桑樹病蟲害防治學(xué)

桑樹病蟲害防治學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書陳仁方肖偉何詩明西南農(nóng)業(yè)大學(xué)蠶學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院蠶桑學(xué)教研室200實(shí)驗(yàn)規(guī)則為了使同學(xué)們能夠充分的運(yùn)用實(shí)驗(yàn)時(shí)間，提高實(shí)驗(yàn)效率，保證實(shí)驗(yàn)課的質(zhì)量，避免在實(shí)驗(yàn)中發(fā)生事故，制訂以下實(shí)驗(yàn)規(guī)則，要求參加實(shí)驗(yàn)課的同學(xué)共同遵守。1．每次實(shí)驗(yàn)前，預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書，初步了解實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，以保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。2．上實(shí)驗(yàn)課前，必須做好實(shí)驗(yàn)用具準(zhǔn)備和檢查工作，避免因臨時(shí)缺少用具延誤實(shí)驗(yàn)。3．實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中，嚴(yán)格遵守課堂秩序，不得高聲交談和隨意走動(dòng)，遇到問題，可直接請(qǐng)老師指導(dǎo)。4．實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄和觀察繪圖應(yīng)首先按指導(dǎo)書指定的方法進(jìn)行不準(zhǔn)抄襲，養(yǎng)成實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度。5．要愛護(hù)實(shí)驗(yàn)儀器，用具和節(jié)約使用藥品。遇有故障及時(shí)報(bào)告指導(dǎo)老師，如有物品損壞，應(yīng)報(bào)告登記。借用的儀器用具，用后要清潔歸還。6．切實(shí)注意實(shí)驗(yàn)室安全，使用易燃易爆，有毒物品要當(dāng)心，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。禁止用酒精燈相互接火。7．離開實(shí)驗(yàn)室前，將實(shí)驗(yàn)桌整理好，負(fù)責(zé)清潔的同學(xué)，把實(shí)驗(yàn)室打掃干凈，關(guān)上水電和門窗。目錄實(shí)驗(yàn)一桑樹主要病害癥狀觀察。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。4實(shí)驗(yàn)二顯微鏡的使用和桑樹病原玻片簡易制作。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。15實(shí)驗(yàn)三桑病毒及類菌原質(zhì)體病診斷及桑花葉型萎縮病內(nèi)含物檢查。。。。。。。。。。。。。。。。18實(shí)驗(yàn)四桑樹細(xì)菌、真菌病原的分離、純化及接種。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。20實(shí)驗(yàn)五桑樹主要蟲害的識(shí)別。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。26實(shí)驗(yàn)六桑樹病蟲標(biāo)本采集與制作。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。34實(shí)驗(yàn)七桑園常用農(nóng)藥品種的識(shí)別、稀釋、藥效測定及殘毒試驗(yàn)。。。。。。。。。。。。。。。。。。40實(shí)驗(yàn)八桑樹抗病性鑒定。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。46實(shí)驗(yàn)九桑樹病蟲的田間調(diào)查、測報(bào)與損失估計(jì)及綜合治理。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。47實(shí)驗(yàn)一桑樹主要病害癥狀觀察一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^觀看桑樹主要病害實(shí)物幻燈片，觀察病害標(biāo)本，認(rèn)識(shí)桑樹病害各種類型，癥狀，初步掌握描述桑樹病害癥狀的方法，加深對(duì)桑樹主要病害對(duì)象的感性認(rèn)識(shí)。二．實(shí)驗(yàn)材料及用具1．實(shí)驗(yàn)材料：桑樹主要病害標(biāo)本2．實(shí)驗(yàn)用具：手放大鏡、體視顯微鏡、解剖針、鑷子等。三．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及作法植物在生長發(fā)育過程中，常常受到各種病原物侵襲，植物在受到病原物侵襲后，其內(nèi)部生理過程受到擾亂，并在外部形態(tài)上出現(xiàn)不正常狀態(tài)，稱為病狀。在受病植物的侵染部位常?？梢钥吹揭恍┎≡锝Y(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)叫病征。如菌絲體、菌索分生孢子盤、菌核、菌膿等。植物受病后表現(xiàn)出來的不正常的綜合癥狀，稱之為病害癥狀。病害癥狀的主要類型有：1．變色：感病后失去正常的綠色。變色又分兩種，形成的癥狀明顯不同。（1）整株、整葉或部分葉片均勻變色、褪綠、黃化，如桑樹黃化型萎縮病，桑樹萎縮型萎縮?。唬?）變色不均勻，形成濃綠和淡綠相間的花葉，如?；ㄈ~型萎縮病。2．壞死：因受病部位不同表現(xiàn)各種癥狀，在葉片上常表現(xiàn)為葉斑和葉枯，如桑樹褐斑病，桑樹葉枯?。蝗~斑壞死組織如果脫落，即形成穿孔，如褐斑病，有的葉斑有輪紋則稱為輪斑如桑炭疽病。幼苗近土面的莖組織壞死，但植株不倒則形成立枯病，（如桑苗立枯?。?，若幼菌猝倒而葉片仍綠色，則稱猝倒，如桑幼菌猝倒病。若莖枝壞死，則稱為枝枯，如桑芽枯病、桑擬干枯病。3．腐爛：受病部位細(xì)胞組織較大面積的分解和破壞，受病部位可以是根、莖、花、果等，如桑樹褐斑病，桑紫紋羽病，桑根腐病，桑椹菌核病等。含水較多的柔嫩組織分解和破壞，細(xì)胞的中膠層破壞，組織崩潰形成軟腐。含水較少的組織腐爛后，水分很快蒸發(fā)形成干腐病，如桑干枯病，擬干枯??；相反如果細(xì)胞消解很快，腐爛組織不能及時(shí)失水則形成濕腐。4．萎蔫：整株或部分枝葉、萎垂死亡，剖視病株，莖、根常見維管束組織變黑、變褐，植株迅速萎蔫死亡，而葉面仍保持綠色的稱青枯?。ㄈ缟Ｇ嗫莶。?。5．畸形：部分細(xì)胞組織受抑制或殘缺或生長過度植株的生長成比例受抑制，病株比健株矮小得多，稱為矮縮。枝條不正常的增多，形成族生狀，稱為叢枝。葉面產(chǎn)生高低不平的皺縮，如桑萎縮??；葉片向上或向下卷，稱為卷葉，如桑葉枯病。根、莖、葉上形成大小不等的瘤狀物稱腫瘤，如桑根瘤線蟲病。先看幻燈片實(shí)物照片及癥狀描述，然后仔細(xì)觀察實(shí)物標(biāo)本，必要時(shí)用放大鏡觀察，或用雙筒顯微鏡、顯微鏡制片觀察。1、桑黃化型萎縮病桑黃化型萎縮病又叫萎縮病，俗稱癃桑、貓兒朵、塔桑，是我國主要的桑樹病害。本病主要發(fā)生于我國江蘇、浙江、安徽、湖北、湖南等省。70年代以來，不少地區(qū)曾暴發(fā)成災(zāi)。本病大都在夏伐后發(fā)生，早的在5月上旬出現(xiàn)癥狀，6-8月發(fā)生最烈，病樹很快衰亡，致使成片桑園被迫挖毀，成為一些蠶區(qū)蠶桑生產(chǎn)上嚴(yán)重威脅。發(fā)病輕的，桑枝頂端的桑葉縮小變薄，葉脈變細(xì)，稍向背面卷縮，葉色黃化，腋芽早發(fā)。發(fā)病中等的，葉形更加縮小，葉片向背面卷曲更甚，色黃質(zhì)粗，節(jié)間變短，葉序混亂，側(cè)枝多而細(xì)小，不生桑果。發(fā)病重的，葉瘦小似貓兒朵，腋芽不斷萌發(fā)，細(xì)枝叢生成簇，似帚狀。從整株的病情發(fā)展來看，先由單枝發(fā)病，逐步蔓延至全株。植株上還沒表現(xiàn)癥狀的枝條仍能長出花椹，次年經(jīng)過夏伐，往往枝條頂端逐葉萎縮，下部葉片仍正常，看似寶塔狀。病枝越冬有枯梢現(xiàn)象，病根色澤不鮮明。2、桑萎縮型萎縮病桑萎縮型萎縮病也叫萎縮病、癃桑、龍頭桑、糜桑、蝦桑，是桑樹萎縮病的類型之一。該病主要分布于我國浙江、江蘇、安徽等省。本病也是在桑樹夏伐后發(fā)病，其特點(diǎn)也是來勢(shì)兇猛、蔓延快，嚴(yán)重的地區(qū)3—4年間發(fā)病率可達(dá)80%，減產(chǎn)50%以上。嚴(yán)重影響蠶桑生產(chǎn)。發(fā)病輕的，葉片縮小，葉面皺縮，裂葉品種的葉形變圓、枝條細(xì)短、葉序混亂、節(jié)間縮短；發(fā)病中等的枝條頂部或中部的腋芽早發(fā)，生出許多側(cè)枝，全葉黃化，質(zhì)粗糙，秋葉早落，春芽早發(fā)，無花椹；發(fā)病重的，枝條生長顯著不良，瘦枝徒長，病葉更小，最后枯死。整株發(fā)病情況是先局部、后全株，逐步蔓延加重。3、?；ㄈ~型萎縮病桑花葉型萎縮病又稱癃桑、癩頭皮桑、鬈桑、驚桑，也叫花葉卷縮病，是桑萎縮病的一種。該病主要分布于我國江蘇、浙江、安徽、四川等蠶區(qū)。嚴(yán)重田塊的發(fā)病率可高達(dá)90%左右。本病主要在春季及晚秋發(fā)生，病株桑葉卷縮、發(fā)皺、硬化，影響春葉及夏秋葉的產(chǎn)量及質(zhì)量。葉片側(cè)脈間出現(xiàn)淡綠色或黃綠色斑塊，葉脈附近仍為綠色，形成黃綠相間的花葉。葉背脈側(cè)常生小瘤狀突起，細(xì)脈變褐，病枝稍細(xì)、節(jié)間略短，春末、初夏及秋季，同一病枝上的葉片常有表現(xiàn)癥狀與不表現(xiàn)癥狀的間歇現(xiàn)象。葉形不正，葉緣常向葉面卷縮，裂葉有時(shí)半邊無缺刻，病葉小而葉面卷起顯著，后期質(zhì)地粗硬，葉脈明顯變褐，瘤狀或棘狀突起更多，腋芽早發(fā)，病株極易遭受凍害，桑根不腐爛，病株逐漸衰亡。