藥理學(xué)試驗課件

藥理學(xué)試驗朱偉藥理學(xué)試驗朱偉藥理學(xué)試驗朱偉實驗課程簡介（1）實驗基本技能（2）阿司匹林鎮(zhèn)痛實驗（5）鏈霉素的毒性反應(yīng)及對抗（4）地塞米松抗炎實驗（3）心得安對氯仿引起的心室纖顫預(yù)防作用1實驗課程簡介實驗課程安排共18學(xué)時（1）實驗基本技能（2）阿司匹林鎮(zhèn)痛實驗（5）鏈霉素的毒性反應(yīng)及對抗（4）地塞米松抗炎實驗（3）心得安對氯仿引起的心室纖顫預(yù)防作用2020/11/262實驗課程學(xué)習(xí)要求實驗前實驗中實驗后1.預(yù)習(xí)實驗指導(dǎo)，明確實驗?zāi)康暮鸵?，充分了解實驗方?.進(jìn)入實驗室，必須穿白大衣.3.檢查實驗器材

1.根據(jù)實驗內(nèi)容進(jìn)行小組內(nèi)分工2.嚴(yán)格、準(zhǔn)確地按照指導(dǎo)中的實驗方法進(jìn)行實驗操作。3.仔細(xì)、真實的記錄實驗結(jié)果。1.死亡動物放在指定地點；存活動物放入籠內(nèi)。2.將器材洗凈擦干，放回原處3.每小組輪流負(fù)責(zé)搞好實驗室內(nèi)衛(wèi)生。2020/11/263實驗課程學(xué)習(xí)目的DBCA鞏固藥理學(xué)基本理論學(xué)習(xí)基本的實驗方法培養(yǎng)實事求是的學(xué)習(xí)作風(fēng)培養(yǎng)動手能力、科研能力2020/11/264實驗一、基本實驗操作不同給藥途徑的藥物對小鼠睡眠時間的影響2020/11/265實驗?zāi)康模?）掌握小鼠給藥的基本方法。2）比較不同給藥途徑藥物起效的時間快慢。實驗原理：不同的給藥途徑的藥物起效時間不相同。1實驗?zāi)康募霸?020/11/266實驗動物：小鼠實驗藥物：1%戊巴比妥鈉2主要實驗材料2020/11/2673

稱重、分組腹腔給藥皮

下

給

藥灌胃給藥（0.1ml/10g）小鼠翻正反射消失時翻正反射再次恢復(fù)時間主要實驗過程2020/11/2681小鼠基本捉拿、固定方法2小鼠基本給藥方法實驗基本技能2020/11/269右手提起鼠尾,左手拇指和食指捏住雙耳及頭部皮膚，無名指、小指和掌心夾其背部皮膚及尾部,便可將小鼠完全固定。單手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、無名指和手掌壓住尾根部，再用騰出的拇指、食指及中指抓住鼠耳及頭部皮膚而固定。注意事項：小鼠捉拿與固定方法2020/11/2610注意事項：1.取背部及后腿皮下，注射時用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚，右手持注射器將針頭刺入，固定后即進(jìn)行注射。

皮下注射2020/11/2611注意事項：1、針頭刺入部位不宜太接近上腹部或太深，以免刺破內(nèi)臟。針頭與腹腔的角度不宜太小，避免刺入皮下。

2、使用針頭不宜太粗，避免藥液注射后從注射孔流出。注射后可用棉球按一下注射部位。

腹腔注射給藥途徑2020/11/2612注意事項：1.用左手拇指和食指抓住鼠兩耳和頭部皮膚，其他三指抓住背部皮膚，將鼠抓持在手掌內(nèi)，固定好動物，頭部和頸部保持很平,右手取注射器進(jìn)行灌胃。

2.灌時針頭沿鼠口角通過食管進(jìn)入胃內(nèi)。灌時如很通暢，則表示針頭已進(jìn)入胃內(nèi)；如動物有嘔吐動物或強(qiáng)烈掙扎，必須拔出后按上述方法重新操作。決不可進(jìn)針不順硬向里插。

灌胃給藥給藥途徑2020/11/2613（1）注意基本給藥途徑的正確操作。（2）注意小鼠翻正反射消失時間判定（＞1min）（3）客觀真實的記錄實驗數(shù)據(jù)。4實驗注意事項2020/11/2614影響藥物起效的因素有哪些？請分析本次實驗中，那些因素可影響實驗結(jié)果。？仔細(xì)觀察記錄實驗結(jié)果，結(jié)合藥理學(xué)總論知識思考，何種給藥途徑起效最快。為什么？問題與思考2020/11/2615實驗二、阿司匹林的鎮(zhèn)痛作用2020/11/2616實驗?zāi)康模孩僬莆真?zhèn)痛藥的實驗方法。（熱板法、扭體法）②觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用。實驗原理：熱刺激或者化學(xué)刺激物使小鼠產(chǎn)生疼痛反應(yīng)，觀察給藥前后小鼠疼痛反應(yīng)的變化。（痛閾值、扭體次數(shù)）1實驗?zāi)康募霸?020/11/2617實驗動物：小鼠實驗藥物：阿司匹林主要儀器：熱板測痛儀2主要實驗材料2020/11/26183

