抑癌基因在肺癌治療中的新進(jìn)展

抑癌基因在肺癌治療中的新進(jìn)展

肺癌是當(dāng)前最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率逐年升高。由于大多數(shù)肺癌患者臨床確診時(shí)已屬晚期，其中50%以上患者不能手術(shù)，而絕大部分非小細(xì)胞肺癌患者對(duì)現(xiàn)行放療和化療又不夠敏感，因此肺癌的治療成為臨床治療一大難題。近來(lái)人們研究的熱點(diǎn)集中到肺癌的基因治療上，并取得了許多重要進(jìn)展?，F(xiàn)主要對(duì)肺癌的基因治療方法之一棗抑癌基因治療肺癌的研究新進(jìn)展作一綜述。

一、抑癌基因及其與細(xì)胞周期關(guān)系

抑癌基因指正常細(xì)胞內(nèi)存在的，能抑制細(xì)胞轉(zhuǎn)化和腫瘤發(fā)生的一類基因群，當(dāng)它們受到各種因子的作用失活后，細(xì)胞的生長(zhǎng)分化失控，增加了細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的可能性。目前已分離克隆的抑癌基因有Rb、p53、p16、p33ING1、nm23、TIMP、KAI1、APH、MCC、APC、DCC、BRCA1等，最近被認(rèn)為候選抑癌基因的有FHIT、PTEN/MMAC1/TEP1等。

Rb基因又名成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤基因,是最早發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因,定位于人染色體13q14上，編碼的一組DNA結(jié)合蛋白與細(xì)胞分化的過(guò)程有關(guān)，具有抑制細(xì)胞轉(zhuǎn)化的能力。與人類腫瘤相關(guān)性最高的基因目前認(rèn)為是p53基因，該基因定位于,編碼的核磷酸蛋白具有轉(zhuǎn)錄激活的作用，正常的p53基因具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，且DNA損傷后可觸發(fā)細(xì)胞凋亡，防止惡變。近幾年來(lái)發(fā)現(xiàn)的p16基因即多腫瘤抑制基因1(multipletumorsuppressor1,MTS1)，定位于人類多種惡性腫瘤頻繁發(fā)生缺失的染色體區(qū)域9p21，p16表達(dá)產(chǎn)物的基本功能是作為細(xì)胞周期素依賴激酶4(cyclindependentkinase4,CDK4)抑制蛋白。

新近發(fā)現(xiàn)的抑癌基因p33ING1，定位于染色體11q33，需依賴于野生型p53，才能發(fā)揮細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制效應(yīng)。而定位在人染色體5q21的抑癌基因MCC、APC在肺癌中經(jīng)常表現(xiàn)為純合性缺失，在小細(xì)胞肺癌是在結(jié)腸癌中新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因。BRCA1抑癌基因主要與家族性乳腺癌和卵巢癌的發(fā)生有關(guān)。FHIT基因定位于人染色體，與肺癌、乳腺癌、腸癌、胰腺癌等有關(guān)，染色體3p是乳腺癌、肺癌、卵巢癌等腫瘤的經(jīng)常缺失區(qū)，抑癌基因APH也位于3p區(qū)。PTEN/MMAC1/TEP1基因定位于人染色體10q23，在肺癌發(fā)現(xiàn)有突變。

抑癌基因的抑癌功能主要是通過(guò)在細(xì)胞增殖周期對(duì)細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)進(jìn)行負(fù)調(diào)控，防止細(xì)胞周期失控變成無(wú)限制地增殖而實(shí)現(xiàn)的。

細(xì)胞周期中有兩個(gè)重要的調(diào)節(jié)點(diǎn)，即G1-S和G2-M調(diào)節(jié)點(diǎn)。細(xì)胞周期的運(yùn)行主要依賴于細(xì)胞周期依賴性激酶，該酶只有與細(xì)胞周期素結(jié)合才有活性，可促進(jìn)細(xì)胞周期中G1→S和G2→M的轉(zhuǎn)變。在細(xì)胞周期素中最有意義的是細(xì)胞周期蛋白D，它能激活CDK2、4、5，促進(jìn)細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期，進(jìn)行DNA合成。