4、桑細(xì)菌性青枯病桑細(xì)菌性青枯病又名“枯萎病”，細(xì)菌性枯萎病，俗名“瘟?！?、“疽桑”。本病是廣東蠶區(qū)常發(fā)的一種細(xì)菌性病害。具有發(fā)病急、蔓延快等特點(diǎn)，對(duì)蠶桑生產(chǎn)造成的威脅很大。1978年廣東順德地區(qū)不少桑園發(fā)此病后不得不另種其它作物。除廣東省有本病的分布外，廣西及其它引進(jìn)廣東桑品種的蠶區(qū)也有本病的發(fā)生。本病在田間具明顯的發(fā)病中心，如果桑園出現(xiàn)多個(gè)發(fā)病中心，則病害很快蔓延，致使整片桑樹青枯死亡，病地雖補(bǔ)植桑樹，仍然發(fā)病。本病是典型的維管束病害，無論是多年生的根刈桑、大樹尾，或是當(dāng)年的定植桑、實(shí)生苗，均能受害。地上部的癥狀表現(xiàn)為青枯，全株葉片尚保持青綠而失水凋萎；有些是從桑株的上、中部葉片的葉尖、葉緣先失水，然后變褐、干枯，逐步擴(kuò)展全葉。地下部的初期癥狀外觀并不明顯，但剖開根部皮層可見木質(zhì)部有褐色條紋，隨病情進(jìn)展可延及莖枝，嚴(yán)重時(shí)根部的木質(zhì)部全部變褐、變黑，病枝或病根切口很少或沒有白色乳汁分泌，卻有污白色的菌膿溢出，久病的根部皮層呈濕腐而脫落，木質(zhì)部變黑腐爛。5、桑疫病桑疫病過去稱細(xì)菌病、爛頭病。有黑枯型、縮葉型兩種病型，都是桑樹重要病害。該病分布很廣，各大蠶區(qū)都有，浙江、江蘇、山東、廣東、四川各地更為普遍而嚴(yán)重。本病為害葉片、新梢，使葉片呈現(xiàn)黃褐色斑點(diǎn)，甚至整片枯黃；同時(shí)引起枝條梢端芽葉黑枯腐死，使枝條不能繼續(xù)生長，影響產(chǎn)量極大。本病兩種病型的癥狀不同。黑枯型桑疫?。呵秩旧Ｈ~時(shí)，葉片呈現(xiàn)褪綠轉(zhuǎn)黃的不規(guī)則多角斑。侵染新梢時(shí)，發(fā)生爛頭癥，并沿枝條向中下部蔓延，在枝條表面形成粗細(xì)不等稍隆起的點(diǎn)線狀黑褐色病斑。枝條內(nèi)部呈現(xiàn)比外部更鮮明的黃褐色點(diǎn)線狀病斑。有癥狀的病斑可穿過木質(zhì)部深達(dá)髓部，木質(zhì)部和髓部受害后發(fā)生畸形病變。有時(shí)病斑相連成塊，在中央形成空洞，空洞周圍的表皮組織向外突出呈隆起狀。有的病斑能蔓延到桑芽的中軸組織、支干和潛伏芽內(nèi)?？s葉型桑疫?。喊l(fā)生在嫩葉和嫩梢上，若病原菌從氣孔侵入葉內(nèi)，則葉面散生油浸狀圓形病斑，病斑逐漸擴(kuò)大變?yōu)辄S褐色，周圍稍退綠變黃。隨著嫩葉長大，病斑部壞死穿孔，葉片皺縮，進(jìn)而脫落。若病菌從葉柄、葉脈處侵入，則通過維管束擴(kuò)展至葉脈，常在葉背的葉脈上形成病斑，初呈褐色，后變黑色，使葉片不能展開，葉面反向卷曲。病菌從嫩梢侵入時(shí)，枝條表面形成大小不一的縱裂病斑。不論是黑枯型或縮葉型，在高溫多濕條件下，病斑部溢出淡黃色粘附物，是為病菌聚集而成的“溢膿”，干燥時(shí)溢膿常凝結(jié)成為有光澤的小珠或菌膜狀。6、桑里白粉病桑里白粉病又稱白粉病，寄生桑及臭椿。本病在我國分布極為廣范，長江流域多在9—10月分盛發(fā)。主要對(duì)晚秋葉造成為害。受害桑葉雖不致引起急速萎凋，但因養(yǎng)分消耗，影響桑葉品質(zhì)，使桑葉提前硬化，采摘后容易干燥。用病葉飼蠶由于葉質(zhì)劣，營養(yǎng)價(jià)值差，蠶食下量減少，造成蠶體虛弱，容易誘發(fā)蠶病，全繭量、繭層量、繭層率均降低。桑里白粉病癥狀開始時(shí)散生白色細(xì)小霉斑，逐漸擴(kuò)大并常連成一片，終至布滿葉背。霉斑表面呈白粉狀，是病菌的菌絲體和分生孢子。至后期（一般在10月上旬）在白色霉斑上出現(xiàn)黃色小顆粒，并逐漸增多，由黃色轉(zhuǎn)橙紅變褐，最后成黑色。這種顆粒是病菌的閉囊殼。在病斑相應(yīng)處的葉表則可看到微黃至淡黃褐色的斑塊。桑里白粉病通常發(fā)生在枝條中、下部較老的葉上，枝條上部的嫩葉一般不受侵害。7、桑污葉病本病也是夏、秋季桑葉常見病害之一，常與桑里白粉病同時(shí)發(fā)生。桑污葉病在我國分布也很廣，病葉背面蒙上一層黑色煤污狀物，使葉質(zhì)變劣，提早硬化，容易萎凋，不適于飼蠶。桑污葉病發(fā)生在較老的桑葉葉背（嫩葉上很少發(fā)生），開始時(shí)發(fā)生小塊煤粉狀黑斑，隨著病勢(shì)發(fā)展，病斑逐漸擴(kuò)大，在相應(yīng)的葉表面呈現(xiàn)同樣大小的黃灰色或暗褐色變色斑。當(dāng)病斑繼續(xù)擴(kuò)大，相互連接時(shí)，往往布滿葉背，整張葉片表面也隨之變色，與桑里白粉病并發(fā)時(shí)，常在葉背形成黑、白相間的混生斑。8、桑葉枯病桑葉枯病又叫桑卷葉枯病。也是桑樹重要的葉部病害。主要分布在江蘇、浙江蠶區(qū)，近年來山東、四川也有發(fā)生。發(fā)病后桑葉卷枯或干枯脫落，有時(shí)整個(gè)桑園無可用之葉，影響桑葉產(chǎn)量。為害葉片，以嫩葉為主，故枝條頂端4—5片葉發(fā)病為多。春季發(fā)病時(shí)，被害葉邊緣發(fā)生深褐色連片病斑，隨著葉片的生長，葉身前面卷縮，嚴(yán)重的全葉發(fā)黑脫落，致使整枝只剩新梢頂端嫩芽。夏秋期發(fā)病較多，枝條頂端葉片受害的則葉尖及附近葉緣變褐，后擴(kuò)大至前半張葉片，成為黃褐色大枯斑；下部葉片受害，則從葉緣向葉脈間發(fā)生黃褐色或灰褐色的梭形大病斑。在病葉上病、健組織界限分明。病斑吸水易腐敗、干燥則開裂。當(dāng)天氣潮濕時(shí)，病斑上往往產(chǎn)生暗藍(lán)褐色的霉?fàn)钗?，為病原菌?、桑褐斑病桑褐斑病俗名爛葉病、焦斑病，是桑樹葉部的主要病害之一。主要分布于浙江、江蘇、山東、四川、云南、新疆等省。此病發(fā)生期很長，為害嚴(yán)重，可使桑葉減產(chǎn)30%以上；一般4月下旬即開始發(fā)病，5月上、中旬到達(dá)發(fā)病盛期。發(fā)病初期，病斑少而小，病葉尚可飼蠶，受害重的桑葉，病斑多而大，往往連接成片，使病葉枯萎，提早脫落或整葉腐爛，嚴(yán)重影響桑葉的產(chǎn)量和質(zhì)量。癥狀病斑呈現(xiàn)于葉片的正背兩面。最初為淡褐色、水漬狀的小斑點(diǎn)，病斑周圍葉色稍變黃，迎光看輪廓十分明顯，隨著病情的發(fā)展，病斑逐漸擴(kuò)大，形成近圓形的茶褐色或暗褐色病斑。（有時(shí)病斑受葉脈的限制而呈多角形或不規(guī)則形，）病斑邊緣色較深呈暗褐色或茶褐色，中央淡茶褐色或灰色，其上環(huán)生白色或微紅色的粉質(zhì)塊。這種粉質(zhì)塊在同一病斑的正反兩面都有，后期變成黑褐色殘留在病斑上。晚秋發(fā)病的病斑周緣常有紫褐色暈環(huán)，葉脈被侵染亦變紫褐色，葉背更為明顯。陰雨連綿時(shí)，病斑吸水膨脹，腐敗穿孔；遇干燥天氣，病斑中部往往開裂。嚴(yán)重發(fā)病的葉片上，許多病斑相互連接成大病斑，不久葉片枯焦，形成“焦斑”、“爛葉”而脫落。葉柄、新梢發(fā)病時(shí)，則呈暗褐色、長形略凹陷的病斑。10、桑炭疽病桑炭疽病主要分布于華東、西南地區(qū)。本病為害葉片，多在夏秋季發(fā)生，發(fā)生嚴(yán)重時(shí)，多數(shù)病斑連接形成不規(guī)則大枯斑，葉尖葉緣更多，使葉片枯黃，提早硬化，中下部葉發(fā)病多，嚴(yán)重影響秋蠶飼養(yǎng)。癥狀開始發(fā)病時(shí)，葉上散生黃褐或紅褐色不清晰小點(diǎn)，后逐漸擴(kuò)大，呈暗紅色，不規(guī)則或近圓形的病斑，病斑部正反面均可散生由棕褐色到黑色的疹狀小顆粒，即病菌的分生孢子盤。病斑擴(kuò)大，聯(lián)在一起，則病部或全葉枯焦。11、桑赤銹病桑赤銹病又名赤粉病、金桑。可寄生桑及數(shù)種與桑近緣的植物。本病分布也很廣，但主要分布在江蘇、浙江、山東、云南、廣東等省。主要為害嫩芽和葉片，葉柄及新梢，病葉飼蠶雖無中毒現(xiàn)象，但感病芽葉畸形卷縮，布滿金黃色病斑，引起葉質(zhì)低劣，產(chǎn)量下降，導(dǎo)致蠶繭歉收。桑赤銹病以春季到初夏發(fā)生多，至炎熱的夏季停止，秋季也有發(fā)生。江蘇、浙江每年春季發(fā)芽時(shí)發(fā)??；廣東則4—6月、9—11月有兩次發(fā)病高峰。癥狀嫩芽被害后局部腫脹、彎曲畸形，其上布滿微隆起的小點(diǎn)，即病菌的銹子器；新梢受害后，順著維管束方向呈縱長形發(fā)展，呈彎曲畸形，表面均生有橙黃色銹子器，葉片被害后，起初正反兩面散生圓形有光澤小點(diǎn)，逐漸肥厚隆起，顏色逐漸轉(zhuǎn)黃，還侵及葉脈、葉柄，最后表皮破裂散出橙黃色粉末狀的銹孢子，布滿全葉，故有“金?！敝Q。新梢、葉柄、葉脈受害后，順著維管束方向呈縱長形發(fā)展，呈彎曲畸形，表面均生有橙黃色銹子器，新梢上的病斑逐漸變黑，橢圓形稍凹陷。?；ū缓Τ什灰?guī)則膨大，桑椹則失去固有光澤、變黃，后期布滿橙黃色粉末。12、桑芽枯病桑芽枯病是桑樹枝干上的重要病害之一，為害冬芽，常與擬干枯病并發(fā)，影響春蠶生產(chǎn)。本病主要分布在北方蠶區(qū)。被害株輕者枝梢1/3以上枯死，重則整株全枯，影響春蠶飼養(yǎng)。本病病原除寄生桑外，還寄生合歡、刺槐、構(gòu)樹等。癥狀：冬末至早春，在枝條中、上部的冬芽附近，開始出現(xiàn)油浸狀暗褐色略下陷的病斑，以后逐漸擴(kuò)大，并密生略隆起的小粒，突破表皮后露出紅褐色小疹狀的分生孢子座。以后數(shù)個(gè)小病斑愈合成一個(gè)大病斑，當(dāng)包圍枝條后，截?cái)鄻湟旱牧鲃?dòng)，上部枝條即枯死，促使病斑以下的腋芽萌發(fā)。病部皮層很易與木質(zhì)部剝離，并放出一種酒精氣味。發(fā)病3—4個(gè)月后，在枯死枝上的分生孢子座，可單獨(dú)形成一種暗藍(lán)色的小點(diǎn)塊，即病菌的子囊殼子座。病斑僅局限于枝干局部，為害并不劇烈時(shí)，因患病部周圍愈傷組織的形成可限制菌絲的擴(kuò)展，其上部枝條，即不至枯死，但被害部顯著變形，呈癌腫狀，外皮常常破裂，在其上露出黑褐色的纖維。13、桑擬干枯病桑擬干枯病又名擬胴枯病，本病是一類引起枝干枯死、病狀比較相似的病害，病原菌種類很多，分布也很廣，但以北方蠶區(qū)發(fā)生較多。病原寄生在枝干部，伐條后留下的枯樁、半截枝上，以為害一年生枝條最重，可致枯死，不能發(fā)芽。常與芽枯病并發(fā)，導(dǎo)致春葉減產(chǎn)，直接影響到春蠶飼養(yǎng)。