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PAGEPAGE3中藥鑒定學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)內(nèi)容提要《中藥鑒定學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》是21世紀(jì)全國高等中醫(yī)藥院校的配套教材。為了加強(qiáng)其適用性,全書按基本實(shí)驗(yàn)和選做實(shí)驗(yàn)兩大部分撰寫,對教育發(fā)展不平衡和教學(xué)計(jì)劃的調(diào)整可起到彈性調(diào)節(jié)作用。實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容均結(jié)合中藥研究、生產(chǎn)和臨床應(yīng)用的需要設(shè)計(jì),以方法學(xué)為基本理念,尤其強(qiáng)調(diào)中藥品種和質(zhì)量鑒定方法的基本原理、基本技能、基本技術(shù),并注重實(shí)驗(yàn)用單味中藥的代表性和指導(dǎo)性,首次在該教材中體現(xiàn)了中藥材及其制劑鑒定指標(biāo)的相關(guān)性和整體觀的科學(xué)思路,具有較大的知識涵蓋面和創(chuàng)新性。本教材的實(shí)驗(yàn)教學(xué)部分共28個(gè)實(shí)驗(yàn),參考教學(xué)時(shí)數(shù)為128學(xué)時(shí),其中基本實(shí)驗(yàn)76學(xué)時(shí)、選做實(shí)驗(yàn)52學(xué)時(shí),各院校可根據(jù)實(shí)際教學(xué)條件和教學(xué)計(jì)劃的調(diào)整選擇授課。附錄部分收載了部分鑒定方法的關(guān)鍵技術(shù),并附有重點(diǎn)講授和掌握的97種重點(diǎn)中藥材的彩色圖譜,供學(xué)生課前預(yù)習(xí)和課后復(fù)習(xí)參考。本教材是中藥類專業(yè)本科教育的教學(xué)用書,亦可作為藥學(xué)類、制藥類等相關(guān)專業(yè)各個(gè)層次教學(xué)的選用教材,也是從事中藥工作各類專業(yè)人員必備的參考書。前言為適應(yīng)我國高等中醫(yī)藥教育改革和發(fā)展的需要,根據(jù)教育部《關(guān)于“十五”期間普通高等教育教材建設(shè)與改革的意見》精神,組織編寫了本教材。在全國高等中醫(yī)藥院校21世紀(jì)課程教材編寫的基本原則指導(dǎo)下,本教材的編寫以全面推進(jìn)素質(zhì)教育為綱,力求體現(xiàn)了以下特點(diǎn):即突出中醫(yī)藥理論體系的特色、反映中醫(yī)藥教學(xué)改革和學(xué)術(shù)發(fā)展的成果、注重教材整體內(nèi)容的優(yōu)化、體現(xiàn)方法學(xué)的創(chuàng)新性、實(shí)踐性和課程體系改革的方向?!吨兴庤b定學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》是21世紀(jì)全國高等中醫(yī)藥院校的配套教材。根據(jù)中醫(yī)藥現(xiàn)代化人才培養(yǎng)、中藥國際化和產(chǎn)業(yè)化快速發(fā)展的需要,本教材增加了生物鑒定法等新方法、新技術(shù)、新知識。為了加強(qiáng)其適用性,全書按基本實(shí)驗(yàn)和選做實(shí)驗(yàn)兩大部分撰寫,對教育發(fā)展不平衡和教學(xué)計(jì)劃的調(diào)整可起到彈性調(diào)節(jié)作用。實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容均結(jié)合中藥研究、生產(chǎn)和臨床應(yīng)用的需要設(shè)計(jì),以方法學(xué)為基本理念,尤其強(qiáng)調(diào)中藥品種和質(zhì)量鑒定方法的基本原理、基本技能、基本技術(shù),并注重實(shí)驗(yàn)用單味中藥的代表性和指導(dǎo)性,首次在該教材中體現(xiàn)了中藥材及其制劑鑒定指標(biāo)的相關(guān)性和整體觀的科學(xué)思路。教學(xué)內(nèi)容由淺入深、重點(diǎn)突出、詳略得當(dāng),全面系統(tǒng),具有較大的知識涵蓋面和創(chuàng)新性,體現(xiàn)了培養(yǎng)學(xué)生分析問題和解決實(shí)際問題能力的教學(xué)特點(diǎn)。本教材的實(shí)驗(yàn)教學(xué)部分包括基原鑒定法、性狀鑒定法、顯微鑒定法、理化鑒定法、生物鑒定法的28個(gè)實(shí)驗(yàn),參考教學(xué)時(shí)數(shù)為128學(xué)時(shí),其中基本實(shí)驗(yàn)76學(xué)時(shí)、選做實(shí)驗(yàn)52學(xué)時(shí),各院??筛鶕?jù)實(shí)際教學(xué)條件和教學(xué)計(jì)劃的調(diào)整選擇授課。附錄部分收載了部分鑒定方法的關(guān)鍵技術(shù),并附有重點(diǎn)講授和掌握的97種重點(diǎn)中藥材的彩色圖譜,供學(xué)生課前預(yù)習(xí)和課后復(fù)習(xí)參考。為了提高本教材內(nèi)容的科學(xué)性、先進(jìn)性、適用性和準(zhǔn)確性,本書收載了20世紀(jì)末中藥鑒定的最新方法與技術(shù)成果,為了達(dá)到優(yōu)勢互補(bǔ)、增強(qiáng)教教材內(nèi)容成的熟性,特聘請了國內(nèi)部分知名專家對某些章節(jié)和品種的有關(guān)內(nèi)容進(jìn)行了執(zhí)筆和審校。特聘專家編委有:張繼副主任藥師(中國生物藥品檢定所),陳代賢主任藥師(大連市藥品檢驗(yàn)所)、蔡少青教授(北京大學(xué))、肖永慶教授(中國中醫(yī)研究院)、張思巨教授(中國中醫(yī)研究院)、孫素琴副教授(清華大學(xué))、屠鵬飛教授(北京大學(xué))、徐秉玖教授(北京大學(xué))、鄭毅男教授(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué))、馬小軍研究員(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué))、肖小河主任藥師(中國人民解放軍總醫(yī)院)、徐鴻華教授(廣州中醫(yī)藥大學(xué))、丁平副教授(廣州中醫(yī)藥大學(xué))、李守拙教授(承德醫(yī)學(xué)院)、孫靜蕓教授(浙江中醫(yī)中藥研究院)、楊書斌教授(山東中醫(yī)藥研究所)、劉延澤教授(河南中醫(yī)學(xué)院)、白根本副教授(北京中醫(yī)藥大學(xué))等。在編寫過程中,還得到了各位編委所在單位的支持和幫助,在此一并致以衷心地感謝。本教材是中藥類專業(yè)本科教育的教學(xué)用書,亦可作為藥學(xué)類、制藥類等相關(guān)專業(yè)各個(gè)層次教學(xué)的選用教材,也是從事中藥工作各類專業(yè)人員必備的參考書。由于時(shí)間倉促和水平有限,教材中難免存在有缺點(diǎn)和錯(cuò)誤,敬請各位專家和讀者提出寶貴意見,以便重修并臻于完善。北京中醫(yī)藥大學(xué)目錄1基本實(shí)驗(yàn)…………1.1中藥顯微鑒定基本技術(shù)…………………1.2中藥的化學(xué)定性鑒別…………1.3中藥的薄層色譜鑒定…………1.4根及根莖類中藥材性狀及顯微鑒定……………1.4.1雙子葉和蕨類植物根及根莖類中藥………………1.4.2雙子葉植物根及根莖類中藥……1.4.3單子葉植物根及根莖類中藥……1.5莖、木類中藥材的性狀及顯微鑒定………………1.6皮類中藥材的性狀及顯微鑒定…………………1.7葉及花類中藥材的性狀及顯微鑒定……………1.8果實(shí)類中藥材的性狀及顯微鑒定…………………1.9種子類中藥材的性狀及顯微鑒定…………………1.10全草類中藥材的性狀及顯微鑒定…………………1.11藻菌、地衣、樹脂及其他類中藥材的性狀及顯微鑒定…………1.12動(dòng)物類中藥材的性狀及顯微鑒定…………1.13礦物類中藥材的性狀及顯微鑒定………………1.14粉末性中成藥的顯微鑒定…………………1.15注射用雙黃連的鑒定……………2選做實(shí)驗(yàn)……………………2.1中藥的光譜鑒定…………………2.1.1熒光鑒定…………………2.1.2可見-紫外光譜鑒定………………2.1.3紅外光譜鑒定…………………2.2中藥的電泳鑒定…………………2.3鹿茸的特異PCR鑒定……………2.4中藥的常規(guī)檢測………………2.4.1水分測定………………2.4.2灰分測定………………2.4.3浸出物的含量測定………………2.4.4揮發(fā)油的含量測定………………2.5中藥有害物質(zhì)檢測………………2.5.1農(nóng)藥殘留量的檢測………………2.5.2重金屬的檢查………………2.5.3砷鹽的檢查………………2.6大黃中蒽醌成分的含量測定—高效液相色譜法…2.7紫草中羥基萘醌總色素的含量測定—可見分光光度法………………2.8大青葉中靛玉紅的含量測定—薄層掃描法……………2.9淫羊藿中總黃酮的含量測定—紫外分光光度法…………2.10斑蝥中斑蝥素的含量測定—?dú)庀嗌V法…………………2.11朱砂中硫化汞的含量測定…………………2.12未知粉末中藥顯微鑒定………………2.13中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂…………………實(shí)驗(yàn)課時(shí)分配表1.