人體解剖生理學(xué)實驗基本操作

人體解剖生理學(xué)實驗基本操作第一頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六常用的實驗動物動物的捉持動物的秤重實驗動物分組及編號的標記方法動物的麻醉實驗動物的給藥方法實驗動物的取血方法實驗動物的處死方法第二頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六常用的實驗動物小鼠在哺乳類實驗動物中，由于小鼠體小，飼養(yǎng)管理方便，易于控制，生產(chǎn)繁殖快，研究最深，有明確的質(zhì)量控制標準，已擁有大量的近交系、突變系和封閉群，因此在各種實驗研究中，用量最大，用途最多。第三頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六常用的實驗動物大鼠白化型大鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中占據(jù)著重要的地位，常用的大鼠近交品系有十幾個如ACI、BVF、F344、PA、M520、WAB、WAC、WKA、SD、RF等品系。常用的非近交的純種大鼠有7種，其中以Wistar大鼠用得最多，我國醫(yī)藥研究中應(yīng)用也比較廣泛。此種大鼠白色，相當于小鼠的瑞士（Swiss）種。第四頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六常用的實驗動物豚鼠豚鼠對某些藥物極為敏感，因此它是研究這些藥物的“專門動物”。例如豚鼠對組織胺極敏感，所以很適合作平喘藥和抗組織胺藥的研究；豚鼠對人型結(jié)核桿菌具有高度的敏感性，因此常用作抗結(jié)核病藥物的藥理學(xué)研究。

第五頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六常用的實驗動物家兔家兔體小力弱、膽小怕驚、怕熱、怕潮，喜歡安靜、清潔、干燥、涼爽的環(huán)境，不能忍受污穢的條件。家兔對體溫變化十分靈敏。最易產(chǎn)生發(fā)熱反應(yīng)，而且發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定。小鼠、大鼠和豚鼠恒溫機能差。對發(fā)熱刺激的反應(yīng)低。有時熱原性物質(zhì)的刺激時。體溫反應(yīng)下降。

第六頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六常用的實驗動物犬犬在各個方面的研究，如心血管外科、腦外廣泛用于實驗外科科、斷肢再植、器官或組織移植等中都比較常用。犬是目前基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究和教學(xué)中最常用的動物之一，尤其在生理、藥理、病理生理等實驗研究中起著重要作用。第七頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六動物的麻醉揮發(fā)性麻醉藥乙醚乙醚麻醉的優(yōu)點：深度易于掌握，比較安全，麻醉后恢復(fù)比較快。缺點：需要專人管理，麻醉初期出現(xiàn)強烈的興奮現(xiàn)象，對呼吸道有較強的刺激性，需在麻醉前給一定量的嗎啡和阿托品（基礎(chǔ)麻醉）。非揮發(fā)性麻醉藥苯巴比妥鈉戊巴比妥鈉氨基甲酸乙酯水合氯醛第八頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六實驗動物的給藥方法皮下注射皮內(nèi)注射腹腔注射肌肉注射靜脈注射灌胃給藥法實驗動物的取血方法尾靜脈眼眶動脈和靜脈后眼眶靜脈叢連續(xù)穿刺斷頭心臟頸靜脈耳緣靜脈第九頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六大/小鼠解剖第十頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六第十一頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六血液凝固【實驗?zāi)康摹勘緦嶒灢捎猛妙i總動脈放血，通過測定各種條件下的血液凝固時間，了解影響血液凝固的一些因素?！緦嶒炘怼垦耗炭煞譃閮?nèi)源性凝血系統(tǒng)和外源性凝血系統(tǒng)。內(nèi)源性凝血系統(tǒng)是指參與凝血過程的因子全部存在于血漿中，外源性凝血系統(tǒng)是指在組織因子參與的凝血過程。【實驗材料】家兔兔手術(shù)臺、哺乳動物手術(shù)器、動脈夾、細塑料管、20毫升注射器、25%烏拉坦、試管8支、小燒杯2個，竹簽1支、冰塊、棉花，石蠟、肝素、草酸鉀、生理鹽水、肺組織浸液。第十二頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六【實驗方法】1、用烏拉坦將兔麻醉，仰臥固定于兔手術(shù)臺上，分離一側(cè)頸總動脈，上端用線結(jié)扎阻斷血液，下端夾上動脈夾，在動脈當中剪一小口，插入細塑料管，結(jié)扎插管備取備用。2、將下列試管準備好試驗用品后，每管加入血液2毫升。試管1內(nèi)放少許棉花；試管2用石蠟油潤滑整個內(nèi)表面試管3不加任何處理試管4置于有冰塊的小燒杯中試管5內(nèi)加肝素8單位試管6內(nèi)加草酸鉀1-2毫克將多余的血盛于小燒杯中，不斷用竹簽攪動直至纖維蛋白形成3、記錄凝血時間：每個試管加血2毫升后，即可開始計時，每隔15秒，將試管傾斜一次，觀察血液是否凝固。至血液成為凝膠狀不再流動為止，幾下所經(jīng)時間即凝血時。另一燒杯內(nèi)加入血液后立即用竹簽攪動，去除纖維蛋白。5、6號試管，加入血液后，用拇指蓋住試管口將管顛倒兩次。第十三頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六將結(jié)果及在各條件下的凝血時間按表1填寫，并進行解釋

