發(fā)酵工程（同課異構(gòu)）【知識精講+拓展提升】高考生物一輪復習課件

發(fā)酵工程第十單元生物技術(shù)與工程一、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程發(fā)酵發(fā)酵工程發(fā)酵是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過微生物代謝轉(zhuǎn)化為人類所需的產(chǎn)物的過程。(P5)指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品。它涉及菌種的選育和培養(yǎng)，產(chǎn)物的分離和提純等方面。（P1）原料人類所需產(chǎn)物適宜的條件微生物代謝(復雜分子)(簡單分子)蛋白質(zhì)、多糖氨基酸、抗生素一、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和發(fā)酵工程直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下的面團、鹵汁等發(fā)酵物中的微生物進行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)。傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制環(huán)境中蛋白質(zhì)脂肪小肽氨基酸甘油脂肪酸++酵母、曲霉和毛霉等多種微生物(毛霉起主要作用)創(chuàng)造毛霉生長環(huán)境防止雜菌污染，避免豆腐的腐敗由酒及各種香辛料置成，抑制微生物的生長同時增加風味和口感1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作-腐乳菌種名稱生物分類代謝類型適宜溫度繁殖方式發(fā)酵對氧的需求乳酸菌酵母菌醋酸菌真核生物異養(yǎng)兼性厭氧出芽生殖先需氧，后厭氧原核生物異養(yǎng)需氧30-35℃二分裂一直需氧原核生物異養(yǎng)厭氧二分裂密閉厭氧18-30℃18-20℃C2H5OH+O2→CH3COOH（醋酸）+H2O+能量酶②酵母菌先在有氧條件下大量繁殖②再在無氧條件下進行酒精發(fā)酵C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量酶C6H12O6→2C2H5OH（酒精）+2CO2+能量酶③醋酸菌在氧氣、糖源充足時,將糖分解成醋酸C6H12O6+2O2→2CH3COOH+2CO2+2H2O+能量酶③當缺少糖源時，將乙醇變?yōu)?/p>

乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿幄偃樗峋跓o氧條件下將糖分解成乳酸C6H12O6→2C3H6O3（乳酸）+能量酶1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作配置鹽水原料處理蔬菜裝壇加鹽水封壇發(fā)酵用清水和食鹽配制質(zhì)量百分比為5%-20%的鹽水，并將鹽水煮沸，冷卻待用；Q1：食鹽的作用Q2：鹽水的濃度Q3：鹽水煮沸的原因Q4：鹽水冷卻的原因過高：乳酸發(fā)酵受抑制，泡菜風味差；過低：雜菌易繁殖，導致泡菜變質(zhì)。調(diào)味、抑制其他微生物的生長殺菌除氧防止殺死乳酸菌1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作-泡菜將新鮮蔬菜洗凈，切成塊狀或條狀，混合均勻，晾干后裝入泡菜壇內(nèi)；裝至半壇時，加入蒜瓣、生姜及其他香辛料，繼續(xù)裝至八成滿；在泡菜發(fā)酵初期，酵母菌等較為活躍，發(fā)酵產(chǎn)物中有較多的CO2，防止發(fā)酵液溢出壇外；防止因裝太滿使鹽水未完全淹沒菜料而導致菜料變質(zhì)腐爛；配置鹽水原料處理蔬菜裝壇加鹽水封壇發(fā)酵1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作-泡菜將冷卻好的鹽水緩緩倒入壇中，使鹽水沒過菜料，蓋好壇蓋；創(chuàng)造無氧環(huán)境Q1：鹽水沒過菜料的原因Q2：泡菜壇應該符合什么要求？氣密性良好，給泡菜壇內(nèi)創(chuàng)造無氧環(huán)境，嚴格控制厭氧條件*使用前檢查氣密性：壇口向上，壓入水中，看壇內(nèi)壁有無滲水現(xiàn)象。配置鹽水原料處理蔬菜裝壇加鹽水封壇發(fā)酵1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作-泡菜向壇蓋邊緣的水槽中注滿水，并在發(fā)酵過程中注意經(jīng)常向水槽中補充水；根據(jù)室內(nèi)溫度控制發(fā)酵時間；Q1：水槽中注滿水以及補充水的原因嚴格控制厭氧條件Q2：控制發(fā)酵時間的原因發(fā)酵期間，乳酸的質(zhì)量百分比為0.4%-0.8%時，泡菜的口味、品質(zhì)最佳配置鹽水原料處理蔬菜裝壇加鹽水封壇發(fā)酵1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作-泡菜時期乳酸菌乳酸亞硝酸鹽發(fā)酵前期發(fā)酵中期發(fā)酵后期變化曲線泡菜發(fā)酵過程中，乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的含量變化少（O2抑制乳酸菌活動）少增加（硝酸鹽還原菌作用）最多（乳酸菌比其他雜菌更耐酸。乳酸積累，抑制其他菌活動）增多達到最多后開始下降（硝酸鹽還原菌受抑制，部分亞硝酸鹽被分解）減少（乳酸積累，pH下降，抑制乳酸菌活動）繼續(xù)增多，最后保持穩(wěn)定下降至保持相對穩(wěn)定（硝酸鹽還原菌被完全抑制）1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作-泡菜【典例1】紅酸湯是一種很有特色的火鍋底料,制作流程如圖所示。請回答以下問題:(1)密封發(fā)酵時,常在壇中加入成品紅酸湯,其目的是________________________。乳酸發(fā)酵的過程即為乳酸菌進行__________的過程,該過程發(fā)生在乳酸菌細胞的____________中。