基本實(shí)驗(yàn)76學(xué)時(shí)1.1中藥顯微鑒定基本技術(shù)6學(xué)時(shí)1.2中藥的化學(xué)定性鑒別4學(xué)時(shí)1.3中藥的薄層色譜鑒定4學(xué)時(shí)1.4根及根莖類中藥材性狀及顯微鑒定18學(xué)時(shí)1.5莖、木類中藥材的性狀及顯微鑒定4學(xué)時(shí)1.6皮類中藥材的性狀及顯微鑒定4學(xué)時(shí)1.7葉及花類中藥材的性狀及顯微鑒定4學(xué)時(shí)1.8果實(shí)類中藥材的性狀及顯微鑒定4學(xué)時(shí)1.9種子類中藥材的性狀及顯微鑒定4學(xué)時(shí)1.10全草中藥材的性狀及顯微鑒定4學(xué)時(shí)1.11藻菌、地衣、樹脂及其他類中藥材的性狀及顯微鑒定4學(xué)時(shí)1.12動(dòng)物類中藥材的性狀及顯微鑒定4學(xué)時(shí)1.13礦物類中藥材的性狀及顯微鑒定4學(xué)時(shí)1.14粉末性中成藥的顯微鑒定4學(xué)時(shí)1.15注射用雙黃連的鑒定4學(xué)時(shí)2選做實(shí)驗(yàn)52學(xué)時(shí)2.1中藥的光譜鑒定6學(xué)時(shí)2.2中藥的電泳鑒定4學(xué)時(shí)2.3鹿茸的特異PCR鑒定4學(xué)時(shí)2.4中藥的常規(guī)檢測6學(xué)時(shí)2.5中藥有害物質(zhì)檢測6學(xué)時(shí)2.6大黃中蒽醌成分的含量測定—高效液相色譜法2學(xué)時(shí)2.7紫草中羥基萘醌總色素的含量測定—可見分光光度法2學(xué)時(shí)2.8大青葉中靛玉紅的含量測定—薄層掃描法2學(xué)時(shí)2.9淫羊藿中總黃酮的含量測定—紫外分光光度法2學(xué)時(shí)2.10斑蝥中斑蝥素的含量測定—?dú)庀嗌V法2學(xué)時(shí)2.11朱砂中硫化汞的含量測定2學(xué)時(shí)2.12未知粉末中藥顯微鑒定4學(xué)時(shí)2.13中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂10學(xué)時(shí)
1基本實(shí)驗(yàn)1.1中藥顯微鑒定基本技術(shù)內(nèi)容提要本實(shí)驗(yàn)包括顯微測量、顯微制片的基本技術(shù)、顯微化學(xué)反應(yīng)和顯微特征描述的基本方法。通過實(shí)驗(yàn)掌握顯微測量、顯微制片、顯微化學(xué)反應(yīng)的一般方法與技術(shù),掌握常見顯微特征描述的一般方法。原理(1)顯微測量使用標(biāo)定的目鏡測微尺,測定顯微目的物的大小(以μm為計(jì)量單位)。目鏡測微尺是放在目鏡內(nèi)的直徑為2cm的圓形玻片,其上有100等分格的刻度尺,每一小格表示的實(shí)際長度隨不同的顯微鏡、不同放大倍數(shù)的物鏡而不同。鏡臺測微尺是在載玻片上封固有精細(xì)刻度的標(biāo)尺,標(biāo)尺的長度是1mm,分為100等分小格(每小格的長度為10μm),用于目鏡量尺的標(biāo)定。使用標(biāo)定的目鏡測微尺,才能測量顯微鏡下目的物的大小(2)顯微制片根據(jù)鑒定工作的需要,采用徒手制片和機(jī)械制片等手段,制備各種顯微制片供顯微特征的觀察和描述。根據(jù)制作方法和保存的需要,分為半永久制片、永久制片和臨時(shí)制片3大類。根據(jù)觀察的目的和對供試品采取的制片方法也不同,分切片標(biāo)本片、解離組織標(biāo)本片、表面標(biāo)本片、粉末標(biāo)本片和磨片等;其中橫切片多用于觀察組織的排列特征;縱切片多用于觀察莖、木類中藥的某些細(xì)胞組織,如射線的特征;解離組織片用于觀察某些細(xì)胞的形狀,如纖維、石細(xì)胞等;表面片多用于觀察葉、花、全草、果實(shí)和種子等的表面特征,一般取某一部分制片;粉末片多用于觀察組織碎片、細(xì)胞、內(nèi)含物或某些中藥顆粒的特征;磨片用于堅(jiān)硬藥材,如骨類、貝殼類及礦石類顯微特征的觀察。(3)顯微化學(xué)反應(yīng)顯微化學(xué)反應(yīng)是指在藥材的臨時(shí)切片(新鮮的材料效果尤佳)或粉末片上滴加某種化學(xué)試劑,觀察細(xì)胞壁、細(xì)胞內(nèi)含物以及所含化學(xué)成分的反應(yīng)。(4)顯微描繪器
(5)顯微特征的描述顯微特征的描述是在觀察顯微特征的基礎(chǔ)上,對顯微特征進(jìn)行的形態(tài)描述。描述的內(nèi)容主要有組織排列、細(xì)胞形狀、細(xì)胞的大小和數(shù)量、顏色等。粉末顯微特征的描述應(yīng)遵循先多數(shù)后少數(shù)、先特殊后一般、先感觀后測試的原則進(jìn)行。儀器、材料與試劑(1)儀器與材料1)儀器生物顯微鏡,目鏡測微尺,鏡臺測微尺,顯微描繪器,鑷子,解剖針,載玻片,蓋玻片,酒精燈,剃須刀片,粉碎機(jī),繪圖板,鉛筆等。2)材料粉末:艾葉,巴戟天,半夏,穿心蓮,黃芪,木香,肉桂,石韋,洋金花。綿馬貫眾葉柄永久制片(2)試劑α-萘酚濃硫酸試液,碘試液,間苯三酚試液,水合氯醛試劑,蘇丹Ⅲ試液,稀甘油試劑,鹽酸,硝酸,碘化鉍鉀試劑,氯化鋅碘試液,硫酸,釕紅試液,硝酸汞試液,乙醚,石油醚,90%乙醇,70%乙醇,α-萘酚乙醇溶液,稀鹽酸,稀醋酸等。操作步驟(1)顯微測量1)顯微目鏡測微尺的標(biāo)化取下顯微鏡的目鏡,將目鏡測微尺的刻度面向上放入目境內(nèi)的視場光闌上,再旋上上透鏡。將鏡臺測微尺蓋片面朝上放在再載物臺上,用低倍鏡觀察,調(diào)節(jié)焦距看清楚鏡臺測微尺的刻度。移動(dòng)鏡臺測微尺,同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡,使目鏡測微尺與鏡臺測微尺平行靠近,并將兩尺的“0”點(diǎn)刻度線或某刻度線對齊,然后從左向右察看兩尺刻度線另一重合線,記錄重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數(shù)(參見附錄顯微測量)。用下列公式計(jì)算目鏡測微尺每小格的實(shí)際長度。鏡臺測微尺的格數(shù)×10μm目鏡測微尺每小格的實(shí)際長度=目鏡測微尺的格數(shù)2)物體的測量移去鏡臺測微尺,換上標(biāo)本片(選取顯微特征描述用粉末制片),用目鏡測微尺測量顯微鏡下細(xì)胞或內(nèi)含物所占小格數(shù)并乘以目鏡測微尺每小格代表的實(shí)際長度,即為被測物體的實(shí)際長度。(2)顯微制片1)徒手切片取材、固定與切片:取較細(xì)小的牛膝和麥冬藥材,用水浸軟,選擇適當(dāng)部位,切割成長2~3cm的小段,用拇解離組織制片及滑走切片、冷凍切片、石蠟切片等機(jī)械制片略,參見附錄。(3)顯微化學(xué)反應(yīng)選擇顯微特征描述使用的標(biāo)本片,滴加規(guī)定顯微化學(xué)試劑,在顯微鏡下觀察細(xì)胞壁或細(xì)胞內(nèi)含物的顏色變化。1)細(xì)胞壁性質(zhì)的鑒定木栓化或角質(zhì)化細(xì)胞壁:2)細(xì)胞內(nèi)含物的鑒定淀粉粒:3)組織或細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分的鑒定略。參見1.2中藥的化學(xué)定性鑒別。(4)描繪器的使用及繪圖方法1)取下顯微鏡的接目鏡,按說明書裝上描繪器(或描繪目鏡)。2)裝上顯微標(biāo)本片,調(diào)節(jié)物像清晰度。3)調(diào)整繪圖板的角度與描繪器的角度相一致,用顯微描繪器上的濾光片調(diào)節(jié)光線強(qiáng)度,使視野中的物象及繪圖紙上鉛筆均較清晰,選定描繪的目的物(使用描繪目鏡可省略繪圖板)。4)用目鏡側(cè)微尺測量描繪的目的物的大小,然后繪圖。5)繪圖時(shí),先用HB型鉛筆輕輕依物像描出細(xì)胞或組織的輪廓,確定無誤后,移開描繪器,用H型鉛筆按要求的線條表示方法繪圖,用橡皮擦去草圖的鉛筆痕。繪圖的線條要流暢、粗細(xì)均勻。5)放大倍數(shù)的計(jì)算按下列公式計(jì)算:繪圖紙上描繪的圖像長度放大倍數(shù)=被描繪目的物的實(shí)際長度也可以在描繪目的物的一側(cè)畫出目鏡側(cè)微尺每個(gè)小格(或幾個(gè)小格)長度的線段,再測其實(shí)際長度后計(jì)算?;蛟谒嫵瞿跨R側(cè)微尺每個(gè)小格(或幾個(gè)小格)長度的線段上標(biāo)注實(shí)際長度即可,如1個(gè)小格的線段標(biāo)注10mμ,2個(gè)小格的線段標(biāo)注20mμ。(5)顯微特征的描述分取牛膝、麥冬的徒手切片和各供試品藥材粉末少許,分別用水制片或制水合氯醛透化標(biāo)本片,置顯微鏡下觀察。根據(jù)觀察的對象和目的物,可進(jìn)行必要的顯微化學(xué)反應(yīng)(參見顯微化學(xué)反應(yīng)項(xiàng)下的要求)。1)組織特征取綿馬貫眾葉柄、牛膝、麥冬橫切面永久制片或徒手切片,由外向內(nèi)依次觀察其木栓層(或表皮、厚壁組織)、皮層、維管束等組織的排列情況及其特征。2)粉末特征淀粉粒:取半夏水制片,淀粉粒的類型、形狀,測量淀粉粒的大小,觀察臍點(diǎn)的形狀、位置,層紋的有無。草酸鈣針晶:取半夏粉末少許,制水合氯醛透化片或用水制片,觀察并描述草酸鈣晶體的類型、存在狀態(tài),測量草酸鈣針晶的長度。石細(xì)胞:取巴戟天粉末少許,制水合氯醛透化片,觀察并描述石細(xì)胞的形狀、顏色,測量石細(xì)胞的大小、觀察細(xì)胞壁及孔溝的特征。