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文檔簡(jiǎn)介
基因技術(shù)與人類(lèi)的關(guān)系第一頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五從DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)——基礎(chǔ)性研究階段(20世紀(jì)50年代開(kāi)始):遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,以及表達(dá)和調(diào)控有了全面的認(rèn)識(shí),為通過(guò)對(duì)遺傳物質(zhì)的修飾和改造,定向的獲得人類(lèi)所需要的成分打下了基礎(chǔ)。商業(yè)化生產(chǎn)階段(20世紀(jì)80年代以來(lái)):第二頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五一、轉(zhuǎn)基因植物與農(nóng)業(yè)生產(chǎn)二、基因技術(shù)與人類(lèi)健康三、生物技術(shù)在工業(yè)中的應(yīng)用第三頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五轉(zhuǎn)基因植物與農(nóng)業(yè)生產(chǎn)
(一)、轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)1、植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)定義
將優(yōu)良性狀的目的基因?qū)胫参锛?xì)胞或組織,并在其中進(jìn)行表達(dá),從而使植物獲得新的性狀。2、轉(zhuǎn)基因方法介紹
原生質(zhì)體為受體的直接轉(zhuǎn)化法(簡(jiǎn)稱(chēng)原生質(zhì)體法)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法(1974年)
基因槍法(1987年)第四頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五
基因槍第五頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五
3.轉(zhuǎn)基因植物研究發(fā)展
1983年,轉(zhuǎn)基因煙草、胡蘿卜問(wèn)世
1987年,轉(zhuǎn)基因油菜、棉花產(chǎn)生
1988年,轉(zhuǎn)基因水稻、玉米誕生
1992年,培育出轉(zhuǎn)基因小麥
1994年,培育出轉(zhuǎn)基因大麥20余種植物產(chǎn)品通過(guò)FDA認(rèn)證13個(gè)國(guó)家種植轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化:遍布6大洲2000年商業(yè)化種植面積比1996年翻了幾倍預(yù)測(cè):2020年世界上80%-90%的農(nóng)作物將是轉(zhuǎn)基因植物第六頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五4.轉(zhuǎn)基因作物種植面積的發(fā)展:1996年170萬(wàn)公頃。1997年1100萬(wàn)公頃。1998年2780萬(wàn)公頃。
1999年3990萬(wàn)公頃。2000年4420萬(wàn)公頃。
2001年全球轉(zhuǎn)基因植物種植面積首次突破5000萬(wàn)公頃。以轉(zhuǎn)基因性狀而言,2001年種植面積最大的仍然是抗除草劑轉(zhuǎn)基因作物,其次是抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因作物。種植面積最大的國(guó)家仍然是美國(guó),2001年種植面積達(dá)3570萬(wàn)公頃,其次為阿根廷1180萬(wàn)公頃,加拿大320萬(wàn)公頃,中國(guó)150萬(wàn)公頃。第七頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五(二)轉(zhuǎn)基因植物研究現(xiàn)狀提高作物抗性抗蟲(chóng)棉、抗蟲(chóng)玉米、抗蟲(chóng)水稻、抗蟲(chóng)馬鈴薯、抗除草劑大豆、抗除草劑玉米、抗白葉枯水稻等。改良品質(zhì)高含油玉米,使玉米含油量從3.5%升高至8.5%(美國(guó)杜邦公司投資17億美元)改善大豆蛋白質(zhì)質(zhì)量,使其具有肌肉蛋白的營(yíng)養(yǎng)含ω-3不飽和脂肪酸的高含油大豆含40%月桂酸的油菜籽耐儲(chǔ)藏的延熟番茄增加馬鈴薯的固形物含量,以減少炸薯?xiàng)l用油第八頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五保健型作物把植物改造成重要的藥物(抗體)或工業(yè)原料的生產(chǎn)工廠----生物反應(yīng)器(生產(chǎn)口服疫苗),利用香蕉、西紅柿生產(chǎn)口服疫苗提高植物抗逆性抗低溫、抗寒基因香蕉抗鹽、抗旱植物,抗病基因:抗霉菌的轉(zhuǎn)基因葡萄,提高德國(guó)雷司令葡萄酒的口味,保證了德國(guó)的葡萄酒的純正口味第九頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五(三)商業(yè)化生產(chǎn)步伐加快2000年底,世界各國(guó)批準(zhǔn)的商業(yè)化生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因作物有100多種,包括12種農(nóng)作物,涉及轉(zhuǎn)基因食品達(dá)4000余種在美國(guó)市場(chǎng)包裝食品中轉(zhuǎn)基因成分占60%,轉(zhuǎn)基因食品的總交易量:1996年2.35億美元