細胞質(zhì)基質(zhì)增加乳酸菌含量以縮短制作時間無氧呼吸(2)裝壇時壇口留有一點空間而不裝滿的目的是__________________________,紅酸湯腌制過程的初期會有氣泡冒出,但氣泡的產(chǎn)生逐漸停止,試分析原因是________________________________________________________________________________________________________________________________。

防止西紅柿發(fā)酵后液體膨脹外溢剛?cè)雺瘯r,西紅柿表面的雜菌呼吸產(chǎn)生二氧化碳,隨著乳酸積累抑制了雜菌的生長,乳酸菌產(chǎn)生乳酸的過程不產(chǎn)生二氧化碳(3)亞硝酸鹽的含量影響紅酸湯的品質(zhì),在發(fā)酵過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有____________________________________________。

溫度、食鹽用量、腌制時間、腌制方法等1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作-果酒果醋項目果酒果醋菌種酵母菌醋酸菌溫度18～30℃30～35℃時間10～12d7～8d氧氣條件前期需氧，后期不需氧需氧排氣或充氣情況發(fā)酵旺盛期的CO2產(chǎn)量非常大，要及時排氣，防止發(fā)酵瓶爆裂適時通過充氣口充氣，保證充足的氧氣條件氣味或味道酒味酸味氣泡和泡沫有氣泡和泡沫無氣泡和泡沫發(fā)酵液顏色混濁混濁，液面形成白色菌膜檢測指標嗅味和品嘗、用酸性重鉻酸鉀檢測酒精含量、測定pH、進行酵母菌的鏡檢等工作觀察菌膜的形成、嗅味和品嘗、測定pH、進行醋酸菌的鏡檢等工作器具消毒沖洗葡萄榨汁裝瓶果酒檢測酒精發(fā)酵將發(fā)酵瓶、榨汁機等器具用洗潔精清洗干凈，并用體積分數(shù)為70%的酒精消毒，晾干備用1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作-果酒果醋取新鮮葡萄，用清水沖洗1-2次，再去除枝梗和腐爛的籽粒，瀝干Q1：新鮮葡萄、去腐爛籽粒Q2：沖洗Q3：先洗葡萄，再去枝梗的原因防止帶入雜菌造成發(fā)酵液污染洗去浮塵，防止洗掉葡萄皮上的酵母菌防止除去枝梗時葡萄皮破損導致雜菌污染器具消毒沖洗葡萄榨汁裝瓶果酒檢測酒精發(fā)酵在發(fā)酵的最初階段使酵母菌的有氧呼吸，大量繁殖產(chǎn)生足夠的菌種；防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液溢出。