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文檔簡介
主要內(nèi)容血清蛋白電泳免疫分型電泳本文檔共96頁;當(dāng)前第1頁;編輯于星期一\21點4分電泳技術(shù)的發(fā)展歷程1809年發(fā)現(xiàn)電泳現(xiàn)象1937年建立了界面電泳技術(shù)1948年諾貝爾化學(xué)獎1950年后區(qū)帶電泳從發(fā)展到成熟1980年
毛細(xì)管電泳技術(shù)2001年
sebia首次推出全自動毛細(xì)管電泳儀19世紀(jì)21世紀(jì)sebia本文檔共96頁;當(dāng)前第2頁;編輯于星期一\21點4分蛋白電泳技術(shù)的變遷濾紙電泳醋酸纖維素薄膜電泳凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳—臨床聚丙烯酰胺凝膠電泳—科研毛細(xì)管電泳電泳技術(shù)的革命3本文檔共96頁;當(dāng)前第3頁;編輯于星期一\21點4分蛋白電泳技術(shù)的臨床應(yīng)用描繪出蛋白組分的全貌各種體液血清、血漿尿液腦脊液胸腹水全血臨床疾病肝病腎病腫瘤心腦血管疾病、代謝病、中樞神經(jīng)病變、血紅蛋白分子病……4本文檔共96頁;當(dāng)前第4頁;編輯于星期一\21點4分CapillarysElectrophoresisPrinciple正極負(fù)極檢測器氘光源200nm約1萬伏高壓毛細(xì)管(內(nèi)徑25微米)樣本進(jìn)入-+溫控裝置電泳方向毛細(xì)管電泳工作原理本文檔共96頁;當(dāng)前第5頁;編輯于星期一\21點4分++++++++++++++++++++++++++++++++++++毛細(xì)管的內(nèi)表面是帶負(fù)電荷當(dāng)毛細(xì)管內(nèi)部充滿緩沖液被活化后,在毛細(xì)管內(nèi)表面的負(fù)電荷層上形成了一正電荷層毛細(xì)管電泳工作原理本文檔共96頁;當(dāng)前第6頁;編輯于星期一\21點4分++++++++++++++++++++++++++++++++++++陽極陰極+電滲流作用方向內(nèi)部充滿電泳緩沖液的毛細(xì)管帶電后,
-毛細(xì)管內(nèi)的正電荷層整體向陰極移動,這種現(xiàn)象稱之為電滲流本文檔共96頁;當(dāng)前第7頁;編輯于星期一\21點4分++++++++++++++++++++++++++++++++++++陽極-陰極
+電滲流作用方向電場力作用方向在毛細(xì)管內(nèi)部的正電荷粒子同時到受電滲流和電場力的作用,兩種作用力方向一致→快速向負(fù)極端遷移+本文檔共96頁;當(dāng)前第8頁;編輯于星期一\21點4分--++++++++++++++++++++++++++++++++++++陽極-陰極
+電滲流作用方向電場力作用方向(負(fù)電荷)在毛細(xì)管內(nèi)部的負(fù)電荷粒子同時到受電滲流和電場力的作用,兩種作用力方向相反;電滲流>>>電場力→向負(fù)極端遷移本文檔共96頁;當(dāng)前第9頁;編輯于星期一\21點4分---------------++++++++++++++++++++++++++++++++++++++陽極-陰極+電滲流作用方向負(fù)電荷電場力作用方向樣品進(jìn)入到毛細(xì)管之中的運動正電荷電場力作用方向無論是帶正電、帶負(fù)電或不帶電的粒子,都在電滲流的作用下,向陰極遷移,帶正電的,受到同方向的電場力作用,遷移最快,不帶電的遷移速度次之,帶負(fù)電的遷移速度最慢,因為它受到與電滲流反方向的電場力作用。