月季的花藥培養(yǎng)詳解

請拿出你的38號導(dǎo)學(xué)案，課本，雙色筆(sèbǐ)和典題本，還有你的激情！今日贈(zèng)言：當(dāng)一個(gè)人先從自己的內(nèi)心開始奮斗(fèndòu)，他就是個(gè)有價(jià)值的人。

第一頁，共三十六頁?；ㄖ谢屎笤录居址Q“月月紅”，自然花期(huāqī)5至11月，開花連續(xù)不斷，通常扦插就可以成活。

第二頁，共三十六頁。編輯課件課題(kètí)2月季的花藥培養(yǎng)第三頁，共三十六頁。編輯課件【課題(kètí)目標(biāo)】1.識記被子植物花粉發(fā)育的過程。2.通過學(xué)習(xí)花藥培養(yǎng)的基本技術(shù)(jìshù)，培養(yǎng)設(shè)計(jì)試驗(yàn)、動(dòng)手操作、分析解釋實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的能力。第四頁，共三十六頁?！菊n題(kètí)重點(diǎn)】1.被子植物花粉(huāfěn)發(fā)育過程。2.花藥離體培養(yǎng)過程。第五頁，共三十六頁?！菊n題(kètí)難點(diǎn)】花藥離體培養(yǎng)(péiyǎng)過程。第六頁，共三十六頁?！緦?dǎo)學(xué)案(xuéàn)反饋】1.優(yōu)點(diǎn)：書寫認(rèn)真，整體完成情況較好。2.不足：①探究能力(nénglì)有待提高

