排膿散活性成分對(duì)小鼠的抗炎作用及其配伍的定量研究

排膿散活性成分對(duì)小鼠的抗炎作用及其配伍的定量研究【摘要】目的：觀察排膿散各藥味部分活性成分的抗炎作用，并對(duì)其不同配伍進(jìn)行定量研究。方法：選擇排膿散中的部分活性組分芍藥苷、柚皮苷加新陳皮苷、桔梗皂苷，用正交設(shè)計(jì)法安排實(shí)驗(yàn)，劑量?jī)伤椒謩e為用藥和不用藥。選擇醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)為急性炎癥模型，以阿司匹林和生理鹽水為對(duì)照，以對(duì)毛細(xì)血管通透性影響作為炎癥指標(biāo)，定量分析各藥味活性成分的抗炎作用及相互作用。結(jié)果：全方活性成分組合對(duì)醋酸所致炎癥滲出的抑制效果與阿司匹林組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，藥效模擬結(jié)果提示為最大效應(yīng)組合。與生理鹽水組比較，排膿散中各藥味活性成分及其他不同配伍組合均不同程度抑制炎癥的滲出。復(fù)方配伍的預(yù)測(cè)效應(yīng)區(qū)間為～，全部活性成分組合呈現(xiàn)協(xié)同作用；各活性成分對(duì)復(fù)方的貢獻(xiàn)按重要程度排列為：芍藥苷柚皮苷加新陳皮苷桔梗皂苷。結(jié)論：排膿散各藥味活性成分對(duì)抑制小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性均呈正性作用，芍藥苷貢獻(xiàn)度最大，全方活性成分組合抑制作用最強(qiáng)。采用正交模擬法對(duì)復(fù)方配伍進(jìn)行定量分析，有可能挖掘出排膿散;活性成分;中藥配伍;藥物相互作用.

Methods:Themousemodelofacuteinflammationwithincreaseofcapillarypermeabilitywasinducedbyintraperitonealinjectionofaceticacid.Anorthogonaldesignwith2levels(usedandunused)wasappliedtoassignthecombinationsgroupsofactiveingredientsincludingnaringinandneohesperidin,peoniflorin,andplatycodin.Aspirinandnormalsalinewereadministeredascontrol.Thepharmacodynamicinteractionswereanalyzedbytheopticaldensity(OD)ofinfiltratedEvansblue.

Results:Thedifferentcombinationsofactiveingredientsshowedantiinflammatoryeffectwithdifferentdegree,andthepredictedvaluesofODvariedfromtoThemaximumantiinflammatoryeffectwasfromthecombinationofnaringin,neohesperidin,paeoniflorinandplatycodin,betterthanthatofthesalinegroup().However,therewasnosignificantdifferenceascomparedwiththeaspiringroup().Paeoniflorinshowedadominantcontributiontotheformula,andplatycodintheleast.Thecombinationofallactivecomponentsexhibitedsynergism.

Conclusion:Theresultssuggestthatalltheingredientsareefficaciousconstituentsoftheformula,andpaeoniflorinshowsadominantcontributiontotheformula.Moreinformationaboutprescriptioncompatibilitycanbeobtainedbytheorthogonalsimulationmethod.

Keywords:Painongpowder;activeingredient;compatibility(traditionalChinesedrug);druginteractions

排膿散始載于《金匱要略》，由枳實(shí)、芍藥和桔梗組成，具有止痛、排膿的功效。方中各藥味配伍比例為3︰3︰1，臨床上主要用于炎癥的急性期。不同組合相互作用性質(zhì)不同，由此引起的交互效應(yīng)也不同。相互作用指數(shù)用Q來(lái)表示，Q0為協(xié)同，Q0為拮抗，Q=0為相加。藥效預(yù)測(cè)誤差由散點(diǎn)圖來(lái)表示，橫坐標(biāo)表示模擬擬合度，PE1=/實(shí)測(cè)值；縱坐標(biāo)表示數(shù)據(jù)離散度，PE2=/實(shí)測(cè)值。若大于70%的散點(diǎn)分布于評(píng)價(jià)窗30%的預(yù)測(cè)偏倚內(nèi)，表示模型的模擬能力可靠，即模型可以準(zhǔn)確有效地對(duì)各配伍組藥效進(jìn)行預(yù)測(cè)。

2結(jié)果

對(duì)毛細(xì)血管通透性的影響各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2，陰性對(duì)照組提供了藥效基線值，即第8組的平均藥效。各組分配伍組對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性均顯示不同程度的抑制作用，其OD值與陰性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。組分配伍1、2、3組與阿司匹林組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其他各組均劣于阿司匹林組。表2各配伍組對(duì)毛細(xì)血管通透性的影響

