抗體,抗體的多樣性及其產(chǎn)生機(jī)制gaobo

抗體研究簡史目前一頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)20世紀(jì)有關(guān)抗體研究獲得諾貝爾醫(yī)學(xué)生理學(xué)獎的免疫學(xué)家年代學(xué)者姓名國家獲獎成就1901E.A.Behring德國發(fā)現(xiàn)抗毒素，開創(chuàng)免疫血清療法1908P.Ehrlich德國提出體液免疫理論和抗體生成的側(cè)鏈學(xué)說1960F.M.Burnet澳大利亞提出抗體生成的克隆選擇學(xué)說1972G.M.Edelman美國闡明抗體的本質(zhì)R.R.Porter英國闡明抗體的化學(xué)結(jié)構(gòu)目前二頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)20世紀(jì)有關(guān)抗體研究獲得諾貝爾醫(yī)學(xué)生理學(xué)獎的免疫學(xué)家年代學(xué)者姓名國家獲獎成就1984N.Jerne丹麥提出天然抗體選擇學(xué)說和免疫網(wǎng)絡(luò)學(xué)說G.Kohler德國建立雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體C.Milstein阿根廷單克隆抗體技術(shù)及免疫球蛋白基因表達(dá)的遺傳調(diào)控1987Tonegawa日本闡明抗體多樣性的遺傳基礎(chǔ)目前三頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)EmilvonBehring,1901,antitoxinsGeoregesKohlerandCesarMilstein,1984,monoclonalantibodySusumuTonegama,1987,structureofIggeneGeraldEdelmanandRodneyPorter,1972,structureofantibodyPaulEhrlich,1908,productionofantibodyNobelPrizewinnersBurnet,1960，ClonalselectionJerne,1984,Idiotypenetwork目前四頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)抗體——生物體最奇妙的分子無限的多樣性（diversity)功能與結(jié)構(gòu)的雙重性可變區(qū)——抗原結(jié)合(特異性specificity)

恒定區(qū)——生物學(xué)效應(yīng)功能分泌型和膜型表達(dá)目前五頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化成漿細(xì)胞產(chǎn)生的糖蛋白?；靖拍預(yù)g1Ab1Ag1-Ab1Ag2Ag2Ag2-Ab2與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合。主要存在于血清中。目前六頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)EmilvonBehring(1845-1917)抗毒素（1888）凝集素（1896,GruberandDurham）沉淀素（1897,kraus）抗體(antibody)是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子，是B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的糖蛋白?？贵w一詞的由來（19世紀(jì)末）目前七頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)1937年Tiselius和Kabat用電泳方法證實(shí)抗體的活性存在于泳動最慢的血清組分，稱為球蛋白抗體與球蛋白關(guān)系抗體≠球蛋白目前八頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)1968和1972年WHO和國際免疫學(xué)會分別決定將具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白.抗體與免疫球蛋白關(guān)系抗體免疫球蛋白功能概念結(jié)構(gòu)概念目前九頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)一、基本概念B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化成漿細(xì)胞產(chǎn)生的糖蛋白與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合主要存在于血清中又稱免疫球蛋白(Immunoglobulin)分泌型sIg、膜型mIg目前十頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)1）四肽鏈通過鏈間二硫鍵組成H2L2重鏈：五類(isotype:a、g、m、d、e)輕鏈：兩型(k、l)一、基本結(jié)構(gòu)VHCH1CH2CH3CH4VLCLFabHingeregionFcCOO–NH3+免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)目前十一頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)RodneyPorter1917-1985NobelPrizein1972GeraldEdelman1929--NobelPrizein1972目前十二頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)FabFabFcPorter主要致力于將抗體中負(fù)責(zé)與外來抗原結(jié)合的部分從抗體中分開，他發(fā)現(xiàn)可利用酵素--木瓜蛋白(papain)，將抗體分成三部分。HHLLEdelman將抗體分子假定與其它各種蛋白質(zhì)一樣，由一些polypeptide鏈所構(gòu)成，而他認(rèn)為polypeptide鏈間最可能以二硫鍵結(jié)合在一起，故他試圖將這些鍵結(jié)打斷來觀察其中的各條polypeptide鏈，結(jié)果他發(fā)現(xiàn)這些氨基酸鏈單獨(dú)存在時都不具有任何抗體的功用。目前十三頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)重鏈（Heavychain:H鏈）①大約500a.a,糖基(+)②類別（Class）:H鏈：,,,,.(Ig)IgA,IgG,IgMIgD,IgE