用榨汁機榨取葡萄汁，將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶（注意：要留有大約1/3的空間），蓋好瓶蓋初期需氧、后期無氧1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作-果酒果醋空氣進入發(fā)酵品會破壞無氧環(huán)境以及雜菌污染將溫度控制在18-30℃進行發(fā)酵，在發(fā)酵過程中，每隔12h左右將瓶蓋擰松一點（注意：不是打開瓶蓋），此后再擰緊瓶蓋。發(fā)酵時間為10-12d.Q1：擰松Q2：不是打開瓶蓋適時排氣，以平衡氣壓結(jié)構(gòu)作用酒精發(fā)酵充氣口排氣口出料口器具消毒沖洗葡萄榨汁裝瓶果酒檢測酒精發(fā)酵可通過從發(fā)酵瓶口取樣來對發(fā)酵的情況進行檢測(P8T3)通入空氣關(guān)閉排出CO2打開便于取樣監(jiān)測關(guān)閉Q1：為什么排氣口膠管長而彎曲？Q2：該裝置還能繼續(xù)改進嗎？防止空氣中的微生物污染可以在充氣口填充棉花或者安裝其他過濾裝置，以防止充入的氣體攜帶外來雜菌污染發(fā)酵液等1.傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作-果酒果醋結(jié)構(gòu)作用醋酸發(fā)酵充氣口排氣口出料口器具消毒沖洗葡萄榨汁裝瓶果酒檢測酒精發(fā)酵打開瓶蓋蓋上紗布果醋檢測當葡萄酒制作完成后，打開瓶蓋，蓋上一層紗布，進行葡萄醋的發(fā)酵。發(fā)酵溫度為30～35℃，時間為7～8d。通入空氣排出CO2便于取樣監(jiān)測打開，并接入氣泵打開關(guān)閉Q1：在制作果酒的過程中，除了酵母菌，是否還有其他微生物生長？它們會對果酒發(fā)酵產(chǎn)生影響嗎？如果有，如何避免這種影響？

果酒中除了酵母菌，還有乳酸菌、醋酸菌等微生物。

乳酸菌可能分解果酒中的糖從而使果酒變質(zhì)?？梢酝ㄟ^調(diào)節(jié)發(fā)酵的溫度、果酒的pH等來控制乳酸菌的含量。由于醋酸菌在有氧的條件下才能進行旺盛的代謝活動，因此在制作果酒的過程中盡量減少O2含量，可以抑制醋酸菌的生長繁殖。此外，通過調(diào)節(jié)發(fā)酵的溫度、果酒的pH等同樣可以控制醋酸菌的含量。Q2：在制作果醋的過程中，酵母菌是否還會繼續(xù)發(fā)酵？醋酸菌從何而來？采用什么措施可以加快果醋的制作？

隨著醋酸發(fā)酵的進行，發(fā)酵液的pH、發(fā)酵溫度等均不利于酵母菌的生長繁殖，因此酵母菌活性很低。

在我們的實驗條件下，當打開瓶蓋后，空氣中的醋酸菌會進入發(fā)酵液中大量繁殖，其他的菌因不適應環(huán)境條件而不能繁殖。我們制作果醋時，可以先買一瓶醋，將其打開暴露于空氣中，一段時間后在醋的表面會有一層薄膜（實際上是醋酸菌），用這層薄膜進行接種可以明顯縮短制作果醋的時間。【典例2】(2022·天津質(zhì)檢)圖甲是傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的裝置圖，圖乙是果酒和果醋制作過程中發(fā)生的物質(zhì)變化。下列有關(guān)敘述中，錯誤的是(