表1各條件下凝血時間實驗儀器編號實驗條件結(jié)果及凝血時間解釋試管（放血2毫升）12粗糙面的影響預(yù)先在試管內(nèi)放入少許棉花預(yù)先用石蠟油潤滑整個使館內(nèi)表面34溫度的影響預(yù)先置于室溫中試管置有冰塊的小燒杯中56試管內(nèi)先加肝素8單位試管里先加草酸鉀1-2毫克小燒杯（放血10毫升）放血于燒杯時用竹簽不斷攪動，約2-3分鐘后取出竹簽，用水洗凈竹簽上的血液，觀察纖維蛋白，燒杯內(nèi)為去除纖維蛋白血，觀察其是否會發(fā)生凝血。第十四頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六血紅蛋白含量的測定【實驗?zāi)康摹空莆毡壬y定血紅蛋白含量的方法。【實驗原理】測定血紅蛋白含量的方法很多，實驗常用比色法。其原理是在一定量的血液中，血紅蛋白經(jīng)少量鹽酸的作用，使亞鐵血紅素變成高鐵血紅素，呈現(xiàn)較穩(wěn)定的棕色。用水稀釋后與標準色比較，求出每100ml血液中所含的血紅蛋白克數(shù)。正常成年男子每100ml血液平均含14.4g，女子為13.1?！緦嶒灢牧稀客醚忱涎t蛋白計一套，采血針，玻璃棒，滴管，75%酒精，95%酒精，棉球，蒸餾水，乙醚，0.1N鹽酸第十五頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六【實驗方法】1．血紅蛋白計包括①標準比色架，架的兩側(cè)鑲有兩個棕色標準玻璃色柱。②血紅蛋白稀釋管，有方形也有圓形的。兩側(cè)有刻度，一側(cè)以g為計數(shù)單位，對側(cè)以百分率計。2．用滴管加0.1mol/LHCl于血紅蛋白稀釋管內(nèi)，到刻度10處。3．用血紅蛋白吸管的尖端吸上個實驗中燒杯中的血，吸血至刻度20mm3處（0.02ml）。4．用濾紙片或棉球擦凈吸管口周圍的血液，將吸管插入血紅蛋白稀釋管的鹽酸內(nèi)，輕輕吹出血液至管底部，反復(fù)吸入并吹出稀釋管內(nèi)上層的鹽酸，洗滌吸管多次，使吸管內(nèi)的血液完全洗入稀釋管內(nèi)。搖勻或用小玻璃棒攪勻后，放置10min，使鹽酸與血紅蛋白充分作用。5．把稀釋管插入標準比色架兩色柱中央的空格中，使無刻度的兩側(cè)面位于空格的前后方，便于透光和比色。6．用滴管向稀釋管內(nèi)逐滴加入蒸餾水（每加一滴要攪拌），邊滴邊觀察顏色，直至顏色與標準玻璃色柱相同為止。稀釋管上液面的刻度讀數(shù)即為每100ml血液血紅蛋白的克數(shù)。第十六頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六家兔動脈血壓的神經(jīng)、體液調(diào)節(jié)【實驗?zāi)康摹?．掌握測定動脈血壓直接法及動脈插管方法。2．了解溫血動物的麻醉、固定及手術(shù)方法。