1998年12-15億美元
2000年30億美元以上預(yù)計(jì)2005年60億美元
2010年200億美元第十頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五基因作物產(chǎn)品的銷(xiāo)售額增長(zhǎng)
1997年40億美元
2002年85億美元第十一頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五轉(zhuǎn)基因技術(shù)帶來(lái)了育種方法的革命傳統(tǒng)雜交育種:時(shí)間長(zhǎng),至少需要8-12年突變育種:可加快育種速度,誘變的隨機(jī)性高,篩選工作繁重分子育種:時(shí)間短,目的性強(qiáng)第十二頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五第十三頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五第十四頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五第十五頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五突變育種:CropCultivarNameMethodUsedtoInduceMutationriceCalrose76gammarayswheatAbovesodiumazideLewisthermalneutronsoatsAlamo-XX-raysgrapefruitRioRedthermalneutronsStarRubythermalneutronsburmudagrassTifeaglegammaraysTifgreenIIgammaraysTift94gammaraysTifwayIIgammarayslettuceIceCubeethylmethanesulphonateMini-GreenethylmethanesulphonatecommonbeanSeafarerX-raysSeawayX-rayslilacPrairiePetitethermalneutronsSt.AugustinegrassTXSA8202gammarays第十六頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五分子育種程序:第十七頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五標(biāo)記基因啟動(dòng)子外源目的基因終止序列DNA---mRNA---蛋白質(zhì)-性狀第十八頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五第十九頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五第二十頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五第二十一頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五轉(zhuǎn)基因植物的生產(chǎn)(圖例)樣品比較(左為普通棉花,右為兔毛轉(zhuǎn)基因棉花)抗除草劑大豆第二十二頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五抗除草劑作物第二十三頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五抗蟲(chóng)棉花第二十四頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五第二十五頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五第二十六頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五抗CMV病毒轉(zhuǎn)基因番茄抗CMV病毒轉(zhuǎn)基因甜椒轉(zhuǎn)查爾酮合酶矮牽牛花第二十七頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五Twotomatoplantsartificiallyinoculatedwithbacterialspeckdisease.Plantonlefthasbeengeneticallyengineeredwithageneforresistancetothedisease,andplantonrightisasusceptible,non-engineeredvariety.第二十八頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五Swissresearchershaveproducedricecapableofsynthesizingbeta-carotene,theprecursorofVitaminA(Yeetal.,2000).Thisricevarietyisnowbeingcrossedintoadaptedvarieties,withfieldtestspossibleinayearortwo.