)A．甲裝置既可用于果醋的制作，也可用于果酒的制作B．使用甲裝置制作果醋時，要打開閥a，關(guān)閉閥bC．制作果酒和果醋的過程中，發(fā)酵液的pH都會降低D．過程③和④都需要氧氣的參與，但反應場所不同B【典例3】《齊民要術(shù)》記載了一種稱為“動酒酢(“酢”同“醋”)法”的釀醋工藝：“大率酒一斗，用水三斗，合甕盛，置日中曝之。七日后當臭，衣(指菌膜)生，勿得怪也，但停置，勿移動，撓攪之。數(shù)十日，醋成”。下列有關(guān)敘述錯誤的是A.該方法的原理是醋酸菌在缺少糖源時可將乙醇最終轉(zhuǎn)化為乙酸B.加水的目的是對酒進行稀釋，避免酒精濃度過高殺死醋酸菌C.“衣”位于變酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的D.撓攪有利于酒精與醋酸菌充分接觸，還可以增加溶液中的溶解氧C【典例4】我國制作泡菜的歷史悠久。清末曾懿《中饋錄》中記載：“泡鹽菜法，定要覆水壇?！?。壇口上覆一蓋，浸於水中，……。泡菜之水，用花椒和鹽煮沸，加燒酒少許?！Ｈ缬忻够?，……?！毕铝邢嚓P(guān)敘述錯誤的是

(

)A．發(fā)酵初期出現(xiàn)的氣泡可能來自菜上附著的酵母菌的細胞呼吸B．“壇口上覆一蓋，浸於水中”是為了創(chuàng)設(shè)壇內(nèi)的無氧環(huán)境C．“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸”，其目的就是為了調(diào)味D．“如有霉花”說明泡菜遭到污染，可加適量燒酒抑制雜菌生長C【典例5】(2022·煙臺調(diào)研)泡菜的制作容易受環(huán)境條件的影響，溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短等，均會造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。某研究小組以“測定泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量的變化”為課題開展了如下研究。①取3個泡菜壇，分別編號為A、B、C。②向3個泡菜壇內(nèi)分別加入調(diào)味料和0.6kg洗凈的新鮮大白菜。③向3個泡菜壇內(nèi)分別加入2L濃度依次為3%、5%、7%的食鹽水。④密封后置于相同的環(huán)境中發(fā)酵。⑤測定亞硝酸鹽的含量。在封壇前進行第一次測定，以后定期測定，并將測定的數(shù)據(jù)繪制成曲線圖，如下圖所示。(1)制作泡菜的主要菌種是________，其代謝類型是_____________。(2)該實驗的自變量是____________。實驗中食鹽水需煮沸并冷卻后才可使用，原因是______________________________。乳酸菌異養(yǎng)厭氧型食鹽水的濃度煮沸滅菌，冷卻避免高溫殺死乳酸菌等發(fā)酵菌種【典例5】(2022·煙臺調(diào)研)泡菜的制作容易受環(huán)境條件的影響，溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短等，均會造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。某研究小組以“測定泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量的變化”為課題開展了如下研究。①取3個泡菜壇，分別編號為A、B、C。②向3個泡菜壇內(nèi)分別加入調(diào)味料和0.6kg洗凈的新鮮大白菜。③向3個泡菜壇內(nèi)分別加入2L濃度依次為3%、5%、7%的食鹽水。④密封后置于相同的環(huán)境中發(fā)酵。⑤測定亞硝酸鹽的含量。在封壇前進行第一次測定，以后定期測定，并將測定的數(shù)據(jù)繪制成曲線圖，如下圖所示。(3)圖中濃度為3%的食鹽水的測定結(jié)果，說明______________________________。(4)為了使實驗結(jié)果更準確，測定亞硝酸鹽含量時應______________________。食鹽水濃度過低會導致亞硝酸鹽含量過高多次測定后取平均值營養(yǎng)協(xié)調(diào)pH適宜碳源氮源防止雜菌污染穩(wěn)定、溫和自然界基因工程2.發(fā)酵工程產(chǎn)物濃度過濾沉淀蒸餾、萃取2.發(fā)酵工程