3．觀察心血管活動的某些影響因素?！緦嶒炘怼啃呐K受交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)支配。心交感神經(jīng)興奮，對心臟產(chǎn)生正性變時、變力、變傳導(dǎo)作用，從而使心輸出量增加。心迷走神經(jīng)興奮，對心臟產(chǎn)生負性變時、變力、變傳導(dǎo)作用，從而使心輸出量減少。支配血管的植物神經(jīng)主要是交感縮血管神經(jīng)，其興奮時主要引起縮血管效應(yīng)，外周阻力增加。中樞通過反射活動調(diào)節(jié)心血管的活動，改變心輸出量及外周阻力，從而調(diào)節(jié)動脈血壓。心血管活動尚受體液因素的調(diào)節(jié)。其中主要有腎上腺素和去甲腎上腺素。本實驗是以動脈血壓為指標，在整體條件下，施加某些因素，觀察神經(jīng)、體液因素對心、血管的調(diào)節(jié)作用?！緦嶒灢牧稀考彝枚嗟郎碛涗泝x、血壓換能器、動脈插管、三通管。兔手術(shù)臺、哺乳類手術(shù)器破、注射器、有色絲線、紗布、棉花。25％氨基甲酸乙酯、1％肝素。生理鹽水、l／萬去甲腎上腺素。第十七頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六【實驗方法】1.麻醉和動物固定：兔稱重后，按1g／kg體重的劑量由兔耳緣靜脈緩慢注入25％氨基甲酸乙酯溶液將動物麻醉。注射過程中注意觀察動物的肌張力、呼吸頻率及角膜反射的變化，防止麻醉過深。麻醉好的動物仰臥固定于手術(shù)臺上，注意頸部必須放正拉直。2.分離頸部血管和神經(jīng)：用彎剪刀剪去頸部的毛，作長5—7厘米的正中切口，鈍性分離皮下組織和肌肉，即可見到氣管，將氣管兩旁的肌肉拉開，便可在氣管兩側(cè)的深部找到頸動脈鞘，內(nèi)有頸總動脈、迷走神經(jīng)、減壓神經(jīng)和交感神經(jīng)。仔細辨認并小心分離，在左側(cè)減壓神經(jīng)和交感神經(jīng)下穿不同顏色濕絲線備用．然后分離雙側(cè)的迷走神經(jīng)和頸總動脈，穿線備用。

3.動脈插管：分離右側(cè)頸總動脈3厘米左右，近心端用動脈夾夾閉，遠心端用線結(jié)扎．耳緣靜脈注入肝素1ml，然后在結(jié)扎的近端剪一斜口，向心臟方向插入動脈插管，用線將插管與動脈扎緊，防止滑脫。放開動脈夾，記錄動脈血壓。第十八頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六觀察項目