Grapevinesaresusceptibletoseveraldiseasesthatreducetheamountandthequalityofwinegrapesandtablegrapesorevenkillthevine.Genesthatconferresistancetoparticulardiseaseswouldreducethecostofbattlingdiseasesinthevineyard.ResearchersattheUniversityofFloridahavepatentedamethodforproducinggrapevinesthatcarryasilkwormgenetoprovideprotectionfromPierce'sdisease,afatalbacterialdiseasethataffectsgrapesandseveralotherplants.第二十九頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五Improvednutritionalcontentanddelayedripeningaretransgenictraitsofinterestintomatoes.Source:USDACanolaisamajoroilseedcrop.TransgenicresearchhasfocusedonimprovingthenutritionalqualityofcanolaoilbyenhancingtheVitaminEcontentorbymodifyingthebalanceoffattyacids.Nicotine-freetobaccoisnowbeinggrownforaprojectedintroductionofnicotine-freecigarettes第三十頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五Decaffeinatedcoffeeisnowmadebytreatingcoffeebeanstoremovethecaffeine.Othermethodsarecriticizedforremovingsomeofthedesirable,flavor-producingcomponentsalongwiththeundesirablecaffeine.PapayaisatropicalfruitrichinVitaminsAandC,butsusceptibletoanumberofseriouspestsanddiseases.ThetransgenicvarietyUHRainbow,resistanttothepapayaringspotvirus,iscurrentlyinproductioninHawaii.第三十一頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五ImprovedTurfgrassforLawnsandRecreationalAreas
Thereareanumberofenvironmentalconcernsassociatedwiththecurrentuseofturfgrass.Theseincludetheamountofchemicalsapplied(fertilizers,herbicides,fungicides,andevengreendyes);thelargequantityofwaterrequiredtokeeplawnshealthy,especiallyintheWest;theenergyrequiredtomowlawns
第三十二頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五Foodcropsengineeredtoproduceediblevaccinesagainstinfectiousdiseaseswouldmakevaccinationmorereadilyavailabletochildrenaroundtheworld.Whitemold(Sclerotinia)isaseriousproblemforsunflowerproducersinsomeareas.Resistancetothisdiseasewouldexpandtheareainwhichsunflowerscanbegrownandmightimproveyieldsinareasofcurrentcultivation.Acommerciallyavailablecultivarisnotexpectedbefore2005.第三十三頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五轉(zhuǎn)基因植物種植面積增長(zhǎng)速度第三十四頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五第三十五頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五(三)轉(zhuǎn)基因植物的發(fā)展趨勢(shì)1.抗逆基因及抗逆分子育種2.提高作物品質(zhì):高含油、低飽和脂肪酸、高必需氨基酸、高營(yíng)養(yǎng)(營(yíng)養(yǎng)功能基因,維生素E)3.生物反應(yīng)器-含疫苗的農(nóng)作物4.清除重金屬作物等第三十六頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五基因工程與人類(lèi)健康第三十七頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五一、人類(lèi)基因組計(jì)劃概述(一)人類(lèi)基因組計(jì)劃
第三十八頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五1、人類(lèi)基因組計(jì)劃的提出1986年,美國(guó)生物學(xué)家、諾貝爾獎(jiǎng)獲得者RenatoDulbecco首次提出人類(lèi)基因組計(jì)劃(簡(jiǎn)稱(chēng)
HGP)的設(shè)想。
1988年,國(guó)際人類(lèi)基因組織成立。
1987年,中國(guó)開(kāi)始在“863計(jì)劃”中設(shè)立人類(lèi)基因組研究課題。
1990年,美國(guó)國(guó)會(huì)批準(zhǔn)正式啟動(dòng)人類(lèi)基因組計(jì)劃。
1999年,中國(guó)正式加入國(guó)際研究計(jì)劃,完成1%,成為參與這一研究的唯一的一個(gè)發(fā)展中國(guó)家。3號(hào)染色體上的三千萬(wàn)個(gè)堿基對(duì)。第三十九頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五2、人類(lèi)基因組的概念整個(gè)基因組:DNA全部序列,10萬(wàn)個(gè)基因基因定位基因作圖基因克隆第四十頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五生物物種間的差異第四十一頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五人的個(gè)體差異第四十二頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五人染色體及其標(biāo)準(zhǔn)帶紋(常染色體和性染色體)差異差生的原因:染色體—DNA—氨基酸第四十三頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)(遺傳物質(zhì))決定形狀的氨基酸序列(由DNA決定)第四十四頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五人染色體上的30億個(gè)堿基對(duì)第四十五頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五一個(gè)堿基突變—氨基酸變異—蛋白質(zhì)變異—人類(lèi)疾?。ㄧ牭缎载氀。汗劝彼帷i氨酸)第四十六頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五
由于染色體、核基因突變導(dǎo)致的遺傳性疾?。喝旧w病:先天愚型或稱(chēng)唐氏綜合癥,也稱(chēng)21三體綜合征單因子遺傳病:由單一因子引起的遺傳性疾病。常染色體顯性遺傳病---多指(趾)癥;常染色體隱性遺傳—白化病,先天性聾啞等;性連鎖顯性遺傳--遺傳性慢性肝炎;性連鎖隱性遺傳--血友病,色盲等溶酶體貯積癥,如苯丙酮尿癥,半乳糖血癥,粘多糖癥合成酶缺陷,如血γ球蛋白缺乏癥、白化?。桓味?fàn)詈俗冃裕╓ilson?。┑妊翰?,如地中海貧血、鐮狀細(xì)胞貧血、血友病先天性腎上腺增生癥、脊髓性肌肉萎縮癥3.多因子遺傳病:由兩對(duì)以上微效基因共同作用造成的.