本文檔共96頁;當(dāng)前第10頁;編輯于星期一\21點4分優(yōu)點性能特征減少手工操作全自動,人機(jī)分離操作操作簡單,可根據(jù)用戶需求調(diào)整操作模式提供多種檢測項目供溯源性,減少誤差原管條碼識別增加用戶滿意度高通量優(yōu)化的工作流程持續(xù)進(jìn)樣、雙向通訊、快捷的數(shù)據(jù)讀取優(yōu)化結(jié)果用200nm氘光直接檢測蛋白,無需染色簡化結(jié)果分析高分辨率、高清晰度M蛋白檢測的高靈敏度毛細(xì)管電泳技術(shù)的優(yōu)勢本文檔共96頁;當(dāng)前第11頁;編輯于星期一\21點4分毛細(xì)管血清蛋白電泳圖譜白蛋白GammaBeta-2Beta-1Alpha-2Alpha-1免疫球蛋白C3補體α-1抗胰蛋白酶結(jié)合珠蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白白蛋白α-1酸性糖蛋白
α-2巨球蛋白血紅素結(jié)合蛋白本文檔共96頁;當(dāng)前第12頁;編輯于星期一\21點4分臨床疾病的識別炎癥肝病腎病……“M”蛋白的篩查及定量對疑似骨髓瘤患者檢測單克隆免疫球蛋白早期檢出無癥狀的骨髓瘤患者對骨髓瘤疾病進(jìn)行隨訪及療效觀察血清蛋白電泳的臨床應(yīng)用13本文檔共96頁;當(dāng)前第13頁;編輯于星期一\21點4分14本文檔共96頁;當(dāng)前第14頁;編輯于星期一\21點4分正常血清蛋白電泳圖譜白蛋白GammaBeta-2Beta-1Alpha-2Alpha-1免疫球蛋白C3補體α-1抗胰蛋白酶結(jié)合珠蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白白蛋白α-1酸性糖蛋白
α-2巨球蛋白血紅素結(jié)合蛋白本文檔共96頁;當(dāng)前第15頁;編輯于星期一\21點4分電泳圖譜---急性炎癥免疫球蛋白C3補體α-1抗胰蛋白酶結(jié)合珠蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白白蛋白α-1酸性糖蛋白
α-2巨球蛋白血紅素結(jié)合蛋白急性期反應(yīng)蛋白16本文檔共96頁;當(dāng)前第16頁;編輯于星期一\21點4分電泳圖譜---慢性炎癥本文檔共96頁;當(dāng)前第17頁;編輯于星期一\21點4分電泳圖譜---肝臟肝臟是血清蛋白合成的主要器官白蛋白GammaBeta-2Beta-1Alpha-2Alpha-1免疫球蛋白C3補體α-1抗胰蛋白酶結(jié)合珠蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白白蛋白α-1酸性糖蛋白
α-2巨球蛋白血紅素結(jié)合蛋白本文檔共96頁;當(dāng)前第18頁;編輯于星期一\21點4分電泳圖譜---肝病19本文檔共96頁;當(dāng)前第19頁;編輯于星期一\21點4分beta2區(qū):多克隆IgA↑gamma區(qū):多克隆IgG↑電泳圖譜---肝硬化Beta-Gamma橋20本文檔共96頁;當(dāng)前第20頁;編輯于星期一\21點4分BetaGamma橋本文檔共96頁;當(dāng)前第21頁;編輯于星期一\21點4分電泳圖譜---腎病22本文檔共96頁;當(dāng)前第22頁;編輯于星期一\21點4分電泳圖譜---腎病腎小球濾過屏障損傷→白蛋白流失低白蛋白高α-2賈曉輝,馬彧旻.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報.2009,30(16):2015Alpha-2巨球蛋白23本文檔共96頁;當(dāng)前第23頁;編輯于星期一\21點4分Alba1a2b1b2g總蛋白濃度降低(低于60g/l)α-2巨球蛋白脂蛋白低白蛋白電泳圖譜---腎病綜合征三高一低:高脂蛋白血脂24本文檔共96頁;當(dāng)前第24頁;編輯于星期一\21點4分電泳圖譜---腎病綜合征性別:男
年齡:24 科室:腎臟內(nèi)科
