細(xì)胞生物學(xué)常用研究方法

Southern雜交:是體外分析特異DNADNA或線粒體DNA切成DNA通過放射自顯影，即可辨認(rèn)出與探針互補(bǔ)的特殊核苷序列。將RNA轉(zhuǎn)移到薄膜上，用探針雜交，則稱為Northern雜交。RNAi技術(shù):是指在進(jìn)化過程中高度保守的、由雙鏈RNA（double-stranded誘發(fā)的、同源mRNA高效特異性降解的現(xiàn)象。由于使用RNAi技術(shù)可以特異性剔除或關(guān)閉療領(lǐng)域?？梢岳胹iRNA或siRNA表達(dá)載體快速、經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便的以序列特異方式剔除目的基因表達(dá)，所以現(xiàn)在已經(jīng)成為探索基因功能的重要研究手段。SouthernDNA片段，將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA特定DNA]。強(qiáng)度，顯示出與電子束同步的掃描圖像。細(xì)胞顯微分光光度計(jì)：用來描述薄膜、涂層厚度超過1微米的物件的光學(xué)性能的顯微技術(shù)。()超薄切片機(jī)，大多數(shù)生物材料，如果固定、包埋處理得合適，可以切成50-100切片。Northern印跡雜交Northernblo。這是一種將RNA上的方法。（含AgBr或AgCl）（14C核磁共振技術(shù)：可以直接研究溶液和活細(xì)胞中相對(duì)分子質(zhì)量較小(20，000道爾頓以下)的蛋白質(zhì)、核酸以及其它分子的結(jié)構(gòu)，而不損傷細(xì)胞。DNA序列分析：在獲得一個(gè)基因序列后，需要對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析，從中盡量發(fā)掘信ORF表達(dá)譜分析等，能夠闡明基因的基本信息。:結(jié)合，形成或RNA-RNA鏈分子核苷酸序列間是否具有互補(bǔ)關(guān)系。（一）原位雜交insituhybridizatio。用于檢測(cè)染色體上的特殊DNA序列。最初是使用帶放射性的DNA疫探針法。蛋白質(zhì)印跡法：即WesternBlot。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。其基本原理是通過特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中的表達(dá)情況的信息。GF（綠色熒光蛋白）GFPShi等人曾報(bào)道將GFP用作環(huán)境檢測(cè)以及探測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程等等。負(fù)染技術(shù):()1.5nm左右。,兩個(gè)或兩個(gè)以上的異源()(cellfusion)(cellhybridization)冰凍蝕刻freeze-etching: 亦稱冰凍斷裂標(biāo)本置于干冰或液氮中冰凍然后斷開升溫后冰升華，暴露出了斷面結(jié)構(gòu)。向斷裂面上噴涂一層蒸汽碳和鉑。然后將組織溶掉把碳和鉑的膜剝下來，此膜即為復(fù)膜replic。BrdUincorporation：阿糖胞苷（Ara-C）A549Ara—C體外作用于／t549細(xì)胞，噻唑藍(lán)還原法（MTT法）Ara—CA549細(xì)胞增殖的抑制作用；Hoechst33258熒光染色觀察細(xì)胞核形態(tài)學(xué)的變化；單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)（cometassay）A549DNAWesternblottingA549Ara-CA549細(xì)胞的增殖有明顯抑制作用；觀察到特異性的凋亡小體；Ara—CA549DNA鏈斷裂，并呈明顯劑量依賴性增強(qiáng)：Westernblotting顯示ADP核糖聚合酶被剪切降解。結(jié)論揭示了Ara—C明顯A549Ara-CA549細(xì)胞有明顯的化療作用。實(shí)也是生物體的精妙的調(diào)控機(jī)制。采用干細(xì)胞治療有著多種優(yōu)勢(shì)：低毒性（或無毒性采用干細(xì)胞治療有著多種優(yōu)勢(shì)：低毒性（或無毒性，即使不完全了解疾病發(fā)病的確切機(jī)iPS應(yīng)器官替代移植，人類將有可能延年益壽。iPSiPS細(xì)胞是通過基因轉(zhuǎn)染技術(shù)（genetransfection）將某些轉(zhuǎn)錄因子導(dǎo)入動(dòng)物或入的體細(xì)胞，使體細(xì)胞直接重構(gòu)成為胚胎干細(xì)胞（embryonicstemcell,ESC）細(xì)胞樣的多潛能細(xì)胞。50-100nm格有被小窩，一種小分子GTP解與其結(jié)合的GTP引起頸部縊縮，最終脫離質(zhì)膜形成網(wǎng)格蛋白有被小泡。1內(nèi)質(zhì)網(wǎng)選用放射性標(biāo)記的CDP2用羅丹明標(biāo)記微管蛋白連續(xù)注入培養(yǎng)細(xì)胞，用熒3oligo-dT對(duì)提取的RNA進(jìn)行親和層析，提取MRNA進(jìn)行southern雜交。456掃描電鏡技術(shù)，概念你自己7用綠色熒光蛋白標(biāo)記CENP-E8用BRduincorporation培養(yǎng)，會(huì)引起DNA突9用RNA干擾技術(shù)，本質(zhì)是與mRNA10，用熒光共振能量轉(zhuǎn)移或酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)。杉醇還可抑制細(xì)胞在層粘連蛋白上的粘附作用。紫杉醇可使微管蛋白和組成微管的微管蛋白,,從而阻止它是由2(α和,微管蛋白和組成