新冠肺炎實驗室檢測課件

新冠肺炎實驗室檢測

一、標(biāo)本采集二、新型冠狀的實驗室檢測三、病原生物安全實驗活動要求主要內(nèi)容（一）采集對象．新型冠狀觀察病例及需要進行新型冠狀診斷或鑒別診斷者；其它需要進一步篩查檢測的研究材料（如溯源分析）。標(biāo)本采集（二）標(biāo)本采集要求。從事新型冠狀檢測標(biāo)本采集的技術(shù)人員應(yīng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)（培訓(xùn)合格）。住院病例的標(biāo)本由所在醫(yī)院醫(yī)護人員在當(dāng)?shù)丶部貦C構(gòu)專業(yè)人員指導(dǎo)下采集。密切接觸者標(biāo)本由當(dāng)?shù)丶部貦C構(gòu)負(fù)責(zé)采集。根據(jù)實驗室檢測工作的需要，可結(jié)合病程及研究需求多次采樣。標(biāo)本采集

根據(jù)新型冠狀病例特點實驗室檢查：發(fā)病早期白細(xì)胞總數(shù)正?；驕p低，淋巴細(xì)胞計數(shù)減少。

部分患者出現(xiàn)肝酶、肌酶增高。多數(shù)患者C反應(yīng)蛋白和血沉升高，降鈣素原正常。嚴(yán)重者D-二聚體升高，血清淀粉樣蛋白應(yīng)該升高。以上檢測指標(biāo)的血樣護士采集后盡快送檢驗科。（三）標(biāo)本采集種類（針對新型冠狀疑似病例）

?采集的臨床標(biāo)本種類雖然有咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、深咳痰液、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液等

鑒于生物安全考慮只采集病人的咽拭子和急性期血清，接診醫(yī)護人員在白銀區(qū)疾控中心專業(yè)人員指導(dǎo)下采集樣本，并由區(qū)疾控工作人員直接帶走送白銀市疾控。（四）標(biāo)本采集方法（限于咽拭子）

咽拭子：用2根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子同時擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將兩根拭子頭浸入含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。（五）標(biāo)本包裝．標(biāo)本采集送達(dá)后應(yīng)在生物安全柜內(nèi)分裝成三份（由市疾控完成）。一份送省疾控中心檢測用，一份送國家疾控中心病預(yù)防控制所檢測，一份保存以備復(fù)核。所有標(biāo)本應(yīng)放在大小適合的帶螺旋蓋、耐冷凍的樣本采集管里，擰緊。容器外注明樣本編號、種類、姓名及采樣日期。將密閉后的標(biāo)本放入大小合適的塑料袋內(nèi)密封，每袋裝一份標(biāo)本。（六）標(biāo)本保存．用于分離和核酸檢測的標(biāo)本應(yīng)盡快進行檢測，

1.24小時內(nèi)能檢測的標(biāo)本可置于4°C保存；

2.24小時內(nèi)無法檢測的標(biāo)本則應(yīng)置于-70°C或以下保存（如無-70°C保存條件，則于-20°C冰箱暫存）。

3.血清可在4°C存放3天，可在-20°C以下長期保存。

4.標(biāo)本運送期間應(yīng)避免反復(fù)凍融，并應(yīng)設(shè)立專柜單獨保存標(biāo)本。（七）標(biāo)本送檢．樣本采集后應(yīng)盡快送往市疾控進行核酸篩查檢測當(dāng)咽拭子或血清運往實驗室的運輸中出現(xiàn)耽擱時，適當(dāng)?shù)牡蜏乇４嫣幚硎欠浅Ｖ匾?，建議在能獲得干冰的地方采用干冰保藏運輸樣本二、新型冠狀的實驗室檢測目前監(jiān)測方法主要有：1.新型冠狀全基因測序鑒定2.實時熒光定量RT-PCR監(jiān)測技術(shù)3.的分離市疾控：實時熒光定量RT-PCR監(jiān)測（收到標(biāo)本后3小時完成）在實驗室要確認(rèn)一個病例為陽性，滿足其中一個條件即可：（一）同一份標(biāo)本中新型冠狀（五）檢測項目．5.I、新型冠狀核酸測定(rRT-PCR方法）推薦選用針對新型冠狀的ORFlab、E、N引物和探針，具體可參考上海輝睿生物科技有限公司、上海捷諾生物科技有限公司、上海伯杰醫(yī)療科技有限公司的單通道、雙通道或多通道檢測試劑盒。5.2、結(jié)果判斷：陰性：無Ct值或Ct為40。陽性：Ct值(37, 可報告為陽性?？梢桑篊t值在37-40之間，建議重復(fù)實驗，若重做結(jié)果Ct值<40,擴增曲線有明顯起峰，該樣本判斷為陽性，否則為陰性。根據(jù)目前掌握的新型冠狀的生物學(xué)性狀、傳播特性、致病性、臨床資料等信息，考慮到新型冠狀聚集性發(fā)病且有重癥病例，并有死亡病例的特點，實驗活動暫時按照病原微生物危害程度分類中第二類病原微生物進行管理，具體要求如下：三、病原生物安全實驗活動要求（一）培養(yǎng)。指的分離、培養(yǎng)、鑒定、中和試驗、活及其蛋白純化、凍干以及產(chǎn)生活的重組試驗等操作。利用活或其細(xì)胞（或細(xì)胞提取物），不經(jīng)滅活進行的生化分析、血清學(xué)檢測、免疫學(xué)檢測等操作視同培養(yǎng)。上述操作應(yīng)在BSL-3實驗室進行。使用培養(yǎng)物提取核酸，裂解劑或滅活劑的加入必須在與培養(yǎng)等同級別的實驗室和防護條件下進行，裂解劑或滅活劑加入后可比照未經(jīng)培養(yǎng)的性材料的防護等級進行操作。BSL-3實驗室應(yīng)具有開展相應(yīng)活動的資質(zhì)。（二）動物實驗．

指以活動物的實驗。應(yīng)在ABSL-3實驗室操作。ABSL-3實驗室應(yīng)具有開展相應(yīng)活動的資質(zhì)。（三）未經(jīng)培養(yǎng)的性材料的操作．指未經(jīng)培養(yǎng)的性材料在采用可靠的方法滅活前進行的抗原檢測、血清學(xué)檢測、核酸檢瀏、生化分析等操作，應(yīng)在BSL-2實驗室操作。如果疫情發(fā)生變化，出現(xiàn)死亡病例，該項檢測應(yīng)在加強型BSL-2實驗室操作。未經(jīng)可靠滅活或固定的人和動物組織標(biāo)本因含量較高，其操作的防護級別應(yīng)比照培養(yǎng)。（四）滅活材料的操作．指性材料或活在采用可靠的方法滅活后進行的抗原檢測、血清學(xué)檢測、核酸檢測、生化分析、分