診斷:腎病綜合征本文檔共96頁;當(dāng)前第25頁;編輯于星期一\21點4分原因:免疫缺陷病、免疫抑制劑、游離輕鏈病電泳圖譜---低免疫球蛋白26本文檔共96頁;當(dāng)前第26頁;編輯于星期一\21點4分電泳圖譜---高免疫球蛋白原因:慢性感染、自身免疫病、慢性肝病、慢性肉芽腫本文檔共96頁;當(dāng)前第27頁;編輯于星期一\21點4分血清蛋白電泳圖譜常見類型圖譜類型
總蛋白Albα1α2βγ低蛋白血癥↓↓↓↓N↑N↓N↑急性炎癥/急性時相反應(yīng)N↓N↑↑/N慢性炎癥型
↓↑↑↑彌漫性肝損害↓N↓↓↑↓↑肝硬化↓N↑↓↓N↓N↓β-γ↑橋腎病↓↓↓↓↑↑↑不定彌漫寬γ球蛋白血癥型↑↓N↑↑M蛋白血癥型
在α2-γ區(qū)出現(xiàn)異常峰高α2(β)球蛋白血癥↓↑↑↑妊娠(高α型)↓N↓↑↑N蛋白質(zhì)缺陷個別區(qū)帶出現(xiàn)特征性缺乏本文檔共96頁;當(dāng)前第28頁;編輯于星期一\21點4分Gammaglobulins(免疫球蛋白區(qū)帶)免疫球蛋白是機(jī)體的正常生理成分多克隆分類重鏈:IgG、IgA、IgD、IgE、IgM輕鏈:κ、λ10種類型本文檔共96頁;當(dāng)前第29頁;編輯于星期一\21點4分10種免疫球蛋白IgDLambdaIgELambdaIgEKappaIgDKappaIgALambdaIgGKappaIgGLambdaIgMLambdaIgAKappaIgMKappa本文檔共96頁;當(dāng)前第30頁;編輯于星期一\21點4分B淋巴細(xì)胞
轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞3漿細(xì)胞
合成抗體,即免疫球蛋白.4漿細(xì)胞免疫球蛋白造血干細(xì)胞分化為3類細(xì)胞:紅細(xì)胞
粒細(xì)胞巨核細(xì)胞免疫球蛋白
在免疫系統(tǒng)中被用來識別和消滅如細(xì)菌或病毒等外源物52骨髓
(顱骨,盆骨,肋骨,胸骨)1免疫球蛋白的合成過程本文檔共96頁;當(dāng)前第31頁;編輯于星期一\21點4分正常漿細(xì)胞多克隆免疫球蛋白
P1P2P3P4P5正常電泳結(jié)果免疫球蛋白電泳結(jié)果正常
所有漿淋巴細(xì)胞同步合成免疫球蛋白=多克隆免疫球蛋白32本文檔共96頁;當(dāng)前第32頁;編輯于星期一\21點4分漿細(xì)胞惡性增殖多克隆免疫球蛋白單克隆免疫球蛋白異常電泳結(jié)果M蛋白免疫球蛋白電泳結(jié)果骨髓瘤33本文檔共96頁;當(dāng)前第33頁;編輯于星期一\21點4分IgGLambdaIgGKappaIgMKappaIgMLambdaIgALambdaIgAKappa200nm34本文檔共96頁;當(dāng)前第34頁;編輯于星期一\21點4分多克隆Igs單克隆Ig---“M”蛋白正常異常本文檔共96頁;當(dāng)前第35頁;編輯于星期一\21點4分什么是M蛋白本文檔共96頁;當(dāng)前第36頁;編輯于星期一\21點4分惡性漿細(xì)胞增殖僅次于白血病(血液腫瘤)發(fā)病率占所有腫瘤的1~2%,血液腫瘤的10%美國:白人4/10萬;黑人10/10萬歐洲:2.5~3.0/10萬亞洲:1~2/10萬中國:無確切數(shù)據(jù)發(fā)病年齡老年病,隨年齡↑發(fā)病率↑歐美:高峰65~70歲,中位年齡68歲中國:高峰55~65歲,中位年齡57歲男女比例男:女=2~2.5:1多發(fā)性骨髓瘤(MultipleMyeloma,MM)本文檔共96頁;當(dāng)前第37頁;編輯于星期一\21點4分多發(fā)性骨髓瘤臨床表現(xiàn)/并發(fā)癥CalciumRenalAnemiaBoneCRAB38本文檔共96頁;當(dāng)前第38頁;編輯于星期一\21點4分骨髓瘤相關(guān)器官/組織損傷(ROTI