1、觀察正常血壓曲線。2、用動脈夾夾閉左側(cè)頸總動脈5—10秒，觀察血壓變化。3、刺激減壓神經(jīng)：以中等強度，頻率為10-15次/秒，波寬2毫米的連續(xù)電脈沖。刺激一次減壓神經(jīng)，觀察血壓有何變化？然后用兩根絲線在該神經(jīng)中部兩處接扎，并在兩結(jié)扎間將神經(jīng)切斷，分別刺激切斷后的神經(jīng)中樞端和外周端，觀察對血壓影響有何不同？4、刺激迷走神經(jīng)：結(jié)扎并剪斷雙側(cè)迷走神經(jīng)，觀察血壓變化．刺激右側(cè)外周端，觀察血壓變化。5、靜脈注射去甲腎上腺素：由耳緣靜脈注入1／萬去甲腎上腺素0.3ml，觀察血壓變化。6、刺激交感神經(jīng)：結(jié)扎并剪斷左側(cè)交感神經(jīng)，觀察左側(cè)耳都血管的變化，然后用中等強度電流連續(xù)刺激其頭端，觀察左側(cè)耳部血管變化。第十九頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六尿生成的影響因素【實驗?zāi)康摹?．學(xué)習(xí)輸尿管插管技術(shù)。2．觀察影響尿量的幾種因素?！緦嶒炘怼磕虻纳蛇^程包括：腎小球的過濾作用；腎小管與集合管的重吸收作用；腎小管與集合管的分泌作用。在整體內(nèi)，這3個過程往往受到生理性的調(diào)節(jié)。凡影響這些過程的因素，都可影響尿的生成而引起尿量的改變?！緦嶒灢牧稀考彝?、手術(shù)臺、常用手術(shù)器械、或細塑料管、、刻度試管、2ml及20ml注射器、25%氨基甲酸乙酯溶液、20%葡萄糖注射液、生理鹽水、垂體后葉素（5單位/ml）第二十頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六【實驗方法】1．取家兔一只，用25%氨基甲酸乙酯（1g/kg體重）耳緣靜脈注射，麻醉后，背位固定于手術(shù)臺上。導(dǎo)尿管直接由實驗動物的尿道插入。實驗動物應(yīng)選擇雄性，插導(dǎo)尿管時用液體石蠟浸潤后順尿道輕輕插入膀胱。插管是若遇阻力：不可強插，應(yīng)拔出重插。依次進行下列項目實驗。注意：每項實驗前都要記錄尿量作為對照。實驗觀察待尿流量穩(wěn)定后，即可進行下列各項實驗觀察。每項實驗開始時，都應(yīng)先記錄一段尿量曲線作為對照；然后進行注射或刺激，并連續(xù)記錄和觀察至效應(yīng)明顯和恢復(fù)過程。（1）自耳緣靜脈注射的生理鹽水20ml，觀察尿量的變化。（2）自耳緣靜脈注射20%葡萄糖液15ml，觀察其變化。（3）自耳緣靜脈注射1∶10000腎上腺素0.1ml，觀察其變化。（4）自耳緣靜脈注射垂體后葉素0.2ml，觀察和記錄其變化20min。(5)自耳緣靜脈注射呋塞米0.2ml，觀察和記錄其變化20min。結(jié)果：記錄兔尿量并觀察其變化。第二十一頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六小白鼠破壞小腦引起的共濟失調(diào)【實驗?zāi)康摹?/p>

一側(cè)小腦損傷后的動物，軀體運動表現(xiàn)異常，通過對異常運動的觀察，了解小腦的機能?！緦嶒炘怼?/p>

小腦具有維持身體平衡，調(diào)節(jié)肌緊張和協(xié)調(diào)肌肉運動等機能。當小腦損傷后，隨著破壞程度的不同，可表現(xiàn)出不同程度的肌緊張失調(diào)及平衡失調(diào)?！緦嶒灢牧稀?/p>

小白鼠、探針、棉花。【實驗方法】1.觀察正常小鼠的活動情況。2.用探針破壞某一側(cè)小腦，切勿損傷中腦，然后迅速取出探針，用棉球止血。3.放開縛線觀察小白鼠的活動情況。4.根據(jù)切除小腦的小白鼠活動情況討論小腦的功能。第二十二頁，共二十三頁