藥效學(xué)參數(shù)分析藥效學(xué)參數(shù)分析結(jié)果根據(jù)正交模擬法［12］獲得，其參數(shù)列于表3。各組分對(duì)復(fù)方藥效的貢獻(xiàn)值大小排序?yàn)锳BC，也是重要程度排序。結(jié)果顯示芍藥苷對(duì)復(fù)方的貢獻(xiàn)值最大，發(fā)揮主要藥效。

組分有效性判別見(jiàn)表4，不同無(wú)作用區(qū)間對(duì)雙向單側(cè)t檢驗(yàn)結(jié)果影響很大，NEB越窄，90%可信區(qū)間越易超出。本研究NEB預(yù)設(shè)為90%～110%。雙向單側(cè)t檢驗(yàn)顯示各組分均為藥效組分，發(fā)揮正性作用。

組分相互作用分析不同組合相互作用性質(zhì)不同，相互作用分析顯示全方配伍協(xié)同作用明顯，相互作用指數(shù)Q值達(dá)，而其他兩兩組合相互作用均為拮抗。見(jiàn)表5。

復(fù)方效應(yīng)模擬及評(píng)價(jià)本復(fù)方的最大效應(yīng)組合為ABC，最小效應(yīng)組合為C，OD值效應(yīng)區(qū)間為～。由正交模擬法對(duì)不同組合的藥效進(jìn)行預(yù)測(cè)，各配伍組PE均小于15%。用實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對(duì)預(yù)測(cè)模型進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果由散點(diǎn)圖表示除空白組外70只小鼠藥效模擬值與各配伍組實(shí)測(cè)藥效均數(shù)間關(guān)系，其中76%的散點(diǎn)分布于30%評(píng)價(jià)窗內(nèi)，顯示模型模擬結(jié)果具有可靠性。進(jìn)而利用門(mén)特卡羅模擬擴(kuò)大樣本量至700，81%的散點(diǎn)分布于評(píng)價(jià)窗內(nèi)，提示了模型的穩(wěn)定性。以上結(jié)果表明模型能夠有效模擬各配伍組合效應(yīng)。表3復(fù)方藥效學(xué)模型參數(shù)表4雙向單側(cè)t檢驗(yàn)表5配伍組交互效應(yīng)和組分相互作用性質(zhì)表6不同組合的藥效模擬OD值

3討論

在對(duì)復(fù)方組成藥物活性成分有所了解的情況下，利用藥味活性成分進(jìn)行組方配伍成為新近復(fù)方研究的特點(diǎn)。基于醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)的模型研究，我們發(fā)現(xiàn)無(wú)論復(fù)方煎劑［2］還是各藥味活性成分實(shí)驗(yàn)各配伍組藥效OD值基本一致。排膿散各藥味活性成分配伍按重要程度排列為芍藥苷(A)、柚皮苷+新陳皮苷(B)、桔?？傇碥?C)。芍藥苷的藥效最強(qiáng)，這也和現(xiàn)代中藥藥理研究［13］芍藥苷的抗炎作用相符。

各配伍組藥效模擬擬合度較好，顯示最大效應(yīng)組合為全方所有活性成分配伍；相互作用分析顯示只有全方配伍時(shí)才表現(xiàn)為明顯的協(xié)同作用，以上結(jié)果與前期復(fù)方煎劑研究一致［2］。雖日本學(xué)者報(bào)道［7］排膿散抗炎作用的活性成分為柚皮苷、新陳皮苷和芍藥苷，未提及桔?？傇碥?，但本研究證實(shí)了桔梗皂苷同樣在復(fù)方中發(fā)揮藥效，并認(rèn)為可能是日本學(xué)者對(duì)排膿散的提取工藝導(dǎo)致未測(cè)到桔梗皂苷。

中藥復(fù)方配伍研究需綜合多指標(biāo)，多水平進(jìn)行深入研究。若選擇關(guān)鍵指標(biāo)，重點(diǎn)突破，也是一種方法。文中采用正交模擬法［12,14］對(duì)配伍進(jìn)行定量分析，不僅可獲得每一組分在復(fù)方中的藥效強(qiáng)度，判斷其重要性，并能分析不同配伍組合之間的相互作用，且能有效模擬各配伍組合的預(yù)期藥效，為中藥復(fù)方的拆方研究提供指導(dǎo)和參考意義，為中藥新藥的二次開(kāi)發(fā)提出新思路?；诖?，本文通過(guò)排膿散的研究，希望為同類研究提供方法上的借鑒。

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