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關(guān)于分解纖維素的細(xì)菌第1頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基第2頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月1.直接計(jì)數(shù)法:最常用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。測(cè)定微生物數(shù)量的方法:第3頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月2.間接計(jì)數(shù)法:最常用稀釋平板計(jì)數(shù)法。
第4頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月第5頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月第6頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月閱讀27頁基礎(chǔ)知識(shí)部分第一、二段,回答下列問題:1.纖維素在生物圈的分布狀況?纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素。其中棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。一、纖維素和纖維素酶2.纖維素酶的組成及作用?纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即C1酶、
CX酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。第7頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月3、纖維素的分解
能分解纖維素的微生物有各種細(xì)菌、真菌和少數(shù)放線菌。方法:濾紙崩潰法4、纖維素酶活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn):第8頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月下列生物能分解纖維素的是()①人②兔③牛④蘑菇⑤纖維桿菌A、①②③④⑤B、②③⑤C、②③④⑤D、③⑤C第9頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月二、纖維素分解菌的篩選1.纖維素分解菌的篩選方法剛果紅染色法:
這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選閱讀課本第28頁的相關(guān)部分,回答下列問題:第10頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月2.纖維素分解菌的篩選方法的原理
剛果紅是一種染料,它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不和纖維二糖、葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解為中心的透明圈。這樣我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。第11頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月練一練:1.下列關(guān)于纖維素酶的說法,錯(cuò)誤的是A.纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種B.纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C.纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D.葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖第12頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月練一練:1.下列關(guān)于纖維素酶的說法,錯(cuò)誤的是A.纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種B.纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C.纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D.葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖第13頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月2.利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌,下列說法錯(cuò)誤的是A.剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物B.剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物C.剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D.若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈,則說明已篩
選出了纖維素分解菌第14頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月三、實(shí)驗(yàn)操作土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落第15頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月土壤取樣①取樣環(huán)境富含纖維素的環(huán)境中
由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對(duì)提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。②原因第16頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月土壤取樣③實(shí)例:樹林中多年落葉形成的腐殖土,多年積累的枯枝敗葉等。④討論:如果找不到合適的環(huán)境,可將濾紙埋在土壤中,將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)埋進(jìn)土壤中多深?
將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)集中,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于深約10cm左右的土壤中。第17頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月1.選擇培養(yǎng)的目的:增加纖維素分解菌的濃度,以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物選擇培養(yǎng)第18頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月參照課本29頁旁欄中的比例配置,回答下列問題a.旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?b.這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用?如果具有,是如何進(jìn)行選擇的?是液體培養(yǎng)基,原因是配方中無凝固劑有選擇作用,本配方中的碳源是纖維素,所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖2.制備選擇培養(yǎng)基第19頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月3.操作方法:將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中,將錐形瓶固定在搖床上,在一定溫度下振蕩培養(yǎng)1~2天,直至培養(yǎng)液變渾濁。也可重復(fù)選擇培養(yǎng)第20頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月思考:為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用第21頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月梯度稀釋按照課題1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋,稀釋最大倍數(shù)到106第22頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上1.制備培養(yǎng)基:
參照旁欄中的比例2.涂布平板:
將稀釋度為104~106的菌懸液各取0.1ml涂布在培養(yǎng)基上,30℃倒置培養(yǎng)第23頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月挑選產(chǎn)生透明圈的菌落
挑取產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落,一般即為分解纖維素的菌落。接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上,在300C-370C培養(yǎng),可獲得純培養(yǎng)。第24頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月剛果紅染色法方法一:先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二:在倒平板時(shí)就加入剛果紅思考:這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?第25頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月
方法一缺點(diǎn)是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用
方法二優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,不存在菌落混雜問題缺點(diǎn)一是由于培養(yǎng)基中還含有淀粉類物質(zhì),可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng);缺點(diǎn)二有些微生物具有降解色素的能力,它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過程中會(huì)降解剛果紅,形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分第26頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)錄像第27頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月1.在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌,符合下列哪一生物學(xué)觀點(diǎn)?A.生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點(diǎn)
B.生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點(diǎn)C.生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點(diǎn)D.生物發(fā)展進(jìn)化的觀點(diǎn)練一練:第28頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月2.從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是①土壤取樣②梯度稀釋
③選擇培養(yǎng)④菌懸液涂布平板
⑤挑選出單個(gè)菌落A.①②③④⑤
B.①③②④⑤C.①②④③⑤D.①④②③⑤第29頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月3.有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是A.可以增加纖維素分解菌的濃度B.可以減少纖維素分解菌的濃度C.所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D.所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基第30頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月四、課題延伸
本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選,但是這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn),纖維素酶的測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定。第31頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月
4.鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中碳源為()
A、CMC-NaB、木聚糖C、纖維素D、裂解酶A第32頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月
5.剛果紅染色時(shí),加入剛果紅應(yīng)在()
(1)制備培養(yǎng)基時(shí)(2)梯度稀釋時(shí)(3)倒平板時(shí)(4)涂布時(shí)(5)長(zhǎng)出菌落時(shí)
A、(1)(3)
B、(2)(5)
C、(3)(5)
D、(4)(5)C第33頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月
6.為以纖維素為唯一碳源篩選出真菌和細(xì)菌,試分析此類微生物在生態(tài)系統(tǒng)中的作用與下列哪種生物類似?()
A.硝化細(xì)菌B、藍(lán)藻C、蚯蚓D、兔子C第34頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月
7.有關(guān)平板劃線操作正確的是()
A.使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿,操作過程中不再滅菌
B.打開含菌種的試管需要通過火焰滅菌,取出菌種后需要馬上塞上棉塞
C.將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線即可
D.最后將平板倒置,放入恒溫箱中培養(yǎng)
D第35頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月練一練:1、下列關(guān)于纖維素酶的說法,錯(cuò)誤的是A、纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種B、纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C、纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D、葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖2、利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌,下列說法錯(cuò)誤的是A、剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物B、剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物C、剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D、若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈,則說明已篩選出了纖維素分解菌第36頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月1、在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌,符合下列哪一生物學(xué)觀點(diǎn)?()A、生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點(diǎn)B、生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點(diǎn)C、生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點(diǎn)
D、生物發(fā)展進(jìn)化的觀點(diǎn)C第37頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月A、可以增加纖維素分解菌的濃度B、可以減少纖維素分解菌的濃度C、所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D、所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基3、有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是()A第38頁,課件共41頁,創(chuàng)作于2023年2月2、從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是()①土壤取樣②梯度稀釋
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