基因工程載體

質(zhì)粒載體載體噬菌體載體

動(dòng)物病毒載體大腸桿菌質(zhì)粒載體pBR322

單鏈DNAM13載體

SV40載體

乳頭瘤病毒載體昆蟲(chóng)桿狀病毒載體柯斯(COS)載體

λ噬菌體載體

枯草桿菌質(zhì)粒載體pNC3酵母菌質(zhì)粒載體2μ

農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒載體Ti一基因工程的基本元件

------載體四、E.coli質(zhì)粒載體

1.pBR322

是基因工程中最重要的一個(gè)人工質(zhì)粒,有萬(wàn)能質(zhì)粒之美稱(chēng).①pBR322的構(gòu)建復(fù)制子:松弛型選擇標(biāo)記:Amp、Tet篩選形式:抗性插入失活單一切點(diǎn):24個(gè)③物理圖譜②pBR322的特性pBR322plasmidF.BolivarR.L.RodriguezBacterialResistancepBR322酶切圖譜2懇.堂p潤(rùn)U姜C系接統(tǒng)美神國(guó)味加簡(jiǎn)利科福宇尼小亞乎大里學(xué)糠的莊科糖學(xué)麥家J禿.稻M什e旅s對(duì)s房誠(chéng)i擔(dān)n箏g和J藍(lán).呈V常i含e齒r孔i喂a于1魯9門(mén)8單7年歸首發(fā)先新構(gòu)瞧建來(lái)漆自p亂B咐R芹3括2枕2質(zhì)型粒起的孩復(fù)沸制鵲起強(qiáng)點(diǎn)氨鑼芐舉青陳霉悠素舅的故抗燒性漁基大因大攀腸科桿蝕菌β-半鄭乳奴糖繼酶批基山因看的廢啟礙動(dòng)蓋子絞及栗其耳編木碼駁的α-肽墳鏈播基引因?yàn)酰╨邁a問(wèn)c傾Z’）位密于l麻a臣c背Z’基渣因朝內(nèi)幟的虎一漿段M母C羨S區(qū)鴨段2源.由p聽(tīng)U常C系及統(tǒng)X顆-警g每a圾l溴示氯乖吲陸哚+β賴(lài)-半魯乳芝糖狠苷-爺-憐-易-村-藍(lán)酒白漲斑刻篩狂選插消入洪片燃段酒無(wú)捧酶棵活闖性嚴(yán)白定斑未授插籍入撲片闖段田有斧酶陳活保性簡(jiǎn)藍(lán)抵斑β矛-半旬乳鍬糖譯苷海酶3早.駕T鐮A載驗(yàn)體經(jīng)T葡a膛q毛D遼N猜A聚無(wú)合柳酶原擴(kuò)昆增舞后推的P蛋C肅R產(chǎn)陪物道末蹈端彈都跑帶應(yīng)有耀單弱個(gè)A酵含母懶菌齒質(zhì)歉粒歌載且體食沉品吹級(jí)矛微改生冊(cè)物適卻合漆于丸真弓核勢(shì)基劑因淺表傲達(dá)基詢(xún)因給產(chǎn)旨物篩外掠分坦泌七政、圈酵鍵母駝菌至質(zhì)烘粒朝載木體多鵲數(shù)辛酵摸母飄中南含隊(duì)有包一觸種攝能貼獨(dú)勁立聰復(fù)礙制這的摧環(huán)狗狀雄雙木鏈D懷N尋A，瀉稱(chēng)秩為2兇μ質(zhì)似粒用，蠢長(zhǎng)襖約6肢.灰3伶k暈b，織有血單疲一歉的卷復(fù)棵制雨起孩始琴點(diǎn)妄和首一愿?jìng)€(gè)霜自著主遇復(fù)訴制辱功警能障區(qū)捆域走（A轉(zhuǎn)R變S片告段途）盆。整爛合券型同、俘復(fù)何制野型稅、左附心加漿型瞎和辛穩(wěn)惕定蛋型等虜類(lèi)斤型撕。①股含悼有E漁.若c駐o怎l壓i質(zhì)傍粒彎的因復(fù)滔制鍬起捏始匯序臘列丙。②旅含腹有孔酵霸母絲式的葬篩暢選慮標(biāo)雞記煌（泰如L殺E舉U屆2）③丈具訪有浪合漸適浪的刃供辰外寨源蒜基迎因溝插現(xiàn)入智的質(zhì)限達(dá)制顆酶赴切奧割安位孔點(diǎn)稠。2皺.酵它母標(biāo)菌灘質(zhì)習(xí)粒鴨載紀(jì)體鵝的血特噴點(diǎn)1泛.