用間苯三酚-濃鹽酸制片,觀察和描述石細(xì)胞壁的木化情況。韌皮纖維:取肉桂粉末少許,制水合氯醛透化片,觀察并描述韌皮纖維的分布狀態(tài)、形狀、顏色、細(xì)胞壁的特征,測量細(xì)胞的長度和直徑。用間苯三酚-濃鹽酸制片,觀察和描述細(xì)胞壁的木化情況。碳酸鈣晶體(鐘乳體):取穿心蓮粉末少許,制水合氯醛透化片,觀察并描述碳酸鈣晶體的分布狀態(tài)、形狀、顏色,測量鐘乳體的大小。在制片邊緣滴加少許鹽酸,觀察鐘乳體的變化和產(chǎn)生的現(xiàn)象。木栓細(xì)胞:取黃芪粉末少許,制水合氯醛透化片,觀察并描述木栓細(xì)胞的存在狀態(tài)、切面觀和表面觀的形狀、顏色,用間苯三酚-濃鹽酸試液制片,觀察和描述木栓細(xì)胞的木化情況;用蘇丹Ⅲ試液制片,觀察和描述木栓細(xì)胞的木栓化情況。菊糖:取木香粉末少許,用水或水合氯醛制片(不透化),觀察并描述菊糖的分布狀態(tài)、形狀、顏色,表面特征。在制片的邊緣滴加α-萘酚-濃硫酸試液,觀察并描述其化學(xué)反應(yīng)。非腺毛:分別取石韋、艾葉、洋金花粉末或藥材碎片少許,制水合氯醛透化片,觀察并描述非腺毛的分布狀態(tài)、類型、形狀、顏色、表面特征、細(xì)胞的數(shù)目和組成情況,測量非腺毛的長度和直徑。用間苯三酚-濃鹽酸試液制片,觀察和描述非腺毛的木化情況;用蘇丹Ⅲ試液制片,觀察和描述非腺毛的角質(zhì)層情況。腺毛:分別取艾葉、洋金花粉末或藥材碎片少許,制水合氯醛透化片,觀察并描述腺毛的分布狀態(tài)、形狀、顏色、表面特征、腺頭和腺柄細(xì)胞的數(shù)目和組成情況,測量腺毛頭部柄部長度和直徑。腺鱗:取穿心蓮粉末或藥材碎片少許,制水合氯醛透化片,觀察并描述腺鱗的分布狀態(tài)、形狀、顏色、表面特征、腺頭和腺柄細(xì)胞的數(shù)目和組成情況,測量腺毛頭部柄部的直徑。要點(diǎn)及難點(diǎn)解答(1)目鏡測微尺的標(biāo)定同一顯微鏡,在目鏡固定的情況下,不同放大倍數(shù)的物鏡,目鏡測微尺必須分別標(biāo)定。(2)顯微特征描述要在充分觀察和測試的基礎(chǔ)上進(jìn)行,至少重復(fù)制備3片顯微制片,并采用“之”字移動(dòng)法觀察,以防特征遺漏。描述特征的確定至少觀察20個(gè)以上的目的物。(3)一般情況下,粉末顯微特征檢出的難易程度主要與制片的質(zhì)量、取樣、供試品的粉碎度等有關(guān)。(4)顯微特征圖的放大倍數(shù)取決于顯微鏡本身的放大倍數(shù)和繪圖距離,繪圖距離越大,放大倍數(shù)越大。顯微特征圖的繪制方法參見附錄。習(xí)題與作業(yè)(1)習(xí)題1)常用顯微制片的基本過程和所觀察的對象。2)常見細(xì)胞壁、內(nèi)含物顯微化學(xué)反應(yīng)的常用試劑。3)雙子葉植物和單子葉植物根類中藥的組織構(gòu)造特點(diǎn)。(2)作業(yè)1)寫出顯微鏡目鏡測微尺的標(biāo)定結(jié)果。2)寫出顯微特征描述的結(jié)果并繪圖。1.2中藥的化學(xué)定性鑒別內(nèi)容提要本實(shí)驗(yàn)采用中藥常用的化學(xué)定性鑒別(包括顯微化學(xué)鑒別)方法與基本技術(shù),對部分常用中藥進(jìn)行品種鑒定或質(zhì)量控制。通過實(shí)驗(yàn)掌握中藥化學(xué)定性鑒別的一般規(guī)律和方法,掌握部分常用中藥化學(xué)定性鑒別的主要特征。原理化學(xué)定性分析是指利用某些化學(xué)試劑能與中藥中的某種或某類化學(xué)成分產(chǎn)生特殊的氣味、顏色、沉淀或結(jié)晶等反應(yīng),作為鑒別中藥品種的手段。優(yōu)質(zhì)中藥的專屬性成分,也可作為質(zhì)量評價(jià)的特征之一。在對中藥進(jìn)行化學(xué)定性分析時(shí),可用其提取液、粉末或切片等來進(jìn)行。如將化學(xué)試劑直接加到中藥表面、切片或粉末上,觀察產(chǎn)生的結(jié)晶(用顯微鏡觀察)以及特殊的顏色反應(yīng);取切片或粉末也可裝置在玻片或?yàn)V紙上,滴加相應(yīng)的試劑進(jìn)行直接觀察;取適量中藥粉末于小試管中,加適當(dāng)溶劑提出其化學(xué)成分,然后將溶液滴于玻片上、濾紙上或加入小試管中,再滴加一定的化學(xué)試劑并觀察其現(xiàn)象;利用微量升華法,將中藥中可升華的成分分出,加適當(dāng)?shù)脑噭┯^察其化學(xué)反應(yīng)現(xiàn)象等。儀器、材料與試劑(1)儀器與材料1)儀器天平,試管,燒杯,錐形瓶,吸管,量筒,漏斗,分液漏斗,濾紙,水浴鍋,蒸發(fā)皿,載玻片,蓋玻片,電吹風(fēng)等。2)材料粉末:安息香,白術(shù),檳榔,薄荷,蟾酥,丁香,番瀉葉,茯苓,附子,狗脊,訶子,厚樸,黃連,黃芩,金櫻子,決明子,鹿茸,沒藥,全蝎,人參,乳香,延胡索,知母。(2)試劑0.2%吲哚醌溶液,0.25mol/L硫酸溶液,0.5%硫酸銅溶液,1%三氯化鐵溶液,1%鐵氰化鉀溶液,10%醋酸鉛試液,10%氫氧化鈉溶液,2%醋酸溶液,2%茚三酮溶液,2,4-二硝基苯肼,3%過氧化氫溶液,4%氫氧化鈉溶液,5%對二甲基苯甲醛的10%硫酸溶液,5%三氯化鐵的甲醇溶液(1?1),5%三氯化鐵乙醇溶液,5%茚三酮丙酮溶液,50%硫酸,α-萘酚試液,苯酚,醋酐,醋酸,碘化鉍鉀試液,碘化汞鉀試液,碘化鉀-碘試液,碘試液,對二甲氨基苯甲醛,過氧化氫試液,甲醇,堿性酒石酸銅試液,氯仿,氯化鈉明膠試液,鎂粉,硝酸汞試劑,明膠試液,濃硫酸,氫氧化鈉試液,四氯化碳,鐵氰化鉀-三氯化鐵試液,稀醋酸,稀硫酸,香草醛,3%氫氧化鈉氯化鈉的飽合溶液,硝酸,鹽酸,乙醇,乙醚等。操作步驟(1)含生物堿類成分中藥的鑒定1)取附子粉末約0.1g置試管中,加乙醇5mL,在水浴上加熱20min,時(shí)時(shí)振搖,濾過,濾液蒸干,加2%醋酸溶液2mL,攪拌,濾過,濾液中加碘化汞鉀試液2滴,即發(fā)生黃色沉淀。2)取延胡索粉末2g置小燒杯中,加0.25mol/L硫酸溶液20mL,振搖片刻,濾過。取濾液2mL,加1%鐵氰化鉀溶液0.4mL與1%三氯化鐵溶液0.3mL的混合液,即顯深綠色,漸變深藍(lán)色,放置后底部有較多深藍(lán)色沉淀。另取延胡索粉末0.2g,加稀醋酸5mL,在水浴上加熱5min,濾過。取濾波lmL,加碘化鉍鉀試液1~2滴,顯紅棕色;另取濾液lmL,加碘化汞鉀試液1~2滴,顯淡黃色沉淀。3)取黃連粉末置載玻片上,加乙醇1~2滴及30%硝酸1滴,加蓋玻片,放置片刻,鏡檢,有黃色針狀或針簇狀結(jié)晶析出,加熱或放置,結(jié)晶消失并顯紅色。4)取檳榔粉末0.5g,加水3~4mL,加5%硫酸液1滴,微熱數(shù)分鐘,濾過,取濾液1滴于載玻片上,加碘化鉍鉀試滴1滴,即顯混濁,放置后,置顯微鏡下觀察,有石榴紅色的球晶或方晶產(chǎn)生。(2)含酚類和鞣質(zhì)類成分中藥的鑒定1)取狗脊粉末2g,加水30mL,加熱15min,濾過。分取濾液2mL,加1%三氯化鐵試液,呈淡綠色;加鐵氰化鉀-三氯化鐵試液,呈藍(lán)黑色沉淀;加明膠試液,產(chǎn)生混濁或沉淀。2)取金櫻子粉末5g,加水50mL,置60℃水浴上加熱15min,立即濾過。取濾液1mL,加堿性酒石酸銅試液4~5滴,在水浴中加熱5min,生成紅棕色沉淀;取濾液1mL,加1%三氯化鐵溶液1~2滴,即顯暗紫色。3)取訶子果肉粉末3g,加水30mL,50℃水浴溫?zé)?~5min,濾過。取濾液2mL,加三氯化鐵試液1滴,呈深藍(lán)色和生成沉淀。另取濾液2mL,加氯化鈉明膠試液1滴,生成白色沉淀。(3)含黃酮類成分中藥的鑒定取黃芩粉末2g,置100mL錐形瓶中,加乙醇20mL,置水浴上回流15min,濾過。取濾液1mL,加10%醋酸鉛試液2~3滴,即發(fā)生橘黃色沉淀;另取濾液lmL,加鎂粉少量與鹽酸3~4滴,顯紅色。(4)含蒽醌類成分中藥的鑒定1)取決明子粉末0.5g,加稀硫酸20mL與氯仿10mL,微沸回流15min,分取氯仿層,加入氫氧化鈉試液10mL,振搖,放置,堿液層顯紅色;若顯棕色,則分取堿液層加過氧化氫試液1~2滴,再置水浴中加熱4min,即顯紅色。2)取番瀉葉粉末0.1g,加50%硫酸10mL,沸水浴上加熱水解15min,放冷,用氯仿或乙醚萃取,分取氯仿層或乙醚層,加4%氫氧化鈉溶液提取,堿液加3%過氧化氫溶液2滴,沸水浴上加熱4min,出現(xiàn)明顯的紅色。(5)含皂苷類成分中藥的鑒定1)取知母粉末2g,加乙醇5mL,振搖后放置20min,吸取上面清液1mL,于水浴上蒸干,殘?jiān)訚饬蛩?滴,初顯黃色,繼變紅色、紫堇色,最后呈棕色。2)分別取人參和三七粉末少許,放于白瓷板上,然后滴加濃硫酸1~2滴,人參呈棕褐色,三七呈血紅色。(6)含木質(zhì)素類成分中藥的鑒定取厚樸粗粉3g,加氯仿30mL,回流30min,濾過。取15mL氯仿提取液,蒸去氯仿,殘?jiān)?0mL乙醇溶液,取濾液各1mL,分別加5%三氯化鐵的甲醇溶液(1?1)1滴顯棕黑色或藍(lán)黑色;加硝酸汞試劑1滴,產(chǎn)生棕色沉淀。(7)含內(nèi)酯類成分中藥的鑒定取白術(shù)粗粉2g,置100mL具塞錐形瓶中,加乙醚20mL,連續(xù)振搖10min,濾過。取濾液少許,揮干后加醋酐和硫酸呈藍(lán)紫色至棕色;取濾液2mL,置蒸發(fā)皿中,待乙醇揮散后,加5%對二甲基苯甲醛的10%硫酸溶液1mL,顯玫瑰紅色,于100℃烘5min,變?yōu)樽仙?。取濾液少許,揮干,加乙醇溶解,再加2,4-二硝基苯肼,有黃色沉淀。(8)含揮發(fā)油類成分中藥的鑒定1)取薄荷粉末少許,經(jīng)微量升華得油狀物,加硫酸2滴及香草醛結(jié)晶少量,初顯黃色至橙黃色,再加水1滴,即變紫紅色。