目前認(rèn)為p53、p16、Rb基因與G1-S調(diào)節(jié)點(diǎn)有關(guān)。p53基因的表達(dá)產(chǎn)物p53蛋白的作用機(jī)制主要是間接作用于細(xì)胞周期，p53可促進(jìn)P21蛋白的表達(dá)，從而在細(xì)胞周期中抑制G1期至S期的轉(zhuǎn)換，阻礙細(xì)胞進(jìn)入DNA合成期，使細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)受到抑制。而p16具有直接的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制效應(yīng)，p16與細(xì)胞周期蛋白D競(jìng)爭(zhēng)同CDK4的結(jié)合，當(dāng)p16與CDK4結(jié)合后，CDK4/cyclin復(fù)合物活性受到抑制，細(xì)胞分裂生長(zhǎng)受阻。CDK/cyclin復(fù)合物對(duì)Rb蛋白具有磷酸化作用，Rb被磷酸化后其G1期停滯作用喪失，而Rb非磷酸化時(shí)可阻止細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期。

p53基因較為特殊，與G2-M調(diào)節(jié)點(diǎn)又有一定關(guān)系，是參與細(xì)胞凋亡的重要基因。野生型p53基因使細(xì)胞在離子輻射、藥物刺激引起DNA損傷后停留在G1期進(jìn)行修復(fù)，若DNA修復(fù)失敗，細(xì)胞就進(jìn)入凋亡。若p53基因發(fā)生突變，則細(xì)胞對(duì)DNA損傷因素引起的細(xì)胞凋亡耐受性增加，因此突變型p53基因可影響放療、化療的療效。細(xì)胞凋亡與CDK2基因編碼p34CDK2激酶的活化有關(guān)，p34CDK2具有G1→S和G2→M雙重作用，p34CDK2激酶過(guò)早激活，可引起DNA裂解和細(xì)胞核破壞，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。

一般認(rèn)為癌變的重要原因是細(xì)胞周期的失控。當(dāng)Rb基因缺失、突變或磷酸化失活后，則促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入S期，當(dāng)p53、p16基因突變或缺失時(shí)，則可間接或直接造成具有促增殖活性的CDK的過(guò)度表達(dá)，產(chǎn)生細(xì)胞增殖失控導(dǎo)致癌變。

二、抑癌基因與肺癌的發(fā)生和發(fā)展

近年來(lái)隨著分子生物學(xué)研究的進(jìn)展，在分子水平認(rèn)識(shí)到肺癌的形成是一個(gè)多步驟的過(guò)程，有多種基因功能失常，包括原癌基因的激活與抑癌基因的滅活等，才導(dǎo)致惡性腫瘤細(xì)胞增殖到腫瘤形成。與肺癌有關(guān)的原癌基因包括myc、ras、erbB-1、c-erbB-2、BCL-2、c-fos、c-jun、c-raf-1、c-src、LCK基因等，約30%的NSCLC細(xì)胞系中有ras基因突變，幾乎所有的NSCLC中可見(jiàn)到c-erbB-1蛋白的過(guò)度表達(dá)，c-erbB-2在25%的NSCLC細(xì)胞系中有過(guò)度表達(dá)，BCL-2基因在凋亡中起負(fù)調(diào)控作用，在NSCLC中可有表達(dá)。與肺癌有關(guān)的抑癌基因有p53、Rb、p16、APH、MCC、APC、nm23、KAI1等。Bai等［1］通過(guò)對(duì)臨床肺癌患者的研究發(fā)現(xiàn)，在肺癌的發(fā)展中，可同時(shí)有抑癌基因p53突變和癌基因myc過(guò)度表達(dá)，而p53基因不是預(yù)后標(biāo)記，決定預(yù)后的因素是myc過(guò)度表達(dá)。