唇裂、腭裂、高血壓、糖尿病、狂躁抑郁癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及先天性心臟病等,均有多基因遺傳基礎(chǔ),并各自有其遺傳度。-----“易感人群”。環(huán)境因素影響越大,遺傳度越低。第四十七頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五3、人類(lèi)基因組計(jì)劃的目標(biāo)人類(lèi)基因組計(jì)劃的起因--解決包括腫瘤在內(nèi)的人類(lèi)疾病的分子遺傳學(xué)問(wèn)題,疾病基因的克隆是HGP的核心之一用15年時(shí)間,闡明人類(lèi)基因組全部DNA序列,定位10萬(wàn)個(gè)基因:基因定位,基因作圖,基因克隆建立儲(chǔ)存這些信息的數(shù)據(jù)庫(kù);開(kāi)發(fā)數(shù)據(jù)分析工具;研究HGP實(shí)施所帶來(lái)的倫理、法律和社會(huì)問(wèn)題第四十八頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五人類(lèi)基因組計(jì)劃的意義:闡明基因結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)育、分化的分子機(jī)制疾病發(fā)生的分子機(jī)制為人類(lèi)診斷和治療疾病提供依據(jù),為醫(yī)療產(chǎn)業(yè)帶來(lái)新的革命生命科學(xué)與信息科學(xué)相結(jié)合,衍生出新的學(xué)科-生物信息學(xué)帶動(dòng)新興高技術(shù)產(chǎn)業(yè)、技術(shù)、數(shù)據(jù)庫(kù)和生物學(xué)資源推動(dòng)農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)、能源、環(huán)境相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展第四十九頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五(二)人類(lèi)基因組計(jì)劃的研究現(xiàn)狀
1、人類(lèi)基因組測(cè)序2、某些疾病基因的定位克隆3、部分多基因病的研究4、中國(guó)的人類(lèi)基因組研究:人類(lèi)基因組的多樣性的比較研究,腫瘤易感基因第五十頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五(三)人類(lèi)基因組計(jì)劃的應(yīng)用1、人類(lèi)基因組計(jì)劃在基礎(chǔ)理論研究方面的應(yīng)用
(1)基因的結(jié)構(gòu)與功能
(2)基因組結(jié)構(gòu)特征
(3)新基因與蛋白質(zhì)第五十一頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五2、人類(lèi)基因組計(jì)劃在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用(1)基因時(shí)代:戰(zhàn)勝特定疾病心腦血管疾病,糖尿病,癌癥等疾病與基因序列的突變有關(guān)易感疾病與易感基因(2)基因診斷:金睛火眼
產(chǎn)前診斷,胎兒期疾病預(yù)測(cè):憂郁癥、心臟病第五十二頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五二、醫(yī)藥生物技術(shù)發(fā)展?fàn)顩r(一)基因工程藥物的發(fā)展現(xiàn)狀
1、基因工程藥物:蛋白質(zhì)類(lèi)藥物、疫苗
2、基因工程藥物發(fā)展現(xiàn)況
第五十三頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五國(guó)外基因工程藥物中文名稱(chēng) 英文名或縮寫(xiě)適應(yīng)癥
胰島素 HumulinNovolinHumalog 糖尿病腫瘤壞死因子 TNF 各種腫瘤集落刺激因子Neupogen 人生長(zhǎng)激素 ProtropinHumatropeNutropinAQ矮小病人干擾素 rhuIFNα2brhuIFNα2arhuIFNB抗癌rhuIFNrlb HCV,抗癌HBV,HVC等抗癌,多發(fā)硬化癥腎癌,慢性肉芽腫白細(xì)胞介素 rhuIL 化療,抗癌組織溶纖原激活劑RhuTpA 腦栓塞,心梗第五十四頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五我國(guó)基因工程藥物
(批準(zhǔn)上市的藥物和疫苗:12種;批準(zhǔn)進(jìn)入臨床的:10種;進(jìn)入臨床研究的:10種)中文名稱(chēng) 英文名或縮寫(xiě)適應(yīng)癥