桑擬干枯病大多發(fā)生在枝條中、下部，或在伐條后的殘樁上。在病部表面生水漬狀的褐色病斑，以后逐漸擴(kuò)大，并可相互愈合成大病斑而連成一片，大的往往長達(dá)尺余。濕潤時(shí)呈水腫狀，干燥后皺縮凹陷，病健組織界限分明，在病斑環(huán)繞枝條一周時(shí)，截?cái)囵B(yǎng)分流通，上部枝條即枯死。被害枝條在春季發(fā)芽前后最為醒目。癥狀病部皮下密生并不突起的黑色小疹，外皮平滑易剝落，樹皮及木質(zhì)部均極脆。常見的有五種。桑平疹干枯病本病寄生于枝條，病斑可長達(dá)30多厘米，呈黃褐色，皮下密生黑色小疹，表面平滑無突起。桑腐皮病本病在鯊魚皮狀小疹中，用放大鏡可看到灰色子座中有一至數(shù)個(gè)黑點(diǎn)（子囊殼嘴）。桑丘疹干枯病本病大部分在冬芽周圍出現(xiàn)病斑，病斑上布滿黑色小疹，枝條上病健組織界限明顯，病斑暗色，稍凹陷，外皮龜裂。桑小疹干枯病枝條上病斑生小疹狀黑色病斑。桑枝枯病本病多發(fā)生于桑苗及幼樹，發(fā)病部在近地面枝條基部2—3厘米處，病斑黑褐色，皮層壞死脫落，顯著凹陷。其周圍發(fā)生許多小疹，小疹暗黑色。14、桑膏藥病桑膏藥病又稱“爛腳癬”。是桑樹的枝干病害。主要分布在四川、江蘇、浙江、安徽、山東等省,各蠶區(qū)。四川川南蠶區(qū)因土壤地下水位高，空氣濕度大，高干喬木多，故發(fā)生特別嚴(yán)重。本病在病樹枝干上可見膏藥狀病斑，菌絲體在枝干上形成厚而致密的菌絲膜，緊纏枝干，產(chǎn)生機(jī)械壓力，阻礙枝干加粗生長，使病斑部呈凹陷。尚有部分菌絲侵入組織內(nèi)吸取養(yǎng)分水分，使樹勢(shì)衰弱。本病除為害桑樹外，還為害茶樹、桃、李、杏、梅、櫻桃、柑桔、冬青等。癥狀本病多發(fā)生于主干中、上部或枝干基部表面。桑樹感病后，由于菌絲相互密集，形成菌絲膜，圍繞于枝干上，形成圓形或不規(guī)則形灰色或褐色斑塊，緊貼樹皮，如膏藥一樣而得此名。桑樹上常見的有兩種：1．灰色膏藥病2．褐色膏藥病15、桑紫紋羽病桑紫紋羽病，又叫爛蒲頭、泥龍，是桑樹重要的根部病害。主要分布于江蘇、浙江、安徽、四川。感病桑株春季不能發(fā)芽，或發(fā)芽較差。發(fā)芽開葉后，遇較高氣溫，芽葉即迅速萎凋，隨即全株枯死。苗木及幼齡桑受害后只需2—3個(gè)月即可枯死，成林桑較慢，感病后一年至數(shù)年才枯死，喬木桑最慢。發(fā)病嚴(yán)重時(shí)成片死亡，對(duì)蠶繭生產(chǎn)威脅極大。除桑以外，本病還為害山芋、馬鈴薯、花生、大豆、胡蘿卜、茶、梨、桃、蘋果、槐等百余種植物。癥狀初發(fā)病時(shí)，病菌首先侵入桑株的幼嫩新根上，被害根漸變黃色，失去光澤，根的表面有細(xì)絲狀紫紅色菌絲，隨著病情發(fā)展，菌絲體糾結(jié)成根狀菌絲束，縱橫交錯(cuò)成網(wǎng)狀布滿桑根，以后蔓延在根部及樹干基部，形成紫紅色菌絲膜。病菌逐漸侵入支根和主根的形成層后，根部皮層轉(zhuǎn)黑色而腐爛，栓皮和木質(zhì)部彼此分離，致使病株容易拔離土壤。在腐朽的根部或病株附近土壤中還有紫紅色顆粒狀的菌核。地上部分，初呈缺肥狀，生長緩慢，病株逐步衰弱，枝細(xì)葉小，葉色發(fā)黃，下部葉先脫落，枝梢停止生長，芽葉枯萎，最后整株枯死。廣東蠶區(qū)3月間即開始表現(xiàn)癥狀，4、5月最多。江蘇、浙江一帶5月間才陸續(xù)出現(xiàn)，梅雨季節(jié)，菌絲膜上常產(chǎn)生子實(shí)體，表面產(chǎn)生白色粉質(zhì)塊，即病菌的擔(dān)子和擔(dān)子孢子。16、桑根結(jié)線蟲病桑根結(jié)線蟲病又叫桑根瘤線蟲病。我國各蠶區(qū)均有發(fā)生。桑苗和桑樹得病后根的正常生長機(jī)能受到阻礙，致使地上部表現(xiàn)衰弱矮小，逐漸枯黃，嚴(yán)重時(shí)可引起病株凋萎死亡。線蟲除為害桑樹外，還寄生多種經(jīng)濟(jì)作物和雜草。主要的寄主如花生、煙草、黃豆、綠豆、馬鈴薯、番茄、瓜類、紅麻、黃麻、蔬菜等。本病是由根結(jié)線蟲侵入桑的根系組織而引起。線蟲入侵后，不斷吸取根系營養(yǎng)物質(zhì)，在吸食過程中，線蟲分泌出一種分泌物（唾液）刺激根部細(xì)胞變形增大（形成巨形細(xì)胞），使根部組織過度生長，形成大小不等的瘤狀物（根瘤）。根瘤多數(shù)呈球形，小如豆粒，大如雞蛋，外表不規(guī)則。根瘤初形成時(shí)呈黃白色，表面光滑，較堅(jiān)實(shí)；剖開根瘤，肉眼可見乳白色、半透明粒狀物（雌成蟲），以后根瘤漸變褐色，最后成黑色而腐爛，致使病株的地上部表現(xiàn)近似缺肥等癥狀。病株短小，生長遲緩，枝條少而纖弱，葉薄而少，頂葉難開，嚴(yán)重發(fā)病時(shí)，葉色發(fā)黃，葉緣卷褶甚至干枯脫落，枝條終致枯萎，整株死亡。在一般發(fā)病情況下，桑樹栽種2—3年后明顯減產(chǎn)，4—5年頻于死亡；在嚴(yán)重發(fā)病情況下，栽種2—3年后，長勢(shì)衰退以至死亡。17、桑肥大性菌核病18、桑椹縮小性菌核病19、桑椹小粒性菌核病20、桑斷梢病21、桑干枯病22、桑白絹病23、桑根朽病24、桑灰霉病25、桑粗皮?。ㄉ聿『Γ?6、廢氣污染－氟化物嚴(yán)重中毒氟化物為害嚴(yán)重時(shí)葉緣顯現(xiàn)褐色，隨污染加重周緣褐色更加擴(kuò)展。氟污染主要是磚瓦廠、水泥廠、磷肥廠等排放的氟化氫、四氟化硅等含氟廢氣。屬生理病害。27.廢氣污染－二氧化硫?yàn)楹疃趸驗(yàn)楹θ~片，葉片發(fā)育不正常,出現(xiàn)斑點(diǎn)。二氧化硫多發(fā)生在銅、鋅冶煉廠周圍。28.藥害－農(nóng)藥濃度過大引起的藥害全株性的，先在葉片周緣變褐，后迅速干枯卷縮。29.縮二脲中毒外觀皺縮，癥狀似桑萎縮病。引起的主要原因：尿素質(zhì)量低劣（含縮二尿超標(biāo)）。22.草甘膦積累中毒本病癥狀與?；ㄈ~型萎縮病相似，極易混淆。四作業(yè)將觀察結(jié)果記錄于下表病害名稱為害部位癥狀特點(diǎn)所屬病源分類地位黃化型萎縮病萎縮型萎縮病桑疫病青枯病桑里白粉病桑片枯病桑葉枯病桑疽病桑褐斑病桑赤銹病桑芽枯病桑擬干枯病桑膏藥病桑紫絞羽病實(shí)驗(yàn)二顯微鏡的使用和桑樹病原玻片簡易制作一實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私怙@微鏡的結(jié)構(gòu)，正確掌握，顯微鏡的使用方法，學(xué)習(xí)病原玻片的簡易制作方法。二實(shí)驗(yàn)材料和用具顯微鏡、蓋玻片、載玻片、擦鏡紙，沙布，鑷子，解剖針，蒸餾水。三實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及作法（一）顯微鏡的結(jié)構(gòu)顯微鏡的種類很多，有的簡單，有的復(fù)雜，而且各有專門用途。這里只介紹一般的光學(xué)顯微鏡、它的結(jié)構(gòu)主要包括。光學(xué)部分：物鏡，目鏡，鏡筒，聚光器和反光鏡。（1）物鏡：即接物鏡，是顯微鏡上最重要的光學(xué)部分，也是最重要的部分。物鏡分：低倍，中倍，高倍鏡和油浸鏡，物鏡上都標(biāo)有放大倍數(shù)，如8×，10×為低倍鏡，15×，20×為中倍鏡，40×，45為高倍鏡，90×，100×為油浸鏡。油浸鏡是指物鏡和蓋玻片之間須用香柏油或液體石蠟等為介質(zhì)、除油浸鏡外，其它物鏡與蓋玻片之間是以空氣為介質(zhì)。（2）目鏡：即接目鏡、目鏡上同樣標(biāo)有放大倍數(shù)。如5×，10×，15×，25×等。觀察物體的放在倍數(shù)=目鏡的放大倍數(shù)×物鏡的放大倍數(shù)（3）聚光器：位于載物臺(tái)，通光孔的下方，它的作用是聚集反光鏡反射來的光線，并將其射入物鏡和目鏡，增加觀察物的亮度。聚光器可以通過螺旋上下調(diào)節(jié)，向上調(diào)亮度加強(qiáng)，反之側(cè)減弱。聚光器下部有虹彩光圈，推動(dòng)把手，可以控制聚光器口徑大小和照射面，達(dá)到調(diào)節(jié)光的亮暗。當(dāng)自然光或照明用具光強(qiáng)時(shí)，縮小光圈，光弱時(shí)增大光圈。虹彩光圈下部有一金屬圓圈，可以置放濾光玻片，以改變?nèi)展庠吹纳{(diào)。（4）反光鏡：是顯微鏡下部的一個(gè)圓鏡，它可以朝任何方向轉(zhuǎn)動(dòng)，用鏡面收集光線、通過聚光鏡將光線反射到物鏡。反光鏡有平凹兩面，凹面反光強(qiáng)于平面。2．機(jī)械部分：包括鏡頭轉(zhuǎn)換器，粗細(xì)焦距調(diào)節(jié)螺旋、載物臺(tái)、鏡臂、傾斜關(guān)節(jié)、鏡座。（1）鏡頭轉(zhuǎn)換器：上按鏡筒，通過鏡頭轉(zhuǎn)換器，上的螺紋圓孔可以安放不同放大倍數(shù)的物鏡，轉(zhuǎn)換器可以旋轉(zhuǎn)以便根據(jù)需要利用其上面的不同物鏡。（2）粗、細(xì)調(diào)節(jié)螺旋：粗調(diào)節(jié)螺旋是鏡臂上方的一對(duì)大施扭，用于較大幅度升降鏡筒，以調(diào)節(jié)物鏡與標(biāo)本之間的距離，確定合適的焦距。細(xì)調(diào)節(jié)螺旋是鏡臂上方的一對(duì)小旋扭，用以調(diào)節(jié)微小焦距。有的顯微鏡的調(diào)節(jié)螺旋，是控制鏡筒的升降，有的則是控制載物臺(tái)的升降，所以使用時(shí)要特別注意旋扭的方向。（3）傾斜關(guān)節(jié)：鏡座與鏡臂連接處的活動(dòng)關(guān)節(jié)，可以調(diào)節(jié)顯微鏡的傾斜角度，以便觀察，但使用臨時(shí)玻片時(shí)，禁止鏡座傾斜，防止損壞顯微鏡。（二）顯微鏡的使用及注意事項(xiàng)：1．顯微鏡的取用：顯微鏡平時(shí)存致在柜和箱中，用時(shí)取出，取時(shí)做到一手緊握鏡臂，一手托住鏡底座，使鏡身直立，不可單手傾斜提攜，防止摔落目鏡或反光鏡。2．顯微鏡的安放：應(yīng)放在身體正前略偏左方，距實(shí)驗(yàn)桌的邊緣至少有2-3cm的距離，以防顯微鏡掉下。3．玻片的放置：將觀察玻片放于載物臺(tái)上，使觀察部位，置于載物臺(tái)上的圓孔之上，卡緊。4．鏡頭的使用（1）低倍鏡的使用：觀察任何標(biāo)本，首先一定要從低倍物鏡觀察起。因?yàn)榈捅剁R的視野大，容易發(fā)現(xiàn)標(biāo)本和找到需要觀察的位置。