生物學(xué)抗體免疫技術(shù)

生物技術(shù)---免疫學(xué)技術(shù)基本概念抗原（antigen）：進(jìn)入動物體內(nèi)能刺激動物的免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答，從而引起動物產(chǎn)生抗體或形成致敏淋巴細(xì)胞，并能和抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)分完全抗原和半抗原抗體(antibody)：抗原刺激動物免疫系統(tǒng)，由免疫系統(tǒng)產(chǎn)生分泌的能和相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白第三章免疫學(xué)技術(shù)基本概念抗原的制備：顆?？乖?、半抗原、人工抗原抗體的制備：多克隆抗體、單克隆抗體、基因工程抗體第三章免疫學(xué)技術(shù)--抗原抗體反應(yīng)可對抗原或抗體進(jìn)行定性、定量、定位的檢測抗體抗原以非共價鍵結(jié)合不可見反應(yīng)：幾秒-幾分鐘可見反應(yīng)：數(shù)分鐘（小時、日）影響因素電解質(zhì)溫度酸堿度第三章免疫學(xué)技術(shù)酶聯(lián)免疫法放射免疫法熒光免疫法其他第三章酶聯(lián)免疫法（enzymeimmunoassay)以酶標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行的抗體抗原反應(yīng)酶結(jié)合物應(yīng)具有雙功能：高度特異的免疫反應(yīng)、生物催化放大作用基本方法間接法雙抗體夾心法競爭法生物素-親和素系統(tǒng)（biotin-avidinsystem，BAS）某些新進(jìn)展酶聯(lián)免疫吸附（enzymelinkedimmunosorbentassay）間接法1、將已知可溶性抗原吸附于載體2、溫育后清洗3、加入可能含特異性抗體的待檢液4、溫育后清洗5、加入酶標(biāo)記的二抗6、溫育后清洗7、加入酶作用底物8、測定反應(yīng)顏色深淺雙抗體夾心法1、將已知抗體吸附于載體上2、溫育后清洗3、加入可能含特異性抗原的待檢液4、溫育后清洗5、加入酶標(biāo)記特異性抗體6、溫育后清洗7、加入酶作用底物8、測定顏色反應(yīng)深淺酶聯(lián)免疫吸附（enzymelinkedimmunosorbentassay）競爭法1、將已知抗體吸附于載體上2、溫育后清洗3、加入可能含特異性抗原的待檢液和酶標(biāo)記的已知抗原液4、溫育后清洗5、加入酶作用底物6、測定顏色反應(yīng)深淺酶聯(lián)免疫吸附（enzymelinkedimmunosorbentassay）生物素-親和素系統(tǒng)（biotin-avidinsystem）基本概念生物素：是一種維生素H，經(jīng)活化后，可與抗體、抗原、酶以多配一的方式共價結(jié)合，且不影響它們的活性親和素：從卵蛋白中提取的一種堿性糖蛋白，可與酶偶合，以1配多的方式對生物素有很強(qiáng)的親和力BAS用于檢測的基本方法：BAB法或BRAB法BA法ABC法酶聯(lián)免疫吸附（enzymelinkedimmunosorbentassay）酶聯(lián)免疫吸附（enzymelinkedimmunosorbentassay）均相酶免疫測定法無需“固定在載體上”；無需“溫育后清洗”斑點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn)以微孔薄膜為載體，酶免疫反應(yīng)陽性結(jié)果在膜上出現(xiàn)色斑點(diǎn)膠體金標(biāo)記較酶標(biāo)記更為簡便酶聯(lián)免疫吸附（enzymelinkedimmunosorbentassay）豬肉和尿液鹽酸克倫特羅的免疫膠體金法快速檢測瘦肉精中毒事件2000年以來，內(nèi)地相繼發(fā)生18起瘦肉精中毒事件，中毒人數(shù)達(dá)1700多人，死亡1人（不包括上海2006年集體中毒事件）瘦肉精殘留及危害不容忽視，瘦肉精替代品暗潮涌動上海9.13瘦肉精食物中毒事件（2006年）“瘦肉精”學(xué)名為鹽酸克倫特羅，醫(yī)學(xué)上又稱克喘素，常用于治療哮喘。由于鹽酸克倫特羅添加于飼料飼喂動物后可明顯促進(jìn)動物生長,提高瘦肉率,所以養(yǎng)殖戶稱其為“瘦肉精”，曾在國內(nèi)外廣泛用于動物飼養(yǎng)生豬食用瘦肉精后皮毛光亮，呼吸急促，個別會出現(xiàn)腿抽搐，站不穩(wěn)，爬坡困難；宰后豬的肌肉特別鮮紅，后臀肌肉飽滿，肥肉非常薄瘦肉精介紹瘦肉精介紹“瘦肉精”化學(xué)性質(zhì)特別穩(wěn)定，加熱到170℃時才能被分解，故一般家庭廚房加熱不能將其分解破壞食用后在胃腸道吸收快，作用維持時間持久。中毒后主要癥狀表現(xiàn)為頭疼、頭暈、心悸、心慌、面色潮紅、四肢發(fā)抖等癥狀違法者使用該物質(zhì)以提高豬的瘦肉率和顏色鮮艷程度，不知情的市民錯誤地認(rèn)為這樣的肉才是“好肉”而特別喜歡選購《食品膛衛(wèi)生戶法》《食品愧添加領(lǐng)劑衛(wèi)督生管爪理辦克法》（GB揚(yáng)27棵60）《動物云性食固品中由獸藥槍殘留兔最高獎限量》（農(nóng)癥業(yè)部晌公告浩第23氣5號，20災(zāi)02年12月24日）樣規(guī)定燒：禁疑用藥捧物，矛動物擁性食肯品中撐不得描檢出這：瘦肉蚊精、型沙丁隸胺醇珠、西蒜馬特龜羅等31種違法海者的哈法律推責(zé)任目：民窗事賠委償、浮行政躁處罰分、刑恢事處頑罰法律沾規(guī)定鹽酸龍克倫古特羅嶺殘留傳檢測掛方法《動物稀性食安品中僑克倫騾特羅產(chǎn)殘留捐量的畏測定》（GB買50你09呆.1秒92搏-2大00鄉(xiāng)豐3）第一挽法：誓氣相棟色譜——質(zhì)譜蹄法，頓檢出負(fù)限：0.饒5p藥pb第二宅法：閱高效確液相傍色譜運(yùn)法，純檢出速限：0.真5p柄pb第三繡法：茶酶聯(lián)妙免疫吊法（EL嚼IS哄A篩選益法），檢扛出限沫：0.陷5p拌pb《動物野組織祖中鹽共酸克慕倫特瞞羅的銀測定——?dú)庀嗲鹕V/質(zhì)譜漲法》（NY紫/T歸4竭68－20腔06），削檢出油限：2.羊0p反pb《動物較尿液糧中鹽陶酸克快倫特聚羅的際測定——?dú)庀噘u色譜/質(zhì)譜臂法》（NY端/X駛Q關(guān)42觀1－20扔03），膀檢出漸限：1.訪0p裙pb《尿液鑰中鹽歐酸克背侖特蹈羅的鏟測定火膠體弓金免膚疫層粒析法（NY婦/T鬧93蛾3-期20喝05），勤檢出董限：3.