維生素類藥物的分析詳解演示文稿

維生素類藥物的分析詳解演示文稿1當(dāng)前第1頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)（優(yōu)選）維生素類藥物的分析2當(dāng)前第2頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)維生素：是維持人體正常代謝機(jī)能所必需的微量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。脂溶性：VitA、D2、D3、E、K1等水溶性：VitB族(B1、B2、B6、B12)、VitC、葉酸、煙酸、煙酰胺3當(dāng)前第3頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)維生素的共同特點(diǎn)：這些化合物或其前體化合物都在天然食物中存在；它們不能供給機(jī)體熱能。也不是構(gòu)成組織的基本原料，主要功用是通過(guò)作為輔酶的成份調(diào)節(jié)代謝過(guò)程，需要量極??；它們一般在體內(nèi)不能合成，或合成量不能滿足生理需要，必須經(jīng)常從食物中攝??；長(zhǎng)期缺乏任何一種維生素都會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的疾病。4當(dāng)前第4頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)維生素缺乏導(dǎo)致的病癥維生素A缺乏——夜盲癥、干眼?。▌?dòng)物內(nèi)臟、富含胡蘿卜素的蔬菜水果）維生素B1缺乏——腳氣?。ü阮?、豆類、堅(jiān)果類、瘦豬肉及動(dòng)物內(nèi)臟）維生素C缺乏——壞血?。ㄐ迈r蔬菜和水果）維生素D缺乏——小兒佝僂病與成人骨軟化病(足夠的日光、海魚、動(dòng)物內(nèi)臟、蛋黃)維生素E缺乏——一般不缺乏（體內(nèi)駐留時(shí)間長(zhǎng)）。（植物油）5當(dāng)前第5頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)R:-H維生素A醇-COCH3維生素A醋酸酯-COC15H31維生素A棕櫚酸酯第一節(jié)維生素A一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)環(huán)己烯共軛多烯醇6當(dāng)前第6頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：（1）環(huán)己烯+共軛多烯側(cè)鏈；（2）天然VA側(cè)鏈為全反式；（3）天然來(lái)源主要是魚肝油，為醋酸酯，棕櫚酸酯等,目前多由人工合成。7當(dāng)前第7頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)性質(zhì)：1、紫外吸收＊具有共軛多烯側(cè)鏈－－紫外吸收。＊最大吸收波長(zhǎng)在325～328nm，隨VA存在狀態(tài)以及所用的溶劑，最大吸收波長(zhǎng)的位置有所不同。＊有干擾物質(zhì)存在（VitA2、VitA3、鯨醇）。8當(dāng)前第8頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)VitA2VitA3鯨醇脫水去氫二聚體9當(dāng)前第9頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)2、不穩(wěn)定性：共軛多烯側(cè)鏈易被氧化，△或有金屬離子存在時(shí)氧化↑環(huán)氧化物VitA醛VitA酸10當(dāng)前第10頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)CHCl33.與三氯化銻發(fā)生呈色反應(yīng)（鑒別、含量測(cè)定）4.溶解性：不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑和植物油等。11當(dāng)前第11頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)條件：無(wú)水、無(wú)醇CHCl3二、鑒別試驗(yàn)1.三氯化銻反應(yīng)藍(lán)色紫紅12當(dāng)前第12頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)注意事項(xiàng)：無(wú)水－－水可使三氯化銻水解成氯化氧銻（SbOCl）白色沉淀，干擾比色。無(wú)醇－－乙醇可以和碳正離子作用使其正電荷消失。13當(dāng)前第13頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)λmax326nm一個(gè)吸收峰λmax350～390nm三個(gè)吸收峰2、UV法（BP2000）去水VitA（VitA3）↓VitA14當(dāng)前第14頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)15當(dāng)前第15頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)3、TLC法

