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文檔簡介

食品微生物自動化儀器檢測第一頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二

第十五章食品微生物自動化儀器檢測

第一節(jié)全自動微生物鑒定儀器第二節(jié)全自動微生物總數(shù)和大腸桿菌快速測定儀器第三節(jié)其他快速測定儀器第二頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第一節(jié)全自動微生物鑒定儀器

檢測和鑒定細菌的標準方法是什么?一、ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)

ATBExpression是自動化微生物鑒定和藥敏分析系統(tǒng),它是從API系統(tǒng)發(fā)展而來,由法國生物—梅里埃研制生產(chǎn)。以API試劑條試條為基礎,測試品種齊全,共有750種反應,電腦數(shù)據(jù)庫不斷地完善和補充,鑒定能力強,可鑒定近700多種細菌。

第三頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二一、ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)

API細菌鑒定系統(tǒng)(生物梅里埃)鑒定產(chǎn)品包括試劑條和數(shù)據(jù)庫,試劑條通常包含20個微量生化試驗。目前系列提供的16個產(chǎn)品鑒定范圍涵蓋幾乎所有的細菌群,超過550個不同的種。將操作繁瑣、解釋冗長的傳統(tǒng)方法微量化和標準化,將生化試驗試劑條和數(shù)據(jù)庫結(jié)合起來,使鑒定工作變得容易、快速和安全。這一創(chuàng)新得益于數(shù)值鑒定法的發(fā)展。

第四頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二API細菌鑒定系統(tǒng)第五頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第一節(jié)全自動微生物鑒定儀器

一、ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)(一)系統(tǒng)原理1.微生物數(shù)值編碼鑒定技術細菌的編碼鑒定法是根據(jù)Bascomb(1978)等人的理論編制而成,新編碼鑒定法采用21項生化指標,每3項一組,計有7個組。每組的3項生化試驗,凡陽性結(jié)果者其數(shù)值分別記為1、2、4,反應陰性者記為0,爾后,分別將各組數(shù)值相加,依次組成一組7位數(shù)值的編碼,即代表所鑒定的菌株的相應菌名。一株擬態(tài)弧菌的編碼鑒定計數(shù):第六頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二一株擬態(tài)弧菌的編碼鑒定計數(shù)

第七頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)原理

選擇識別力最強的發(fā)酵試驗、同化試驗、抑制試驗、酶試驗和其他傳統(tǒng)的生化反應,經(jīng)過優(yōu)化,組成由32個反應聯(lián)合的專一鑒定試劑條。采用8進位制細菌數(shù)碼分類法,整個鑒定條10-11位數(shù)的生物數(shù)碼,與標準數(shù)據(jù)庫分類單位比較,得到相似系統(tǒng)和鑒定值,并計算模式頻率T值(Tindex),T值越接近1代表該細菌與典型菌株反應模式越接近。第八頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)第九頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)ATBExpression細菌鑒定及藥敏分析儀由閱讀器、數(shù)字顯示電子比濁儀、電子連續(xù)加樣器、電腦及打印機組成。

第十頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)主要操作程序

1、用光電比濁儀配制菌懸液,將待檢菌液濃度調(diào)節(jié)至各試條要求的范圍。

2、將試條置入普通培養(yǎng)箱35℃培養(yǎng)4或24小時。

3、將試條置入讀數(shù)器讀數(shù),并打印報告。報告內(nèi)容包括細菌鑒定、藥敏試驗S、I、R(部分試條含MIC)的結(jié)果,有豐富的專家系統(tǒng)信息,嚴格控制報告質(zhì)量。第十一頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)鑒定試條包含風干底物的反應孔,將標準濁度的菌液接種于反應孔,于指定溫度培養(yǎng)4小時/24小時后,即可上ATBExpression儀器閱讀及分析各生化孔的數(shù)據(jù).

第十二頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)閱讀器能以比色及比濁模式操作,能掃描試劑條條碼,自動判斷出試條的種類。計算機根據(jù)閱讀器檢測到的結(jié)果自動調(diào)用相應試劑條數(shù)據(jù)庫,并對數(shù)據(jù)進行分析,得出生化/同化結(jié)果(數(shù)值編碼)和藥敏試驗結(jié)果。系統(tǒng)將所得編碼跟數(shù)據(jù)庫的典型菌株生化譜比較,以客觀的2個參數(shù)(鑒定百分率及T值)計算鑒定結(jié)果。第十三頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二

取菌苔

配制菌液接種試條ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)第十四頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二上機檢測結(jié)果自動判斷保溫孵育ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)第十五頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)操作步驟第十六頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二ATBExpression細菌鑒定系統(tǒng)結(jié)果檢測第十七頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二ATBExpression細菌鑒定智能系統(tǒng)第十八頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第一節(jié)全自動微生物鑒定儀器二、全自動微生物快速鑒定儀器VITEK系統(tǒng)(一)系統(tǒng)工作原理(二)VITEK系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)組成(三)VITEK系統(tǒng)的特點(四)系統(tǒng)局限性第十九頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第一節(jié)全自動微生物鑒定儀器二、全自動微生物快速鑒定儀器VITEK系統(tǒng)(一)系統(tǒng)工作原理