使用低倍鏡時(shí)，在觀察之前，先轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)螺旋，使鏡頭下降，逐漸接近蓋片，但應(yīng)注意不能按觸蓋片，然后用左眼注視目鏡（右眼同時(shí)要睜開），再轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)螺旋，使鏡筒逐漸上升，不久即可看到觀察標(biāo)本。如果物象不夠清晰時(shí)，可調(diào)節(jié)細(xì)螺旋至清晰為止。（2）中、高倍鏡的使用：需要用中，高倍鏡觀察的標(biāo)本，也必須先用低倍鏡找到，并且把要觀察部位移到視野的中央，然后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，用中、高倍鏡觀看，在一般的情況下；在轉(zhuǎn)換中、高倍鏡頭后，在視野內(nèi)即可顯示出物象，旋轉(zhuǎn)細(xì)調(diào)螺旋至物象清晰。如果在轉(zhuǎn)成高倍鏡后，未見到物象，則須將物鏡下降到幾乎與玻片相接的程度，然后轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)微調(diào)節(jié)螺旋，使鏡筒慢慢升起，就可找到觀察物。（3）油浸鏡的使用：把高倍鏡下觀察到的標(biāo)本部位移至視野中央，轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，移去高倍鏡，在標(biāo)本的玻片上滴上一滴香柏油或石蠟油，然后換用油浸鏡，使鏡頭浸埋在油中，觀察時(shí)，只需略微調(diào)節(jié)細(xì)螺旋，即可看清物象。觀察后，需將鏡頭升起，用擦鏡紙輕輕地擦去鏡頭上的香柏油，用一塊擦鏡紙，滴一滴二甲苯，擦鏡頭，最后用干凈的擦鏡紙將鏡頭擦至清潔。5．光線亮度調(diào)節(jié)：顯微鏡主要是利用自然光和燈光，這兩種光源的強(qiáng)弱直接影響聚光器和反光鏡的使用。當(dāng)光源強(qiáng)時(shí)，聚光器向下降，并縮小虹彩光圈的口徑，使用平面反光鏡。當(dāng)光線弱時(shí)，聚光器向上升，開大虹彩光圈，反光鏡用凹面。在觀察標(biāo)本時(shí)，一般來說，使用低倍鏡時(shí)，聚光器下降，并縮小虹彩光圈，隨著物鏡放大倍數(shù)的增加，聚光器逐漸上升，并開大虹彩光圈。使用油浸鏡時(shí)，光度須調(diào)至比高倍鏡時(shí)更強(qiáng)。6．顯微鏡的還放：用畢顯微鏡后，將載物臺(tái)上的玻片拿掉，把物鏡移開，使兩個(gè)物鏡以“八”字形同時(shí)擱在鏡臺(tái)上，然后放回箱柜中。（三）臨時(shí)病原玻片簡易制作方法植物病原（真菌、細(xì)菌）的個(gè)體比較小，在顯微鏡下才能觀察清楚。因此，必須把病原制成玻片標(biāo)本，在實(shí)際工作中，常常是制做臨時(shí)玻片標(biāo)本。方法如下：1．用鑷子從酒精瓶中取出蓋玻片與載玻片，用清潔沙布擦干凈。載玻片平放在桌上。2．用吸管乳酚油或蒸餾水，滴一小滴在載玻片中央。3．將需要觀察的病原或病組織材料。用解剖針挑取放于載玻片的乳酚油或蒸餾水中。4．取蓋玻片，以其一邊先按觸載玻片，用解剖針托住蓋片，慢慢放下，使乳酚油成蒸餾水在蓋玻片內(nèi)鋪滿。乳酚油等浮載劑不能滴太多，以加蓋玻片后剛剛均勻鋪開，而蓋玻片邊緣無多余浮載劑外溢為宜，如浮載劑過多，應(yīng)用吸水低從蓋片邊吸取外溢的浮載劑。制片中，為了減少氣泡，要求在蓋蓋片時(shí)動(dòng)作要緩慢，如果臨時(shí)蓋片上有氣泡，可以將載玻片底面即沒有蓋玻片的一面置于酒精燈火焰上稍加熱，排除氣泡。四、作業(yè)制作一張合格的臨時(shí)玻片，并使用各種放大倍數(shù)的物鏡觀察。實(shí)驗(yàn)三桑病毒及類菌原質(zhì)體病診斷及桑花葉型萎縮病內(nèi)含物檢查目的要求桑樹病毒及類菌原質(zhì)體病害，有黃化型萎縮病、萎縮型萎縮病、花葉型萎縮病，一般認(rèn)為黃化型、萎縮型萎縮病為類菌原質(zhì)體病害，花葉型萎縮病為病毒病害。均是全株性病害，對(duì)蠶桑生產(chǎn)威脅很大，可使一個(gè)地區(qū)桑園全軍覆沒，必須及時(shí)診斷采取措施。通過本實(shí)驗(yàn)認(rèn)設(shè)識(shí)桑樹病毒及類菌原質(zhì)體病害主要癥狀，掌握病毒內(nèi)含體觀察的基本技術(shù)，為桑樹病毒及類菌原質(zhì)體（?；ㄈ~型萎縮病）的診斷打下基礎(chǔ)。二．實(shí)驗(yàn)材料用具三種病毒及類菌原質(zhì)體標(biāo)本，顯微鏡，載玻片，蓋玻片，尖頭鑷子，安置液，魯戈?duì)柺系庖骸Ｈ?、?shí)驗(yàn)內(nèi)容及做法1．癥狀觀察桑樹病毒及類菌原質(zhì)體病害的癥狀識(shí)別，是診斷病毒及類菌原質(zhì)體病害的一個(gè)重要方面。1）．黃化型萎縮病2）．萎縮型萎縮病3）．花葉型萎縮病4）．其它病毒病害取三種萎縮病標(biāo)本，仔細(xì)觀察主要癥狀區(qū)別，記載于下表病型黃化型萎縮病萎縮型萎縮病花葉型萎縮病癥狀葉枝側(cè)2．大田觀察桑樹黃化型萎縮病，萎縮型萎縮病，花葉型萎縮病的癥狀，與一些非浸染性病害及藥害相似，必須按一定程序進(jìn)行診斷和鑒定。首先必須進(jìn)行田間觀察：一般來說，患病毒及類菌原質(zhì)體的桑樹在田間的分布是分散的，在病株周圍可以有完全健康的桑樹，而非侵染性病害通常成片發(fā)生，而且發(fā)病的地點(diǎn)與特殊的土壤條件及地形有關(guān)。如果初次侵染來源是兩種菱紋葉蟬，那就可以能首先在田邊的桑樹上先發(fā)生。在癥狀上，患病毒及類菌原質(zhì)體病害的桑樹，往往表現(xiàn)出某一類型的變色、褪色和器官變態(tài)，變色褪色發(fā)生在葉片局部器官組織，相間發(fā)生即形成駁斑狀的花葉。典型的花葉癥狀是，先表現(xiàn)在葉脈透明，以后表現(xiàn)葉色的深淺不一，濃綠與淡綠相嵌，葉面皺縮不平。如果變色在整張葉片上全面褪色即成為黃化。這些癥狀在田間的表現(xiàn)，是先從桑樹頂端生長點(diǎn)出現(xiàn)，然后擴(kuò)展到全株的其它部位。隨著氣候變化，較均勻的分布，不象真菌與細(xì)菌病那樣引起的斑點(diǎn)分布不均勻。此外大多數(shù)細(xì)菌與真菌病害的發(fā)生與發(fā)展與溫度成正相關(guān)，而桑樹病毒及類菌原質(zhì)體病害沒有這種相關(guān)性，有時(shí)干燥反而還有利于兩種萎縮葉蟬繁殖活動(dòng)、加速病害的發(fā)展。證明其傳染性是診斷桑樹病毒及類菌原質(zhì)體病害的關(guān)鍵，進(jìn)行田間觀察后，還必須取病枝進(jìn)行嫁接，嫁接后如表現(xiàn)出萎縮的癥狀。才能最后確診。3．?；ㄈ~型萎縮病內(nèi)含體檢查桑樹病毒及類菌原體病害病原均在細(xì)胞內(nèi)寄生，外表看不到病征，但?；ㄈ~型病毒病在受浸染的細(xì)胞中常常形成病毒的內(nèi)含體。病毒的內(nèi)含體分結(jié)晶狀與非結(jié)晶狀，桑花葉型萎縮病屬無定型內(nèi)含體，即非結(jié)晶狀的X—體。?；ㄈ~型萎縮病內(nèi)含體多存在于有明顯癥狀的葉片中，尤以葉片表皮細(xì)胞和表皮毛為多。檢查方法如下：1）.取典型花葉型萎縮病病葉（表皮及表皮毛），用尖頭鑷子從褪綠部位撕下一小塊表皮，放于載玻片上水滴中，加蓋玻片，先在低倍鏡下觀察，再在高倍顯微鏡下觀察。2）.取材相同，放于載玻片上，用碘液染色（碘1g、碘化鉀2g、蒸餾水300ml）桑樹黃化型萎縮病媒介昆蟲觀察：取兩種菱紋葉蟬標(biāo)本，仔細(xì)觀察體色、體型菱紋斑及花紋。四作業(yè)1．完成完成癥狀觀察表；2．簡述兩種菱紋葉蟬的形態(tài)特征；3．以組為單位選取制作好的桑樹花葉型病毒內(nèi)含體標(biāo)本拍攝。實(shí)驗(yàn)四桑樹細(xì)菌、真菌病原的分離、純化及接種一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私獠≡镂锓蛛x的基本原理，掌握組織分離法、單孢分離法、培養(yǎng)皿稀釋法和平板劃線分離法等細(xì)菌、真菌分離技術(shù)；接種技術(shù)，了解接種實(shí)驗(yàn)在植物病理上的意義。二．實(shí)驗(yàn)材料及用具1．材料；供分離的桑樹真菌、細(xì)菌病害新鮮標(biāo)本、菌種（桑小粒性菌核病新鮮子囊盤、桑細(xì)菌病斜面培養(yǎng)純化菌種）清水——瓊脂培養(yǎng)基（三角瓶裝，真菌分離用）馬鈴薯——葡萄糖培養(yǎng)基（三角瓶裝，試管斜面真菌分離用）牛肉汁——蛋白胨培養(yǎng)基（三角瓶裝，試管斜面、平板細(xì)菌分離用）滅菌水（三角瓶裝）藥品：75%酒精、95%酒精、0.1%升汞液。2．用具：滅菌培養(yǎng)皿、試管、吸管、吸水紙、移植針、移植鑷、小刀、小剪、紗布、酒精燈、玻棒、鉛筆、標(biāo)簽、棉花、電爐、高壓鍋、塑料袋、金鋼砂、顯微鏡、解剖針、噴槍。三．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及作法在受病組織的各個(gè)部位和其它基物中，病原真菌、細(xì)菌常常是和其它微生物混雜在一起的，為了獲得純的植物病原真菌、細(xì)菌，必須將病原菌和其它微生物分離，再將分離出來的病原物進(jìn)一步純化，就可以得到純培養(yǎng)的病原菌。植物病害的鑒定、病原菌的特性、分類等研究都必須經(jīng)分離而獲得純培養(yǎng)菌。（一）桑樹病原真菌的分離和純化１．分離前的準(zhǔn)備工作（１）分離工作是在清潔無菌的不環(huán)境下進(jìn)行，一般是在消毒的滅菌操作室或超凈工作臺(tái)。在無上述條件和設(shè)備時(shí)，在清潔而空氣比較靜止的房間內(nèi)也可以進(jìn)行分離工作。要求把工作臺(tái)上的其它物品拿走，擦凈工作臺(tái)，放一張濕紗布，地面灑水，使其潮濕，工作所需一切物品都應(yīng)放在工作臺(tái)上，工作前應(yīng)用肥皂水洗手，再用酒精消毒，分離時(shí)避免在室內(nèi)走動(dòng)。（２）制作平板：將三角瓶內(nèi)的清水——瓊脂培養(yǎng)基熔化，倒１５ml在滅菌培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿內(nèi)分布均勻。培養(yǎng)基冷卻后，即成平板。２．