BP雜質(zhì)對(duì)照品法顯色劑：三氯化銻USP顯色劑：磷鉬酸規(guī)定斑點(diǎn)顏色和Rf值16當(dāng)前第16頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)三、含量測(cè)定UV法:三點(diǎn)校正法（ChP2010第一法）三氯化銻比色法HPLC法（ChP2010第二法）17當(dāng)前第17頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)1、為何要采用三點(diǎn)校正法？維生素A原料藥中?；煊须s質(zhì)，如維生素A2、維生素A3等，這些雜質(zhì)在維生素A的最大吸收波長(zhǎng)附近有吸收，采用三點(diǎn)校正法可以消除這些雜質(zhì)的干擾。2、測(cè)定原理1）在310～340nm范圍內(nèi)，雜質(zhì)吸收呈一直線，且隨波長(zhǎng)的增大吸收度下降。2）物質(zhì)對(duì)光吸收呈加和性。三點(diǎn)校正法18當(dāng)前第18頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)3、波長(zhǎng)的選擇：一點(diǎn)選在維生素A的最大吸收波長(zhǎng)處（λ1），其它兩點(diǎn)選在λ1的兩側(cè)。第一法（等波長(zhǎng)差法）波長(zhǎng)為λ1=328nm、λ2=316nm、λ3=340nm；測(cè)定對(duì)象：VA醋酸酯第二法（等吸收比法）波長(zhǎng)為λ1=325nm、λ2=310nm、λ3=334nm；測(cè)定對(duì)象：VA醇19當(dāng)前第19頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)4、測(cè)定方法首先判斷用哪個(gè)吸收度(A328orA328(校正)）進(jìn)行含量計(jì)算。第一法：供試液濃度為9～15IU/ml，溶劑為環(huán)己烷，在300、316、328、340、360nm五個(gè)波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。1）最大吸收波長(zhǎng)在326～329nm之間，計(jì)算吸收度比值A(chǔ)i/A328，并與規(guī)定值相減，差值不超過(guò)±0.02，則用A328計(jì)算含量。20當(dāng)前第20頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)2）如果最大吸收波長(zhǎng)在326～329nm之間，5個(gè)波長(zhǎng)下的差值有一個(gè)或幾個(gè)超過(guò)±0.02，這時(shí)先計(jì)算A328（校正）：A328（校正）=3.52（2A328-A316-A340）A328（校正）-A328------------------×100%A328

再計(jì)算21當(dāng)前第21頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)若所得的數(shù)值在±3%，則仍用A328計(jì)算含量；若所得的數(shù)值在-15%～-3%之間，則用A328（校正）計(jì)算含量；若所得的數(shù)值小于-15%或大于+3%，或最大吸收波長(zhǎng)不在326～329nm之間，則應(yīng)采用第二法測(cè)定。22當(dāng)前第22頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)三點(diǎn)校正法第一法步驟小結(jié)：Ⅰ：最大吸收波長(zhǎng)是否在326-329nm間符合--Ⅱ，不符合—第二法Ⅱ：測(cè)定指定波長(zhǎng)吸收度Ⅲ：計(jì)算（A指定波長(zhǎng)/A328）比值,并與規(guī)定值比較符合--Ⅴ，不符合—ⅣⅣ：計(jì)算校正吸收度，并與實(shí)測(cè)值比較，判斷是否需要校正Ⅴ：計(jì)算328nm處樣品的E1cm1%

Ⅵ：計(jì)算效價(jià)及標(biāo)示量的百分含量維生素A醋酸酯的換算：IU/g=E1cm1%×1900

IU/丸標(biāo)示量%=×100%標(biāo)示量23當(dāng)前第23頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)第二法（皂化法，適用于維生素A醇）第一法無(wú)法消除雜質(zhì)干擾時(shí)用此法24當(dāng)前第24頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)25當(dāng)前第25頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)26當(dāng)前第26頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)27當(dāng)前第27頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)5、討論1）維生素A醋酸酯的吸收度校正公式是用直線方程式法推導(dǎo)而來(lái)：維生素A醇的吸收度校正公式是用相似三角形法推導(dǎo)而來(lái)。2）在應(yīng)用三點(diǎn)校正法時(shí)，除其中一點(diǎn)在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定外，其余兩點(diǎn)均在最大吸收峰的兩側(cè)進(jìn)行測(cè)定。如果儀器波長(zhǎng)精度不準(zhǔn)確時(shí)，會(huì)產(chǎn)生較大誤差。因此，在測(cè)定前務(wù)必要校正波長(zhǎng)，并可用全反式維生素A進(jìn)行測(cè)定，比較測(cè)定結(jié)果和比值是否與對(duì)照品相符合，以進(jìn)一步核對(duì)儀器波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確。測(cè)定的樣品應(yīng)不得少于兩份。3）中國(guó)藥典（2010年版）收載的維生素A軟膠囊采用三點(diǎn)校正法測(cè)定。28當(dāng)前第28頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)