2)取丁香粉末1g,置小試管中,加氯仿3mL,浸漬5min,吸取氯仿浸液2~3滴于載玻片上,速加3%氫氧化鈉飽和液1滴,加蓋玻片,片刻即有簇狀細(xì)針形丁香酚鈉結(jié)晶產(chǎn)生。(9)含樹脂類成分中藥的鑒定1)取安息香約0.1g,加乙醇5mL,研磨,濾過,濾液加5%三氯化鐵乙醇溶液0.5mL,即顯亮綠色,后變?yōu)辄S綠色。2)取乳香粗粉0.05g,置小蒸發(fā)皿中,加入苯酚-四氯化碳(1:5)液1滴,即顯褐色或紫色。取本品1g,研碎,加入甲醇10mL,振搖24h,濾過。取濾液5mL,蒸干,殘?jiān)酉×蛩?0mL后轉(zhuǎn)移到分液漏斗中,用氯仿振搖提取2次,每次10mL,合并氯仿濾液,并濃縮至除盡氯仿,殘?jiān)哟姿?mL溶解,再加醋酐-濃硫酸(19:1)試劑1mL,溶液很快變成紫色。(檢查乳香酸)3)取沒藥粉末加硝酸,呈紫色。取沒藥粉末0.1g,加細(xì)沙0.5g,研勻,置試管中,加乙醚振搖提取,將提取液置蒸發(fā)皿中,待乙醚揮發(fā)后,殘留有一層薄膜,用溴或發(fā)煙硝酸蒸氣接觸皿底殘?jiān)?,即顯紫紅色。(10)含氨基酸類成分中藥的鑒定1)取全蝎粉末1g,加甲醇20mL,冷浸過夜,濾過,將濾液濃縮至5mL左右,作為供試品溶液。將此液分別點(diǎn)于2張濾紙上,分別噴0.5%茚三酮丙酮溶液及0.2%吲哚醌溶液,置110oC紅外燈下烘烤,前者出現(xiàn)紫色斑點(diǎn),后者出現(xiàn)藍(lán)黑色斑點(diǎn)。2)取鹿茸粉末0.1g,加水4mL,置水浴中加熱15min,放冷,過濾。取濾液1mL,加2%茚三酮溶液3滴,搖勻,加熱煮沸數(shù)分鐘,顯藍(lán)紫色。另取濾液1mL,加10%氫氧化鈉溶液2滴,搖勻,滴加0.5%硫酸銅溶液,顯藍(lán)紫色。(11)含強(qiáng)心苷類成分中藥的鑒定1)取蟾酥粉末0.1g,加氯仿5mL,浸泡1h,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)哟佐倭渴谷芙?,滴加硫酸,初顯藍(lán)紫色,漸變?yōu)樗{(lán)綠色。取蟾酥粉末0.1g,加甲醇5mL,浸泡1h,濾過,濾液中加對二甲氨基苯甲醛固體少許,滴加硫酸數(shù)滴,即顯藍(lán)紫色。(12)含多糖類成分中藥的鑒定取茯苓塊片或粉末少許,加碘化鉀碘試液數(shù)滴,顯深紅色。取茯苓粉末0.1g于試管中,加水5mL,煮沸,加碘試液3滴,得黃色溶液,應(yīng)不顯藍(lán)色或紫紅色。取茯苓粉末加α-萘酚及濃硫酸,團(tuán)塊物即溶解,可顯橙紅色至深紅色。要點(diǎn)及難點(diǎn)解答(1)中藥的化學(xué)定性鑒定,應(yīng)選擇中藥中專屬性成分或有效成分為鑒別特征?;瘜W(xué)成分的提取要選擇最佳溶劑,所選的化學(xué)試劑要具有靈敏、選擇性強(qiáng)和穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。(2)重點(diǎn)掌握下列中藥的化學(xué)定性鑒別特征附子,延胡索,黃芩,番瀉葉,人參,厚樸,白術(shù),薄荷,丁香,安息香,乳香,沒藥,鹿茸,蟾酥,茯苓。習(xí)題與作業(yè)(1)習(xí)題1)中藥中常見化學(xué)成分的提取方法及其鑒定用的主要化學(xué)試劑。2)用化學(xué)定性方法鑒別下列藥材附子,延胡索,黃芩,番瀉葉,人參,厚樸,白術(shù),薄荷,丁香,安息香,乳香,沒藥,鹿茸,蟾酥,茯苓。3)將教材中收載的植物類中藥按照化學(xué)成分進(jìn)行分類。(2)作業(yè)寫出實(shí)驗(yàn)結(jié)果,并分析實(shí)驗(yàn)的現(xiàn)象。1.3中藥的薄層色譜鑒定內(nèi)容提要本實(shí)驗(yàn)采用薄層色譜法,對大黃、人參、丹參、大青葉、馬錢子、熊膽、萬氏牛黃清心丸等常用中藥進(jìn)行品種鑒定或質(zhì)量控制。通過實(shí)驗(yàn)掌握含有不同類別化學(xué)成分中藥薄測色譜鑒別的條件關(guān)鍵技術(shù)。掌握熊膽等中藥薄層色譜鑒定的特征和方法。原理薄層色譜鑒定法是選用適當(dāng)粒度的吸附劑,并將其均勻涂鋪在玻璃板上(或其他支持物上,如鋁制薄板)成一薄層,然后用毛細(xì)管或適當(dāng)?shù)狞c(diǎn)樣器將供試品和對照品溶液分別滴加在薄層的啟始線上,待樣點(diǎn)上的溶劑揮散后,置于密閉的層析缸中,用一定的溶劑展開,當(dāng)溶劑前沿到達(dá)距離另一端2~3cm處,取出,干燥,顯色或直接觀察(有色成分),并與專屬性的化學(xué)對照品或?qū)φ账幉南啾容^,以鑒定品種或質(zhì)量。薄層色譜鑒定法是中藥鑒定應(yīng)用范圍最廣的方法之一。儀器、材料與試劑(1)儀器與材料1)儀器電吹風(fēng),硅膠G薄層板,硅膠H-CMC-Na薄層板,容量瓶,三角瓶,燒杯,水浴鍋,索氏提取器,紫外分析燈,層析缸。2)材料粉末:大黃,人參,丹參,大青葉,馬錢子,熊膽,萬氏牛黃清心丸。(2)試劑10%磷鉬酸乙醇溶液,10%硫酸乙醇溶液,2%三氯化鐵乙醇溶液,20%氫氧化鈉溶液,30%硫酸乙醇溶液,pH試紙,氨水,苯,冰醋酸,丙酮,醋酸,醋酸乙酯,碘化鉍鉀試液,丁酮,硅藻土,甲苯,甲醇,甲酸,甲酸,甲酸乙酯,氯仿,石油醚(30~60℃),鹽酸,乙醇,乙醚,異丙醇,異辛烷,蒸餾水,正丁醇,正己烷。(3)對照品大黃對照藥材,大黃酸,丹參對照藥材,丹參酮ⅡA,膽酸,靛藍(lán),靛玉紅,鵝去氧膽酸,士的寧,黃連對照藥材,黃芩苷,馬錢子堿,去氧膽酸,人參皂苷Rg1、Re、Rb1,熊去氧膽酸,鹽酸小檗堿,梔子苷。操作步驟(1)大黃的鑒定1)供試品溶液的制備取大黃粉末0.1g,加甲醇20mL浸漬1h,濾過,取濾液5mL,蒸干,加水10mL,使溶解,再加鹽酸lmL,置水浴上加熱30min,立即冷卻,用乙醚分2次提取,每次20mL,合并乙醚液,蒸干,殘?jiān)勇确耹mL使溶解。2)對照藥材溶液的制備另取大黃對照藥材按照上法制備。3)對照品溶液的制備取大黃酸對照品,加甲醇制成每lmL含lmg的溶液。4)色譜條件硅膠H-CMC-Na薄層板。展開劑:石油醚(30~60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液。點(diǎn)樣量:3種溶液各4μL。顯色:365nm紫外光燈,或氨氣中熏后在日光下觀察。5)結(jié)果供試品與對照藥材均顯5個(gè)橙黃色熒光斑點(diǎn),對照品顯橙黃色熒光斑點(diǎn);氨氣熏后斑點(diǎn)均變?yōu)榧t色。(2)人參的鑒定1)供試品溶液的制備取人參粉末1g,加氯仿40mL,加熱回流1h,棄去氯仿液,藥渣揮干溶劑,加水0.5mL拌勻濕潤后,加水飽和的正丁醇10mL,超聲處理30min,吸取上清液,加3倍量的氨試液,搖勻,放置分層,取上層液蒸干,殘?jiān)蛹状?mL使溶解。2)對照藥材溶液的制備取人參對照藥材1g,同上法制備。3)對照品溶液的制備取人參皂苷Rg1、Re、Rb1為對照品,加甲醇制成1mL中各含2mg的混合液。4)色譜條件硅膠G薄層板(厚500μm)。展開劑:氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液。顯色:10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰,日光及365nm紫外光燈下觀察。點(diǎn)樣量:3種溶液各1~2μL。5)結(jié)果供試品與對照品在日光下顯3個(gè)相同的紫紅色斑點(diǎn),紫外光燈(365nm)下顯相同的1個(gè)黃色和2個(gè)橙色熒光斑點(diǎn)。(3)丹參的鑒定1)供試品溶液的制備取丹參粉末1g,加乙醚5mL,置具塞試管中,振搖,放置1h,濾過,濾液揮干,殘?jiān)哟姿嵋阴?mL使溶解。2)對照藥材溶液的制備取丹參對照藥材,同上法制備。3)對照品溶液的制備取丹參酮ⅡA對照品,加醋酸乙酯制成每1mL含2mg的溶液。4)色譜條件硅膠G薄層板。展開劑:苯-醋酸乙酯(19∶1)。點(diǎn)樣量:上述3種溶液各5μL。展開后直接觀察。5)結(jié)果供試品與對照品顯相同的暗紅色斑點(diǎn)。(4)大青葉的鑒定1)供試品溶液的制備取大青葉粉末0.5g,加氯仿20mL,置水浴上回流提取1h,濾過,濾液濃縮至1mL。2)對照品溶液的制備取靛藍(lán)、靛玉紅對照品,加氯仿制成每1mL各含1mg的混合溶液。3)色譜條件硅膠G薄層板。展開劑:苯-氯仿-丙酮(5∶4∶1)。點(diǎn)樣量:上述2種溶液各5μL。展開后直接觀察。4)結(jié)果供試品與對照品顯相同顏色的斑點(diǎn),靛藍(lán)顯藍(lán)色、靛玉紅淺紫紅色。(5)馬錢子的鑒定1)供試品溶液的制備取馬錢子粉末0.5g,加氯仿-乙醇(10∶1)混合液5mL,與濃氨試液0.5mL,密塞,振搖5min,放置2h,濾過。2)對照品溶液的制備取士的寧和馬錢子堿對照品,加氯仿制成每1mL各含2mg的溶液。3)色譜條件硅膠G薄層板上。展開劑:甲苯-丙酮-乙醇-濃氨(4∶5∶0.6∶0.4)。顯色:碘化鉍鉀試液。點(diǎn)樣量:上述3種溶液各10μL。4)結(jié)果供試品與對照品顯相同的棕色斑點(diǎn)。(6)熊膽的鑒定1)供試品溶液的制備取熊膽仁0.1g,加甲醇10mL,溫?zé)崾谷芙?,放冷,濾過,濾液濃縮近干,加20%氫氧化鈉溶液5mL,水浴水解5h,放冷,加鹽酸至pH2~3,加醋酸乙酯萃取2次,合并醋酸乙酯液,濃縮至約5mL。2)對照品溶液的制備取膽酸、熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸及去氧膽酸各約1mg,分別加甲醇1mL溶解。