酵孕母求菌圾質(zhì)瓦粒蓋載孔體饞的爐類(lèi)莖型TypeNameDescriptionbacterialoriginColE1ColE1(pUC-type)originofreplicationpromoterGal1-10promoterGal1-10yeastpromoterselectablemarkerampRampicillinresistancegeneselectablemarkerchlRchloramphenicolresistancegeneLOSTinrecombined(withinsert)formselectablemarkerURA3URA3auxotrophyselectablemarker(yeast)yeastcentromereCEN4yeastcentromericsequenceyeastoriginARS1ARS1yeastoriginofreplication④酵役母窯菌穩(wěn)寸定花型質(zhì)偷粒款載務(wù)體著撫絲畢粒第象二身節(jié)盾噬箱菌驚體勾載墓體一勺、λ噬述菌繪體秒載葡體1沾.λ噬瓜菌伴體度結(jié)州構(gòu)惡特旁點(diǎn)厲:①活線鮮性賞雙嫁鏈D得N調(diào)A分申子②論可襲在E晚.丘c乏o柜l絹i中名大資量江繁緣瑞殖③勒具簽非望必定需宋區(qū)域(財(cái)約哲1忠/搶3剝長(zhǎng)度度庫(kù)）④涌?jī)沙蕉俗肪咔?撤2昌個(gè)熊核挎苷巨酸福單拾鏈筒互孤補(bǔ)將粘柜性艷末艇端λ噬圍菌前體上線灶性D也N襯A分飾子弓的追粘斗性硬末狂端斑及辛其成環(huán)挎化們作帆用（a）很具慮有午互吃補(bǔ)穴單匹鏈阻末攪端較（仁粘敢性繳末頁(yè)端槳）身的λD前N藏A分執(zhí)子稠。（b）裝當(dāng)袋進(jìn)比入利宿貪主著細(xì)救胞介后較，突通補(bǔ)過(guò)鞋粘召性唯末熊端爹之喝間傾的輔堿早基帽配項(xiàng)對(duì)惡作移用卷實(shí)和現(xiàn)隸的邁線墨性餓分哀子更的費(fèi)環(huán)曾化今作針用仔，腦由磚此珍形叢成帝的摟雙隸鏈茅區(qū)羞叫判做c條o噸s位蒜點(diǎn)GGGCGGCGACCTCCCGCCGCTGGATACGcos5’-P5’-P3’3’粘性末端環(huán)化作用（a）（b）2、λ噬屢菌騙體斑的民缺狠陷兄與債改寨造λ噬轎菌予體冰的汁缺宮陷用：⑴富酶犁切碑點(diǎn)蹄太折多5個(gè)B巖a巴m鍬H刃1位徑點(diǎn)燃，6個(gè)B香g濁l鼓Ⅰ位腐點(diǎn)翁，5個(gè)E校c塌o梁R優(yōu)Ⅰ位朋點(diǎn)文。⑵堡野頑生識(shí)型搶只惡能飼接制納黎一賴(lài)定四長(zhǎng)媽度諷的D俊N咳A。λ噬冶菌飯?bào)w躁的7女5燃-亦1竹0敗5喚%，您只躲能宅接容納4旺9脂k演b屢×念5則%誕=記2勾.帝4心5唐k蜓b的D冤N才A。λ噬兔菌膛體麥的讀改功造施：⑴涼切滔去燒非雨必評(píng)須社區(qū)哨段傷，詳在欣切脊去慘的侵同正時(shí)彎，躬加換載貢目沸的砍基述因掩（1晶5社-灶2適3派K毯b）置；⑵望去鵲除道過(guò)水多疾的漏酶扯切棉位剝點(diǎn)餐，鋪每毫種是酶堅(jiān)只喪留1娛-膨2個(gè)惕切悄口先；⑶歇增書(shū)加鋸選蔥擇幼標(biāo)析記暢基脹因藏（s階e桌l委e熔c表t膽a炸b橋l馳e噴m坡a跪r稱(chēng)k印e曲r）燈；⑷建倒立λD植N張A的森體堪外夢(mèng)包菌裝原。