Rb基因的缺失最初是在家族性成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤研究中發(fā)現(xiàn)的，后來(lái)在許多腫瘤細(xì)胞中都可觀察到Rb基因的缺失或失活，如小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、乳腺癌、前列腺癌、骨肉瘤等，在肺癌組織和細(xì)胞系中Rb基因異常多表現(xiàn)為雜合子丟失、基因突變等。Michael等［2］研究發(fā)現(xiàn)88%的SCLC和12%的NSCLC細(xì)胞系中存在Rb基因產(chǎn)物表達(dá)的缺失。

p53基因突變?cè)谌祟愒S多常見(jiàn)腫瘤中均可檢測(cè)到，包括肝癌、胃癌、大腸癌、食道癌、子宮癌，肺癌等，p53基因突變是不同類型肺癌中最常見(jiàn)的基因改變，且出現(xiàn)的頻率比其它腫瘤要高得多。Takahashi等［3］發(fā)現(xiàn)SCLC中p53基因突變率最高，可達(dá)80%，NSCLC中p53基因突變率也可達(dá)60%。

p16基因的正常功能丟失的主要方式是p16基因的純合性缺失，在人類眾多惡性腫瘤中相當(dāng)普遍存在p16基因的純合性缺失，包括惡性間皮瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、黑色素瘤、星形細(xì)胞瘤、白血病、膀胱癌、乳腺癌、肺癌、骨肉瘤、食管癌、胰腺癌等。Michael等［2］發(fā)現(xiàn)23%NSCLC細(xì)胞株可檢測(cè)到p16基因的純合性缺失，而只有1%的SCLC細(xì)胞株存在p16基因缺失。Washimi等［4］對(duì)原發(fā)性肺癌的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)30%的NSCLC有p16的純合性缺失，而SCLC中未發(fā)現(xiàn)。許多研究結(jié)果［2,4-6］均表明，p16基因的失活在NSCLC形成中起重要作用，與SCLC的形成關(guān)系不大，在SCLC的細(xì)胞株及原發(fā)腫瘤中很少檢測(cè)到p16基因的改變，而在NSCLC的細(xì)胞株及原發(fā)腫瘤中常見(jiàn)p16基因純合性缺失。Kratzke等［7］還發(fā)現(xiàn)p16純合性缺失的檢出率在NSCLC晚期比早、中期高得多，這就使p16基因具有一定的NSCLC臨床預(yù)后判斷的意義。

候選抑癌基因FHIT在NSCLC及SCLC中經(jīng)常出現(xiàn)缺失，F(xiàn)HIT在肺癌中的缺失一般提示預(yù)后差。而候選抑癌基因PTEN/MMAC1/TEP1的突變?cè)诜伟┑陌l(fā)生中目前認(rèn)為只與SCLC有關(guān)，與NSCLC關(guān)系不大。

三、抑癌基因與肺癌基因治療研究

肺癌的基因治療是指經(jīng)某種途徑引入外源基因到肺癌細(xì)胞以糾正或補(bǔ)償基因的缺陷，從而達(dá)到治療目的。肺癌的基因治療包括抑癌基因治療、反義基因治療、藥物敏感基因治療、耐藥基因治療、免疫基因治療等。