重組人干擾素a1b rhuIFNaIb 治療病毒性角膜炎上皮生長(zhǎng)因子 (EGF) 燒傷或創(chuàng)傷治療外用藥物粒細(xì)胞集落刺激因子 (GCSF) 癌癥粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF) 癌癥治療引起的白細(xì)胞減少癥紅細(xì)胞生成素 (EPO)治療慢性腎功能衰竭引起的貧血溶栓藥物鏈激酶 (SK)治療慢性腎功能衰竭引起的貧血重組人胰島素 HumulinNovolinHumalog 糖尿病白細(xì)胞介素-2rhuIL-2類(lèi)風(fēng)濕第五十五頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五(二)基因工程疫苗、診斷試劑、
診斷技術(shù)的發(fā)展1、基因工程疫苗2、診斷試劑、診斷技術(shù)的產(chǎn)生3、法醫(yī)、犯罪鑒定
第五十六頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五三、納米技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用1、納米生物技術(shù):1nm=10-9m
用納米技術(shù)制造的微型機(jī)器人
(體積只有句子中的標(biāo)點(diǎn)符號(hào)大小)第五十七頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五2、納米生物材料的研發(fā)1)納米藥物載體和基因載體技術(shù):以納米顆粒作為藥物和基因的攜帶載體,將藥物、DNA和RNA等基因治療分子包裹在納米顆粒之中或吸附在其表面,同時(shí)也在顆粒表面耦聯(lián)特異性的靶向分子,通過(guò)靶向分子與細(xì)胞表面特異性受體結(jié)合,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),實(shí)現(xiàn)安全有效地靶向性藥物和基因治療。2)用于惡性腫瘤診斷和治療的藥物載體主要由金屬納米顆粒、無(wú)機(jī)非金屬納米顆粒、生物降解性高分子納米顆粒和生物性顆粒構(gòu)成。
第五十八頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五納米藥物載體降解過(guò)程第五十九頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五生物技術(shù)在工業(yè)上
的應(yīng)用第六十頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五生物技術(shù)是最古老的技術(shù),其歷史與人類(lèi)文明同時(shí)開(kāi)始中國(guó)人最早懂得了制醬、釀酒、造醋--傳統(tǒng)的釀造和發(fā)酵工業(yè):現(xiàn)代生物技術(shù)特點(diǎn):以基因工程為核心內(nèi)容,包括細(xì)胞工程、酶工程和發(fā)酵工程的生物技術(shù)。向工業(yè)的其他領(lǐng)域發(fā)展,向高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、高效、資源節(jié)約、環(huán)境友好型過(guò)度,形成生物材料產(chǎn)業(yè)、生物能源產(chǎn)業(yè)、生物化工產(chǎn)業(yè)及環(huán)境生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)等等。第六十一頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五1.食品工業(yè)2.石油工業(yè)3.化工工業(yè)4.化妝品工業(yè)5.紡織工業(yè)第六十二頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五1.食品工業(yè)轉(zhuǎn)基因食品--轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和轉(zhuǎn)基因植物,轉(zhuǎn)基因食品滲透到食品工業(yè)的各個(gè)方面,轉(zhuǎn)基因食品工業(yè)產(chǎn)值達(dá)2500億美元生物反應(yīng)器-含疫苗的農(nóng)作物、水果基因工程生產(chǎn)需用激素-增加產(chǎn)奶量和瘦肉型化的重組生長(zhǎng)激素;改變奶成分-除去乳糖和乳球蛋白,高酪蛋白,品質(zhì)育種—提高小麥硬度,減少對(duì)淀粉的破壞,提高米的品質(zhì);控制小麥谷蛋白亞基的數(shù)量,改善面粉的粘彈性等第六十三頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五2.石油工業(yè)(1)利用微生物勘探石油(2)油污及其他有機(jī)物、污水的處理:自然狀態(tài)和人為施加微生物
第六十四頁(yè),共六十九頁(yè),編輯于2023年,星期五
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