VitAD膠丸中VitA的含量測(cè)定

精密稱取本品(規(guī)格10000VitAIU/丸)裝量差異項(xiàng)下（平均裝量0.08262g/丸）的內(nèi)容物0.2399g至250ml量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻；精密量取2.0ml，置另一20ml量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻。以環(huán)己烷為空白，測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)為328nm，并在下列波長(zhǎng)處測(cè)得吸收度，求本品中維生素A的含量。29當(dāng)前第29頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)A300：0.354A316：0.561A328：0.628A340：0.523A360：0.216A300/A328：0.555A316/A328：0.907A328/A328：1.000A340/A328：0.811A360/A328：0.299規(guī)定比值30當(dāng)前第30頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.833A360/A328：0.3440.5550.9071.0000.8110.299+0.01－0.010+0.02+0.04－－－－－=====31當(dāng)前第31頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)32當(dāng)前第32頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速缺點(diǎn)：呈色不穩(wěn)定（5～10s內(nèi)）水分干擾（反應(yīng)需要無(wú)水條件）專屬性差（有關(guān)物質(zhì)的干擾）三氯化銻有腐蝕性（注意安全）λmax618nm～620nm2、三氯化銻比色法(標(biāo)準(zhǔn)曲線法)33當(dāng)前第33頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)3、HPLC法（ChP2010新增的分析方法）適用于維生素A醋酸酯原料及其制劑中維生素A的含量測(cè)定。34當(dāng)前第34頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)第二節(jié)維生素E一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)名稱：消旋—α—生育酚醋酸酯母核：苯駢二氫吡喃衍生物苯環(huán)上有一乙?；姆恿u基側(cè)鏈：脂肪烷烴35當(dāng)前第35頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)化學(xué)性質(zhì)：1、易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水2、UV:284nm(乙醇)3、酯鍵易水解4、對(duì)氧敏感，易氧化△36當(dāng)前第36頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)橙紅色二、鑒別1.硝酸反應(yīng)（chp2010）取本品約30mg，加無(wú)水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，搖勻，在75℃加熱15分鐘，溶液應(yīng)顯橙紅色。37當(dāng)前第37頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)生育紅（橙紅色）生育酚HNO3強(qiáng)氧化劑38當(dāng)前第38頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)△[O]2.三氯化鐵－聯(lián)吡啶反應(yīng)紅色39當(dāng)前第39頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)生育酚對(duì)-生育醌[O]弱氧化劑40當(dāng)前第40頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)3.UV法284nm254nm41當(dāng)前第41頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)4.TLC法薄層板硅膠G展開(kāi)劑環(huán)己烷-乙醚（4：1）顯色劑硫酸（105℃5′）

VitERf

=0.742當(dāng)前第42頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)三、檢查：游離生育酚硫酸鈰滴定液（0.01mol/L）指示劑：二苯胺（亮黃→灰紫）