主捆要晌外繞殼男蛋把白效質(zhì)峰是褲基見(jiàn)因E的遙產(chǎn)坊物頭犁部享前矮體連診環(huán)D菌N晶A基辰因A的扭產(chǎn)胸物疲在c采o斃s位潮點(diǎn)裙切漂割尖噬且菌執(zhí)體D慨N首A包粱含何在段外困殼冶中俊的旋基星因D的陸產(chǎn)是物基崖因W和F臺(tái)I叫I的含產(chǎn)贊物佛組腫裝躺蛋膛白礙質(zhì)爽加筒完擠整峰的軍尾陵部噬半菌撿體卻的借包瘦裝車(chē)過(guò)野程s典u扔p-細(xì)蛛菌頭如部箱基席因蹦（棋琥詢(xún)珀滑突鹿變虎型朵）尾矮部釘基鍋因祥（奶琥鐮珀詳突樓變政型任）轉(zhuǎn)樂(lè)錄湊復(fù)病制婆蛋垂白蛛質(zhì)蛛合束成組樹(shù)裝鞭尾逝部懸所文需城要凝的像組藝分“無(wú)算頭孕部”的痛提謙取興物組雜裝搞頭嗚部行所鼻需手要俘的停組贈(zèng)分“無(wú)竿尾丘部”的屢提乳取酷物溫顆育完剩整土的蒼噬催菌惰體轉(zhuǎn)明錄高復(fù)海制厘蛋邊白墻質(zhì)借合公成T學(xué)4噬泡菌隔體榮的追體獸外磨包塊裝λD酷N盟A的身體疾外賭包來(lái)裝體虧外鵲包愉裝頸的獸重薪組D巴N并A比套裸值露得的D模N乖A導(dǎo)醋入鋪受旅體堆細(xì)歪胞貿(mào)的鼻效歸率椒高1蓮0次0要-黃1膜0殊0軋0悔0倍4斥.凱稅倫巧噬敘菌工體循載蠢體峽克唯隆泥過(guò)騎程5跌.引λ噬餐菌縫體洽載功體淺優(yōu)項(xiàng)點(diǎn)懇:用詠途悄:主蘇要見(jiàn)用俱于預(yù)建萄立若真湊核西生竄物刷的殖基鋸因裕文河庫(kù)①品感略染菌高賓效童:巧比禾質(zhì)努粒貓高拔百天倍②需容虎量戀大舌:斜可瞞達(dá)卡1販5K偉b織(不雨得忽超疏過(guò)說(shuō)原舟來(lái)瞞長(zhǎng)處度向的君1錯(cuò)0私5先%賀,起不方得集短也于棚原抬來(lái)枯長(zhǎng)稼度控的婚75酷%腿)③易單操段作壓,洪易其保俗藏二尤、班柯慕斯英(C線O監(jiān)S采)載武體睡(c衡o斑s回m術(shù)i張d撓)1習(xí).仙柯服斯柳載文體逐的嶺組襲成帶劑有使抗僚藥翻性灑標(biāo)吼記帶言有標(biāo)質(zhì)貞粒唉的途復(fù)駐制炸起建始足點(diǎn)帶邀有品多引個(gè)定限歌制抖酶塑的斥單卡一穩(wěn)切沙點(diǎn)帶野有λ噬好菌軟體繭粘沉性應(yīng)末授端抽片訴段由萄質(zhì)設(shè)粒消和λ粘毛性鐘末哭端春“仔尾練巴塘”姨兩邁部蓮分償組施成業(yè)。2隆.柯括斯身載柜體饑的亭特麻點(diǎn)3斗.園c簡(jiǎn)o碌s葡m柜i靠d載恢體穩(wěn)的搏優(yōu)椅點(diǎn)能甚象λ狹D沃N趁A一吃樣她體要外念包桃裝贏，喝并節(jié)高患效貧導(dǎo)域入畏受箏體潮細(xì)困胞可講以驕裝巧載粉比婆質(zhì)緊粒教或λ車(chē)D膜N炮A大禍得丑多等的墨外巴源D班N督A片電段c籌o壟s區(qū)1甜.悟7旋k隱b盾+質(zhì)宏粒澤部園分3暢.肆3貞k諷b禾4淘6率.今5垂K大b外蘇源D必N業(yè)A由晴于饒攜店帶海質(zhì)刪粒企的異選蕩擇私標(biāo)鏟記陳，毛便攀于臣篩償選由揚(yáng)于激質(zhì)廈粒顧上幻玉的除多惑種威單西一宿酶擇切皮位趟點(diǎn)梯，飽便們于談克犬隆贏。利那用撕柯釀斯為載抖體猶載史體種進(jìn)脅行咐基揮因仁克奪隆濟(jì)的泡一昆般解程飯序三辦、M俊1征3噬俗菌豬體扣克側(cè)隆滾載嬌體1冰.竟M疲1漆3的懲特肺性:嚇環(huán)蠟狀驗(yàn),炮單奔鏈D春N花A攀,普6茶.跪4事0敢7昌K疏b2柿.唯M歇1獅3噬球菌濫體嫂作療為縮慧載戒體優(yōu)府越得性單館鏈D映N獵A噬菠菌渾體景的麻復(fù)稠制天，往是拼以煎雙籮鏈囑環(huán)憐形腳的D賭N驅(qū)A為輝媒態(tài)介澇的凡，脈這通種液復(fù)鑒制弓形堵式封的D敏N餡A簡(jiǎn)班稱(chēng)R神F徒D賭N巖A；不巨論塵是R嘉F平D丘N中A還號(hào)是s師s慚D綠N深A(yù)都胞能望感笨染勢(shì)大夢(mèng)腸撈桿獵菌技；單膨鏈D乏N題A噬執(zhí)菌挽體明顆日粒它的黃大因小介，宇是似受撓其D換