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果蠅形態(tài)生活史第一頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私夤壍纳盍?xí)性,掌握果蠅飼養(yǎng)管理的方法,鑒定果蠅的雌雄性別和突變性狀第二頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六.shortgenerationtimeforaeukaryoticorganisms(twoweeks),largeoffspringsavailabilityofmanymutantscontrollingspecificphenotypeslargechromosomeswithwell-definedcytogeneticsystemsurviveswellinthelabandmatingareeasilyperformedcurrently,thebestorganismtostudydevelopmentalgeneticstransposableelementscanbemanipulatedtoclonegenescanbegeneticallyengineered用果蠅做實(shí)驗(yàn)材料有許多優(yōu)點(diǎn):第三頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第四頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六果蠅對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)研究的貢獻(xiàn)果蠅的整個(gè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)大約分布了300,000個(gè)神經(jīng)元,按照神經(jīng)元所處位置又分為食管上神經(jīng)節(jié)(supraoesophagealganglion)、食管下神經(jīng)節(jié)(suboesophagealganglion)以及胸腹神經(jīng)節(jié)(thorax-abdominalganglia)三部分,前兩者又統(tǒng)稱頭節(jié)。除視葉(opticlobe)以外的食管上神經(jīng)節(jié)及食管下神經(jīng)節(jié)組成了通常意義上的果蠅的腦——中央腦(centralbrain),其中包含了大約50,000個(gè)神經(jīng)元。第五頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第六頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六果蠅的神經(jīng)系統(tǒng)相對(duì)于脊椎動(dòng)物等其它物種來(lái)說(shuō)相對(duì)簡(jiǎn)單,因而對(duì)其生理、生化及解剖的研究相對(duì)簡(jiǎn)單易行。但是它的神經(jīng)系統(tǒng)又具有一定的復(fù)雜性,使得果蠅可以完成覓食、交配、求偶、學(xué)習(xí)記憶以及晝夜節(jié)律等復(fù)雜行為。果蠅無(wú)論在蛋白質(zhì)分子基礎(chǔ),還是信號(hào)傳導(dǎo)通路;無(wú)論是神經(jīng)編碼方式,還是突觸傳遞機(jī)制,以及神經(jīng)疾病的發(fā)生和病癥上,都與哺乳動(dòng)物有高度的相似性。因此,以果蠅為模型,研究神經(jīng)系統(tǒng)的一些基本問(wèn)題,是一個(gè)簡(jiǎn)捷而有效的途徑。第七頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六Fru(fruitless)第八頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第九頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第十頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第十一頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六黑腹(普通)果蠅(Drosophilamelanogaster)為雙翅目昆蟲,果蠅屬,具完全變態(tài)。3000(513)個(gè)種或亞種,2n=12——2n=6家蠅(Muscadomesticadomestica...雙翅目(Diptera)蠅科(Muscidae)雙翅目:一對(duì)翅膀+一對(duì)平衡棒第十二頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六1、生長(zhǎng)迅速每10-12天左右即可完成一個(gè)世代;10℃15℃20℃25℃卵→幼蟲幼蟲→成蟲57天18天8天6.3天5天4.2天第十三頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六生活史果蠅的生活史包括卵、幼蟲、蛹、成蟲四個(gè)連續(xù)的發(fā)育階段(圖3-1)。卵:卵白色,長(zhǎng)橢圓形,長(zhǎng)約0.5mm,在背面的前端伸出一對(duì)觸絲,它能使卵附著在柔軟的食物上,不至于深陷到食物中去。幼蟲:幼蟲從卵中孵化出來(lái)后,經(jīng)過(guò)兩次蛻皮到第三齡期,體長(zhǎng)可達(dá)4~5mm。在解剖鏡下觀察可見一端稍尖為頭部,并且有一黑點(diǎn)即口器;稍后有一對(duì)半透明的唾腺,每條唾腺前有一條唾腺管向前延伸,然后會(huì)合成一條導(dǎo)管通向消化道。神經(jīng)節(jié)位于消化道前端的上方。蛹:幼蟲生活七天左右即化蛹,化蛹前從培養(yǎng)基中爬出附在瓶壁上,漸次形成一個(gè)棱形的蛹。起初顏色淡黃、柔軟,以后逐漸硬化,變?yōu)樯詈稚@就顯示即將羽化了。第十四頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六
圖3-1果蠅生活史1.卵2.一齡幼蟲3.二齡幼蟲4.三齡幼蟲5.蛹6.成蟲(雄)7.成蟲(雌)4-5天1天1天1天3-4天第十五頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六成蟲:剛羽化出的果蠅,身體狹長(zhǎng),翅還沒有展開,身體較白嫩,此時(shí)野生型體色與黑檀體體色都是一樣的,沒有多大區(qū)別。不久,蠅體變?yōu)榇侄虣E圓形,雙翅展開,體色加深,如野生型果蠅的體色成為灰褐色,突變型黑檀體果蠅的體色成為烏黑色。果蠅生活周期的長(zhǎng)短與溫度關(guān)系密切,30℃以上時(shí)果蠅則將不育且瀕臨死亡,低溫則使它的生活周期延長(zhǎng),同時(shí)生活力也降低。培養(yǎng)果蠅的最適溫度是20~25℃。第十六頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2、繁殖能力強(qiáng)每只受精的雌蠅可以產(chǎn)卵500個(gè)左右,因此在短時(shí)間內(nèi)即可獲得大量的子代,便于遺傳分析;3、飼養(yǎng)容易以玉米粉等做飼料就可以生長(zhǎng)繁殖;4、突變性狀多達(dá)400以上,且多數(shù)是形態(tài)變異,容易觀察。