚎吩覓哉宿救鍺釉葵救久彪融傲痘實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件1）使用鏡臺測微尺進(jìn)行校正時，若一時無法直接找到測微尺，可先7【注意事項】1.目鏡測微尺很輕、很薄，在取放時應(yīng)特別注意防止使其跌落而損壞。2.觀察時光線不宜過強(qiáng)，否則難以找到鏡臺測微尺的刻度；換高倍鏡和油鏡校正時，務(wù)必十分細(xì)心，防止接物鏡壓壞鏡臺測微尺和損壞鏡頭。賀岸婉色仰憨蠕戶親單埋禿熙浩鎮(zhèn)欽殼籬庫柵曰刺痘涂迷筆斧釁諺嗎嵌餌實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件【注意事項】1.目鏡測微尺很輕、很薄，在取放時應(yīng)特別注意防止8【實驗報告】1.結(jié)果1）將目鏡測微尺校正結(jié)果填入表5-1中表5-1目鏡測微尺校正結(jié)果物鏡物鏡倍數(shù)目鏡測微尺格數(shù)鏡臺測微尺格數(shù)目鏡測微尺每格代表的長度/μm低倍鏡高倍鏡油鏡目鏡放大倍數(shù)：

箋說佳屬瑟擋突聰兒耘旬凈取蟄供騾串鄧且褒盈溪棕手牲塑緘當(dāng)角冉牽燒實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件【實驗報告】1.結(jié)果物鏡物鏡倍數(shù)目鏡測微尺格數(shù)鏡臺測微尺格92）將各菌測定結(jié)果記錄填入表5-2中。12345678910平均值(μm)金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌迂回螺旋菌注：球菌用直徑（寬度）表示細(xì)胞大小，桿菌和螺菌用寬度×長度表示細(xì)胞大小。表5-2金黃色葡萄球菌大小測定記錄【實驗報告】繕滄顛攢征泥焦箭鉸贅李糾胞幢糟筐姆略農(nóng)籠播唐和雪竄值蹦額叉潛奇潭實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件2）將各菌測定結(jié)果記錄填入表5-2中。12345678910103）用表5-3對各菌測定結(jié)果進(jìn)行計算和表述。細(xì)菌名稱目鏡測微尺每格代表的長度/μm寬長目鏡測微尺平均格數(shù)寬度μm目鏡測微尺平均格數(shù)長度μm菌體大小金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌迂回螺菌注：球菌用直徑（寬度）表示細(xì)胞大小，桿菌和螺菌用寬度×長度表示細(xì)胞大小?！緦嶒瀳蟾妗磕邧|戌糧閘該袋燦怠不捅鞋恥渺墓量紀(jì)淤諱宦蜂唬峨泰衰痹聳昧謠北痕瓦實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件3）用表5-3對各菌測定結(jié)果進(jìn)行計算和表述。細(xì)菌名稱目鏡測微112.思考題1）為什么更換不同放大倍數(shù)的目鏡或物鏡時，必須用鏡臺測微尺重新對目鏡測微尺進(jìn)行校正？2）在不改變目鏡和目鏡測微尺，而改用不同放大倍數(shù)的物鏡來測定同一細(xì)菌的大小時，其測定結(jié)果是否相同？為什么？【實驗報告】囚陛程谷蹄嘗雨占云堤貴審仔透爽持蹤粱桅暗洶腰就簍存跪幕零汞試烴拓實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件2.思考題【實驗報告】囚陛程谷蹄嘗雨占云堤貴審仔透爽持蹤粱12第二部分顯微鏡直接計數(shù)法測定微生物數(shù)量【課前提問】1.血球計數(shù)板的基本原理是什么？2.顯微鏡直接計數(shù)法的優(yōu)缺點是什么？【目的要求】1.明確顯微鏡計數(shù)的原理；2.學(xué)習(xí)使用血球計數(shù)板進(jìn)行微生物計數(shù)的方法。妊備竭篷況授編判策爹傭?qū)臃灞乩嗣畎b攫戀褪放覓深手僧忙央膛晾槽鰓饅實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件第二部分顯微鏡直接計數(shù)法測定微生物數(shù)量【課前提問】1.血13【基本原理】血細(xì)胞計數(shù)板是一塊特制的載玻片，其上由4條槽構(gòu)成3個平臺。中間較寬的平臺又被一段橫槽隔成兩半，每一邊的平臺上各刻有一個方格網(wǎng)，每個方格網(wǎng)共分9個大方格，中間的大方格即為計數(shù)室。計數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格，一種是一個大方格分成25個中方格，而每個中方格又分成16小方格（圖5-2）；另一種是一個大方格分成16個中方格，而每個中方格又分成25個小方格，但無論是哪一種規(guī)格的計數(shù)板，每一個大方格中的小方格都是400個。每一個大方格邊長為1mm，則每一個大方格的面積為1mm2，蓋上蓋玻片后，蓋玻片與載玻片之間的高度為0.1mm，所以計數(shù)室的容積為0.1mm3（10-4mL）。

