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第七章外源基因的表達及其優(yōu)化策略第一節(jié)影響外源基因表達的因素第二節(jié)外源基因在原核細胞中的表達第三節(jié)外源基因在真核細胞中的表達第一節(jié)影響外源基因表達的因素基因表達:從DNA分子有序地將其所承載的遺傳信息通過密碼子和反密碼子系統(tǒng)轉(zhuǎn)變由特定氨基酸順序構(gòu)成的多肽或蛋白質(zhì)分子過程,從而決定生物有機體遺傳表型。第一節(jié)影響外源基因表達的因素基因表達是指結(jié)構(gòu)基因在生物體中的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及所有加工過程?；蚬こ讨谢蚋咝П磉_研究是指外源基因在某種細胞中的表達活動,即剪切下外源基因片段,拼接到另一個基因表達體系中,使其能獲得原生物活性又可高產(chǎn)的表達產(chǎn)物。第一節(jié)影響外源基因表達的因素DMMMMRAHlication基因表達遺傳信息從DNA到蛋白質(zhì)的傳遞過程中心法則(centraRNAdogma)。Protein第一節(jié)影響外源基因表達的因素克隆基因的表達外源基因在宿主細胞中表達導入宿主細胞在宿主細胞中表達出蛋白質(zhì)宿主細胞原核細胞或真核細胞第一節(jié)影響外源基因表達的因素影響外源基因表達的因素主要有:閱讀框架順式作用元件翻譯過程表達體系第一節(jié)影響外源基因表達的因素、閱讀框架對轉(zhuǎn)化基因的影響什么是閱讀框架(openreadingframe,ORF)?二、順式作用元件對基因表達的影響1對基因轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控1)啟動子2)增強子3沉默子第一節(jié)影響外源基因表達的因素順式作用元件對基因表達的影響2對基因轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控1)終止子2)衰減子3對DNA結(jié)構(gòu)的影響1)核基質(zhì)結(jié)合區(qū):一段與核基質(zhì)特異結(jié)合的DNA序列。2)絕緣子:對一側(cè)有作用,對另一側(cè)沒有。3)基因座控制區(qū):通過改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)導致基因轉(zhuǎn)錄第一節(jié)影響外源基因表達的因素三、翻譯過程對表達的影響1翻譯起始對基因表達的影響2密碼子偏愛性對基因表達的影響3翻譯終止對基因表達的影響四、表達系統(tǒng)對表達產(chǎn)物的影響第二節(jié)外源基因在原核細胞中的表達外源基因表達系統(tǒng)由基因表達載體和相應(yīng)的受體細胞兩部分組成。宿主細胞分為兩大類第一類為原核細胞大腸桿菌、枯草芽胞桿菌、鏈霉菌等;第二類為真核細胞酵母、絲狀真菌、哺乳動物細胞等。目前使用最廣泛的宿主菌

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