肺癌的發(fā)生源于多基因損傷，抑癌基因的缺失或突變是導(dǎo)致肺癌發(fā)生的原因之一。許多研究者都在探索肺癌的抑癌基因治療，即將外源正常的抑癌基因如Rb基因、p53基因、p16基因等導(dǎo)入肺癌細(xì)胞，以恢復(fù)抑癌基因抑制細(xì)胞增殖的功能，從而抑制肺癌細(xì)胞的惡性增長(zhǎng)，達(dá)到肺癌的治療作用。目前研究最多的是抑癌基因p53。Takahashi等［3］發(fā)現(xiàn)，恢復(fù)單個(gè)抑癌基因的功能，可明顯有效抑制多基因改變引起的肺癌的發(fā)生和生長(zhǎng)，該研究中利用野生型p53基因轉(zhuǎn)染同時(shí)有p53突變或純合子缺失、癌基因ras突變、c-myc過(guò)度表達(dá)的不同肺癌細(xì)胞系，結(jié)果均有生長(zhǎng)抑制作用，而對(duì)于本身具有野生型p53基因的肺癌細(xì)胞，導(dǎo)入外源野生型p53基因后，產(chǎn)生的生長(zhǎng)抑制作用則不明顯。Fujiwara等［8］以逆轉(zhuǎn)錄病毒為載體將野生型p53基因轉(zhuǎn)染人NSCLC細(xì)胞H226Br，轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞在體外生長(zhǎng)明顯受到抑制。在裸鼠體內(nèi)移植人肺癌細(xì)胞也發(fā)現(xiàn)p53基因?qū)Ψ伟┯忻黠@抑制作用。Fujiwara等［8］在裸鼠氣管內(nèi)接種p53突變的人肺癌細(xì)胞系H226Br的細(xì)胞懸液，3天后用攜帶野生型p53基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒進(jìn)行治療，采用氣管滴入法，每日1次，連續(xù)3天，30天后觀察到治療組只有0%～38%的裸鼠肺內(nèi)形成了腫瘤，而對(duì)照組中62%～82%的裸鼠發(fā)生了腫瘤，且治療組中裸鼠發(fā)生的腫瘤的體積亦明顯小于對(duì)照組。高振強(qiáng)等［9］在裸鼠成瘤試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)導(dǎo)入野生型p53基因的人肺腺癌細(xì)胞系，成瘤晚，生長(zhǎng)速度明顯減慢，其速度明顯低于對(duì)照細(xì)胞系和導(dǎo)入突變型p53基因的細(xì)胞系，結(jié)果證明p53基因有抑癌功能。Zou等［10］在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)，氣管內(nèi)腫塊局部注入脂質(zhì)體和野生型p53基因復(fù)合物，可顯著抑制早期癌腫生長(zhǎng)。在外源性野生型p53基因?qū)θ朔伟┘?xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用的進(jìn)一步研究中，汪蕙等［11］采用基因槍介導(dǎo)外源野生型p53基因，建立人肺巨細(xì)胞癌系801-D的轉(zhuǎn)染細(xì)胞系801-D-p53，結(jié)果表明，轉(zhuǎn)染細(xì)胞系801-D-p53體外長(zhǎng)期傳代有外源p53基因存在，轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)明顯受到抑制，裸鼠異種移植致瘤性降低，腫瘤生長(zhǎng)明顯緩慢。這是國(guó)內(nèi)首次成功地運(yùn)用基因槍轉(zhuǎn)移外源p53基因到人肺癌細(xì)胞。

大量的細(xì)胞、動(dòng)物體內(nèi)的研究表明，單獨(dú)運(yùn)用病毒或非病毒為載體的野生型p53基因已經(jīng)具有明顯的抑制肺癌的效果。

盡管p16基因研究起步比p53基因晚，還有許多問(wèn)題待解決，但由于p16基因的純合性缺失在許多惡性腫瘤中存在，且p16基因小，蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量?jī)H為p53的1/4，便于重組和導(dǎo)入，因此理論上認(rèn)為p16基因用于腫瘤的基因治療更為可行。Jin等［12］將野生型p16基因通過(guò)腺病毒載體導(dǎo)入p16基因缺失的肺癌細(xì)胞中，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞被阻滯在G1期，無(wú)法進(jìn)入S期，導(dǎo)致肺癌細(xì)胞體內(nèi)、體外生長(zhǎng)受到抑制。研究結(jié)果為p16抑癌基因?yàn)榉伟┗蛑委熖峁┝擞辛σ罁?jù)。