設(shè)定儀器溫度（55℃）動物初篩給藥組：60mg/ml阿司匹林0.1ml/10g對照組：引用水0.1ml/10g灌胃給藥

給藥后30min、45min、60min再次測定各組小鼠痛閾值。主要實驗過程（熱板法）2020/11/2619篩選指標(biāo)：小鼠的痛閾值—即小鼠出現(xiàn)疼痛反應(yīng)的時間。以小鼠添后足作為出現(xiàn)疼痛觀察指標(biāo)。測定2次痛閾值，以痛閾值大于5秒，小于30秒，做為篩選合格動物。

小鼠篩選方法：2020/11/2620動物隨機(jī)分組給藥組：60mg/ml阿司匹林0.1ml/10g灌胃給藥

30min后各組小鼠均注射0.6%冰醋酸（0.2ml/只）；記錄15min內(nèi)各組小鼠的扭體次數(shù)。對照組：飲用水0.1ml/10g3小鼠扭體反應(yīng)主要實驗過程（扭體法）2020/11/2621熱板儀溫度設(shè)定：55℃±0.5℃。室溫:以15～20oC為宜。熱板法中動物性別的選擇：雌性。痛閾值判定指標(biāo)：添后足。痛閾值時間：初篩（＞5s、＜30s）。超過60s動物未添足，將動物取出，痛閾值以60s計算。實驗中保持小鼠足底及熱板內(nèi)干燥。冰醋酸現(xiàn)用現(xiàn)配。4實驗注意事項2020/11/2622兩種鎮(zhèn)痛模型的區(qū)別？阿司匹林藥理學(xué)作用、機(jī)制？？問題與思考2020/11/2623

實驗三、心得安對氯仿引起的心室纖顫預(yù)防作用2020/11/2624實驗?zāi)康模孩儆^察β受體阻斷藥對氯仿誘導(dǎo)室顫的預(yù)防作用。實驗原理：氯仿誘導(dǎo)的室顫可能與其誘發(fā)體內(nèi)兒茶酚胺含量升高和對心臟的直接作用有關(guān)。心得安有β受體阻斷作用，可對抗氯仿對心臟的作用1實驗?zāi)康募霸?020/11/2625實驗動物：小鼠實驗藥物：心得安、氯仿2主要實驗材料2020/11/2626動物隨機(jī)分組給藥組：10mg/ml心得安0.1ml/10g灌胃給藥

30min后各取1只，同時扣入含有0.5ml氯仿棉球的燒杯內(nèi)，待呼吸停止后，解剖觀察心臟跳動情況，判斷有無室顫出現(xiàn)對照組：飲用水0.1ml/10g3主要實驗過程2020/11/2627（1）室顫的發(fā)生與體重有關(guān)，25-35克室顫率較高（2）小鼠呼吸停止后不能在燒杯內(nèi)停留過久（3）解剖時不要將心臟剪破4實驗注意事項2020/11/2628請分析本次實驗中，哪些因素可影響實驗結(jié)果。心得安藥理學(xué)作用、機(jī)制？？問題與思考2020/11/2629

實驗四、地塞米松對小鼠耳毛細(xì)血管通透性的作用

2020/11/26301.1實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)急性炎癥動物模型方法觀察糖皮質(zhì)激素的抗炎作用1.2實驗原理：二甲苯為致炎物質(zhì)，可促進(jìn)炎癥介質(zhì)釋放，導(dǎo)致動物急性炎癥。比較給藥組與對照組局部腫脹程度的變化判斷藥物的抗炎作用。1實驗?zāi)康募霸?020/11/2631

實驗動物：小鼠實驗藥物：地塞米松二甲苯2主要實驗材料2020/11/2632

小鼠稱重、標(biāo)記、分組給藥組：地塞米松0.1ml/10g腹腔注射

30min后用二甲苯50μl均勻涂抹每只鼠的右耳對照組：生理鹽水0.1ml/10g3

90mim后小鼠脫臼處死，分別用打孔器取相同部位左右耳片，電子天平稱重。主要實驗步驟2020/11/2633抗炎實驗中動物性別的選擇：雄性小鼠耳廓滴加二甲苯時，正反面均勻涂抹。避免滴入耳廓內(nèi)。小鼠左右耳打耳片位置統(tǒng)一（耳廓中間部位）。4實驗注意事項2020/11/2634炎癥的表現(xiàn)以及炎癥的類型有哪些？？本實驗中選擇雄性動物的原因？問題與思考2020/11/2635常見炎癥模型介紹1非特異性炎癥模型：急性大鼠足腫脹小鼠耳腫脹白細(xì)胞游走法2非特異性炎癥模型：慢性棉球植入法大鼠巴豆氣囊法3免疫性炎癥弗氏完全佐劑致炎法2020/11/2636

實驗五、鏈霉素的毒性反應(yīng)及對抗

2020/11/26371.1實驗?zāi)康模河^察鏈霉素引起的肌肉麻痹作用及氯化鈣的對抗作用1.2實驗原理：氨基甙類抗生素用量過大對神經(jīng)肌肉接頭有阻斷作用，可與突觸前膜“鈣結(jié)合部位”結(jié)合，使乙酰膽堿釋放減少，引起肌肉麻痹，鈣離子可對抗此毒性反應(yīng)1實驗?zāi)康募霸?020/11/2638

實驗動物：小鼠實驗藥物：鏈霉素氯化鈣2主要實驗材料2020/11/2639動物隨機(jī)分組給藥組：62.5mg/ml鏈霉素30mg/ml氯化鈣0.1ml/10g腹腔注射

觀察給藥后每