3)色譜條件硅膠G薄層板。展開劑:異辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水(10:5:5:3:1)的上層液。展距:16~18cm。顯色:30%硫酸乙醇溶液,105℃烘10min。4)結(jié)果供試品應(yīng)有與熊去氧膽酸相同的斑點(diǎn)。(7)萬氏牛黃清心丸的鑒定1)取萬氏牛黃清心丸3g,剪碎,加硅藻土0.6g,研勻,加氯仿10mL、冰醋酸0.5mL,回流30min,放冷,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)右掖?mL使溶解,濾過,濾液作為供試品溶液。另取膽酸對照品,加乙醇制成每1mL含1mg的溶液,作為對照品溶液。吸取上述2種溶液各10μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇(32∶6∶1∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在110℃加熱約10min。供試品色譜在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。2)取萬氏牛黃清心丸3g,剪碎,加硅藻土0.5g,研勻,加甲醇20mL,回流1h,放冷,濾過,濾液作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每1mL含1mg的溶液,作為對照品溶液。吸取上述2種溶液各5μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G-CMC-Na薄層板上,以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以2%三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。3)取萬氏牛黃清心丸3g,加乙醚15mL,研磨,棄去乙醚。殘?jiān)鼡]干乙醚,加醋酸乙酯30mL,回流提取1h,放冷,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)蛹状?mL使溶解,濾過,濾液作為供試品溶液。另取梔子苷對照品,加甲醇制成每1mL含1mg的溶液,作為對照品溶液。吸取上述2種溶液各5μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水(10∶7∶2∶0.5)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱約10min。供試品色譜在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。4)取萬氏牛黃清心丸適量,剪碎,取4g,精密稱定,置索氏提取器中,加鹽酸-甲醇(1∶100)適量,回流提取至提取液無色,提取液移至50mL量瓶中,用鹽酸-甲醇(1∶100)稀釋至刻度,搖勻。取提取液4mL,置水浴上蒸干,殘?jiān)蛹状既芙猓钩?mL,作為供試品溶液。另取黃連對照藥材50mg,加甲醇10mL,置水浴上回流15min,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)蛹状?mL使溶解,作為對照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對照品,加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。吸取上述3種溶液各2μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液(12∶6∶3∶3∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下觀察。供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的黃色熒光斑點(diǎn);在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的黃色熒光斑點(diǎn)。要點(diǎn)及難點(diǎn)解答(1)各類成分進(jìn)行薄層色譜鑒定的必備條件供試品的提取方法,吸附劑,展開劑,顯色劑或顯色方法,對照品或?qū)φ账幉?。供試品與對照品或?qū)φ账幉谋仨氃谙嗤V條件下進(jìn)行展開,展距在無特殊規(guī)定情況下一般為10cm。(2)硅膠H-CMC-Na為硅膠H羧甲基纖維素鈉薄層板。(3)在有對照品的情況下,薄層色譜鑒定可用于測定中藥中有效成分或有害物質(zhì)的近似含量,以控制中藥的質(zhì)量。若對色譜斑點(diǎn)進(jìn)行薄層掃描,即可較準(zhǔn)確地測定其化學(xué)成分的含量。(4)影響薄層色譜鑒定質(zhì)量因素較多,其關(guān)鍵技術(shù)參見附錄。(5)萬氏牛黃清心丸的處方組成為:牛黃、朱砂、黃連、黃芩、梔子、郁金,注意分析上述色譜鑒別所用的化學(xué)對照品與原料藥材的相關(guān)性。習(xí)題與作業(yè)(1)習(xí)題1)按照各供試品中的化學(xué)成分,總結(jié)各類成分的進(jìn)行薄層色譜鑒定的提取溶劑、吸附劑、展開劑和檢測方法。2)用薄層色譜法鑒別大黃、人參、丹參、大青葉、馬錢子、熊膽、萬氏牛黃清心丸。(2)作業(yè)繪制大黃、人參、丹參、大青葉、馬錢子、熊膽、萬氏牛黃清心丸薄層色譜圖,注明色譜條件和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1.4根及根莖類中藥材性狀及顯微鑒定1.4.1雙子葉和蕨類植物根及根莖類中藥內(nèi)容提要本實(shí)驗(yàn)采用性狀和顯微鑒定法,對綿馬貫眾、大黃、附子、黃連、甘草等33種根及根莖類中藥進(jìn)行鑒定。通過實(shí)驗(yàn)掌握綿馬貫眾、大黃、黃連、甘草的性狀及顯微鑒別特征,熟悉蕨類、雙子葉植物根及根莖類中藥的性狀及顯微鑒別要點(diǎn),了解狗脊、骨碎補(bǔ)、拳參、虎杖、何首烏、商陸、銀柴胡、牛膝、川牛膝、烏藥、威靈仙、川烏、草烏、附子、白頭翁、白芍、赤芍、升麻、防己、北豆根、廣防己、延胡索、板藍(lán)根、苦參、山豆根、葛根、黃芪、遠(yuǎn)志、天花粉藥材的性狀鑒別的主要特征。原理(1)性狀鑒定是用感觀來鑒定中藥是否與規(guī)定的藥用標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)品相符合,主要進(jìn)行中藥的品種、純度鑒定或粗略地估計(jì)其品質(zhì)的優(yōu)劣。本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)觀察供試品的形狀、表面和斷面特征,區(qū)別來源于雙子葉、單子葉或蕨類植物的根或根莖類藥材。通過對單味藥性狀的系統(tǒng)觀察和描述,確定其性狀鑒別的主要特征。(2)顯微鑒定是利用顯微鏡、顯微技術(shù)及顯微化學(xué)方法等對中藥進(jìn)行分析鑒定。應(yīng)用生物的解剖學(xué)和顯微化學(xué)原理,通過不同的顯微制片,觀察中藥的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀、內(nèi)含物的特征,以鑒定中藥的品種、純度和質(zhì)量。通過對單味藥組織或粉末顯微特征的系統(tǒng)觀察和描述,確定其顯微鑒別的主要特征。儀器、材料與試劑(1)儀器與材料1)儀器生物顯微鏡,目鏡測微尺,鑷子,解剖針,載玻片,蓋玻片,酒精燈,毫米刻度尺,酒精等放大鏡等。2)材料藥材標(biāo)本:狗脊,綿馬貫眾,骨碎補(bǔ),大黃,拳參,虎杖,何首烏,商陸,銀柴胡,牛膝,川牛膝,烏藥,威靈仙,川烏,草烏,附子,白頭翁,白芍,赤芍,黃連,升麻,防己,北豆根,廣防己,延胡索,板藍(lán)根,苦參,山豆根,葛根,甘草,黃芪,遠(yuǎn)志,天花粉。橫切面永久制片:綿馬貫眾,大黃,黃連,甘草。粉末:大黃,黃連,甘草。(2)試劑水合氯醛試劑,稀甘油試劑,間苯三酚試液,鹽酸,蒸餾水等。操作步驟(1)性狀鑒定取藥材標(biāo)本,首先根據(jù)形狀、表面、斷面特征鑒定藥用部位,然后按下列順序依次觀察和描述。1)根類中藥觀察其形狀、大小、顏色、表面、質(zhì)地、橫切面和折斷面、氣味等。2)根莖類中藥觀察其根莖的種類,其他特征同根。(2)顯微鑒定1)組織特征取組織橫切面的永久切片,在低倍鏡下由外向內(nèi)依次觀察。內(nèi)含物的特征可在高倍鏡下觀察。綿馬貫眾葉柄橫切片:觀察和描述表皮細(xì)胞、下皮厚壁細(xì)胞、分體中柱的數(shù)目和排列方式、薄壁細(xì)胞內(nèi)含物、細(xì)胞間隙腺毛等特征。大黃根莖橫切片:觀察和描述木栓層、皮層、維管束(韌皮部有無黏液腔,形成層,木質(zhì)部)、髓、薄壁細(xì)胞中的淀粉粒及草酸鈣簇晶等特征。尤其注意髓部的異常維管束的特征。黃連根莖橫切片:觀察和描述木栓層、皮層、維管束、髓等特征。尤其注意石細(xì)胞在組織中的分布狀態(tài)。甘草根或根莖橫切片:觀察和描述木栓層、皮層、韌皮部、木質(zhì)部、射線等特征,根莖有髓。尤其注意纖維束的分布、有無晶鞘纖維、薄壁組織中有無樹脂狀物質(zhì)和淀粉粒。2)粉末特征分取各中藥粉末少許,分別用水裝片和水合氯醛制片。大黃粉末:淡黃棕色。觀察和描述草酸鈣簇晶、導(dǎo)管、淀粉粒等特征。黃連粉末:深棕黃色。觀察和描述石細(xì)胞、韌皮纖維、木纖維、木薄壁細(xì)胞、鱗葉表皮細(xì)胞、導(dǎo)管、淀粉粒等特征。甘草粉末:黃棕色。觀察和描述晶纖維、導(dǎo)管、木栓細(xì)胞、淀粉粒、棕色塊狀物等特征。