輕鏈（lightchain:L鏈）①大約214a.a,糖基(-)②型別（type）:,重鏈和輕鏈（Heavy&lightchains）VHCH1CH2CH3CH4VLCLFabHingeregionFcCOO–NH3+目前十四頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)可變區(qū)(Variableregion,VH/VL,Fv)：結(jié)合抗原

VH和VL：高變區(qū)HVR－抗原結(jié)合部位－互補(bǔ)決定區(qū)CDR

骨架區(qū)FR1－4(1971,Kabat)

恒定區(qū)(Constantregion,CH/CL)

絞鏈區(qū)(Hingeregion)Thebasicstructureofimmunoglobulins三個功能區(qū)(Domain)目前十五頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)

0102030405060708090100110120130140150160170180190200210220

5040

302010

0CDR1CDR2CDR3

抗體分子的多樣性Igl

鏈的氨基酸序列酸殘基的變異率相應(yīng)位置上氨基對來自不同B細(xì)胞克隆的Ig輕鏈氨基酸序列進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)V區(qū)的變化主要集中在3個分別由6－10個氨基酸殘基組成的狹小區(qū)域內(nèi)。這3個區(qū)又被稱作高可變區(qū)或互補(bǔ)決定區(qū)（CDR），參與抗原結(jié)合部位的組成。目前十六頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)0102030405060708090100110120130140150160170180190200210220

5040302010

0

CDR1CDR2CDR3

抗體分子的多樣性酸殘基的變異率相應(yīng)位置上氨基DiversityandSpecificity目前十七頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)目前十八頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)抗原B細(xì)胞表位

抗體CDR表位AbAg目前十九頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)鉸鏈區(qū)（Hingeregion）VHCH1CH2CH3CH4VLCLFabHingeregionFcCOO–NH3+特點(diǎn)：1)極富彈性2)富含脯氨酸功能:1)有利于Ab與Ag的結(jié)合2)有利于Ab與補(bǔ)體的結(jié)合目前二十頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)IgG分子結(jié)合抗原前后的構(gòu)象變化Fab段Fc段C1q結(jié)合位點(diǎn)被屏障結(jié)合抗原之前CH1CH2暴露的C1q結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合抗原之后目前二十一頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)結(jié)構(gòu)域1）Ig分子中由鏈內(nèi)二硫鍵構(gòu)成的致密立體球體(V/C/H)。

2）b-sheet、b-barrel、immunoglobulinfold。

3）CDRs(Hypervariableregions)、FRs(Frameworkregions)。目前二十二頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)功能區(qū)目前二十三頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)“Ig-likeDomain(Ig樣結(jié)構(gòu)域)”目前二十四頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)二、免疫球蛋白的其他成分(1)化學(xué)本質(zhì)：漿細(xì)胞分泌的多肽鏈JCHAIN

IgAdimer(2)存在：IgM（五聚體）,sIgA（雙體）IgM連接鏈（joiningchain，J鏈）SecretorypieceJoiningchain目前二十五頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)

SPIgAdimer分泌片（SecretoryPiece，SP)(1)化學(xué)本質(zhì)：多肽鏈(70kD)(2)來源：上皮細(xì)胞J

chain（3）作用：

a.幫助IgA穿越黏膜

b.保護(hù)sIgA抵抗蛋白酶的水解作用目前二十六頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)SecretoryIgA(sIgA)PlasmacellsIgAdimerpIgRSPEpithelialCell目前二十七頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)胃蛋白酶木瓜蛋白酶FcpFcF(ab′)2Fab

三、免疫球蛋白的水解片段木瓜蛋白酶作用于IgG分子重鏈間二硫鍵的N端側(cè)，將其裂解為Fab段和Fc段。胃蛋白酶則切在該二硫鍵之C端側(cè)，產(chǎn)生F(ab’)2和pFc段。目前二十八頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)類(Class):重鏈C區(qū)抗原性 IgG、IgA、IgM、IgD、IgE亞類(Subclass):重鏈抗原性/二硫鍵數(shù)目位置 IgG1-4型(Type):輕鏈C區(qū)抗原性 k、l亞型(Subtype):輕鏈C區(qū)aa差異排列