。②解決實(shí)際問題的能力較弱。③部分同學(xué)預(yù)習(xí)不充分，答題欠思考。3.改進(jìn)措施：認(rèn)真研讀課本，理清思路，注重分析，養(yǎng)成好的自學(xué)習(xí)慣。第七頁，共三十六頁。小組優(yōu)秀個(gè)人得分1組2組3組4組5組6組小組優(yōu)秀個(gè)人得分7組8組9組10組11組第八頁，共三十六頁。知識(zhīshi)回顧單倍體育種(yùzhǒng)的過程？花藥(huāyào)離體培養(yǎng)（N）單倍體植株（N）秋水仙素處理，使染色體翻倍植株（2N）特點(diǎn)：1明顯縮短育種年限2后代植株都為純合子。正常植株（2N）第九頁，共三十六頁。編輯課件花的結(jié)構(gòu)(jiégòu)花托(huātuō)花萼花瓣雄蕊(xióngruǐ)花藥花絲雌蕊柱頭花柱子房第十頁，共三十六頁。編輯課件花絲(huāsī)花藥(huāyào)：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉（一）被子植物(bèizǐ-zhíwù)的花粉發(fā)育1雄蕊一、基礎(chǔ)知識2花粉的概念:由花粉母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂形成的單倍體的生殖細(xì)胞.第十一頁，共三十六頁。編輯課件被子植物花粉(huāfěn)的發(fā)育過程小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂4個(gè)小孢子(小孢子四分(sìfēn)體時(shí)期)小孢子(單核居中期)小孢子(單核靠邊期)小孢子生殖細(xì)胞核+花粉管細(xì)胞核有絲分裂（花粉粒的雙核期）生殖細(xì)胞將再進(jìn)行一次有絲分裂(yǒusīfēnliè)，形成兩個(gè)精子第十二頁，共三十六頁。編輯課件小孢子母細(xì)胞（2n）小孢子時(shí)期（n）四分體時(shí)期（n）雙核期4個(gè)生殖細(xì)胞核（n）4個(gè)花粉管細(xì)胞核（n）4個(gè)生殖細(xì)胞（n）4個(gè)營養(yǎng)細(xì)胞（n）4×2個(gè)精子(n)有絲分裂減數(shù)分裂單核期（n）有絲分裂第十三頁，共三十六頁。編輯課件注意：①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核。（精子(jīngzǐ)在花粉管中形成）4個(gè)小孢子減數(shù)分裂有絲分裂4個(gè)花粉管細(xì)胞核4個(gè)生殖細(xì)胞核有絲分裂8個(gè)精子1花粉母細(xì)胞③②三核花粉粒：有些(yǒuxiē)植物的花粉，在成熟前，生殖細(xì)胞進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子，這樣的花粉在成熟時(shí)，含有一個(gè)花粉管細(xì)胞核和兩個(gè)精子。例題1：兩個(gè)(liǎnɡɡè)精子和花粉管細(xì)胞核的基因型相同？2NNNN第十四頁，共三十六頁。編輯課件1、關(guān)于被子植物花粉發(fā)育的說法，不正確的是（）A、花粉粒是在花藥中的花粉囊里形成的B、被子植物精子的形成是直接減數(shù)分裂的結(jié)果C、被子植物的花粉的發(fā)育要經(jīng)歷四分(sìfēn)體時(shí)期、單核期、雙核期等階段D、花粉粒在發(fā)育過程中，核先位于細(xì)胞一側(cè)，再移到細(xì)胞中央BD注：花粉(huāfěn)母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成4個(gè)單核花粉(huāfěn)粒，每個(gè)花粉(huāfěn)粒的細(xì)胞核進(jìn)行一次有絲分裂形成1個(gè)花粉(huāfěn)管細(xì)胞核和1個(gè)生殖細(xì)胞核，每個(gè)生殖細(xì)胞核再進(jìn)行一次有絲分裂生成2個(gè)精子。第十五頁，共三十六頁。編輯課件雌蕊(círuǐ)的結(jié)構(gòu)第十六頁，共三十六頁。編輯課件（二）產(chǎn)生花粉植株(zhízhū)的兩種途徑①②移栽(yízāi)花藥中的花粉胚狀體脫分化愈傷組織花藥中的花粉脫分化分化叢芽再分化叢芽誘導(dǎo)生根體細(xì)胞胚（胚狀體）：在組織培養(yǎng)過程中，某些細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常(fēicháng)相似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過程亦與合子胚類似原因：培養(yǎng)基中的激素種類及濃度配比第十七頁，共三十六頁。編輯課件部分花藥(huāyào)通過胚狀體途徑形成小植株煙草(yāncǎo)花藥培養(yǎng)胚狀體發(fā)育(fāyù)途徑第十八頁，共三十六頁。編輯課件愈傷組織(zǔzhī)轉(zhuǎn)接種到再生培養(yǎng)基愈傷組織分化(fēnhuà)形成再生植株水稻(shuǐdào)花藥培養(yǎng)愈傷組織發(fā)育途徑部分花藥產(chǎn)生愈傷組織接種在平板上的水稻花藥第十九頁，共三十六頁。編輯課件1、材料的選擇不同植物的誘導(dǎo)成功率不同.同一植物的不同生理狀況也對誘導(dǎo)成功率有直接的影響.（一般選月季的初花期）合適(héshì)的花粉發(fā)育期（單核居中期與靠邊期之間）2、培養(yǎng)基的組成（MS培養(yǎng)基+不同比例的植物生長調(diào)節(jié)激素）此外，植株生長條件、材料(cáiliào)低溫預(yù)處理、接種密度等(三)、影響花藥培養(yǎng)的主要(zhǔyào)因素注意：選擇最合適的花粉發(fā)育時(shí)期:單核期①不選擇單核期之前花藥原因：花藥質(zhì)地幼嫩，容易破碎；②不選擇單核期之后花藥原因：花瓣開始松動(dòng)，給材料消毒帶來困難困難；③挑選單核期花藥方法：應(yīng)當(dāng)選擇完全未開放的花蕾，微生物少，易消毒。第二十頁，共三十六頁。編輯課件實(shí)驗(yàn)(shíyàn)操作一、材料(cáiliào)的選取二、材料的消毒三、接種和培養(yǎng)第二十一頁，共三十六頁。編輯課件（一）材料(cáiliào)選取2、通過鏡檢來確定是否處于適宜的發(fā)育期。方法：醋酸(cùsuān)洋紅法(將染色體染成紅色)

焙花青-鉻礬法(花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色)。1、從花藥看：月季的初花期(huāqī)從花粉看：單核期

從花蕾看：完全未開放的

花藥（載玻片上）→1%的醋酸洋紅1滴→用鑷柄將花藥搗碎，蓋上蓋玻片→鏡檢（花粉粒的細(xì)胞核被染成紅色）花藥（在卡諾氏固定液中處理20min）→取出，置于載玻片上→焙花青－鉻礬溶液染色→蓋上蓋玻片→鏡檢（花粉粒的細(xì)胞核被染成藍(lán)黑色）第二十二頁，共三十六頁。編輯課件月季(yuèjì)花藥培養(yǎng)時(shí)的花粉粒最好是（

）A、四分體時(shí)期B、二核或三核花粉粒C、單核期C第二十三頁，共三十六頁。編輯課件（二）材料(cáiliào)的消毒5、無菌水沖洗3～5次

花藥的外面有花萼、花瓣保護(hù)(bǎohù)，通常處于無菌狀態(tài)1、花蕾用體積(tǐjī)分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡30秒2、無菌水清洗3、無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4、放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中2～4分鐘（質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液）第二十四頁，共三十六頁。編輯課件為什么花瓣松動(dòng)(sōngdòng)會給材料的消毒帶來困難？

