動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與核移植技術(shù)

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與核移植技術(shù)第一頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五回憶植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪些？

植物組織培養(yǎng),

植物體細(xì)胞雜交暢想對(duì)一個(gè)大面積燒傷的人來(lái)說(shuō)，如何才能獲得大量健康的皮膚進(jìn)行移植?克隆羊多利如何培養(yǎng)出來(lái)？第二頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五動(dòng)物細(xì)胞工程：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：1、概念：

從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。2、原理：細(xì)胞增殖→有絲分裂第三頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五

注意關(guān)鍵詞:

細(xì)胞貼壁接觸抑制原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系閱讀課文44--46頁(yè)相關(guān)內(nèi)容第四頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程:第五頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞懸浮液原代培養(yǎng)（貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制）傳代培養(yǎng)細(xì)胞系（50代以后，遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，失去接觸抑制）單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液（分解彈性纖維）胰蛋白酶或膠原蛋白酶剪碎過(guò)程：動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。細(xì)胞株（10~50代，遺傳物質(zhì)，沒(méi)有改變）

傳代培養(yǎng)第六頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五原代培養(yǎng)：從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。一般在1～10代，保持正常核型。傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸浮液，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。解答概念第七頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五

細(xì)胞株：傳代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到40~50代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株，遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變。

細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別：細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。第八頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五

多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，思考并討論以下問(wèn)題：討論11.體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)？2.體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？

充足的營(yíng)養(yǎng):水、無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸等適宜的溫度、適宜的pH和氣體環(huán)境無(wú)菌、無(wú)毒的液體環(huán)境。第九頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五（1）、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（2）、營(yíng)養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清、血漿等。）（3）、溫度和PH

36.5+0.5度；PH為7.2-7.4。（4）、氣體環(huán)境：

O2和CO2（95%空氣和5%CO2

）補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件細(xì)胞代謝必需的維持培養(yǎng)液PH值第十頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五無(wú)菌操作培養(yǎng)箱第十一頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五培養(yǎng)器皿動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)表面為什么要光滑、無(wú)毒？第十二頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處？3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有：1、液體培養(yǎng)基2、成分中有動(dòng)物血清等因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體思考:第十三頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五（1）生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。（2）獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮。（3）用于檢測(cè)有毒物質(zhì)（4）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用第十四頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五細(xì)胞的全能性細(xì)胞株、細(xì)胞系植物體培養(yǎng)結(jié)果獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動(dòng)物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖原理動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)共同點(diǎn)①都需無(wú)菌條件，培養(yǎng)基中含有有機(jī)物好和無(wú)機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)②都是細(xì)胞有絲分裂過(guò)程比較項(xiàng)目試一試植物組織培養(yǎng)第十五頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五

動(dòng)物細(xì)胞特點(diǎn)？分化潛能變?nèi)酰弘S著細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制，分化潛能變?nèi)?，這是指整體細(xì)胞而言。細(xì)胞核仍具有全能性：它含有保持物種遺傳性所需的全套基因，而且并沒(méi)有因細(xì)胞分化而丟失基因，因此高度分化的動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞核仍具有全能性想一想第十六頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五

根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞核仍具有全能性的特點(diǎn),怎樣將動(dòng)物細(xì)胞的全能性表達(dá)?

再想一想利用動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)第十七頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五

二、動(dòng)物細(xì)胞核移植：

將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。

用核移植的方法得到的動(dòng)物?？寺?dòng)物：2、分類：胚胎細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性困難1、概念3、原理：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性第十八頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五第十九頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五

卵巢卵母細(xì)胞（MⅡ中期：供質(zhì)）1.共分成兩大階段：核移植和胚胎移植，還用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)供體細(xì)胞（供核）細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞核去核無(wú)核卵母細(xì)胞顯微注入細(xì)胞融合重組細(xì)胞重組胚胎胚胎移植代孕母體生出與供體奶牛遺傳基礎(chǔ)相同的犢牛物理或化學(xué)方法激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育電刺激歸納:2.取卵細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因是:它是最大的細(xì)胞,易操作,含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件3.它是一個(gè)無(wú)性繁殖的過(guò)程，嚴(yán)格來(lái)說(shuō)新個(gè)體有卵巢母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，所以有兩個(gè)親本的性狀3、細(xì)胞核移植過(guò)程第二十頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五多莉羊卵細(xì)胞C母綿羊子宮Ａ母綿羊Ｂ母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植胚胎移植重組胚胎分娩電脈沖刺激重組細(xì)胞妊娠多莉羊的培育過(guò)程無(wú)性生殖第二十一頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五討論2：1、在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？為使核移植的胚胎或動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自供體動(dòng)物提供的體細(xì)胞2、用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，這是為什么？

因?yàn)閭鞔?0代以內(nèi)的細(xì)胞核型不會(huì)發(fā)生變化，保持正常的二倍體核型.3、你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物100%的復(fù)制嗎？為什么？

不是?？寺?dòng)物的遺傳物質(zhì)大部分來(lái)至供體細(xì)胞核，但其細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來(lái)自受體細(xì)胞，此外，環(huán)境對(duì)動(dòng)物的性狀也會(huì)有一定的影響，所以克隆動(dòng)物不會(huì)是核供體動(dòng)物100%的復(fù)制。第二十二頁(yè)，共二十四頁(yè)，編輯于2023年，星期五（1）.加速家畜遺傳改良，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育（2）.保護(hù)瀕危動(dòng)物（3）.轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白（4）.作為異體移植供體，治療人類疾病。（5）使人類更深入了解胚胎發(fā)育及衰老過(guò)程（