訪0p堡pb豬肉慘全程擾監(jiān)控礎(chǔ)中瘦婚肉精爭檢測仆方法睛的選各擇生豬侮飼養(yǎng)屠宰偶場大型蘆批發(fā)旁市場零售平市場飼料神檢測豬尿介檢測豬尿肌檢測豬肉點(diǎn)檢測豬肉檢測豬肉檢測酶聯(lián)倍免疫栗法免疫紅膠體攔金免疫搖膠體賠金酶聯(lián)錦免疫碗法免疫告膠體打金篩檢鋒陽性GC烏-M肆S確認(rèn)大型鋤儀器催確認(rèn)政府四部門監(jiān)督變抽檢GC蠅-M均S餐飲星業(yè)豬肉檢測免疫鐮膠體屢金銷毀乳和溯娛源陽性GC梯-M臭S確認(rèn)大型下儀器沫確認(rèn)陽性免疫晉膠體執(zhí)金快推速檢諸測板脂的外布觀圖免疫拴膠體樓金快扭速檢暈測板(試劑)的結(jié)議構(gòu)圖檢測破原理鹽酸殼克倫遼特羅研快速拒檢測串試劑雙板的厚中央喜膜面略上固礙定有秤兩條帶隱形量線，掏克倫敏特羅爪抗原逼固定域在測門試區(qū)蔥作為偶檢測巨線（T線）訊，二農(nóng)抗固券定在餅質(zhì)控續(xù)區(qū)作株為對么照線嫂（C線）禿。當(dāng)待犯檢樣扣品溶涉液滴謹(jǐn)入試南劑板插加樣蒙孔后虎，樣?jì)屍啡転跻阂蛴|層析制作用侄往上蘿擴(kuò)散啦。如原果樣鄰品溶冷液含粉有相來應(yīng)藥侵物的祝殘留縱，藥其物將氧和膠勁體金幸顆粒杯上的代抗體駁先行媽反應(yīng)奮，因甘此當(dāng)葉膠體板金顆棉粒隨輝樣品許溶液專擴(kuò)散蘿至T線時贈，膠豎體金廉顆粒暗上抗呀體活泰性位汽點(diǎn)將照因被費(fèi)樣品筐溶液族中的跨藥物發(fā)占據(jù)釘而無凝法與T線上課藥物滾抗原忠結(jié)合丟；所溫以當(dāng)伯樣品粒中鹽殿酸克范倫特瞧羅含聞量1p冠pb雞(檢測突限)以上盈時，督試劑抓板上凡的T線將脅較C線顯慌色淡哭或甚殊至無己顯色螺，判玻定為經(jīng)陽性魄。反武之，鑄當(dāng)樣獻(xiàn)品中仰鹽酸允克倫借特羅夸含量校在1p戚pb以下休或無吐殘留另時，慕試劑擱板上聾的T線顯襖色與C線相綿近或電偏深坡，判屈定為洽陰性靈敏背度肉樣纏或組略織樣吹：1p所pb崖(標(biāo)準(zhǔn)哪前處番理)或5p鹿pb（簡夜單前凝處理紛）尿樣虧：1p敏pb克(標(biāo)準(zhǔn)唇前處填理)特異嗓性：哪與沙腦丁胺辣醇等徑苯乙販胺類疲藥物你沒有號交叉咱反應(yīng)武；準(zhǔn)確哈性：調(diào)與瘦孝肉精EL那IS爆A試劑垃盒的剛檢測步結(jié)果符合框率>9華0％有效旨期：范半年艱（冷形藏閉尖光保盈存）膠體導(dǎo)金免扯疫層須析法扭檢測倍瘦肉角精的虛技術(shù)更指標(biāo)操作似步驟于5m壞l離心狐管中院加入5g左右導(dǎo)剪碎醒或是張高速月勻漿過批的豬匙肉組放織樣舒，蓋鈔緊管謎蓋1將裝略有樣扮品的過離心拌管在90納℃以上稅水浴飾鍋中雁加熱10分鐘加熱爪完成闊后取宇出冷聽卻至奔室溫曲；可振以明自顯看到底眉部有河溶液搭滲出32吸取3滴（練約10爽0u汽l）煮質(zhì)出的喇樣品濤滲出園液到1.狂5m李l的離體心管幕中4操作牧步驟吸取3滴（德約10淋0u糧l）鹽圖酸克族倫特獄羅組散織樣佩專用繁稀釋膠液到1.外5m偏l離心掏管中餐。充潛分混詞合均填勻從包峰裝鋁侍箔袋容中取蔑出檢井測卡仔平放則。吸燦取3滴（限約10罩0u事l）混析勻溶汪液加燃入到搏試劑證板加豪樣孔稍中567樣液海滴入符加樣宣孔后炭開始聰計(jì)時糠，5～10分鐘田左右駝判定雅結(jié)果感謝蓮您的坦瀏覽有需脆要的體相關(guān)蜓抗體常可以父在F仆an忘ti黃bo積dy吸全球狐抗體鳳搜索牲引擎膏進(jìn)行躁咨詢fa抖nt畏ib荷od摩y.肌co慰m全勁球抗湯體搜尋索引依擎是獄一個中供公貝共檢查索的反抗體充數(shù)據(jù)粥庫，弟其抗犬體信蹄息數(shù)勸據(jù)來邀源于捆全球涉范圍獵的研回究機(jī)鴨構(gòu)與零商業(yè)案公司民。該體引擎爪由商患品化媽抗體著數(shù)據(jù)感庫與爺抗體篩應(yīng)用喘評價帽數(shù)據(jù)屆庫兩噴部分零組成茅，以首幫助隔研究篇者更茅高效軌的尋料找并鏡評估藥該