答：花瓣松動(dòng)后，微生物就可能侵入(qīnrù)到花藥，給材料的消毒帶來困難。

為什么花瓣松動(dòng)會給材料(cáiliào)的消毒帶來困難？討論：第二十五頁，共三十六頁。編輯課件（三）接種(jiēzhòng)和培養(yǎng)

1滅菌后花蕾，要在

下除去(chúqù)萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。3通常每瓶接種花藥(huāyào)

，溫度控制在

左右，

。幼小植株形成后才

。2在剝離花藥時(shí)，要盡量

（否則接種后，容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織），同時(shí)還要徹底

，因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。一般經(jīng)過20-30天培養(yǎng)后，會發(fā)現(xiàn)花藥開裂，長出愈傷組織或釋放出胚狀體。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便進(jìn)一步分化出再生植株。

4進(jìn)一步鑒定和篩選：常常會出現(xiàn)染色體倍性的變化無菌條件不損傷花藥去除花絲7-10個(gè)25℃不需要光照需要光照主要原因是花粉管核和生殖核融合造成的第二十六頁，共三十六頁。編輯課件植物組織培養(yǎng)技術(shù)(jìshù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)(jìshù)的比較項(xiàng)目

植物組織培養(yǎng)

花藥培養(yǎng)技術(shù)相同點(diǎn)1、培養(yǎng)基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。2、都經(jīng)過了脫分化不同點(diǎn)1、離體培養(yǎng)的外植體為體細(xì)胞。2、有絲分裂(yǒusīfēnliè)的過程，染色體數(shù)量不變。1、花粉是生殖細(xì)胞，得到的單倍體植株，弱小(ruòxiǎo)且高度不育。2、秋水仙素處理，染色體加倍，恢復(fù)正常的染色體數(shù)，為純種。第二十七頁，共三十六頁。編輯課件課題成果(chéngguǒ)評價(jià)一選材是否恰當(dāng)(qiàdàng)二無菌技術(shù)是否過關(guān)三接種是否成功人工(réngōng)種子：胚狀體/頂芽/不頂芽等+人工(réngōng)種皮+人工(réngōng)胚乳課外知識第二十八頁，共三十六頁。編輯課件練習(xí)：小麥高桿（D）對矮桿（d）為顯性，抗銹?。═）對不抗銹病（t）為顯性，現(xiàn)有高桿抗銹病和矮桿不抗病的兩種純合體，要獲得矮桿抗銹病的良種，可用雜交育種和單倍體育種法，步驟(bùzhòu)如下：

高桿抗銹?。―DTT）×矮稈不抗銹?。╠dtt）

F1：的基因型和表現(xiàn)型

a各種(ɡèzhǒnɡ)配子的種類

a

↓符合要求的單倍體的基因型

良種的基因型表現(xiàn)型

單倍體育種方法的主要優(yōu)點(diǎn)是

。1、可以明顯(míngxiǎn)縮短育種年限

2、后代為純合子↓P：DdTt，高稈抗銹病DT，Dt,dT,dtddTT矮稈銹病雜交育種花藥離體培養(yǎng)DT，Dt,dT,dt↓秋水仙素處理第二十九頁，共三十六頁。編輯課件內(nèi)容：1.導(dǎo)學(xué)案上不能自己解決的問題。2.合作探究(tànjiū)部分的問題。3.在預(yù)習(xí)過程中發(fā)現(xiàn)的新問題。要求：1.分層討論，先一對一再組內(nèi)共同討論，總結(jié)完善自糾成果。2.時(shí)刻(shíkè)聯(lián)系課本，注重效率，及時(shí)整理總結(jié)，記錄組內(nèi)疑問。3.學(xué)習(xí)組長和學(xué)科組長宏觀調(diào)控，做好結(jié)果反饋及展示點(diǎn)評準(zhǔn)備。4.每個(gè)同學(xué)都要做到：認(rèn)真、熱烈、高效、有序、激情、投入。

分層目標(biāo)：A層：深入探究，解決所有疑難問題，做好總結(jié)與點(diǎn)評準(zhǔn)備；B層：高效討論，總結(jié)探究點(diǎn)答案，并找出自己的疑難點(diǎn)；C層：能夠(nénggòu)對比區(qū)別核心內(nèi)容，雜交育種和誘變育種。讓激情快樂流淌！第三十頁，共三十六頁。展示基本要求：

①言簡意賅；②認(rèn)真規(guī)范;③注重小結(jié)；④雙色粉筆；⑤注意(zhùyì)效率，可多人展示，務(wù)必在6分鐘內(nèi)完成展示內(nèi)容。展示內(nèi)容小組方式展示內(nèi)容小組方式自主探究一