)CRAB血清鈣升高>2.8mmol/L或升高0.25mmol/L以上腎功能不全肌酐>176.8mmol/L貧血<100g/L或低于正常下限20g/L骨損傷溶骨性損害、骨質(zhì)疏松、病理性骨折其他高粘血癥、反復(fù)細(xì)菌感染(≥2次/年)、淀粉樣變……多發(fā)性骨髓瘤臨床表現(xiàn)/并發(fā)癥本文檔共96頁;當(dāng)前第39頁;編輯于星期一\21點4分臨床特征缺乏特異性臨床表現(xiàn)骨痛、病理性骨折:最常見貧血高鈣血癥免疫功能失調(diào),感染腎功能受損、腎衰心、腦臟器微循環(huán)障礙,心腦血管病變多學(xué)科
骨科、感染科、呼吸科、內(nèi)分泌腎內(nèi)科、泌尿科、心內(nèi)科、神經(jīng)科、消化科多發(fā)性骨髓瘤臨床表現(xiàn)/并發(fā)癥40本文檔共96頁;當(dāng)前第40頁;編輯于星期一\21點4分多發(fā)性骨髓瘤病人溶骨報告肱骨顱骨盆骨41本文檔共96頁;當(dāng)前第41頁;編輯于星期一\21點4分臨床特征缺乏特異性臨床表現(xiàn)骨痛、病理性骨折:最常見貧血高鈣血癥免疫功能失調(diào),感染腎功能受損、腎衰心、腦臟器微循環(huán)障礙,心腦血管病變多學(xué)科
骨科、感染科、呼吸科、內(nèi)分泌腎內(nèi)科、泌尿科、心內(nèi)科、神經(jīng)科、消化科多發(fā)性骨髓瘤臨床表現(xiàn)/并發(fā)癥本文檔共96頁;當(dāng)前第42頁;編輯于星期一\21點4分我院實例-1患者信息性別:女年齡:69科室:血液科診斷:多發(fā)性骨髓瘤43本文檔共96頁;當(dāng)前第43頁;編輯于星期一\21點4分我院實例-2患者信息性別:女年齡:69科室:消化內(nèi)科診斷:慢性胃炎44本文檔共96頁;當(dāng)前第44頁;編輯于星期一\21點4分我院實例-3患者信息性別:女年齡:73科室:中醫(yī)科診斷:貧血?45本文檔共96頁;當(dāng)前第45頁;編輯于星期一\21點4分
就診晚2/3確診時已達(dá)中晚期
誤診率高1/3非血液科首診>60%多發(fā)性骨髓瘤診治現(xiàn)狀晚骨折預(yù)后差增加負(fù)擔(dān)感染發(fā)生率高腎臟病變不可逆死亡率↑↑46本文檔共96頁;當(dāng)前第46頁;編輯于星期一\21點4分多發(fā)性骨髓瘤誤診分析47本文檔共96頁;當(dāng)前第47頁;編輯于星期一\21點4分1557例多發(fā)性骨髓瘤誤診分析呂鴻雁,張金巧.河北醫(yī)藥.2009,31(9):1052-54誤診率:65.17%重視實驗診斷39.8%15.6%19.8%7.6%15.6%本文檔共96頁;當(dāng)前第48頁;編輯于星期一\21點4分國際骨髓瘤基金會2010推薦的M蛋白早期篩查流程49本文檔共96頁;當(dāng)前第49頁;編輯于星期一\21點4分
多發(fā)性骨髓瘤分型M蛋白骨髓克隆性漿細(xì)胞
/漿細(xì)胞瘤ROTI有癥狀MM√≥10%√無癥狀MM
(冒煙型,SMM)√≥10%意義未明M蛋病MGUS√<10%早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療腫瘤本文檔共96頁;當(dāng)前第50頁;編輯于星期一\21點4分
多發(fā)性骨髓瘤分型M蛋白骨髓克隆性漿細(xì)胞
/漿細(xì)胞瘤ROTI有癥狀MM√≥10%√無癥狀MM
(冒煙型,SMM)√≥10%意義未明M蛋病MGUS√<10%早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療腫瘤M蛋白篩查是關(guān)鍵51本文檔共96頁;當(dāng)前第51頁;編輯于星期一\21點4分正常血清單克隆Ig單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測血清蛋白電泳是檢測M蛋白的唯一方法若在區(qū)出現(xiàn)異常的峰,且高寬比大于2:1,可以初步判定為M蛋白峰52本文檔共96頁;當(dāng)前第52頁;編輯于星期一\21點4分