要點(diǎn)及難點(diǎn)解答(1)雙子葉植物根莖類中藥性狀鑒別要點(diǎn)為形狀、表面和斷面特征。(2)雙子葉植物、蕨類植物根莖類中藥組織構(gòu)造的基本特征或異常構(gòu)造特征。(3)各中藥粉末顯微鑒定的主要特征大黃:草酸鈣簇晶較大、導(dǎo)管非木化和淀粉粒臍點(diǎn)星狀。黃連:石細(xì)胞和韌皮纖維、木纖維鮮黃色,鱗葉表皮細(xì)胞綠黃色或黃棕色,壁微波狀彎曲或連珠狀增厚。甘草:晶纖維,具緣紋孔導(dǎo)管帶黃色,木栓細(xì)胞紅棕色。習(xí)題與作業(yè)(1)習(xí)題1)敘述下列藥材性狀鑒定的主要特征綿馬貫眾,大黃,何首烏,商陸,銀柴胡,牛膝與川牛膝,川烏與草烏,附子,白芍與赤芍,味連、雅連與云連,防己與廣防己,北豆根與山豆根,甘草,黃芪。2)雙子葉植物、蕨類植物根莖類中藥性狀鑒別的要點(diǎn)。3)雙子葉植物、蕨類植物根莖類中藥組織構(gòu)造的基本特征或異常構(gòu)造的主要類型,繪圖說明。4)寫出綿馬貫眾、大黃、黃連和甘草組織鑒定的主要特征。5)寫出大黃、黃連、甘草粉末鑒定的主要特征。(2)作業(yè)1)寫出綿馬貫眾,牛膝與川牛膝,川烏與草烏,味連、雅連與云連,防己與廣防己性狀鑒定的主要特征。2)寫出黃連、大黃和甘草組織和粉末的主要鑒別鑒別特征,繪制其組織簡圖和粉末特征圖。1.4.2雙子葉植物根及根莖類中藥內(nèi)容提要本實(shí)驗(yàn)采用性狀和顯微鑒定法,對人參、三七、白芷、當(dāng)歸、川芎、柴胡、龍膽、黃芩、黨參、木香等32種中藥進(jìn)行鑒定。通過實(shí)驗(yàn)掌握人參、當(dāng)歸、龍膽、黃芩、黨參、蒼術(shù)的性狀及顯微鑒定特征,掌握雙子葉植物根及根莖類中藥的性狀及顯微鑒別要點(diǎn),了解三七、白芷、獨(dú)活、羌活、前胡、川芎、藁本、防風(fēng)、柴胡、北沙參、秦艽、徐長卿、巴戟天、茜草、紫草、丹參、玄參、地黃、胡黃連、續(xù)斷、桔梗、南沙參、木香、白術(shù)、紫菀、漏蘆的性狀鑒別要點(diǎn)。原理同前。儀器、材料與試劑1)儀器同前。2)材料藥材標(biāo)本:人參,三七,白芷,當(dāng)歸,獨(dú)活,羌活,前胡,川芎,藁本,防風(fēng),柴胡,北沙參,龍膽,秦艽,徐長卿,巴戟天,茜草,紫草,丹參,黃芩,玄參,地黃,胡黃連,續(xù)斷,桔梗,黨參,南沙參,木香,白術(shù),蒼術(shù),紫菀,漏蘆。橫切面永久制片:人參,當(dāng)歸,龍膽,黃芩。粉末:人參,當(dāng)歸,龍膽,黃芩,黨參,蒼術(shù)。(2)試劑同前。操作步驟(1)性狀鑒定取藥材標(biāo)本,首先根據(jù)形狀、表面、斷面特征鑒定藥用部位,然后按下列順序依次觀察和描述。1)根類中藥觀察其形狀、大小、顏色、表面、質(zhì)地、橫切面和折斷面,以及氣味等。2)根莖類中藥觀察其根莖的種類、其他特征同根。(2)顯微鑒定1)組織特征取組織切片,在低倍鏡下由外向內(nèi)依次觀察;內(nèi)含物的特征可在高倍鏡下觀察。人參橫切片:觀察和描述木栓層、皮層、維管束、樹脂道的分布狀態(tài)、草酸鈣簇晶等特征。當(dāng)歸橫切片:觀察和描述木栓層細(xì)胞的列數(shù),皮層有無分泌腔,韌皮部油室的分布、形狀、大小,形成層明顯與否,木質(zhì)部射線及導(dǎo)管等特征。龍膽橫切片:觀察和描述表皮細(xì)胞、皮層及內(nèi)皮層、韌皮部、木質(zhì)部導(dǎo)管束的數(shù)目及形態(tài)、髓、草酸鈣晶體等特征。黃芩橫切片:觀察和描述木栓層石細(xì)胞的分布、皮層與韌皮部中石細(xì)胞和韌皮纖維分布狀態(tài)、木質(zhì)部中栓化細(xì)胞的分布等特征。2)粉末特征分取各中藥粉末少許,分別用水裝片和水合氯醛制片。人參粉末:觀察和描述樹脂道碎片、草酸鈣簇晶、木栓細(xì)胞、導(dǎo)管類型等特征。當(dāng)歸粉末:觀察和描述油室或油管碎片、紡錘形韌皮薄壁細(xì)胞、導(dǎo)管等特征。龍膽粉末:觀察和描述外皮層細(xì)胞和內(nèi)皮層細(xì)胞的形狀及組成,導(dǎo)管的類型,草酸鈣晶體等特征。黃芩粉末:觀察和描述韌皮纖維和木纖維的形狀、細(xì)胞壁的特征,石細(xì)胞的形狀和顏色,導(dǎo)管的類型,木栓細(xì)胞的顏色、形狀等特征。黨參粉末:觀察和描述淀粉粒和菊糖的有無,石細(xì)胞的形狀和顏色,節(jié)狀乳汁管碎片的顏色和導(dǎo)管類型等特征。蒼術(shù)粉末:觀察和描述石細(xì)胞的分布狀態(tài)、形狀、顏色,纖維的形狀、顏色,導(dǎo)管類型,草酸鈣針晶的分布和菊糖的形狀等特征。要點(diǎn)及難點(diǎn)解答(1)雙子葉植物根類中藥性狀鑒別要點(diǎn)為形狀、表面和斷面特征。(2)山參與園參的區(qū)別主要從蘆、艼、體、腿、須的形狀和表面特征等5個(gè)方面鑒別。白芷與杭白芷的區(qū)別主要從根頭的形狀及“疙瘩丁”的分布、斷面形成層環(huán)紋的形狀等方面鑒別。防風(fēng)有“蚯蚓頭”和“鳳眼圈”,關(guān)龍膽和堅(jiān)龍膽可從表面、質(zhì)地等方面鑒別。巴戟天斷面皮部淡紫色,木心較細(xì)。紫草、丹參、黃芩、地黃等以顏色為主要鑒別依據(jù)。黨參有“獅子盤頭”和眉狀疤痕。祈州漏蘆與禹州漏蘆可從根頭部和斷面的特征進(jìn)行鑒別。(3)人參粉末的主要特征為草酸鈣簇晶和樹脂道碎片。當(dāng)歸粉末的主要特征為紡錘形韌皮薄壁細(xì)胞。黃芩粉末的主要特征為韌皮纖維呈短梭形,孔溝明顯;石細(xì)胞呈類圓形、長圓形、類方形或不規(guī)則形,孔溝有時(shí)分叉;木栓細(xì)胞棕黃色。龍膽粉末的主要特征為外皮層細(xì)胞和內(nèi)皮層細(xì)胞均母細(xì)胞(由子細(xì)胞組成)。黨參粉末為淀粉粒與菊糖同時(shí)存在,有石細(xì)胞和乳汁管碎片。茅蒼術(shù)粉末的主要特征為石細(xì)胞壁極厚,淡黃色或黃色,常和木栓細(xì)胞連在一起;有纖維、細(xì)小的草酸鈣針晶和菊糖等。(4)柔軟的根類藥材一般不含有纖維。含有菊糖的藥材一般不含有淀粉粒,黨參屬于特殊類型。習(xí)題與作業(yè)(1)習(xí)題1)寫出下列中藥性狀鑒別要點(diǎn)山參與園參,白芷與杭白芷,藁本與遼藁本,南柴胡與北柴胡,北沙參與南沙參,關(guān)龍膽與堅(jiān)龍膽,軟紫草與硬紫草,丹參,子芩與枯芩,黨參、南沙參,白術(shù)與蒼術(shù),祁州漏蘆與禹州漏蘆。2)寫出下列中藥粉末顯微鑒別的主要特征人參,當(dāng)歸,龍膽,黃芩,黨參,蒼術(shù)。(2)作業(yè)1)寫出下列藥材對比鑒別的主要特征山參與園參,白芷與杭白芷,南柴胡與北柴胡,關(guān)龍膽與堅(jiān)龍膽。2)寫出人參、龍膽、黃芩的組織鑒別特征并繪圖。3)寫出人參、當(dāng)歸、龍膽、黃芩、黨參、蒼術(shù)粉末的主要顯微特征并繪圖。1.4.3單子葉植物根及根莖類中藥內(nèi)容提要本實(shí)驗(yàn)采用性狀和顯微鑒定法,對川貝母、麥冬、山藥、天麻等20種中藥進(jìn)行鑒定。通過實(shí)驗(yàn)掌握川貝母、石菖蒲、山藥、天麻的性狀及顯微鑒定特征,掌握單子葉植物根及根莖類中藥的性狀及顯微鑒別要點(diǎn),了解澤瀉、浙貝母、黃精、重樓、土茯苓、天冬、麥冬、知母、百部、天南星、半夏、白附子、香附、莪術(shù)、姜黃、郁金的性狀鑒定要點(diǎn)。原理同前。儀器、材料與試劑1)儀器同前。2)材料藥材標(biāo)本:澤瀉,川貝母,浙貝母,黃精,重樓,土茯苓,天冬,麥冬,知母,百部,山藥,天南星,半夏,白附子,石菖蒲,香附,莪術(shù),姜黃,郁金,天麻。橫切面永久制片:石菖蒲,天麻。粉末:川貝母,山藥,天麻。(2)試劑同前。操作步驟(1)性狀鑒定取藥材標(biāo)本,首先根據(jù)形狀、表面、斷面特征鑒定藥用部位,然后按下列順序依次觀察和描述。1)根類中藥觀察其形狀、大小、顏色、表面、質(zhì)地、橫切面和折斷面,以及氣味等。2)根莖類中藥觀察其根莖的種類、其他特征同根。(2)顯微鑒定1)組織特征取組織切片,在低倍鏡下由外向內(nèi)依次觀察;內(nèi)含物的特征可在高倍鏡下觀察。石菖蒲橫切片:觀察和描述表皮細(xì)胞的形狀、顏色和內(nèi)含物,皮層有無纖維束、葉跡維管束和根跡維管束,中柱維管束的類型,晶纖維及油細(xì)胞的分布等特征。天麻橫切片:觀察和描述表皮的顏色、皮層外側(cè)細(xì)胞壁增厚情況、中柱維管束的類型、薄壁細(xì)胞的內(nèi)含物及草酸鈣針晶束等特征。2)粉末特征分取各中藥粉末少許,分別用水裝片和水合氯醛制片。川貝母粉末:觀察和描述松貝和爐貝淀粉粒的類型、形狀、臍點(diǎn)、層紋,導(dǎo)管和草酸鈣晶體的類型。山藥粉末:觀察和描述淀粉粒的類型、形狀、臍點(diǎn)、層紋,導(dǎo)管和草酸鈣晶體的類型,有無纖維等特征。天麻粉末:觀察和描述厚壁細(xì)胞的形狀和壁孔、草酸鈣針晶有無、導(dǎo)管的類型、薄壁細(xì)胞中的無偏光現(xiàn)象的顆粒狀物質(zhì)等特征。要點(diǎn)及難點(diǎn)解答(1)單子葉植物根及根莖類中藥性狀鑒別要點(diǎn)為形狀、表面和斷面特征,藥用部位多數(shù)為根莖。(2)石菖蒲組織鑒別的主要特征表皮細(xì)胞棕色,含紅棕色物;皮層可見葉跡維管束和根跡維管束;中柱維管束周木型及外韌型;有晶纖維和油細(xì)胞分布。(3)天麻組織鑒別的主要特征為表皮組織淺棕色,皮層靠外側(cè)的1至數(shù)列細(xì)胞壁稍增厚,有稀疏壁孔;中柱維管束外韌型,每束有導(dǎo)管2至數(shù)個(gè)。薄壁細(xì)胞含有多糖類塊狀物,遇碘液顯暗棕色;有的薄壁細(xì)胞內(nèi)含草酸鈣針晶束。