VITEK對細菌的鑒定是以每種細菌的微量生化反應為基礎,不同種類的VITEK試卡(檢測卡)含有多種生化反應孔,可達30種。第二十頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第一節(jié)全自動微生物鑒定儀器二、全自動微生物快速鑒定儀器VITEK系統(tǒng)(一)系統(tǒng)工作原理VITEK卡(檢測卡)第二十一頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第一節(jié)全自動微生物鑒定儀器二、全自動微生物快速鑒定儀器VITEK系統(tǒng)(二)VITEK系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)組成1.檢測卡

2.充填機

3.讀數(shù)器/恒溫箱

4.電腦/打印機

5.電源穩(wěn)壓器和UPSVITEK微生物鑒定系統(tǒng)第二十二頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第一節(jié)全自動微生物鑒定儀器二、全自動微生物快速鑒定儀器VITEK系統(tǒng)VITEK自動化微生物分析儀由充填機/封口機、讀取器/恒溫器、電腦主機及打印機組成,充填機/封口機三分鐘內(nèi)把樣本注入試驗卡中及封口;讀取器/恒溫箱自動恒定培養(yǎng)溫度并同時讀取卡內(nèi)生化反應變化(系統(tǒng)依據(jù)不同型號,容納60至480張卡不等),電腦主機負責分析資料的儲存、系統(tǒng)的操作及分析程式的運作。第二十三頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第一節(jié)全自動微生物鑒定儀器二、全自動微生物快速鑒定儀器VITEK系統(tǒng)(三)VITEK系統(tǒng)的特點P346

可鑒定由環(huán)境、原料及產(chǎn)品分離培養(yǎng)出的微生物

主要鑒定菌種包括:腸桿菌科非發(fā)酵G(-)桿菌葡萄球菌鏈球菌酵母菌厭氧菌芽孢菌

其他測試:液體內(nèi)的細菌計數(shù)微生物生長及抑制的研究第二十四頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二二、全自動微生物快速鑒定儀器VITEK系統(tǒng)VITEK試卡的反應池內(nèi)含風干底物。試卡由標準濃度菌液充填,然后放入測試槽內(nèi),讀取器每小時量度卡片內(nèi)樣本在培養(yǎng)介質(zhì)內(nèi)生長變化值,直至最后結(jié)果打印出來.第二十五頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二二、全自動微生物快速鑒定儀器VITEK系統(tǒng)第二十六頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第二節(jié)全自動微生物總數(shù)和大腸桿菌快速測定儀器一、微生物總數(shù)快速測定儀二、ISO-GRID檢測系統(tǒng)三、大腸桿菌快速測定儀第二十七頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第二節(jié)全自動微生物總數(shù)和大腸桿菌快速測定儀器

一、微生物總數(shù)快速測定儀P347(一)原理(二)微生物總數(shù)快速測定儀的特點(三)結(jié)構(gòu)組成(四)操作步驟(五)特點第二十八頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第二節(jié)全自動微生物總數(shù)和大腸桿菌快速測定儀器二、ISO-GRID檢測系統(tǒng)

ISO-GRID檢測系統(tǒng)是一種基于疏水性網(wǎng)膜(HGMF)的過濾系統(tǒng)。該系統(tǒng)通過使用這種有1600個小方格的濾膜,來對微生物進行檢測或計數(shù)。第二十九頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第二節(jié)全自動微生物總數(shù)和大腸桿菌快速測定儀器三、大腸桿菌快速測定儀在快速檢測大腸桿菌生化反應的色原及成套鑒定系統(tǒng)(Chromogenicorfluorescencesubstratesforrapididentificationofbacteria)中,新型的色原或熒光底物已代替了傳統(tǒng)的糖類和氨基酸。此種底物是由色原(呈色)或熒光與糖類或氨基酸經(jīng)人工合成的。第三十頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第三節(jié)其他快速測定儀器

一、自動菌落計數(shù)系統(tǒng)二、應用電阻抗技術的全自動微生物監(jiān)測系統(tǒng)——BACTOMETER

三、全自動酶聯(lián)熒光免疫分析系統(tǒng)(miniVIDAS)四、API—細菌鑒定系統(tǒng)第三十一頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第三節(jié)其他快速測定儀器

一、自動菌落計數(shù)系統(tǒng)第三十二頁,共三十五頁,編輯于2023年,星期二第三節(jié)其他快速測定儀器二、應用電阻抗技術的全自動微生物監(jiān)測系統(tǒng)——BACTOMETERP351電阻抗檢測法是應用于細菌檢測的一項電化學技術,50年代美國開始出現(xiàn)以此為原理的自動化儀器。70年代~80年代歐洲也陸續(xù)開發(fā)出類似的儀器。1998年電阻抗分析法成為除平板分析法外其他微生物檢測法中首先被Germanstandardizationinstitution接受的微生物測定方法。第三十三頁

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