由于野生型p53基因在化療或放療引起的DNA損傷而導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡中是必需成分，因此化療或放療與p53基因聯(lián)合可具有更強(qiáng)的抗腫瘤性。Fujiwara等［13］研究發(fā)現(xiàn)腺病毒為載體的野生型p53基因可使人類NSCLC細(xì)胞系H358對(duì)化療藥物順鉑的敏感性在體外、裸鼠體內(nèi)有所增強(qiáng)，而且p53基因與化療藥物順鉑聯(lián)合應(yīng)用，可出現(xiàn)肺癌腫塊局部大片凋亡。Roth等［14］1996年提出利用腺病毒載體構(gòu)建野生型p53表達(dá)質(zhì)粒，聯(lián)合化療藥物順鉑治療NSCLC的臨床方案，在臨床前的細(xì)胞及動(dòng)物研究中發(fā)現(xiàn)p53基因可增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，并引起腫塊局部的大片凋亡，單獨(dú)使用p53基因或順鉑治療NSCLC，未觀察到明顯的凋亡發(fā)生。聯(lián)合p53基因及順鉑治療NSCLC比單用其中之一，具有更顯著的腫瘤抑制作用。作者所在的研究中心開(kāi)展了抑癌基因多方面的研究，采用陽(yáng)離子脂質(zhì)體介導(dǎo)p16、p53和p21基因單獨(dú)或共轉(zhuǎn)染到NSCLC和SCLC細(xì)胞系，結(jié)果表明p16、p53、p21可抑制NSCLC細(xì)胞增殖，p16與p21基因或p16和p53基因聯(lián)合應(yīng)用能顯著增強(qiáng)對(duì)NSCLC及SCLC細(xì)胞增殖的抑制，以p16與p53作用更明顯。而且研究也證實(shí)p53基因可增強(qiáng)NSCLC細(xì)胞化療敏感性。研究成果表明p53與p16基因聯(lián)合轉(zhuǎn)染或p53基因聯(lián)合化療，可能成為肺癌基因替代治療的更佳選擇。

目前肺癌的抑癌基因治療的臨床試驗(yàn)已取得初步進(jìn)展。最近Roth等報(bào)道用p53基因聯(lián)合反義K-ras治療1例肺癌患者取得顯著療效。此臨床試驗(yàn)源于1993年Anderson癌癥研究中心的Roth［15］向美國(guó)重組DNA委員會(huì)(RAC)和美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院提出的利用抑癌基因p53和反義K-ras對(duì)NSCLC進(jìn)行腫瘤治療的臨床方案，此方案為利用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LNSX構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒，導(dǎo)入p53基因突變的NSCLC細(xì)胞，臨床上選用內(nèi)窺鏡或激光將大塊肺癌腫塊切除，在剩余微小腫瘤灶內(nèi)注入逆轉(zhuǎn)錄病毒上清液。臨床前的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，將野生型p53基因?qū)雙53基因突變的肺癌細(xì)胞可以逆轉(zhuǎn)腫瘤的表型，可觀察到裸鼠體內(nèi)的肺癌腫塊的范圍明顯縮小，同時(shí)通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了該方案的安全性，Roth等給小鼠注射350倍于擬用于人體的逆轉(zhuǎn)錄病毒上清液，結(jié)果未發(fā)現(xiàn)毒性。Roth等［16］最近對(duì)21例晚期NSCLC患者進(jìn)行了p53基因替代療法的臨床試驗(yàn)，利用腺病毒載體構(gòu)建p53表達(dá)質(zhì)粒，采用腫塊內(nèi)直接注入方法，每月為病人進(jìn)行1次p53基因替代療法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)6名患者臨床表現(xiàn)有效，且腫瘤活檢有p53基因的明顯表達(dá)，并觀察到凋亡。Martin等［17］對(duì)15例晚期NSCLC患者進(jìn)行野生型p53基因治療的臨床試驗(yàn)，結(jié)果提示野生型p53基因?qū)τ谕砥贜SCLC患者是安全，易行，有效的。

