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草莓脫毒種苗病毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)程新疆維吾爾自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I125抽樣方法反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)法(見(jiàn)附錄A),檢驗(yàn)結(jié)果記錄見(jiàn)附錄B。34所用試劑用0.1%(1mLDEPC+999mL蒸餾水)的DEPC處理水配制,并進(jìn)行高溫高壓滅菌。CTABDEPCmLMTrisHCpHmLMEDTANapH后,滴加濃鹽酸調(diào)pH至8.0,定容至10mLH至8.0(約2gNaOH顆粒),定容至100mL。A.3模板核酸(包括RNA和DNA)的制備A.3.2冷卻后,加入500μL的酚:氯仿:異戊醇(25:24:1),混勻,12000rpm,離心15min,吸上清,A.3.3加入500μL氯仿:異戊醇(24:1),12000rpm。離心15min吸上清,轉(zhuǎn)入一新的離心管中5反應(yīng)試劑反應(yīng)體積10*PCR緩沖液引物總體積GAATGGGACAATGAAATGAGSensepAACCTGTTTCTAGCTTCTTGAntisenseprim6CATTGGTGGCAGACCCATCASTTCAGGACCTATTTGATGACAAntisense7原種數(shù)量:編號(hào)草莓斑駁病毒(SMoV)草莓鑲脈病毒(SVBV)草莓皺縮病毒(SCV)注

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