單克隆M蛋白的電泳位置常見于gamma球蛋白區(qū)亦可出現(xiàn)在其他區(qū)Beta2beta1
alpha2單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測53本文檔共96頁;當(dāng)前第53頁;編輯于星期一\21點4分白蛋白GammaBeta-2Beta-1Alpha-2Alpha-1徐玲令,楊再興,趙文靜,屠小卿,高春芳,孔憲濤.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報.2004,25(12):1343-45單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測單克隆M蛋白的電泳位置M蛋白陽性患者2007例的體液免疫特征分析
54本文檔共96頁;當(dāng)前第54頁;編輯于星期一\21點4分單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測gamma區(qū):峰55本文檔共96頁;當(dāng)前第55頁;編輯于星期一\21點4分單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測微量M蛋白gamma區(qū):曲線異常本文檔共96頁;當(dāng)前第56頁;編輯于星期一\21點4分單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測Beta2區(qū)本文檔共96頁;當(dāng)前第57頁;編輯于星期一\21點4分單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測Beta1區(qū)本文檔共96頁;當(dāng)前第58頁;編輯于星期一\21點4分單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測Beta1與beta2融合本文檔共96頁;當(dāng)前第59頁;編輯于星期一\21點4分單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測alpha2區(qū)本文檔共96頁;當(dāng)前第60頁;編輯于星期一\21點4分單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測3個單克隆本文檔共96頁;當(dāng)前第61頁;編輯于星期一\21點4分Mode‘’fromthetoptothebottom
’’Mode‘’fromvalleytovalley’’M蛋白定量的兩種方法對患者的M蛋白隨訪過程只能使用其中一種方法,并堅持使用本文檔共96頁;當(dāng)前第62頁;編輯于星期一\21點4分難以辨別的圖譜本文檔共96頁;當(dāng)前第63頁;編輯于星期一\21點4分血紅蛋白-觸珠蛋白復(fù)合物游離HbAlba1a2b1b2g溶血標(biāo)本電泳圖譜特征本文檔共96頁;當(dāng)前第64頁;編輯于星期一\21點4分Alba1a2b1b2g纖維蛋白原beta2區(qū)抗凝血蛋白電泳圖譜特征本文檔共96頁;當(dāng)前第65頁;編輯于星期一\21點4分Alba1a2b1b2gAlba1a2b1b2g可能原因:基因突變藥物:beta內(nèi)酰胺類胰腺炎
白蛋白區(qū)雙峰本文檔共96頁;當(dāng)前第66頁;編輯于星期一\21點4分白蛋白區(qū)干擾Alba1a2b1b2g可能原因:
脂蛋白升高膽紅素升高造影劑6/30/202367本文檔共96頁;當(dāng)前第67頁;編輯于星期一\21點4分CRPAlba1a2b1b2g
急性炎癥期CRP>200mg/LGamma區(qū):多克隆Ig,異常峰C反應(yīng)蛋白---CRP本文檔共96頁;當(dāng)前第68頁;編輯于星期一\21點4分Alba1a2b1b2gα-1抗胰蛋白(A1AT)缺乏癥本文檔共96頁;當(dāng)前第69頁;編輯于星期一\21點4分Alba1a2b1b2gα-1抗胰蛋白(A1AT)雜合子表型本文檔共96頁;當(dāng)前第70頁;編輯于星期一\21點4分表型I-II表型I-I表型II-IIα2區(qū):觸珠蛋白的不同表型本文檔共96頁;當(dāng)前第71頁;編輯于星期一\21點4分寡克隆免疫球蛋白異常的電泳圖譜本文檔共96頁;當(dāng)前第72頁;編輯于星期一\21點4分常見于
:自身免疫病類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,干燥綜合癥,紅斑狼瘡等)病毒、細(xì)菌和寄生蟲引起的感染H.I.V.病毒性肝炎巨細(xì)胞病毒感染與移植相關(guān)的自身免疫反應(yīng)免疫抑制治療寡克隆免疫球蛋白本文檔共96頁;當(dāng)前第73頁;編輯于星期一\21點4分M蛋白可能類型完整的免疫球蛋白分子重鏈輕鏈半分子IgM單體(7S-IgM)……本文檔共96頁;當(dāng)前第74頁;編輯于星期一\21點4分
型別例數(shù)%IgG型骨髓瘤20531.73IgA型骨髓瘤9314.40IgM型骨髓瘤568.67IgD型骨髓瘤121.86重鏈病50.77輕鏈病21433.13半分子病10.157SIgM20.31BMG497.59雙M蛋白病81.24上海新華醫(yī)院,2005年出現(xiàn)異常血清蛋白結(jié)果需要免疫分型電泳進(jìn)一步確認(rèn)646例M蛋白類型分類本文檔共96頁;當(dāng)前第75頁;編輯于星期一\21點4分免疫分型:檢測請求
在血清蛋白電泳的程序下:“ITRequest”76本文檔共96頁;當(dāng)前第76頁;編輯于星期一\21點4分稀釋液(380μL)
LKMAGELP抗血清/ELPsolution(20μL)免疫分型:抗血清稀釋杯+上機(jī)、分析本文檔共96頁;當(dāng)前第77頁;編輯于星期一\21點4分KLIgGIgAIgMELPIgGXIgAXIgMXIgkIglELPGAMklDILUENT抗血清參考稀釋液本文檔共96頁;當(dāng)前第78頁;編輯于星期一\21點4分免疫分型:全自動化血清稀釋樣本與5種抗血清反應(yīng)(IgG,IgA,IgM,κ,λ
)在液態(tài)環(huán)境中,抗原抗體反應(yīng)非常迅速無需專門孵育未加入抗血清的標(biāo)本,作為參照條帶(ELP)毛細(xì)管電泳分析稀釋液(380μL)
LKMAGELP抗血清/ELP液(20μL)本文檔共96頁;當(dāng)前第79頁;編輯于星期一\21點4分對照曲線與反應(yīng)曲線自動疊加單克隆免疫球蛋白(M蛋白)的鑒定免疫減法與相應(yīng)抗血清發(fā)生反應(yīng)后,M蛋白峰消失免疫分型:結(jié)果分析本文檔共96頁;當(dāng)前第80頁;編輯于星期一\21點4分IgGLambdaIgGKappaIgMKappaIgMLambdaIgALambdaIgAKappaAnti-Kappa本文檔共96頁;當(dāng)前第81頁;編輯于星期一\21點4分IgGLambdaIgGKappaIgMKappaIgMLambdaIgALambdaIgAKappaAnti-IgG本文檔共96頁;當(dāng)前第82頁;編輯于星期一\21點4分參考曲線加入IgG抗血清后電泳曲線加入I
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