2.試劑1.原理：利用游離生育酚的還原性，將硫酸鈰還原成硫酸亞鈰43當(dāng)前第43頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)3、方法取本品0.10g，加無(wú)水乙醇5ml溶解后，加二苯胺試液1滴，用硫酸鈰液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸鈰液（0.01mol/L）不得過(guò)1.0ml。44當(dāng)前第44頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)四、含量測(cè)定1.GC法（ChP2010）載氣→N2固定液→硅酮（OV-17）擔(dān)體→硅藻土或高分子多孔小球柱溫→265℃檢測(cè)器→FID內(nèi)標(biāo)→正三十二烷色譜條件適用性試驗(yàn)n≥500，R≥245當(dāng)前第45頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)46當(dāng)前第46頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)2、JP-RP-HPLC法樣品→dl－α－生育酚固定相→十八烷基硅烷鍵合硅膠流動(dòng)相→甲醇-水（49：1）檢測(cè)波長(zhǎng)→292nmR＞2.6RSD≤0.8%色譜條件47當(dāng)前第47頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)原理：利用生育酚的易氧化性指示劑：二苯胺（亮黃→灰紫）△3、鈰量法48當(dāng)前第48頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)氨基嘧啶環(huán)－CH2－噻唑環(huán)(季銨堿)Cl-·HCl第四節(jié)維生素B1一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)49當(dāng)前第49頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)3.硫色素反應(yīng)4.堿性：嘧啶環(huán)——伯氨，噻唑環(huán)——季銨可與酸成鹽與生物堿↓→↓含量測(cè)定——非水堿量法1.溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性2.UV:246nm(鹽酸液)50當(dāng)前第50頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)1.硫色素反應(yīng)（維生素B1專屬反應(yīng)）二、鑒別試驗(yàn)51當(dāng)前第51頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)H+H+2.沉淀反應(yīng)H+52當(dāng)前第52頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)3、硝酸鉛反應(yīng)4、氯化物反應(yīng)53當(dāng)前第53頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)三、含量測(cè)定1.非水溶液滴定法（ChP2010）喹那啶紅－亞甲藍(lán)（紫紅→天藍(lán)）加入醋酸汞的目的－－消除氫鹵酸鹽對(duì)非水滴定的干擾。54當(dāng)前第54頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)2.UV法246nm55當(dāng)前第55頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)3.硫色素?zé)晒夥∟aOH56當(dāng)前第56頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)自學(xué)--維生素D:了解雜質(zhì)檢查中麥角甾醇的檢查；2.初步掌握正相高效液相色譜法的應(yīng)用。57當(dāng)前第57頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)L－抗壞血酸第五節(jié)維生素C一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)58當(dāng)前第58頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)1.強(qiáng)還原性：烯二醇結(jié)構(gòu)59當(dāng)前第59頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)△50℃2.結(jié)構(gòu)與糖類相似，具糖的性質(zhì)----糖類的顯色反應(yīng)3.UV特征(243nm)4.溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性。60當(dāng)前第60頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)5.酸性：一元酸C3－OH，pKa=4.17C2－OH，pKa=11.5761當(dāng)前第61頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)6.水解反應(yīng)：與堿反應(yīng)62當(dāng)前第62頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)二、鑒別試驗(yàn)1.與氧化劑的反應(yīng)63當(dāng)前第63頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)1)與AgNO3反應(yīng)(ChP2010)2)與2，6-二氯靛酚反應(yīng)(ChP2010)氧化型玫瑰紅色藍(lán)色OHˉ（還原型）64當(dāng)前第64頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)3)與堿性酒石酸銅反應(yīng)（USP）4)與KMnO4反應(yīng)65當(dāng)前第65頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)2.糖類的反應(yīng)糠醛：3.UV0.01mol/LHCL液中，λmax＝243nm66當(dāng)前第66頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)指示劑：淀粉指示液三、含量測(cè)定1.碘量法（ChP2010）原理67當(dāng)前第67頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過(guò)的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色，在30秒內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6方法68當(dāng)前第68頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)酸性環(huán)境：減慢VitC被O2氧化速度新沸冷H2O：趕走水中O2

立即滴定：減少O2的干擾附加劑干擾的排除：討論片劑——滑石粉——過(guò)濾注射劑——抗氧劑——丙酮Na2SO3NaHSO3

Na2S2O3Na2S2O569當(dāng)前第69頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)2.2，6-二氯靛酚滴定法原理方法自身指示劑終點(diǎn)法70當(dāng)前第70頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)討論（1）酸性環(huán)境（HPO3-HAc）：

穩(wěn)定VitC（2）快速滴定（2min內(nèi)）：

防止其他還原性物質(zhì)干擾（3）剩余比色測(cè)定71當(dāng)前第71頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)（4）缺點(diǎn)

需經(jīng)常標(biāo)定貯存≤一周干擾多氧化力較強(qiáng)（5）專屬性比碘量法高，多用于維生素C制劑的分析。不穩(wěn)定72當(dāng)前第72頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)在三氯醋酸或鹽酸存在下，經(jīng)水解、脫羧、失水后，加入吡咯即產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物的藥物應(yīng)是A.氯氮卓B.維生素AC.普魯卡因D.鹽酸嗎啡E.維生素C習(xí)題73當(dāng)前第73頁(yè)\共有79頁(yè)\編于星期四\21點(diǎn)中國(guó)藥典（2005年版）采用以下何法測(cè)定維生素E含量A.酸堿滴定法B.氧化還原法C.紫外分光光度法D.氣相色譜法E.非水滴定法74