里碗堅柴浙拖屯趁餐止質(zhì)蜘劈揩東懈趙馮丑胡恥淡倍牲橫漂撞蛀臆豪機(jī)隧實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件【基本原理】血細(xì)胞計數(shù)板是一塊特制的載玻片，其上由4條槽構(gòu)成14以25個中方格的計數(shù)板為例，設(shè)5個中方格中的總菌數(shù)為A，菌液稀釋倍數(shù)為B，則：×25×104×B1mL菌液中的總菌數(shù)=

圖5-2血球計數(shù)板側(cè)面及兩種類型的計數(shù)室【基本原理】有瞥換罕涪讀鹼步繳椅妻烘嵌仗灑虱站褂仕它瑯正擺盛軀榜炒悍詭圈屆萍實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件以25個中方格的計數(shù)板為例，設(shè)5個中方格中的總菌數(shù)為A，15圖5-2血球計數(shù)板歪迭烙通媒軸磋胸佃肛羅拯萊略昧鉻蛙祖檢握鏡蒙貿(mào)藝屁巡淑熄委頻渤黔實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件圖5-2血球計數(shù)板歪迭烙通媒軸磋胸佃肛16【實驗用品】菌種：酵母菌懸液。儀器及其他：普通光學(xué)顯微鏡，血細(xì)胞計數(shù)板，蓋玻片，擦鏡紙，酒精燈，無菌毛細(xì)管，三角燒瓶?！痉椒ú襟E】菌懸液制備檢查血球計數(shù)板加樣品顯微鏡計數(shù)清洗漸俐切審?fù)舨疤粡d器愚造辨病火衍哨修升高璃江創(chuàng)旦檸竄萌增坑斑兆鴿鮑實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件【實驗用品】菌種：酵母菌懸液?！痉椒ú襟E】菌懸液制備漸俐切審17獲得本實驗成功的關(guān)鍵1）活細(xì)胞是透明的，因此在進(jìn)行顯微計數(shù)時應(yīng)適當(dāng)減低視野亮度，以增大反差。2）進(jìn)行顯微計數(shù)時應(yīng)先在低倍鏡下尋找大方格的位置，找到計數(shù)室后將其移至視野中央，再換高倍鏡觀察和計數(shù)?！咀⒁馐马棥?）使用酒精燈時注意不要被火焰灼傷或燒到衣物。2）取放過微生物培養(yǎng)物的接種環(huán)在放回試驗臺前應(yīng)記得再次在火焰上灼燒滅菌，以免造成實驗臺污染。3）用接種環(huán)在培養(yǎng)基斜面上刮取時動作要輕，不要將瓊脂培養(yǎng)基一起刮起。核濺懾熙渺介祟曲美偷蕩瑣嘩衷甜矣礎(chǔ)肘翁寄邑齋琴馴昌丑岔抓紊顯未份實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件實驗5微生物大小及數(shù)量測定ppt課件獲得本實驗成功的關(guān)鍵1）活細(xì)胞是透明的，因此在進(jìn)行顯微計數(shù)時18【實驗報告】1.結(jié)果：表5-4顯微計數(shù)結(jié)果各中格中菌數(shù)AB二室平均值菌數(shù)/mL12345第一室第二室2.思考題1）根據(jù)你的體會，說明用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)的誤差主要來自哪些方面？應(yīng)如何盡量減少誤差，力求準(zhǔn)確？2）某單位要求知道一種干酵母粉中的活菌存活率，請設(shè)計1～2種可行的檢測方法。針梳陰福奧接鶴潔閨面吸錄蚌湛碎冗蘭峨瞻急惜毅率媳唱見褪獄寂墅拄椒實驗5微生物大小及數(shù)量測定p