第十七頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六三、實(shí)驗(yàn)材料野生型果蠅及幾種常見的突變型果蠅第十八頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟(一)果蠅麻醉檢查果蠅或進(jìn)行果蠅雜交時(shí),應(yīng)先進(jìn)行麻醉,使其保持安靜狀態(tài)。果蠅具有以下一些特性:一是具有趨光性,二是喜歡向上爬。掌握了這些特性,我們就能很方便地將果蠅從培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到麻醉瓶中。向麻醉瓶中滴入幾滴乙醚,約半分鐘,果蠅即被麻醉。注意不能麻醉過(guò)度,如果果蠅的翅膀與身體呈45o角翹起,表明麻醉過(guò)度,不能復(fù)蘇而死亡。麻醉后的果蠅放在濾紙上方便觀察。檢查后的果蠅可以放回原培養(yǎng)瓶中,也可以進(jìn)行處死。第十九頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六(二)果蠅雌雄性別的鑒別果蠅有雌雄之分,幼蟲期較難區(qū)別,成蟲期則較易區(qū)別(圖3-2)。雌雄第二十頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六雌雄果蠅的比較:1.體型雌果蠅體型較大,雄果蠅較??;2.腹部末端雌性腹部橢圓,末端稍尖,雄性末端鈍圓;3.腹部背面雌性有明顯5條黑色條紋,雄性有三條,前兩條細(xì),后一條寬,延至腹面,肉眼看其腹部末端呈現(xiàn)一明顯黑點(diǎn)。4.腹部腹面雌性有較明顯的6個(gè)腹片,雄性有4個(gè)腹片。5.性梳雄性第一對(duì)足的跗節(jié)基部外側(cè)有黑色鬃毛狀性梳(圖3-3),雌性則無(wú)。性梳的有無(wú),是鑒別雌雄性果蠅的明顯標(biāo)志之一。第二十一頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六腹部體節(jié)數(shù)目:
雌果蠅6節(jié),腹部底部為產(chǎn)卵管,呈現(xiàn)圓錐狀凸出。
第二十二頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六腹部體節(jié)數(shù)目:
雄果蠅4節(jié),腹部底部為交尾器,呈現(xiàn)黑色圓形外觀。
第二十三頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六圖3-3左:雄性果蠅的左前足中:跗節(jié)基部的性梳右:雌果蠅無(wú)性梳C、基節(jié)TR、轉(zhuǎn)節(jié)F、腿節(jié)TI、脛節(jié)TA、跗節(jié)第二十四頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六(三)幾種常見的突變性狀實(shí)驗(yàn)中常用的果蠅突變性狀多可用肉眼鑒別,有一些則可借助于解剖鏡辨認(rèn),這些性狀一般都是明顯而穩(wěn)定的。突變名稱基因符號(hào)性狀特征在染色體上座位白眼殘翅黃體黑檀體焦毛小翅wvgyeSnm復(fù)眼白色翅全退化,部分殘留不能飛全身呈淺橙黃色身體呈烏木色,黑亮剛毛卷曲如燒焦?fàn)畛岫虄H長(zhǎng)至腹端X1.5ⅡR67.0X0.0ⅢR70.7X21.0X36.1第二十五頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六果蠅常見突變性狀突變性狀基因符號(hào)染色體號(hào)性狀特征棒眼B1復(fù)眼呈狹窄垂直棒形,小眼數(shù)少褐眼bw2眼呈褐色卷曲翅Cy2翅膀向上卷曲,純合致死小翅m1翅膀小,長(zhǎng)度不超過(guò)身體白眼w1復(fù)眼白色黑檀體e3身體呈烏木色,黑亮黑體b2體黑色,比黑檀體深黃體y1全身呈淺橙黃色殘翅vg2翅明顯退化,部分殘留,不能飛叉毛f1毛和剛毛分叉且彎曲猩紅眼st3復(fù)眼呈明亮猩紅色墨色眼se3羽化時(shí)眼呈褐色并深化成墨色第二十六頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:黃體(y)第二十七頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:白眼(w)第二十八頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:朱紅眼(v)第二十九頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:墨黑眼(se)第三十頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:棒眼(B)第三十一頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:小翅(m)第三十二頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:卷翅(Cy)第三十三頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:殘翅(vg)第三十四頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:短翅(dp)第三十五頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:無(wú)橫隔脈(cv)第三十六頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:短剛毛(Sb)第三十七頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六突變型:叉毛(f)第三十八頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六(四)果蠅培養(yǎng)基果蠅在水果攤或果園里??梢姷?,但它并不是以水果為食,而是采食生長(zhǎng)在水果上的酵母菌,因此實(shí)驗(yàn)室內(nèi)凡能發(fā)酵的基質(zhì),均可作為果蠅的飼料。實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基配制方法是:玉米粉為主料:300ml+3gagar+26gsucrose+20gmaizepowder+2.8gyeastextract+2mlaceticacid50gbanana防止培養(yǎng)基長(zhǎng)霉,加2ml丙酸作為防腐劑。第三十九頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六(五)原種培養(yǎng)在作新的留種培養(yǎng)時(shí),應(yīng)仔細(xì)檢查果蠅有沒有混雜,有沒有突變個(gè)體的產(chǎn)生。一般一瓶放兩對(duì)親本為宜。果蠅移入新瓶時(shí),需將瓶子橫放,待果蠅清醒過(guò)來(lái)后再把培養(yǎng)瓶豎起。原種每2~4周換一次培養(yǎng)基,最好每一個(gè)品種分成兩套分別培養(yǎng)。標(biāo)簽上標(biāo)明品種名稱和日期,溫度控制在18℃左右。第四十頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期六原種果蠅培養(yǎng)常遇到的麻煩是培養(yǎng)基發(fā)霉。導(dǎo)致發(fā)霉的原因很多,用具沒有消毒,空氣
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