天麻粉末的主要鑒別特征為厚壁細(xì)胞多角形,壁孔明顯;薄壁細(xì)胞含卵形或長橢圓形而無偏光現(xiàn)象的顆粒狀物質(zhì),加碘液顯棕色或淡棕紫色。(4)松貝(暗紫貝母鱗莖)粉末的主要鑒別特征為淀粉粒多為單粒,呈卵圓形、三角狀卵形或貝殼形,有的中部或一端凸出而略作分枝狀,少數(shù)長圓形或類圓形,臍點(diǎn)呈點(diǎn)狀、短縫狀、馬蹄形,大多位于較小端,層紋細(xì)密;復(fù)粒少,由2~4個(gè)分粒組成。爐貝粉末的主要鑒別特征為淀粉粒為單粒,呈梨形或橢圓形,臍點(diǎn)呈人字狀、星狀或點(diǎn)狀,層紋明顯。(5)山藥粉末的主要鑒別特征為淀粉粒較大,單粒呈橢圓形、卵形或類圓形,臍點(diǎn)位于較小端,點(diǎn)狀、飛鳥狀,層紋明顯。黏液細(xì)胞中含有草酸鈣針晶束,針晶長80~240μm。習(xí)題與作業(yè)(1)習(xí)題1)寫出下列中藥性狀鑒別的主要特征松貝、青貝、爐貝和浙貝母,天南星、半夏和白附子,郁金,天麻。2)寫出單子葉植物根及根莖類中藥組織的基本構(gòu)造并繪制模式圖。3)寫出下列中藥粉末顯微鑒定的主要特征松貝和爐貝,山藥,天麻。(2)作業(yè)1)寫出下列藥材性狀鑒別的主要特征郁金,天麻,松貝、青貝和爐貝。2)寫出石菖蒲和天麻組織鑒定的主要特征并繪簡圖。3)寫出天麻、川貝母(松貝和爐貝)、山藥粉末鑒定的主要特征并繪簡圖。1.5莖、木類中藥材的性狀及顯微鑒定內(nèi)容提要本實(shí)驗(yàn)采用性狀和顯微鑒定法,對大血藤、關(guān)木通、蘇木、沉香、鉤藤等12種中藥進(jìn)行鑒定。通過實(shí)驗(yàn)掌握關(guān)木通、蘇木、沉香、鉤藤的性狀及顯微鑒別特征,掌握莖、木類中藥的性狀及顯微鑒別要點(diǎn),了解桑寄生、槲寄生、川木通、大血藤、海風(fēng)藤、雞血藤、降香、通草的性狀鑒別要點(diǎn)。原理(1)性狀鑒定是用感觀來鑒定中藥是否與規(guī)定的藥用標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)品相符合,主要進(jìn)行中藥的品種、純度鑒定或粗略地估計(jì)其品質(zhì)的優(yōu)劣。本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)觀察供試品的形狀、表面紋理、顏色、氣味等特征,區(qū)別來源于木本植物的莖類和木類藥材。通過對單味藥性狀的系統(tǒng)觀察和描述,確定其性狀鑒別的主要特征。(2)顯微鑒定原理同前。儀器、材料與試劑(1)儀器與材料1)儀器同前。2)材料藥材標(biāo)本:桑寄生,槲寄生,川木通,大血藤,海風(fēng)藤,關(guān)木通,蘇木,雞血藤,降香,沉香,通草,鉤藤。橫切面永久制片:關(guān)木通,沉香(白木香)??v切面永久制片:沉香(白木香)。粉末:關(guān)木通,蘇木,沉香(白木香和進(jìn)口沉香),鉤藤。(2)試劑同前。操作步驟(1)性狀鑒定取藥材標(biāo)本,首先根據(jù)形狀、表面、斷面特征鑒定藥用部位,然后按下列順序依次觀察和描述。1)莖、木類中藥觀察其形狀、大小、粗細(xì)、表面、顏色、質(zhì)地、折斷面及氣、味等。(2)顯微鑒定1)組織特征取組織切片,在低倍鏡下由外向內(nèi)依次觀察;內(nèi)含物的特征可在高倍鏡下觀察。關(guān)木通橫切片:觀察和描述木栓層、栓內(nèi)層、中柱鞘部位、韌皮部、木質(zhì)部、髓的特征。沉香(白木香)切片:橫切面觀察和描述木射線的寬度、細(xì)胞內(nèi)含物,導(dǎo)管的形狀及分布,木纖維的分布狀態(tài),內(nèi)涵韌皮部等特征。切向縱切面觀察和描述射線的寬度和高度,導(dǎo)管的類型,韌型纖維和內(nèi)涵韌皮部細(xì)胞等特征。徑向縱切面觀察和描述木射線的高度和細(xì)胞形狀。2)粉末特征分取各中藥粉末少許,分別用水裝片和水合氯醛制片。關(guān)木通粉末:觀察和描述中柱鞘纖維壁、導(dǎo)管的類型及紋孔排列情況、纖維管胞的紋孔特征、木薄壁細(xì)胞的形狀和紋孔類型、石細(xì)胞的形狀和草酸鈣晶體的類型。蘇木粉末:觀察和描述纖維及晶纖維的顏色和紋孔情況、射線細(xì)胞的形狀及細(xì)胞壁增厚情況,射線的寬度、導(dǎo)管的類型、薄壁細(xì)胞及草酸鈣結(jié)晶的形狀等特征。沉香粉末:白木香粉末觀察和描述導(dǎo)管的類型及內(nèi)含物、纖維管胞和韌型纖維的形狀、內(nèi)涵韌皮部薄壁細(xì)胞的形狀及內(nèi)含物、草酸鈣晶體的類型等特征。進(jìn)口沉香粉末觀察和描述木射線的寬度和高度等特征。鉤藤粉末:觀察和描述表皮細(xì)胞的形狀和顏色、表皮角質(zhì)層的厚度、韌皮纖維和韌型纖維的形狀和紋孔、導(dǎo)管和草酸鈣結(jié)晶的類型等特征。要點(diǎn)及難點(diǎn)解答(1)莖木類中藥性狀鑒定主要應(yīng)注意其表面紋理、顏色、氣味,以及必要的水試或火試等特征亦較為重要。(2)關(guān)木通組織主要鑒別特征為有木栓層,中柱鞘部位有纖維群和極少數(shù)石細(xì)胞,韌皮部頹廢的篩管群和韌皮薄壁細(xì)胞相間呈層狀排列。木質(zhì)部大型導(dǎo)管與小型導(dǎo)管相間交錯(cuò)形成明顯的層次,髓射線寬而明顯,薄壁細(xì)胞中有草酸鈣蔟晶。關(guān)木通粉末主要鑒別特征為具緣紋孔導(dǎo)管的紋孔排列緊密。纖維管胞有明顯的具緣紋孔,紋孔口呈斜縫狀或十字型交叉。木薄壁細(xì)胞類方形或長方形,有具緣紋孔和單紋孔。有中柱鞘纖維壁、石細(xì)胞和草酸鈣簇晶。(3)沉香(白木香)組織主要鑒別特征為木射線寬1~2列細(xì)胞,高4~20層細(xì)胞。內(nèi)涵韌皮部薄壁組織常呈長橢圓狀或條帶狀,細(xì)胞壁薄,非木化,內(nèi)含樹脂狀物及絲狀物(菌絲)。具緣紋孔導(dǎo)管內(nèi)含黃棕色樹脂塊。白木香粉末主要鑒別特征為具緣紋孔導(dǎo)管,纖維管胞,韌型纖維,木射線細(xì)胞單紋孔較密內(nèi)涵韌皮部薄壁細(xì)胞含黃棕色物質(zhì),細(xì)胞壁非木化,有時(shí)可見縱斜交錯(cuò)紋理及菌絲。有草酸鈣柱晶。進(jìn)口沉香粉末主要鑒別特征為木射線大多為1列細(xì)胞寬,高以5個(gè)細(xì)胞為多見;草酸鈣柱晶極少。(4)蘇木粉末主要鑒別特征為纖維及晶纖維橙黃色或無色,有稀疏的單斜紋孔。射線細(xì)胞長方形,細(xì)胞壁連珠狀增厚,木化,單紋孔較密,切向縱斷面射線寬1~2列細(xì)胞。具緣紋孔導(dǎo)管大小不一,紋孔排列緊密,導(dǎo)管中常含棕色塊狀物。薄壁細(xì)胞長方形或狹長方形,木化,紋孔明顯。草酸鈣結(jié)晶類方形,長方形,雙錐形。(5)鉤藤粉末主要鑒別特征為表皮細(xì)胞棕黃色,類方形。有草酸鈣砂晶。有韌皮纖維和韌型纖維。(6)莖木類中藥的粉末,一般情況細(xì)胞壁全部木化。習(xí)題與作業(yè)(1)習(xí)題1)寫出下列中藥性狀鑒別的主要特征桑寄生與槲寄生,川木通與關(guān)木通,大血藤與雞血藤,白木香與進(jìn)口沉香。2)寫出關(guān)木通、蘇木、沉香(白木香和進(jìn)口沉香)、鉤藤粉末顯微鑒定的主要特征。(2)作業(yè)1)寫出川木通與關(guān)木通、大血藤與雞血藤、白木香與進(jìn)口沉香性狀鑒定的主要特征。2)寫出沉香和關(guān)木通組織鑒定的主要特征,繪制關(guān)木通組織簡圖。3)寫出關(guān)木通、蘇木、沉香(白木香和進(jìn)口沉香)、鉤藤粉末鑒定的主要特征并繪圖。1.6皮類中藥材的性狀及顯微鑒定內(nèi)容提要本實(shí)驗(yàn)采用性狀和顯微鑒定法,對杜仲、厚樸、肉桂、牡丹皮、黃柏等12種皮類中藥進(jìn)行鑒定。通過實(shí)驗(yàn)掌握杜仲、厚樸、牡丹皮、黃柏的性狀及顯微鑒定特征,掌握莖、木類中藥的性狀及顯微鑒別要點(diǎn),了解桑白皮、肉桂、合歡皮、海桐皮、五加皮、秦皮、香加皮、地骨皮的性狀鑒別要點(diǎn)。原理(1)性狀鑒定是用感觀來鑒定中藥是否與規(guī)定的藥用標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)品相符合,主要進(jìn)行中藥的品種、純度鑒定或粗略地估計(jì)其品質(zhì)的優(yōu)劣。本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)觀察供試品的形狀、表面、斷面和氣味等特征,確定皮類中藥的鑒別特征。通過對單味藥性狀特征的系統(tǒng)觀察和描述,確定其性狀鑒別的主要特征。(2)顯微鑒定原理同前。儀器、材料與試劑(1)儀器與材料1)儀器同前。2)材料藥材標(biāo)本:杜仲,桑白皮,厚樸,肉桂,牡丹皮,合歡皮,海桐皮,黃柏,五加皮,秦皮,香加皮,地骨皮。橫切面永久制片:厚樸,牡丹皮,黃柏。粉末:杜仲,厚樸,牡丹皮,黃柏。(2)試劑同前。操作步驟(1)性狀鑒定取藥材標(biāo)本,首先根據(jù)形狀、外表面和內(nèi)表面、斷面特征鑒定莖皮、枝皮或根皮等,然后按照形狀、內(nèi)表面、外表面、質(zhì)地、斷面、氣味等依次觀察和描述。(2)顯微鑒定1)組織特征取組織切片,在低倍鏡下由外向內(nèi)依次觀察;內(nèi)含物的特征可在高倍鏡下觀察。厚樸橫切片:觀察和描述木栓層、木栓形成層、栓內(nèi)層、皮層、韌皮部的特征。牡丹皮橫切片:觀察和描述木栓層、皮層、韌皮部的特征。黃柏橫切片:川黃柏觀察和描述殘存的木栓層、栓內(nèi)層、皮層纖維群及石細(xì)胞群的分布、韌皮部的特征。關(guān)黃柏主要觀察和描述射線和硬韌部的特征。2)粉末特征分取各中藥粉末少許,分別用水裝片和水合氯醛制片。杜仲粉末:觀察和描述石細(xì)胞的形狀和內(nèi)含物、木栓細(xì)胞壁的增厚情況、橡膠絲的形狀及表面等特征。