組織分離法的步驟（１）選擇新鮮病斑，在病健組織交界處，切取適當(dāng)大小一塊組織，一般是葉片組織切取4~5mm2，其它厚肥組織切取3~4mm2。（２）將切取的分離材料浸于７５％酒精中，２～３s（濕潤組織表面或表皮毛），然后把材料移入0.1%升汞液中，處理0.5~2min。（３）用在酒精燈上火焰滅菌的鑷子，將材料從升汞液中取出，放在裝有滅菌水的培養(yǎng)皿中清洗，按順序連續(xù)在三個(gè)培養(yǎng)皿中洗三次。（４）用滅菌的鑷子從第三培養(yǎng)皿中取出材料，放在裝有數(shù)層滅菌吸水紙的培養(yǎng)皿中，吸去附在材料上的水分。（５）用滅菌的鑷子從吸水紙中取出材料，移入平板培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)放３～５塊材料，呈三角形或五梅花形。（６）將材料放好后，貼上標(biāo)簽，將培養(yǎng)皿翻轉(zhuǎn)，放在２５℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。（７）當(dāng)培養(yǎng)皿中的材料長出菌絲，用移植針挑取邊緣菌絲并連帶菌絲下少量培養(yǎng)基，將其轉(zhuǎn)移到斜面試管內(nèi)再培養(yǎng)。如此轉(zhuǎn)管２～３次，能夠起到菌種純化的作用。操作過程應(yīng)注意：倒平板培養(yǎng)基，倒滅菌水入培養(yǎng)皿中，分離步驟（３）（４）（５）（７）都要求在無菌狀態(tài)下操作。主要應(yīng)注意：三角瓶試管的口火焰滅菌，鑷子的火焰滅菌、培養(yǎng)皿的開閉要有滅菌意識(shí)。３．真菌的純化——單孢子分離法采用組織分離法分離的真菌，如果分離材料和操作都很好，不難得到純培養(yǎng)的菌種。但是即便有這些有利條件，也不能排除分離到的菌種混雜有其它真菌和存在不同菌系的可能性。因此對(duì)于一種真菌進(jìn)行深入研究以前菌種的純化是必要的。單孢分離法是重要的真菌純化方法。主要步驟：（１）把清水——瓊脂培養(yǎng)基溶化后，?。保癿l在滅菌培養(yǎng)皿中做成平板，放在溫箱內(nèi)，待冷凝水蒸發(fā)掉后再用。（２）將分離得到的真菌配成孢子懸浮液，用移液器把少量孢子懸浮液涂于平板培養(yǎng)基表面，在２５℃（３）將平板翻轉(zhuǎn)，用低倍顯微鏡在培養(yǎng)皿底部尋找孢子。如果發(fā)現(xiàn)視野內(nèi)只有一個(gè)孢子且已有芽管，就用墨汁把孢子圈住。（４）用切取器將帶有孢子的小塊培養(yǎng)基切下，切取范圍不得超過墨汁圈，再用移植器把孢子移到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上培養(yǎng)。４．真菌分離中，排除細(xì)菌污染的方法在真菌分離時(shí)，經(jīng)常有細(xì)菌污染，特別初學(xué)者更是如此，這對(duì)分離純化菌種帶來很大影響。排除細(xì)菌污染可以采用如下方法：（１）先將真菌接種于水——瓊脂平板培養(yǎng)基上，然后將一管熔化，冷卻至４５℃（２）把玻璃環(huán)浸入７５％酒精中，用鑷子夾起在火焰上滅菌，然后將環(huán)一端陷在水——瓊脂平反培養(yǎng)基內(nèi)，把污染的菌種接種于玻璃環(huán)中央的培養(yǎng)基上，真菌菌絲自玻璃環(huán)底部穿過培養(yǎng)基而達(dá)到培養(yǎng)基表面生長，細(xì)菌則限于在玻璃環(huán)內(nèi)生長。（３）調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的ＰＨ值，使其呈酸性，絕大多數(shù)細(xì)菌不能在ＰＨ值小于４的酸性培養(yǎng)基上生長，因此可以在培養(yǎng)基內(nèi)加入幾滴乳酸，抑制大部分細(xì)菌的生長，而不影響真菌的生長。（二）桑樹細(xì)菌病原的分離和純化１．分離前的準(zhǔn)備工作（同真菌）２．稀釋分離法的步驟（１）選取新鮮病斑，在病組織和健組織交界處，切取適當(dāng)大小的組織材料，一般?。础祄m2,然后用蒸餾水沖洗干凈。（2）材料浸入75%酒精2~3s，濕潤組織或表皮再移入0.1%升汞液中處理0.5~2min。（3）用在酒精燈上滅菌的鑷子，把材料從消毒溶液中取出，放入裝有滅菌水的培養(yǎng)皿中清洗，按順序連續(xù)在三個(gè)培養(yǎng)皿中沖洗三次。（4）取三個(gè)滅菌培養(yǎng)皿，在皿蓋邊緣上標(biāo)1，2，3號(hào)，每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)倒入1ml滅菌水。（5）用在酒精燈上滅菌的鑷子，將已消毒水洗的分離材料，夾一塊放入第一號(hào)培養(yǎng)皿內(nèi)，用火焰滅菌的玻棒將分離材料搗碎，呈懸浮液狀。（6）用滅菌移植鑷從第一皿中取一鑷懸浮液移入第二號(hào)培養(yǎng)皿中，將移植鑷重新滅菌后，再從第二皿中取一鉺移入第三號(hào)培養(yǎng)皿中。（7）將牛肉汁蛋白胨培養(yǎng)基先熔化，待冷卻至45℃，分別倒入上述三個(gè)培養(yǎng)皿中，立刻小心搖動(dòng)培養(yǎng)皿，使懸浮液與培養(yǎng)基均勻混合。冷凝之后將培養(yǎng)皿翻轉(zhuǎn)，置28注意從步驟（3）~（7）都應(yīng)在無菌狀態(tài)下進(jìn)行，隨時(shí)注意避免污染。3．平板劃線分離法（1）將培養(yǎng)基熔化，倒入培養(yǎng)皿中制成平板，翻轉(zhuǎn)置于30~35℃（2）取材，分離材料的表面消毒和清水洗（同稀釋分離法（1）（2）（3）步驟）。（3）取一個(gè)滅菌培養(yǎng)皿倒入1ml滅菌水。（4）用滅菌的鑷子，將已經(jīng)用消毒水洗的分離材料夾一塊放入上述培養(yǎng)皿中，用火焰滅菌的玻棒，將分離材料搗碎呈懸浮液狀。（5）用移液鑷取一鑷懸浮液，在平板培養(yǎng)基表面一側(cè)邊緣反復(fù)涂抹。（6）把移植鑷重新滅菌，從上述涂抹處劃出2條直線。（7）將平板轉(zhuǎn)動(dòng)一定角度，用滅菌后的移植鑷再次劃線，第2次劃線應(yīng)經(jīng)過第一次劃線處。（8）再轉(zhuǎn)動(dòng)平板，繼續(xù)劃線，基本劃滿整個(gè)平板。參閱圖示如下：（9）劃線完畢，倒置平板,在28℃4．菌落的純化象真菌的純化一樣，細(xì)菌的純化在細(xì)菌研究中具有重要的作用，無論是進(jìn)行分類鑒定，還是遺傳變異研究都需要純菌種。細(xì)菌的純化主要是采用平板劃線純化法，其步驟同上述的平板劃線分離法基本一致。即：在稀釋的2、3號(hào)培養(yǎng)皿中或劃線分離平板培養(yǎng)皿中選擇典型菌落，從單個(gè)菌落上醮少許菌液，然后在平板培養(yǎng)基上涂抹，劃線，如果長出的菌落一致，就可選一個(gè)單菌落移到試管斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，而獲得純菌種。反之長出的菌落不一致，還應(yīng)繼續(xù)劃線純化，直到菌落一致。（三）桑樹細(xì)菌、真菌病原的接種從病株上分離得到的真菌、細(xì)菌是否是致病菌，要通過對(duì)寄主植株接種，并透發(fā)產(chǎn)生與原來病株相同的癥狀，才能確定。植物病理的接種技術(shù)是病理學(xué)最常用的基本技術(shù)之一，它可以用來鑒定病原的致病性，選育抗病品種，研究病害發(fā)生過程，病害防治試驗(yàn)等。接種方法一般采用與自然條件下發(fā)病相似辦法，因此，接種類型比較多。在進(jìn)行病原物接種時(shí)，無論采用什么方法，都必須考慮（1）寄主植物的感病性，供試品種應(yīng)是感病品種，在易感病的發(fā)育期接種；（2）病原物的致病性，菌種應(yīng)具有較強(qiáng)的致病力，生活力強(qiáng)，有一定的接種量；（3）要?jiǎng)?chuàng)造適宜的發(fā)病條件，主要是溫度和濕度，以利于病原菌的萌發(fā)和浸入。桑樹上常用的接種方法有噴霧接種、涂抹接種（金鋼砂摩擦）、針刺接種、剪葉接種、土壤接種、種子接種等。真菌病害——桑樹斷梢病病原接種試驗(yàn)接種菌液的準(zhǔn)備：取新鮮子囊盤3~5個(gè)，自盤柄基部剪下，滅菌，放于滅菌燒杯中，加入5~10ml蒸餾水，用玻棒將子囊盤輕輕搗碎，制成子囊孢子懸浮液供用。接種桑樹的選擇：選擇開雌花的桑樹供用。接種：用滅菌毛筆醮取菌液輕涂抹于盛花期雌花柱頭上，使每朵雌花都沾上菌液。保濕；接種后套袋保濕3d。以清水同法為對(duì)照。細(xì)菌病害——桑黑枯性細(xì)菌病原田間接種（1）菌液的準(zhǔn)備：將斜面培純的新鮮菌種，試管內(nèi)加水5~10ml滅菌水，用移液杯輕輕洗下，并適當(dāng)稀釋，一般每ml有5×106個(gè)細(xì)菌。（2）接種桑樹的選擇：選擇易感染黑枯性細(xì)菌病的桑樹品種，如桐鄉(xiāng)青、湖桑7號(hào)、小官桑等，選取數(shù)株嫩梢，作好記號(hào)。（3）接種：接種方法很多，本實(shí)驗(yàn)采用金鋼砂摩擦接種法，即接種時(shí)，先在選好的嫩葉上，撒上一些金鋼砂，用毛筆醮取菌液，在葉面上輕擦，利用金鋼砂粉造成的傷口使細(xì)菌浸入。（4）套袋保濕：（同上）（5）以清水同法處理為對(duì)照。四作業(yè)1．分離真菌、細(xì)菌病原，并純化為純菌種。2．簡圖表示分離純化步驟，并回答下列問題：（1）為什么分離材料不能切取過大過小？（2）在分離純化步驟中，避免污染注意哪些地方？3．以組為單位，每組接種細(xì)菌或真菌病原，接種5~10株列表進(jìn)行觀察記載。4．根據(jù)以上接種試驗(yàn)的調(diào)查結(jié)果，分析此項(xiàng)接種成敗的主要原因及改進(jìn)措施寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)五桑樹主要蟲害的識(shí)別一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^實(shí)驗(yàn)掌握桑樹蟲害主要形態(tài)特征,重點(diǎn)掌握鱗翅目、鞘翅目、同翅目桑樹的蟲害。二．實(shí)驗(yàn)材料及用具1．材料；各類型桑蟲2．用具：解剖鏡，解剖針，鑷子，玻皿等三．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及作法（一）鱗翅目桑樹害蟲鱗翅目種類繁多，為害重。