四、問(wèn)題與展望

肺癌的抑癌基因治療還處于不斷的探索中，目前已由基礎(chǔ)研究發(fā)展到臨床試驗(yàn)，然而要應(yīng)用于臨床，發(fā)展為一種肺癌的常規(guī)療法，還有一定距離。首先要解決肺癌的早期診斷問(wèn)題，是否可將在肺癌早期就有的抑癌基因的改變?nèi)鏿53突變作為篩查指標(biāo)，早期發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肺癌，進(jìn)一步早期治療，通過(guò)抑癌基因?qū)?，明顯有效抑制腫瘤生長(zhǎng)，甚至逆轉(zhuǎn)腫瘤的表型。再則要看到肺癌聯(lián)合治療的可行性，因?yàn)榉伟┑陌l(fā)生是多基因、多步驟的，因此可通過(guò)不同的撐淦鲾所產(chǎn)生的合力，多方面共同對(duì)抗腫瘤，在肺癌的聯(lián)合治療方面有許多問(wèn)題需要進(jìn)一步深入研究，如除p53與p16基因以外其它抑癌基因共轉(zhuǎn)染的抗腫瘤性，抑癌基因與各種DNA破壞藥物的組合，以及抑癌基因與其它基因治療方法的聯(lián)合等。另外還有很多技術(shù)問(wèn)題需解決，選擇高效和導(dǎo)向的理想載體系統(tǒng)，使抑癌基因在受體細(xì)胞中獲得安全高效穩(wěn)定表達(dá)，在肺癌多基因疾病中找尋有效的目的基因，以及建立動(dòng)物模型，治療的安全性，等等。但可以預(yù)言，不遠(yuǎn)將來(lái)，抑癌基因?qū)⒃诜伟┑幕蛑委熤邪l(fā)揮重要作用，與目前常規(guī)的放療、化療以及其它基因治療方法一起聯(lián)合治療肺癌，產(chǎn)生強(qiáng)有力的抗腫瘤效果。

參考文獻(xiàn)

1BaiL,SunY,LiS.Relationofp53alterationandmycfamilygeneoverexpressionwiththeclinicalcharacteristicsoflungcancer.ChinMedJ,1997,110:250-254.

2MichaelJK,NakagawaK,SteinbergSM,etal.DifferentialinactivationofCDKN2andRbproteininnon-smallcellandsmallcelllungcancercellline.JNatlCancerInst,1995,87:756-761.

3TakahashiT,CarboneD,TakahashiT,etal.Wild-typebutnotmutantp53suppressesthegrowthofhumanlungcancercellsbearingmultiplegeneticlessions.CancerRes,1992,52:2340-2343.

4WashimiO,NagatakeM,OsadaH,etal.Invivooccurrenceofp16(MTS1)andp15(MTS2)alterationspreferentiallyinnon-smallcelllungcancer.CancerRes,1995,55:514-517.

5ShapiroGI,EdwardsCD,KobzikL,etal.ReciprocalRbinactivationandp16INK4expressioninprimarylungcancersandcelllines.CancerRes,199555:505-509.

6OkamotoA,HussainSP,HagrwaraK,etal.Mutationinthep16INK4/MTS1/CDKN2,p15INK4B/MTS2andp18genesintheprimaryandmetastaticlungcancer.CancerRes,1995,55:1448-1451.

7KratzkeRA,GreatensTM,RubinsJB,etal.Rbandp16INK4aexpressioninresectednon-smallcelllungtumors.CancerRes,1996,56:3415-3420.

8FujiwaraT,CaiDW,GeorgesRN,etal.Therapeuticeffectofaretrovivalwild-typep53expressionvectorinanorthotopiclungcancermodel.JNatlCancerInst,1994,86:1458-1462.

9高振強(qiáng)，高志萍，張曉濱，等.野生型p53基因?qū)θ朔伟┘?xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用研究.中國(guó)慢性病預(yù)防與控制，1996，4：63-66.

10ZouY,ZongG,LingYH,etal.Effectivetreatmentofearlyendobronchialcancerwithregionaladministrationofliposome-p53complexes.JNatlCancerInst,1998,90:1130-1137.

11汪蕙，賴百?gòu)?qiáng)，李金照，等.外源性野生型p53基因?qū)θ朔伟┘?xì)胞生長(zhǎng)的抑制.中華結(jié)核和呼吸雜志，1998，21：268-272.

12JinX,NguyenD,ZhangWW,etal.Cellcyclearrestandinhibitionoftumorcellproliferationbythep16INK4agenemediatedbyanadenovivusvector.CancerRes,1995,55:3250-3253.

13FujiwaraT,GrimmEA,MukhopadbyayT,etal.Inductionofchemosensitivityinhumanlungcancercellsinv