具體應用成果食品

傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品

醬油（霉菌）、酒類（酵母）醫(yī)藥農(nóng)牧業(yè)肥料農(nóng)藥飼料食品添加劑酶制劑工程菌改造菌種檸檬酸（黑曲霉）、谷氨酸（谷氨酸棒狀桿菌）淀粉酶、果膠酶、脂肪酶和氨基肽酶等生長激素釋放抑制激素青霉素疫苗乙型肝炎疫苗2.發(fā)酵工程-應用根瘤菌肥、固氮菌肥（根瘤菌和固氮菌）多種農(nóng)林蟲害（蘇云金桿菌）、玉米螟和松毛蟲（白僵菌）、水稻枯紋?。ň畬顾兀┑矸刍蚶w維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液通過發(fā)酵獲得微生物菌體（單細胞蛋白）

具體應用成果其他方面解決資源短缺和環(huán)境污染問題對極端微生物的利用2.發(fā)酵工程-應用酒精、乙烯（纖維素廢料）洗滌劑（嗜熱菌、嗜鹽菌）完成酵母菌的繁殖，大部分糖的分解和代謝物的生成。發(fā)芽焙烤碾磨糖化蒸煮發(fā)酵消毒終止低溫、密閉、儲存一段時間→澄清、成熟的啤酒釋放淀粉酶殺死種子胚但淀粉酶不失活淀粉分解加啤酒花產(chǎn)生風味組分終止酶作用糖漿滅菌殺死啤酒中大多數(shù)微生物主發(fā)酵后發(fā)酵啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)流程(P23“圖1--9”)某生產(chǎn)谷氨酸的發(fā)酵裝置，在中性和弱堿性條件下會積累谷氨酸，但在酸性條件下則容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，由此可知__________________________________________________________________。為了縮短發(fā)酵時間，確保品質(zhì)穩(wěn)定，工業(yè)上大規(guī)模生產(chǎn)時，其主要做法是_________________________________________________的工業(yè)化生產(chǎn)流程”環(huán)境條件不僅影響微生物的生長繁殖，而且也會影響微生物代謝物的形成先通過微生物培養(yǎng)技術(shù)獲得單一菌種，再將它們接種到物料中進行發(fā)酵（P27）單細胞蛋白是以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過發(fā)酵獲得的大量的微生物

。其不僅含有豐富的

，還含有糖類、

和維生素等物質(zhì)。菌體蛋白質(zhì)脂質(zhì)（P28）青霉素發(fā)酵是高耗氧過程，如何能夠在發(fā)酵過程中給微生物持續(xù)高效地供氧呢？(提示：血紅蛋白具有攜帶O2的能力。)可以用基因工程的方法，將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉素生產(chǎn)菌來提高菌體對氧的吸收和利用率。②在青霉素發(fā)酵過程中，總有頭孢霉素產(chǎn)生。人們通過對青霉素生產(chǎn)菌代謝途徑的研究發(fā)現(xiàn)，在青霉素與頭孢霉素的合成過程中，它們有一個共同的前體，這個前體經(jīng)過兩種不同酶的作用分別合成兩個產(chǎn)物。如何改造青霉素生產(chǎn)菌使其只生產(chǎn)青霉素，或者只生產(chǎn)頭孢霉素呢？可以對兩種酶的基因進行改造或敲除其中一種酶的基因，從而使青霉素生產(chǎn)菌只生產(chǎn)一種產(chǎn)物。A．發(fā)酵中所使用的谷氨酸棒狀桿菌菌種可從自然界篩選也可通過誘變育種、雜交育種或者基因工程育種獲得B．為了保證發(fā)酵產(chǎn)品的產(chǎn)量和品質(zhì)，圖中發(fā)酵配料及發(fā)酵罐需經(jīng)過嚴格的滅菌C．在發(fā)酵過程中，通過加料口取樣，隨時監(jiān)測產(chǎn)物濃度和微生物數(shù)量D．圖中發(fā)酵過程需通入無菌空氣，并通過攪拌使培養(yǎng)液與菌種充分接觸后關(guān)閉通氣口【典例6】發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品。常用好氧菌谷氨酸棒狀桿菌利用圖1的發(fā)酵罐來大量生產(chǎn)味精，發(fā)酵流程如圖2所示。下列敘述正確的是(