為害桑樹的有十個(gè)科1．桑毛蟲與燈蛾類桑毛蟲屬鱗翅目、毒蛾科。本科的主要特點(diǎn)是成蟲羽毛狀觸角，白色蛾子，腹末有黃毛叢，用以保護(hù)卵塊。幼蟲簇生毒毛，體有紅黑色毛瘤，第6、7復(fù)節(jié)脊背面有毒腺（翻縮腺），幼蟲結(jié)繭化蛹，繭上附有毒毛，蛹體殿棘末端有刺一根。燈蛾類：屬鱗翅目、燈蛾科。為害桑樹燈蛾科的種類較多，但主要是紅腹燈蛾和黃腹燈蛾。該科的主要特點(diǎn)是，成蟲多為白色或黃白色蛾子，成蟲觸角櫛齒狀，以腹部的顏色分為紅腹燈蛾和黃腹燈蛾，背線為黑色，卵聚產(chǎn)，平鋪。紅腹燈蛾卵水綠色，黃腹燈蛾卵黃白色，幼蟲毛瘤上生棕褐色或棕色長毛，長短一致，其中以紅腹燈蛾毛色淺，而黃腹燈蛾毛色深。（無毒腺與桑毛蟲的區(qū)別），土中化蛹，結(jié)土黃色繭。先取桑毛蟲與紅腹燈蛾的世代標(biāo)本，比較成蟲、翅色、紋、腹、斑紋、腹末有無毛叢，產(chǎn)卵方式、幼蟲體毛、顏色、長短是否一致。再用解剖鏡觀察幼蟲6、7腹節(jié)背面有無紅色圓形的翻縮腺，以及蛹、繭顏色、臀棘差異等。然后取紅腹燈蛾世代標(biāo)本比較成蟲、翅色腹部顏色、卵色、幼蟲毛色、蛹體尾端剛毛數(shù)有何差異。2．桑螟與卷葉蛾桑螟與卷葉蛾的為害癥狀、幼蟲極為相似。桑螟屬鱗翅目螟蛾科。特點(diǎn)是成蟲體瘦小，腹部光滑，腹末尖削，前翅成三角形，靜止時(shí)呈展翅狀，鱗片細(xì)密，緊貼，前翅銀白色，具紫色反光，有5條荼色橫帶，后翅一條，卵小，具蠟質(zhì)反光，幼蟲水綠色，上有黑色毛片，其上生短毛1-2根，趾鉤雙序缺環(huán)。蛹瘦削，臀棘細(xì)長，上有8個(gè)鉤刺。為害：幼蟲疊葉，食葉，開天窗，排糞污染下部桑葉。卷葉蛾：屬鱗翅目、卷葉蛾科，主要特點(diǎn)，成蟲前翅成長方形，靜止時(shí)成吊鐘狀，鱗片細(xì)密，其中黃卷葉蛾黃褐色，有3條褐色橫帶。花卷葉蛾灰白色翅基部有蘭黑色闊帶。休止時(shí)，前翅合攏成屋脊?fàn)?。幼蟲水綠色（與桑螟不同之處：具前胸背板，無黑色毛片，趾鉤單序或雙序環(huán)式，幼蟲活潑）。為害：也是以幼蟲為害，多為害頂芽，嫩葉，造成頂芽枯死，側(cè)芽萌發(fā)或卷葉為害。先取桑螟與黃卷葉蛾的世代標(biāo)本，重點(diǎn)在成蟲、翅型、翅色、橫帶、幼蟲前胸背板和黑色毛片的有無上進(jìn)行比較，然后取兩種卷葉蛾的成蟲與幼蟲標(biāo)本進(jìn)行比較，找出兩者在成蟲、翅色、斑紋、幼蟲頭部顏色、以及臀板有無差異。3．桑尺蠖桑尺蠖屬鱗翅目尺蠖蛾科。本科的主要特點(diǎn)是，成蟲翅大而薄，三角形，前后翅斑紋相似，體軀較瘦，休止時(shí)翅平放，幼蟲腹足僅存于第6、10腹節(jié)，運(yùn)動(dòng)時(shí)首尾相就，曲屈前進(jìn)，好象量地，故稱尺蠖。為害：為害桑樹芽葉，越冬幼蟲吃冬芽心，留芽苞，桑芽開葉后，又食葉片，以早春為害冬芽嚴(yán)重。取桑尺蠖、綠尺蠖世代標(biāo)本，觀察成蟲翅色斑紋,幼蟲顏色、斑紋、腹足對(duì)數(shù)、以及蛹體臀棘狀和鉤刺數(shù)目。4．桑蛀蟲桑蛀蟲屬鱗翅目透翅蛾科，本科主要特點(diǎn)，成蟲翅狹長，多透明，似胡峰，幼蟲黃白色，具棕黃色斜置的前胸背板和臀板,腹足退化，但趾溝明顯，二橫帶式。為害，蛀食性害蟲，幼蟲蛀食一年生枝條中上部，蛀孔排成一直線，造成枯枝，類便圓柱形。在桑園中為害狀極易與桑無?；煜?。（枝中上部為害，桑天牛枝中下部為害）取桑蛀蟲世代標(biāo)本和被害枝與桑天牛的世代標(biāo)本及被害枝，從成蟲翅型，口器類型,卵型,幼蟲類型，前胸背板和臀板有無，蛹型來區(qū)別不同點(diǎn)。再在顯微鏡下觀察其幼蟲的趾鉤形式。同時(shí)，從被害枝有無產(chǎn)卵痕，被害部位，排糞孔的位置等來區(qū)別其被害狀。5．桑白毛蟲，小地老虎桑白毛蟲，小地老虎均屬鱗翅目，夜蛾科。本科的主要特點(diǎn)：體色深暗有保護(hù)色，很少是鮮艷的，體粗狀少毛，翅比前翅闊，觸角絲狀，有時(shí)前胸具豎立鱗片，前翅中室后緣脈紋四分支，后翅第一條脈紋在近翅基部處與中室有一點(diǎn)愈合，前翅翅面常有楔形，圓形成腎形紋，休止時(shí)雙翅呈屋脊?fàn)睿上x均在夜間活動(dòng)。幼蟲不具毛瘤，少數(shù)種類只有2-3對(duì)腹足，似尺蠖，一般4對(duì)（肛足除外）。趾鉤單序，中列式或缺環(huán),很大，食葉，蛀食莖稈或切根，如桑白毛蟲，小地老虎。為害：桑白毛蟲，秋季為害桑葉，小地老虎為害桑苗,屬地下害蟲.取桑白毛蟲、小地老虎的成蟲和幼蟲標(biāo)本比較兩者的翅色，翅紋以及幼蟲體色，體毛，臀板等形態(tài)。6．桑蟥、野蠶桑蟥，野蠶屬鱗翅目，蠶蛾科。本科的特點(diǎn)：體中型，粗狀，觸角短，雙櫛齒狀。前翅項(xiàng)角外方外緣略向內(nèi)凹陷，前翅5條經(jīng)脈相連，幼蟲有一尾角，各節(jié)最多只分2-3個(gè)環(huán)，腹足趾鉤為雙序中帶，蛹有繭。如野蠶，桑蟥。為害：均以幼蟲取食桑樹葉片，夏秋期為害嚴(yán)重。取桑蟥，野蠶的世代標(biāo)本，進(jìn)行觀察。7刺蛾，蓑蛾（1）刺蛾屬鱗翅目，刺蛾科，本科的特點(diǎn)是：體型中等大小，短而粗狀，觸角雌為絲狀，雄為羽狀，口器不發(fā)達(dá)。翅上鱗片較松厚，有黃色，綠色，褐色等簡單的斑紋。前后翅中室內(nèi)有中脈的主干存在。幼蟲體短而肥，蛞蝓形，頭小，常縮入前胸，具3對(duì)不發(fā)達(dá)的胸足。腹足多退化，成吸盤，體色常鮮顯，體被分枝毒刺，老熟后結(jié)繭于樹上或土中。雀蛋狀，為害桑樹的刺蛾，主要有黃刺蛾，扁刺蛾，褐刺蛾，扁刺蛾，綠刺蛾等。為害：均以幼蟲取食桑樹葉片，取褐刺蛾世代標(biāo)本，首先認(rèn)識(shí)本科特征，然后分別與其它幾種刺蛾標(biāo)本相比較，找出成蟲，翅色，班紋幼蟲體形，體色，刺突顏色及著生位置上的差異。（2）蓑蛾：屬鱗翅目蓑蛾科（又名袋蛾科）。本科的特點(diǎn)：體小型至中型，雌雄異態(tài)。雄蛾翅上鱗片稀少，觸角雙櫛齒狀，前翅有3條臀脈，在端部合并為一條，雌蟲無翅無足，似幼蟲。雌成蟲終身在蓑袋中，并在其中交尾產(chǎn)卵，幼蟲從蓑袋中孵化外出，能吐絲綴中，成袋。為害：均幼蟲食害桑葉。取蓑蛾觀察其形態(tài)。（二）鞘翅目桑樹害蟲鞘翅目桑樹害蟲種類不多（僅5個(gè)科）但為害普遍而嚴(yán)重，往往造成災(zāi)害。1．天牛科：為害桑樹的天牛有桑天牛，黃量天牛，虎天牛，云斑天牛，黃天牛等，本科的主要特點(diǎn)：觸角鞭狀特別長，伸向體后，復(fù)眼腎形，圍繞在鞭狀觸角基部，附節(jié)為隱5節(jié)，幼蟲鉆蛀型。為害：成蟲咬食桑樹枝皮，產(chǎn)卵于新梢基部6-10CM處，使枝條易被風(fēng)吹斷，幼蟲蛀食桑樹木質(zhì)部心材，吃成空洞，常造成桑樹缺株。取桑天牛，黃量天牛，虎天年，云斑天牛成蟲和幼蟲比較體型，體色，前胸背板顏色，形狀，有無刺突和鞘翅顏色，斑紋，觸角長短等有何差異。2．金龜子科：本科為害桑樹的種類有褐金龜(暗黑鰓金龜)、黑絨金龜子（又名東方金龜子，天鵝絨金龜子）、銅綠麗金龜。本科的最大特點(diǎn)是觸角鰓葉狀，前足為開掘足（可根據(jù)脛節(jié)外方齒的數(shù)目及爪上齒的有無鑒別到種。幼蟲蠐螬型。為害：成蟲為害,幼蟲不為害，成蟲咀食桑葉，吃成缺刻，嚴(yán)重時(shí)可將整個(gè)桑樹上的桑葉吃光。取暗黑鰓金龜（褐金龜）、銅綠金龜子、黑絨金龜子觀察成蟲足、脛節(jié)外方齒數(shù)和爪上齒的有無及數(shù)量，以及幼蟲尾端肛門裂縫狀及肛門前方剛毛排列方式，進(jìn)行種的鑒定。3．葉甲科：為害桑樹的葉甲科種類有藍(lán)尾葉甲、夏葉蟲（鞘翅翠綠、深綠黑褐色等）、桑葉蟲（翅藍(lán)色其余為黃色）、藍(lán)葉蟲（體藍(lán)色、腹末黃色）。本科的特點(diǎn)是鞘翅有金屬反光，觸角線狀，伸向前方，復(fù)眼圓形，靠近前胸（與桑天牛的區(qū)別），附節(jié)隱5節(jié)（與天牛一樣）。在四川一般為害較嚴(yán)重的是藍(lán)尾金花蟲和夏葉蟲。為害：為害桑葉，吃成缺取藍(lán)尾金花蟲，夏葉蟲，觀察其卵，幼蟲，蛹、成蟲的形態(tài)特點(diǎn)，并與夏葉蟲成蟲進(jìn)行比較有何異同。4．象甲科：本科為害桑樹的種類有桑象蟲，桑大象蟲，大灰象蟲，小灰象等，本科的主要特點(diǎn)是成蟲頭的一部分延伸如象鼻子或喙管狀，故又統(tǒng)稱為象鼻蟲。咀嚼式口器。生在喙管端部；觸角彎曲成膝狀，末端三節(jié)膨大成錘，體柔軟、肥胖，幼蟲無足，新月形，稱為象蟲型幼蟲。為害：成蟲在春季食害冬芽及萌發(fā)后的嫩蕊，有時(shí)也吃葉片，葉柄及嫩梢基部，降低發(fā)芽率影響春葉產(chǎn)量.取桑象蟲，小灰象蟲，大象蟲，觀察體型，體色，鱗有無，頭部喙管形狀，觸角節(jié)數(shù)，體色，前胸背板的形狀，（長、寬、心），縱溝刻紋的特點(diǎn)，以及鞘翅顏色形態(tài)、有無后翅等。5．小蠹蟲科：本科為害桑樹的目前只有桑梢小蠹蟲，本科特點(diǎn)是，頭小，前胸大，蓋著頭，為體長的1/3，與翅等寬，觸角錘狀，前足脛節(jié)處有小齒，幼蟲象蟲型。為害：成蟲蛀食桑芽基部及皮層，幼蟲在半枯枝皮下作遂道為害。取桑梢小蠹蟲的被害枝，（半枯枝），用解剖針撥開皮層，觀察其母子坑道（用水沖刷）有無幼蟲、蛹、成蟲，并在解剖鏡下觀察其形態(tài)。（三）同翅目及其它桑樹害蟲同翅目桑樹害蟲都是允吸式害蟲，主要有桑白蚧，桑粉虱、桑木虱、桑葉蟬、大青葉蟬、桑虱等。半翅目桑樹害蟲，只有一個(gè)綠盲蝽，主要是棉花害蟲，在棉、麻區(qū)為害嚴(yán)重。纓翅目桑樹害蟲主要是桑薊馬。雙翅目桑樹害蟲主要是一些癭蚊類，如桑橙癭蚊、桑吸漿蟲，桑葉癭蚊、桑根癭蚊。直翅目：螻蛄其它非昆蟲綱害蟲：蜘蛛：蛛形綱桑樹螨類。腹足綱、柄眼目：灰蝸牛1桑白蚧：別名桑盾蚧，又叫桑蚧殼蟲、黃點(diǎn)蚧殼蟲、樹虱。屬同翅目、盾蚧科。成蟲、若蟲成群寄生桑枝干，以針狀口器插入桑樹內(nèi)皮吸食汁液嚴(yán)重時(shí)整株蓋滿蚧殼，層層疊疊，不見樹皮，被害桑發(fā)育不良，此蟲殖力大，蔓延快，蟲口密度大時(shí)，分泌物還易引起桑膏藥病，除危害桑外，還危害茶、桃、棉、橄欖、苦楝、山椒、梧桐、丁香、楓、槭、櫸、杏、梅、李、蘋果、葡萄等樹種。主要特點(diǎn)：雌雄異體，雌無翅，梨葉形，大小1.4mm,橙黃色，瘤狀觸角，頭胸愈合，胸喙細(xì)長，上有蠟質(zhì)的笠帽狀蚧殼覆蓋，白色。