厚樸粉末:觀察和描述石細(xì)胞形狀和層紋、纖維的形狀、油細(xì)胞的形狀和內(nèi)含物、木栓細(xì)胞的形狀及細(xì)胞壁等特征。牡丹皮粉末:觀察和描述淀粉粒的類型、形狀和臍點(diǎn),草酸鈣結(jié)晶的類型及分布,木栓細(xì)胞的顏色等特征。黃柏粉末:關(guān)黃柏觀察和描述其石細(xì)胞的形狀、顏色和層紋,纖維的顏色及晶纖維,草酸鈣結(jié)晶和黏液細(xì)胞等特征。川黃柏主要觀察和描述其石細(xì)胞的形狀。要點(diǎn)及難點(diǎn)解答(1)皮類中藥性狀鑒定的要點(diǎn)為表面和斷面特征、氣味等。(2)厚樸組織鑒定的主要特征為木栓形成層細(xì)胞含黃棕色物質(zhì),栓內(nèi)層為石細(xì)胞環(huán)層。皮層散有油細(xì)胞、多數(shù)石細(xì)胞群、少數(shù)纖維束。韌皮部纖維束和油細(xì)胞頗多。厚樸粉末鑒定的主要特征為有不規(guī)則分枝狀石細(xì)胞,有時(shí)可見層紋。纖維細(xì)胞壁甚厚,平直,木化。有油細(xì)胞,細(xì)胞壁木化。凹葉厚樸粉末纖維細(xì)胞壁一邊呈齒狀凹凸。(3)杜仲粉末鑒定的主要特征為石細(xì)胞類長方形、類圓形、長條形或不規(guī)則形,有的胞腔中含有膠絲團(tuán)塊。木栓細(xì)胞壁三面增厚,孔溝明顯。膠絲成條或扭曲成團(tuán),表面顆粒狀。(4)牡丹皮組織鑒定的主要特征為木栓層細(xì)胞壁棕色。皮層、韌皮部薄壁細(xì)胞以及細(xì)胞間隙中含草酸鈣簇晶和淀粉粒。牡丹皮粉末鑒定的主要特征為淀粉粒眾多,有單粒和復(fù)粒。草酸鈣簇晶在薄壁細(xì)胞中排列成行或1個(gè)薄壁細(xì)胞中含有數(shù)個(gè)簇晶。木栓細(xì)胞壁淺紅色。(5)黃柏組織鑒定的主要特征為川黃柏木栓細(xì)胞長方形。皮層散有纖維群及石細(xì)胞群,。韌皮部外側(cè)有少數(shù)石細(xì)胞,纖維束切向排列呈斷續(xù)的層帶,形成硬韌部和軟韌部,有晶纖維。射線常彎曲。有黏液細(xì)胞。關(guān)黃柏的木栓細(xì)胞呈方形,射線較平直,硬韌部不甚發(fā)達(dá)。黃柏粉末鑒定的主要特征為關(guān)黃柏有不規(guī)則分枝狀石細(xì)胞,鮮黃色,層紋明顯。纖維鮮黃色,有晶纖維。黏液細(xì)胞多見。川黃柏的石細(xì)胞大多呈分枝狀。習(xí)題與作業(yè)(1)習(xí)題1)寫出下列中藥性狀鑒定的主要特征杜仲,厚樸,肉桂,牡丹皮,合歡皮,關(guān)黃柏與川黃柏、五加皮、香加皮與地骨皮。2)簡述皮類中藥橫切面的組織構(gòu)造特征。3)解釋硬韌部與軟韌部。(2)作業(yè)1)寫出下列中藥性狀鑒定的主要特征杜仲,厚樸,肉桂,關(guān)黃柏與川黃柏。2)寫出黃柏、厚樸和牡丹皮組織鑒定的主要特征,繪黃柏組織特征簡圖。3)寫出杜仲、厚樸、牡丹皮、黃柏粉末鑒定的主要特征并繪圖1.7葉及花類中藥材的性狀及顯微鑒定內(nèi)容提要本實(shí)驗(yàn)采用性狀和顯微鑒定法,對大青葉、番瀉葉、洋金花、金銀花等20種葉及花類中藥進(jìn)行鑒定。通過實(shí)驗(yàn)掌握大青葉、蓼大青葉、番瀉葉、丁香、金銀花的性狀及顯微鑒定特征,掌握葉類和花類中藥的性狀及顯微鑒別要點(diǎn),了解側(cè)柏葉、枇杷葉、枸骨葉、羅布麻葉、艾葉、松花粉、辛夷、槐花、芫花、密蒙花、洋金花、菊花、紅花、西紅花、蒲黃的性狀鑒別要點(diǎn)。原理(1)性狀鑒定是用感觀來鑒定中藥是否與規(guī)定的藥用標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)品相符合,主要進(jìn)行中藥的品種、純度鑒定或粗略地估計(jì)其品質(zhì)的優(yōu)劣。葉類中藥重點(diǎn)觀察供試品的葉片形狀、大小、顏色、表面特征、質(zhì)地、葉緣、葉端、葉基、葉脈等特征,確定葉類中藥的鑒別特征;花類中藥重點(diǎn)觀察供試品的藥用部位及其形狀、大小、表面和質(zhì)地等特征,確定花類中藥的鑒別特征。通過對單味藥性狀特征的系統(tǒng)觀察和描述,確定其性狀鑒別的主要特征。(2)柵表細(xì)胞比的測定是計(jì)算相鄰4個(gè)表皮細(xì)胞下方的柵欄細(xì)胞數(shù),在葉片的不同部位重復(fù)測定5次,取20個(gè)表皮細(xì)胞下柵欄細(xì)胞的總數(shù)計(jì)算其平均值。柵表細(xì)胞比是1個(gè)常數(shù),可用破碎葉類中藥的品種鑒定。(3)顯微鑒定的其他原理同前。儀器、材料與試劑(1)儀器與材料1)儀器同前。2)材料藥材標(biāo)本:側(cè)柏葉,蓼大青葉,大青葉,枇杷葉,番瀉葉,枸骨葉,羅布麻葉,艾葉,松花粉,辛夷,槐花,芫花,丁香,密蒙花,洋金花,金銀花,菊花,紅花,西紅花,蒲黃。橫切面永久制片:番瀉葉,丁香。粉末:大青葉,蓼大青葉,番瀉葉,丁香,金銀花。(2)試劑同前。操作步驟(1)性狀鑒定取藥材標(biāo)本,首先根據(jù)形狀、表面特征鑒定藥用部位,然后按下列順序依次觀察和描述;破碎的藥材用水浸泡后觀察。1)葉類藥材觀察其狀態(tài)、類型、葉片和葉柄等特征,觀察和描述時(shí)尤其要注意葉片的形狀、大小、顏色、表面特征、質(zhì)地、葉緣、葉端、葉基、葉脈,葉片分裂情況,以及葉柄有無、形狀、長短,平直、扭曲、槽狀、鞘狀或葉片狀、有無托葉等特征。2)花類藥材觀察首先要確定藥用部位。單花要注意觀察花萼、花冠、雄蕊群、雌蕊群等特征?;ㄐ蛩幱^察其類別、形狀、中軸、苞片、小花的數(shù)目等。此外應(yīng)觀察其形狀、大小、顏色、表面特征、質(zhì)地和氣味等。(2)顯微鑒定1)組織特征取組織切片,在低倍鏡下由外向內(nèi)依次觀察;內(nèi)含物的特征可在高倍鏡下觀察。番瀉葉葉片橫切片:觀察和描述表皮細(xì)胞內(nèi)含物和表面氣孔和非腺毛的分布情況,葉肉組織的類型,草酸鈣簇晶的分布,主脈維管束的類型及晶纖維的特征。丁香花萼筒橫切片:觀察和描述萼筒中部的表皮細(xì)胞,皮層油室的分布,維管束的數(shù)目、類型、排列方式,中柱鞘纖維,通氣組織,中心軸柱的特征。2)粉末特征分取各中藥粉末少許,分別用水裝片和水合氯醛制片。大青葉粉末:觀察和描述下表皮細(xì)胞、氣孔軸式、葉肉組織等特征。蓼大青葉粉末:觀察和描述表皮細(xì)胞的形狀和垂周壁,氣孔軸式,腺毛和非腺,葉肉組織的色素顆粒,草酸鈣結(jié)晶等特征。番瀉葉粉末:觀察和描述表皮細(xì)胞的性狀、垂周壁的情況,氣孔的軸式,非腺毛的細(xì)胞數(shù)、體部和基部的形狀、表面,晶纖維和草酸鈣簇晶等特征。丁香粉末:觀察和描述纖維形狀、花粉粒的形狀及萌發(fā)孔、草酸鈣簇晶和油室碎片等特征。金銀花粉末:觀察和描述腺毛的類型、形狀、頭部和柄部的細(xì)胞數(shù),非腺毛的形狀、細(xì)胞數(shù)和表面,草酸鈣結(jié)晶,花粉粒的形狀、外壁表面雕紋、孔溝等特征。3)顯微常數(shù)的測定番瀉葉柵表細(xì)胞比的測定:要點(diǎn)及難點(diǎn)解答(1)葉及花類中藥性狀鑒定的要點(diǎn)為藥用部位及其形狀、大小、表面和質(zhì)地等特征。(2)番瀉葉組織鑒定主要特征為上、下表面均有氣孔,下表面非腺毛較多。葉肉組織等面型。海綿細(xì)胞常含草酸鈣簇晶。主脈維管束外韌型,上、下兩側(cè)均有纖維束,有晶纖維。番瀉葉粉末鑒定主要特征為氣孔主為平軸式。非腺毛單細(xì)胞,壁有疣狀突起,基部稍彎曲。有晶纖維、草酸鈣方晶和簇晶。(3)丁香組織(萼筒中部)鑒定主要特征為表皮細(xì)胞外有較厚角質(zhì)層。皮層外側(cè)散有2~3列徑向延長的橢圓形油室,其下有20~50個(gè)小型雙韌維管束,斷續(xù)排列成環(huán)。有通氣組織。中心軸柱薄壁組織間散有多數(shù)細(xì)小維管束,薄壁細(xì)胞含眾多細(xì)小草酸鈣簇晶。丁香粉末鑒定主要特征為纖維梭形,頂端鈍圓,壁較厚?;ǚ哿1姸?,極面觀三角形,赤道表面觀雙凸鏡形,具3孔。草酸鈣簇晶眾多,直徑4~26μm,存在于較小的薄壁細(xì)胞中。油室多破碎,分泌細(xì)胞界限不清,含黃色油狀物(4)大青葉粉末鑒定的主要特征為下表皮細(xì)胞垂周壁略呈連珠狀增厚。氣孔不等式,副衛(wèi)細(xì)胞3~4個(gè)。柵欄細(xì)胞與海綿細(xì)胞無明顯區(qū)別。無毛茸。(5)蓼大青葉粉末鑒定的主要特征為氣孔平軸式,少數(shù)不等式。非腺毛多列式,壁木化增厚。葉肉組織含大量藍(lán)色至藍(lán)黑色色素顆粒。草酸鈣簇晶多見。(6)金銀花(忍冬花)粉末鑒定的主要特征為腺毛有頭部倒圓錐形和類圓形、略扁圓形兩種類型。非腺毛單細(xì)胞或2個(gè)細(xì)胞,表面有微細(xì)疣狀突起,有的具單或雙螺旋紋?;ǚ哿n悎A形或三角形,外壁表面有細(xì)密短刺及圓形細(xì)顆粒狀雕紋,具3孔溝。(7)花粉粒是花類中藥顯微鑒定的主要特征。來源不同,其花粉粒的形態(tài)差異較大。(8)葉類中藥的顯微常數(shù)有柵表細(xì)胞比、氣孔數(shù)、氣孔指數(shù)、脈島數(shù)和脈端數(shù)等,主要適用于完整的、破碎的葉類藥材及其粗粉的顯微鑒定,因?yàn)檩^細(xì)的葉類藥材的粉末中很難找到可用于測定的組織碎片。(9)番瀉葉柵表細(xì)胞比的參考數(shù)值為:尖葉番瀉葉上表面為4.5~9.5~18.0,葉下表面為3.5~7.0~14.5;狹葉番瀉葉上表面為4.0~7.5~12.1,下表面為2.5~5.1~10.5。習(xí)題與作業(yè)(1)習(xí)題1)寫出下列中藥性狀鑒別的主要特征蓼大青葉與大青葉,艾葉,辛夷,洋金花、金銀花、紅花與西紅花。2)簡述葉
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