)B二、微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應用分類標準培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基特點作用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂微生物的分離與鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種液體培養(yǎng)基不加凝固劑常用于工業(yè)生產(chǎn)功能選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物的生長微生物的選擇、分離鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品,用以鑒別不同種類的微生物微生物的鑒定成分來源天然培養(yǎng)基用化學成分不明確的天然物質(zhì)配制常用于工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基用已知的化學物質(zhì)配制分離、鑒定等1.培養(yǎng)基的分類各種培養(yǎng)基的配方不同，一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，此外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基微生物乳酸桿菌霉菌細菌厭氧微生物特殊條件添加維生素pH調(diào)至酸性pH調(diào)至中性或弱堿性無氧2.培養(yǎng)基的組成消毒滅菌概念使用較為溫和的物理、化學或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒濕熱滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌適用對象操作空間、操作者的衣著和手等器皿、接種用具、培養(yǎng)基等3.無菌技術(shù)方法條件作用對象消毒煮沸消毒法100℃，煮沸5～6min殺死微生物的營養(yǎng)細胞和一部分芽孢。用于家庭餐具等生活用品的消毒巴氏消毒法62~65℃消毒30min或80~90℃處理30S~1min殺死牛奶中絕大多數(shù)微生物，并且基本不會破壞牛奶的營養(yǎng)成分。牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進行高溫滅菌的液體消毒化學藥物消毒法用體積分數(shù)為70%～75%的乙醇、碘酒；石炭酸、煤酚皂溶液；一定濃度的食醋皮膚、傷口、動植物組織表面和空氣、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿等紫外線消毒紫外線照射30min照射前，適量噴灑石炭酸、煤酚皂溶液等消毒液，可以增強消毒效果方法條件作用對象滅菌濕熱滅菌利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進行滅菌的方法。其中高壓蒸汽滅菌效果最好，100kPa、121℃維持15～30min培養(yǎng)基及多種器材、物品干熱滅菌在干熱滅菌箱內(nèi)，160～170℃條件下，加熱2～3h耐高溫和需保持干燥的物品，如玻璃器皿(如吸管、培養(yǎng)皿等)、金屬用具等滅菌灼燒滅菌直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速地滅菌微生物接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等，接種過程中的試管口或瓶口等在微生物學中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。4.微生物的純培養(yǎng)菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體。純培養(yǎng)方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。純培養(yǎng)的原理：將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物(單菌落)。酵母菌的純培養(yǎng)步驟配制培養(yǎng)基、滅菌、倒平板、接種、分離和培養(yǎng)等步驟?！锏蛊桨宓牟僮鳍?、培養(yǎng)基滅菌后需要冷卻至50℃左右時才能倒平板。Ⅱ、將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開，以免雜菌污染培養(yǎng)基。Ⅲ、培養(yǎng)基冷卻凝固后，要將培養(yǎng)皿倒置的原因：

防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。Ⅳ、在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板應