雄具有前翅一對(duì)，體長0.65mm，橙黃色，后翅退化為平衡棒蚧殼長橢圓形、繭形白色，大小0.65mm,環(huán)毛狀觸角，較長，口器退化，腹末有針狀交尾器。取桑白蚧被害忮，用解剖針挑取雌成蟲在解剖鏡下觀察，再取雄成蟲和蛹在顯微鏡下觀察，同時(shí)取卵和若蟲的標(biāo)本觀察。2.桑粉虱：又名白虱、楊梅粉虱。屬同翅目粉虱科。氣候型間隙爆發(fā)昆蟲，在一些地區(qū)，如浙江，四川，云南，在某些年份，夏秋季暴發(fā)成災(zāi)，成片栽植桑園、苗圃地更為嚴(yán)重。成蟲群集桑樹嫩梢產(chǎn)卵，卵孵化后吸食汁液，出現(xiàn)許多小班點(diǎn)，并分泌蜜露污染桑葉，誘發(fā)污葉病，擬青霉菌滋生引發(fā)灰僵病。主要特點(diǎn)：成蟲黃色，翅透明，上覆白粉，前翅1-2條脈，后翅一條脈，頭小球形，復(fù)眼腎臟形，腹部第一節(jié)細(xì)，成柄狀，一齡若蟲扁平，橢圓形，體背有半透明臘質(zhì)覆蓋，觸角、足發(fā)達(dá)，僅一齡爬行活動(dòng)，2-4齡觸角、足退化，固定取食。在四齡蛻皮殼內(nèi)化蛹。取桑粉虱成蟲，幼蟲，蛹，觀察其特點(diǎn)。在觀察中注意蛹?xì)つ┒吮趁婊虺上x腹末，一凹入孔（皿狀孔），皿狀孔的形態(tài)是分種的依據(jù)，桑粉虱皿狀孔兩側(cè)各有一刺，上具二毛，幼蟲和蛹同態(tài)，乳白色，半透明，復(fù)眼紅色，其區(qū)別是，幼蟲兩側(cè)排著36根硬毛，，而蛹具一對(duì)鮮紅復(fù)眼。3.桑木虱：屬同翅目，木虱科。在四川一直稱為歷史性害蟲，主要在川北桑柏混栽區(qū)為害，桑木虱成蟲、若蟲均能為害，吸食嫩梢芽葉，使桑葉卷曲，呈“耳朵葉”或筒狀葉，蠟絲污染下部桑葉及間作物，易誘發(fā)煤病。主要特點(diǎn)：微體昆蟲，成蟲似蟬，頭短闊，觸角長，絲狀，10節(jié)，末節(jié)有剛毛兩根。復(fù)眼紅色，半球形。翅長圓形，半透明，從基部發(fā)出一條縱脈，到中部分三支，每支又兩分叉。前翅有咖啡色斑紋，若蟲黃綠色，觸角短，腹末有很長的蠟絲。取桑木虱成蟲標(biāo)本，在體視顯微鏡下觀察體色（黃褐），體形、復(fù)眼，翅，觸角節(jié)數(shù)及末端剛毛數(shù)。再取若蟲標(biāo)本觀察體色（淡黃）體形扁型，復(fù)眼（紅色球形），翅芽（肥大），觸角節(jié)數(shù)（比成蟲少）。4.葉蟬類：危害桑樹的葉蟬有桑葉蟬、菱紋葉蟬，（凹緣和擬菱紋葉蟬）、大青葉蟬等。均屬同翅目、葉蟬科。成蟲，若蟲均為害，桑葉蟬吸食桑葉汁液，造成葉質(zhì)老化，大青葉蟬除吸食汁液外，還在枝條上產(chǎn)卵（晚秋），形成無數(shù)星月形產(chǎn)卵痕，致使桑樹水分大量蒸發(fā)，降低抗寒能力。兩種菱紋葉蟬，除吸食汁液外，都能傳帶桑樹類菌原體病毒，為典型的媒介昆蟲。本科的特點(diǎn)，微小型昆蟲，前翅革質(zhì)，后翅、頭部、頰脹大，跗節(jié)3節(jié)，后足基部橫向膨大，剛毛狀觸角，善跳躍，脛節(jié)有刺二列，卵均產(chǎn)于植物組織中。桑葉蟬頭頂有兩個(gè)紅斑，前胸兩條紅斑，前翅散生紅線紋，若蟲淡綠色，散生黑線紋。取四斑葉蟬（桑葉蟬）成蟲、若蟲，觀察體色、斑紋、觸角、頭喙以及附節(jié)數(shù)目。菱紋葉蟬，頭部紅色或綠色，前胸紅褐或單綠。翅：前翅后緣有三角形褐紋，靜止時(shí)兩翅合攏成菱形斑。5．其他桑樹害蟲（1.）桑薊馬：桑薊馬屬纓翅目薊馬科，微型昆蟲，以成蟲、若蟲，銼吸桑葉汁液，造成許多褐色小點(diǎn)，使桑葉老化，夏秋季危害嚴(yán)重。其特點(diǎn)：成蟲體細(xì)長，淡黃色，兩對(duì)翅狹長，端部尖銳，邊緣有整齊的纓狀緣毛，口器銼吸式，單眼成品字型排列，紅色，在兩復(fù)眼間（單眼丁狀、角狀，其形態(tài)是分種的依據(jù)，觸角6——8節(jié)，念珠狀，1-2節(jié)形成端刺，3-4節(jié)上有感覺器，跗節(jié)2節(jié)，中墊變?yōu)榭缮炜s的泡足，兩爪末退化，腹末圓錐形，雌腹面有鋸齒狀產(chǎn)卵管，產(chǎn)卵管向下彎曲，兩側(cè)有齒狀突起，若蟲與成蟲相似，略小，無翅。取桑薊馬成蟲、若蟲，玻片標(biāo)本，在顯微鏡下觀察，體形，單眼，觸角，纓翅，泡足，雌成蟲的鋸齒狀產(chǎn)卵器。（2）癭蚊類：為害桑樹的癭蚊有桑橙癭蚊，桑吸漿蟲，葉癭蚊（黃癭蚊）、根癭蚊等，均屬雙翅目癭蚊科。桑橙癭蚊：桑癭蚊（四川）以幼蟲為害桑樹嫩芽，使頂芽彎曲。葉癭蚊：（為害葉片，幼蟲在桑葉脈處吸食，刺激寄主形成白色隆起的蟲癭，導(dǎo)致葉片畸形。根癭蚊：以幼蟲集中在幼苗根頸部為害。輕者葉色變黃，重者根腐爛，折斷。本科的特點(diǎn)：成蟲體纖細(xì)，似蚊，觸角長，念珠環(huán)，毛狀（雄），其節(jié)數(shù)，形態(tài)，環(huán)毛是分種的依據(jù)。桑癭蚊的觸角雌14節(jié)，雄26節(jié)，啞鈴狀，有環(huán)毛，前翅蠟質(zhì)，匙形，有四長脈，后翅退化為平衡棒，3~5根翅脈，雌有一條比體長，能伸縮的產(chǎn)卵管。幼蟲仿錘形，蛆形，13節(jié)，頭退化，后端純，腹部腹板上有Y形劍骨片，是彈跳器官，其形狀也是分種的依據(jù)。取桑癭蚊成蟲、幼蟲標(biāo)本，在顯微鏡下觀察成蟲形態(tài)，體色觸角形狀，節(jié)數(shù)，環(huán)毛，翅形，翅脈，產(chǎn)卵管有無等，然后，取幼蟲在顯微鏡下觀察胸部、劍骨片的形態(tài)及體形、體色等，并與其它幾種癭蚊標(biāo)本進(jìn)行比較，找出形態(tài)上的差異。（3）紅蜘蛛：為害桑樹的葉螨過去統(tǒng)稱為紅蜘蛛，主要有桑始葉螨、神澤葉螨、朱砂葉螨（紅葉螨）、二斑葉螨（棉葉螨）、柑橘全爪螨、側(cè)多食跗線螨（荼黃蜘蛛）。前五種屬葉螨科，后一種屬跗線螨科。為害：成螨、幼螨、若螨均在葉背取食汁液，沿葉脈為害，被害后并在葉面出現(xiàn)紅斑，嚴(yán)重時(shí)全葉紅褐枯焦，不能飼蠶，遠(yuǎn)觀如火燒狀。螨類的共同特點(diǎn)，與昆蟲綱的區(qū)別是成蟲分段不明顯，無翅，四對(duì)足，其發(fā)育經(jīng)過為卵-幼螨（三對(duì)足）-若螨（四對(duì)足）-成螨。體橢圓形，由四個(gè)段組成。腭體段相當(dāng)于頭部，由口器和一對(duì)觸須組成。前肢體段，指前面兩對(duì)足的部分，末體段相當(dāng)于腹部，有肛門和生殖孔。無翅，無復(fù)眼，刺吸式口器，體背體毛排列有序，雌26根，雄28根。先取桑始葉螨被害葉，觀察被害狀，在顯微鏡下觀察各蟲態(tài)（卵：球形，淡黃色，幼螨：檸檬色，三對(duì)足，若螨：淡黃色4對(duì)足，成蟲淡黃綠色、暗綠色污斑）。再挑取桑始葉螨在顯微鏡下觀察體背毛序。（4）螻蛄、蝸牛：為害桑樹的螻蛄屬直翅目螻蛄科,成蟲、若蟲咬食幼苗、嫩莖或剛播下的種子，還在表土內(nèi)穿行，形成縱橫的隧道，使幼苗根脫離表土而枯死。形態(tài)特點(diǎn)：全體成仿錘形，前足為開掘足，前翅短，鱗片狀，覆蓋于腹部一半，后翅扇形，折疊前翅下，有一對(duì)較長的尾須。若蟲近似成蟲，但無翅，腹肥大，色淺，隨著齡期增長，色逐漸加深。灰蝸牛：俗名：蜓蚰螺、蜓蜓螺。屬軟體動(dòng)物門腹足綱、柄眼目蝸?？?。春季食害桑樹芽葉，初孵幼蟲取食葉肉，留一層表皮，稍長后，食成缺刻或孔洞。蝸牛爬過的地方留有白色膠質(zhì)痕跡及糞便，使葉質(zhì)降低。形態(tài)特點(diǎn)：成體整個(gè)身體在貝殼內(nèi)，貝殼橢圓形，殼頂尖（在體的右側(cè)）自左向右旋轉(zhuǎn)，有的殼上還有不規(guī)則的深灰色斑紋。體仿錘形，頭部有兩對(duì)觸角，前觸角較短，后觸角較長，端部有眼。生殖孔在頭部右后下側(cè)，呼吸孔在體背中央右側(cè)與貝殼連接處，稍后方即為排泄孔。卵：圓球形，乳白色，有光澤，通常10~20粒以上粘集，成卵堆。幼體：初孵1mm,貝殼淡褐色，一個(gè)月后貝殼右旋增大，6個(gè)月后貝殼增加4.5~5旋，食量顯著增加，7~8個(gè)月之后變?yōu)槌审w，貝殼達(dá)5.5~6旋。取螻蛄、蝸牛標(biāo)本，觀察。四作業(yè)1．列表說明桑毛蟲、桑螟、野蠶、桑尺蠖的的形態(tài)特征。2．列表說明天牛，金龜子，葉甲，象蟲等觸角，幼蟲類型，以及口器，復(fù)眼形態(tài)。3．繪桑天牛，蘭尾葉甲，桑象蟲，金龜子成蟲，幼蟲形態(tài)圖。4．列表說明桑癭蚊、桑薊馬、桑粉虱的形態(tài)特征。實(shí)驗(yàn)六桑樹病蟲標(biāo)本采集與制作一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟∠x標(biāo)本是病、蟲性狀及分布的永久記載，采集、整理、保存質(zhì)量優(yōu)良的病、蟲標(biāo)本，對(duì)教學(xué)、科研、科普宣傳、經(jīng)驗(yàn)交流等都具有重要意義。通過實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)和熟悉病蟲，掌握病蟲標(biāo)本采集與制作的基本技術(shù)。二．實(shí)驗(yàn)材料及用具1．材料；普通防腐浸漬液、保色標(biāo)本浸漬液、酒精、冰醋酸、甲醛、醋酸銅、亞硫酸、樟腦丸、蜂蠟、松香。2．用具：毒瓶、捕蟲網(wǎng)、采集箱、標(biāo)本夾、麻繩、草紙、標(biāo)本采集記錄本、放大鏡、鉛筆、塑料袋、大小試管、吸水紙、三角紙袋、標(biāo)簽、標(biāo)本瓶、二重皿、載玻片、蓋玻片、昆蟲針、展翅板、解剖針、鑷子、解剖刀、解剖鏡、酒精燈、玻璃缸、電爐、桑刀、桑剪、鏟子。三．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及作法1．病蟲標(biāo)本的采集和制作：（1）采集；采集前做好用具及藥劑的準(zhǔn)備工作。采集中注意：①桑樹病蟲害標(biāo)本主要有病根、莖、葉、椹等，要采集典型的，具有代表性的標(biāo)本，要有各受害部位在不同時(shí)期的典型癥狀，采集數(shù)量不宜太少，真菌病害上應(yīng)有子實(shí)體更好。②能產(chǎn)生子實(shí)體的真菌病害，應(yīng)注意采集老葉，（因?yàn)槔先~上病菌子實(shí)體比較成熟），許多真菌的有性階段只有在枯死的枝葉上出現(xiàn)，而無性階段大多在活體中可以找到，病毒病害應(yīng)盡量采集頂梢和嫩葉。③如對(duì)病害還不是很熟悉，采集病株和健株進(jìn)行比較。