，因為Ⅴ、整個操作過程要在酒精燈火焰旁進行，避免雜菌污染。4.微生物的純培養(yǎng)棄用空氣中的雜菌可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。灼燒時期目的取菌種前每次劃線前接種結(jié)束后Q1:為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？殺死接種環(huán)上原有微生物。殺死上次劃線時殘留菌種，使下一次劃線的菌種直接來源上次劃線的末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。Q2：在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進行劃線的原因？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種?！鲦溄滩馁Y料·發(fā)展科學思維■———————4.微生物的純培養(yǎng)————————■鏈教材資料·發(fā)展科學思維■———————Q4：平板冷凝后，要將平板倒置的原因是什么？因為平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，平板倒置后，既可避免培養(yǎng)基表面的水分過快地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。Q5：在接種前隨機取若干個滅菌后的未接種的平板，先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是

。檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格4.微生物的純培養(yǎng)Q3：在作第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的原因？

使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，以便獲得單個菌落?！镜淅?】大腸桿菌是寄生于人和動物腸道中的細菌，利用其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍反應，使菌落呈黑色的特性，從而將其鑒別出來。表格是其培養(yǎng)基配方，相關(guān)敘述錯誤的是

(

)A.培養(yǎng)基配方中X的成分可以是瓊脂B．該培養(yǎng)基中蛋白胨提供的主要營養(yǎng)有碳源、氮源和維生素C．可采用干熱滅菌法對該培養(yǎng)基滅菌D．可利用培養(yǎng)基上菌落的特征來判斷和鑒別大腸桿菌的存在成分蛋白胨乳糖磷酸二氫鉀X蒸餾水2%伊紅水溶液0.5%美藍水溶液含量10g10g2g20～30g1000mL20mL13mLC

【典例8】鯨死亡后會沉入海底，俗稱“鯨落”?！蚌L落”后期會形成一個以厭氧菌和硫細菌等為主體的生態(tài)系統(tǒng)。厭氧菌以“鯨落”肌肉中的脂肪為食，同時產(chǎn)生一些硫化氫等硫化物。硫細菌將硫化物氧化成硫酸鹽，并以該過程中釋放的能量合成有機物。請回答相關(guān)問題：(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中一般都會含有水、無機鹽、氮源和碳源，培養(yǎng)“鯨落”群落中厭氧菌的碳源必須是_________________。要培養(yǎng)硫細菌，培養(yǎng)基中的成分需要特殊配制，主要體現(xiàn)在__________________________________，這種培養(yǎng)基可以用來專一性培養(yǎng)硫細菌，所以稱為______培養(yǎng)基。(2)在分離“鯨落”中的微生物時要制備固體培養(yǎng)基，在倒平板操作后，將平板倒置，這樣做的目的是_________________________________________________。含碳有機物(或脂肪)碳源必須是含碳無機物(或碳酸鹽)，選擇防止培養(yǎng)皿皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，防止培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)同時加入硫化物(3)為了研究“鯨落”中含有微生物的情況，需將“鯨落”提取物加水稀釋，然后將稀釋水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，這種方法稱為________________。下面所示的四種菌落分布情況中，不可能由該方法得到的是________。(4)若想得到“鯨落”中某目標菌種，可用平板劃線法進行純化。若下圖甲是接種培養(yǎng)后的菌落分布圖，對應的平板劃線操作示意圖為________。圖甲中的③更易獲得單菌落，判斷依據(jù)是___________________________。每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，最后一次劃線結(jié)束時更容易獲得單菌落稀釋涂布平板法D丙方法平板劃線法稀釋涂布平板法純化原理接種工具單菌落的獲得用途接種效果圖相同點通過連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散將菌液進行一系列等比稀釋后,分別涂布到固體培養(yǎng)基表面培養(yǎng)，以得到單菌落。接種環(huán)涂布器從最后劃線區(qū)挑取稀釋度合適的整個平板上都可找到單菌落分離純化菌種，獲得單菌落①分離純化菌種，獲得單菌落②用于計數(shù)①都能分離純化菌種

②都在固體培養(yǎng)基上進行的尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化學性質(zhì)穩(wěn)定，是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中一