④每種標(biāo)本采集的數(shù)量不能太少，在制作和鑒定過程中常有損失，并且多余的標(biāo)本可以交流。⑤應(yīng)嚴(yán)加選擇，每一標(biāo)本上的病害種類力求單純，即每一標(biāo)本只有一種病害。⑥不同種類的病害標(biāo)本，嚴(yán)禁混放在一起，必須分別包裝妥放，以免病原混雜，影響鑒定。⑦采集時(shí)對(duì)每種標(biāo)本均需作記錄，隨即編號(hào)初步整理。對(duì)于病葉、病梢易枯萎的標(biāo)本，要隨采隨壓，病根、莖、枝可放入采集箱帶回整理。⑧標(biāo)本采回后，應(yīng)及時(shí)處理，不能久放。（2）蠟葉標(biāo)本的制作：邊采邊壓，帶回室內(nèi)后，立即進(jìn)行整理，使葉片平整，新梢上枝葉排列有序，干燥越快，越能保持標(biāo)本原色，因此，注意未干的標(biāo)本要勤換紙，特別是最初幾天，每天1次，稍干后可隔2~3天換一次。（3）浸漬標(biāo)本的制作：病根、莖、枝、椹等可制成浸漬標(biāo)本保存，浸漬標(biāo)本保存占的面積較大，保存的時(shí)間有限，浸漬標(biāo)本多用于展覽、教學(xué)示范等。浸漬前用清水輕輕洗去泥沙，臟物、并進(jìn)行適當(dāng)修剪，即可投入浸漬液中。浸漬液種類繁多，有專門防腐用的，亦有保持標(biāo)本原色的，可根據(jù)需要選擇。下面介紹幾種標(biāo)本浸漬液配方：①一般防腐浸漬液：福爾馬林50ml95%酒精300ml蒸餾水2000ml亦可單用5%福爾馬林或75%酒精②保色標(biāo)本浸漬液綠色：硫酸銅及亞硫酸浸漬液:將標(biāo)本浸于5%硫酸銅溶液6-24小時(shí),或更長,待標(biāo)本全部轉(zhuǎn)至本色為上,即可取出,用清水漂洗4-5小時(shí),然后保存于亞硫酸液中,(亞硫酸液可用濃硫酸20ML,加水1000ML稀釋,然后加亞硫酸鈉16g,配好的溶液可以貯存,此法用于保存桑葉,青椹效果較好.但要注意亞硫酸易揮發(fā),須注意密封并口,必要時(shí)每年換一次亞硫酸浸漬液.醋酸銅浸漬液此液保存效果較好,特點(diǎn)是保存的標(biāo)本色澤稍有些偏蘭和須要煮過.方法是將醋酸銅結(jié)晶逐步加在50%的醋酸溶液中,直至飽和為止.將原液稀釋3-4倍使用.稀釋度因標(biāo)本色澤深淺有不同,淺色宜稀,深色可稍濃.將稀釋液煮沸,放入標(biāo)本,繼續(xù)加熱,標(biāo)本的綠色開始退卻,經(jīng)3-4分鐘綠色又恢復(fù),至接近標(biāo)本原色為止,取出用清水洗凈,保存于5%的福爾馬林溶液中,也可壓制成干燥標(biāo)本.黃色,桔紅色標(biāo)本浸漬液保持果實(shí)的紅黃色,可用亞硫酸溶液,方法是將含5-6%.SO2的亞硫酸配成4-10%水溶液(含S020.2-0.5%)作浸漬液,將要保存的標(biāo)本放入其中,為增強(qiáng)防腐作用,可加少量酒精,果實(shí)浸漬若發(fā)生崩裂可加少量甘油.真菌色素保存液:真菌色素不溶于水的,可用硫酸鋅,福爾馬林浸漬液保存,用此液保存時(shí),標(biāo)本要新鮮,直接浸漬保存在原液中.硫酸鋅福爾馬林浸漬液:硫酸鋅25g福爾馬林10ML水1000ML真菌色素溶于水的可用下述浸漬液保存,其原理是利用其中的醋酸鉛沉淀花青素.標(biāo)本洗凈后,保存原液中,中性醋酸鉛10g冰醋酸10ml醋酸汞1g95%酒精1000ml2.昆蟲標(biāo)本的采集與制作(1)主要用具的制作與使用①捕蟲網(wǎng):是捕捉飛行性昆蟲最常用的工具,用紗布或白布作成,捕蟲網(wǎng)圈經(jīng)為32cm,用粗鐵絲作口徑,袋長66cm,袋寬10cm,柄長100-150cm,制作時(shí),將紗布或白布剪成四塊如圖,縫合即成.②毒瓶:用于捕捉的害蟲殺生用.毒瓶制作方法是選擇250~500ml的磨口瓶,在瓶底放一層氰化鉀,約1cm厚,壓緊,上放1.5cm厚的木屑,壓實(shí),木梢上再放一層熟石灰,上放一層濾紙或軟紙片.用滴管或毛筆滴幾滴水于濾紙上,使所有的石灰都吸足水,但不宜過量,幾小時(shí)后,石膏結(jié)塊即可使用.瓶內(nèi)還可以放一些松軟的紙條,以免昆蟲在瓶內(nèi)相互碰撞.毒瓶內(nèi)的氰化鉀劇毒,開蓋時(shí)注意吸入中毒.昆蟲在毒瓶中死亡后,取出,以免昆蟲體軀發(fā)黑或變硬.臨用時(shí)毒瓶內(nèi)也可以用綿花蘸少許敵敵畏于瓶底,上墊紙片隔開.③酒精瓶:用標(biāo)本瓶或試管內(nèi)盛75%酒精,保存幼蟲、小甲蟲或蟲卵。④鐵盒：內(nèi)放與盒等大的紙片，將殺死的昆蟲投入其中保存。⑤三角紙包：用以暫時(shí)保存蛾、蝶類，一般用堅(jiān)韌的表面光滑的吸水紙制成。⑥試管或小瓶：用來裝放各種活的或已毒死的小蟲、卵。⑦采集袋：用來裝放外出采集時(shí)必須帶的工具，⑧活蟲采集器：用來裝放需要帶回飼養(yǎng)的活蟲，⑨昆蟲針：用以固定蟲體位置,作針刺標(biāo)本用。昆蟲針有粗細(xì)7種，即：1，2，3，4，5，0，00號(hào)，以5號(hào)最粗00最細(xì)，此外倘僅有12MM長的微針，以1，2，3，4號(hào)最為常用。⑩三級(jí)板（刺蟲臺(tái)）：用以固定針刺昆蟲的高度，一般分三級(jí)，每級(jí)高度0.80M，每級(jí)中央有一小孔，制作時(shí)可將插了蟲的針倒過來，放在三級(jí)臺(tái)的第一級(jí)小孔中，使蟲背緊貼臺(tái)面，其上部留針的長度便是8MM。⑾展翅板：是用較軟的木材制成長約1尺，兩邊的木條寬三寸，略向內(nèi)傾斜，其中一條可以活動(dòng),以調(diào)節(jié)板間縫隙寬度。兩板間溝槽裝軟木條，展翅時(shí)，把已插在軟木上，使蟲體背面與兩側(cè)木板平行，并調(diào)節(jié)活動(dòng)的木板,使寬度與蟲體接近，然后用小號(hào)昆蟲針，插在較粗的翅脈上，將左右前翅向前拉。鱗翅目以兩前翅后緣呈一直線為準(zhǔn)。蜻蜓目、脈翅目以后翅前緣呈一直線為準(zhǔn),前翅后緣稍向前傾，蠅類、蜂類以前翅的尖端與頭相齊為準(zhǔn)，把前翅暫時(shí)固定在展翅板上，再拉兩后翅到前緣，壓在前翅下面，左右對(duì)稱，充分展平。最后以光滑的紙條或塑料膜條壓住，以大頭針固定，放于干燥處，干燥后再取下裝盒。⑿幼蟲吹脹器：主要用于制幼蟲標(biāo)本。吹脹器可分兩部分：一為幼蟲吹脹器,一為幼蟲干燥器，干燥器的制作是用鐵棍作好一個(gè)架子，上面放一個(gè)洋燈罩，為了防止蟲烤焦，可在燈罩內(nèi)放些干砂，下放一酒精燈加熱。吹脹器也可自己制作，即將一根玻管在酒精燈上燒紅后慢慢拉長成細(xì)管，然后折斷，在管子的一端裝一個(gè)橡皮管，再在玻管的適當(dāng)位置上裝一個(gè)厚鐵皮夾便可使用。(2)昆蟲的采集方法:首先要掌握昆蟲的習(xí)性，了解昆蟲最喜歡棲息的場所，分不同昆蟲對(duì)象采用不同的采集方。網(wǎng)捕、振落，燈光誘集，或用手捕捉，用試管或指形管套捉等。采集的昆蟲，立即放入毒瓶殺生，殺死后隨即取出，幼蟲或小甲蟲可投入浸漬液中，蛾、蝶類可放入三角紙包，成蟲稚蟲，若蟲也可放入密閉的標(biāo)本盒中保存。方法是：在盒底鋪一層平整的棉花，將蟲放在棉花上，其上再放一層紙，以記錄采集情況，一層放好后，再鋪一層棉花，棉花上再放一層蟲，直到標(biāo)本盒放滿為止。帶回室內(nèi)整理，并放干燥環(huán)境保存，以免發(fā)霉。（3）昆蟲標(biāo)本的制作：①針刺標(biāo)本的制作：此法用以制成蟲標(biāo)本。其方法是以昆蟲針直接插入昆蟲（成蟲）胸部的方法，插針應(yīng)在蟲體未變硬時(shí)進(jìn)行，已變硬的昆蟲須軟花后再插，否則不易插進(jìn)，易碎。插入部位，因蟲而定，一般半翅目從中胸小盾片中央垂直插入，鞘翅目從右翅鞘基部，鱗翅目和膜翅目從中胸中央插入，直翅目從前胸背板右面插入，鱗翅目針刺后，并將四翅展于展翅板上，膜翅目及其它細(xì)腰昆蟲，針插后，須用硬紙或針使腹部與胸部成一直線，待全干后方能除去。微小昆蟲如粉虱，葉蟬，寄生蜂類，可用垂插法與三角紙點(diǎn)膠法來制作。重插法是先用微針（00號(hào)）從蟲的腹面插入固定在一塊長方形小軟木上，再按其它昆蟲針插法，將軟木片插在普通的昆蟲針上，三角紙點(diǎn)膠法是將特制的三角紙（用較好的硬紙或用舊照相膠片洗凈后，因其透明比紙更好）插在昆蟲針上，其尖端粘少許萬能膠，貼在蟲體的前足與中足間。針插標(biāo)本要注意插針一定要與蟲體垂直。昆蟲在蟲針上要有一定的高度，一般應(yīng)是從針尖末端到蟲體背面的距離等于三級(jí)臺(tái)第一級(jí)（8MM），每一蟲針上應(yīng)有標(biāo)簽，注明采集日期，地點(diǎn)，采集人，昆蟲學(xué)各，中名等。蟲針作好后插在軟木板上，放于干燥器內(nèi)干燥，待徹底干燥后，將軟木板連蟲針放于標(biāo)本盒內(nèi)。②昆蟲浸漬標(biāo)本的制作：一般昆蟲卵，幼蟲，身體柔軟或細(xì)小的成蟲，蛹等多作成浸漬標(biāo)本保存。采集幼蟲標(biāo)本,首先餓1~2天,讓體內(nèi)糞便排完,再放在開水中煮至蟲體硬直為止.體大皮厚的需煮5~10min,小而軟的幼蟲煮2~3min,未經(jīng)煮過的標(biāo)本,放入保存液后蟲體易收縮變形.煮好后立即投入標(biāo)本瓶保存液中,但體大的蟲子,蟲體含水多,浸泡后要更換幾次浸漬液,才能永久保存.身體柔嫩或體軀細(xì)小的昆蟲成蟲或卵、幼蟲、蛹多用保存液浸在試管中。浸漬液種類很多，主要的介紹如下：酒精浸漬液：75%酒精+0.1~1%甘油.可浸漬一般標(biāo)本.FAA：冰醋酸5ml+福爾馬林5ml+酒精90ml,最常用,效果好.保色標(biāo)本浸漬液:一般保色標(biāo)本浸漬液:白糖5g+冰醋酸5ml+福爾馬林4ml+酒精6ml+蒸餾水100ml。此液保存標(biāo)本不收縮，不變黑，浸漬液不沉淀，對(duì)保存綠色、黃色紅色幼蟲有一定效果，但對(duì)多種綠色幼蟲效果較差。綠色幼蟲浸漬液：硫酸銅10g+蒸餾水1000ml，將此液煮沸后投入綠色幼蟲，煮時(shí)開始退去原色，后恢復(fù)到原來色彩，即取出用清水洗凈，浸入5%福爾馬林溶液中。黃色幼蟲浸漬液：無水酒精6ml+冰醋酸1ml+氯仿3ml，先用此液浸24h，再移入75%酒精中保存。紅色幼蟲浸漬液：硼砂2g+50%酒精10ml，將幼蟲直接投入保存。（4）病蟲標(biāo)本的保存：已作好的病蟲標(biāo)本，應(yīng)按病蟲分類