l1～4免疫球蛋白的異質(zhì)性免疫球蛋白的類型目前二十九頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)血清型免疫球蛋白既可結(jié)合抗原，又可作為抗原，激發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答，因而也是一類抗原物質(zhì)。由于免疫球蛋白的遺傳基礎(chǔ)不同，不同的免疫球蛋白的抗原性也有差異。利用血清學(xué)方法測定和分析免疫球蛋白抗原性予以分類，稱為免疫球蛋白的血清型。目前三十頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)1、同種型(isotype)：同一種屬所有個體免疫球蛋白分子共同的抗原特異性標(biāo)志。由C區(qū)決定。VHCH1CH2CH3CH4VLCLFabHingeregionFc目前三十一頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)2、同種異型（allotype)：同一種屬不同個體間免疫球蛋白分子所具有的不同的抗原特異性標(biāo)志。由鏈、鏈、鏈、鏈C區(qū)決定。VHCH1CVLCLFabHingeregionFc目前三十二頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)3、獨(dú)特型(idiotype,Id)：每個免疫球蛋白分子所特有的抗原特異性標(biāo)志。由超變區(qū)特殊的氨基酸序列及其構(gòu)型決定。VHCH1CH2CH3CH4VLCLFabHingeregionFc目前三十三頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)1）與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合：Fv2）激活補(bǔ)體：3）結(jié)合FcR：促吞噬(opsonization)

介導(dǎo)過敏介導(dǎo)細(xì)胞毒(ADCC)

免疫調(diào)理 4）穿過胎盤和粘膜5）調(diào)節(jié)免疫功能VHCH1CH2CH3CH4VLCLFabFcCOO–NH3+免疫球蛋白的功能目前三十四頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)目前三十五頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)免疫球蛋白的功能a.目前三十六頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)b.免疫球蛋白的功能目前三十七頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)

FcR

Antibody-DependentCell-mediatedCytotoxicity(抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用)TargetcellAbEffectorcellTargetcell表達(dá)Fc受體的組織細(xì)胞(NK、M、中性粒細(xì)胞）通過識別抗體的Fc段直接殺傷被抗體包被的的靶細(xì)胞。ADCC免疫球蛋白的功能目前三十八頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)抗體的抗病毒效應(yīng)NK靶細(xì)胞介導(dǎo)ADCC經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體C1qr2s2調(diào)理吞噬作用免疫球蛋白的功能目前三十九頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)IgGIgMIgAIgEIgD各類免疫球蛋白的特點(diǎn)和功能目前四十頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)出生后3個月開始合成，3～5歲接近成人含量最多占血清總Ig的75%產(chǎn)生比較晚，是再次應(yīng)答的主要抗體半衰期最長(t

?

=23天)分布最廣，血管外的主要抗體唯一能通過胎盤的Ig激活補(bǔ)體–IgG1～3（經(jīng)典），IgG4（替代）結(jié)合細(xì)胞–巨噬細(xì)胞，單核細(xì)胞——調(diào)理作用

NK細(xì)胞，巨噬細(xì)胞——介導(dǎo)ADCC

結(jié)合SPA—協(xié)同凝集實(shí)驗(yàn)特性：IgG目前四十一頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)IgG功能：抗感染的主要抗體

介導(dǎo)II,III型超敏反應(yīng)介導(dǎo)自身免疫

調(diào)理介導(dǎo)ADCC

固定補(bǔ)體中和病毒和毒素

抗菌抗病毒抗外毒素目前四十二頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)IgG四個亞類的特點(diǎn)IgG1IgG2IgG3IgG4血清含量(占IgG的百分比）702064

血清半衰期(天)2323723通過胎盤++++++++++固定補(bǔ)體+++++–

結(jié)合Fc受體+++–++++目前四十三頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)

特性血清中含量第三出現(xiàn)最早的Ig分布局限，主要在血管內(nèi)d)通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體e)分子量最大f)凝集細(xì)菌e)結(jié)合細(xì)胞–

巨噬細(xì)胞,單核細(xì)胞-調(diào)理

NK細(xì)胞,巨噬細(xì)胞-介導(dǎo)ADCC

IgMJ鏈

目前四十四頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)IgM抗感染的先鋒抗體

介導(dǎo)II,III型超敏反應(yīng)介導(dǎo)自身免疫天然血型抗體

調(diào)理作用

(最強(qiáng))

激活補(bǔ)體中和病毒和外毒素凝集微生物介導(dǎo)ADCC功能：

抗菌作用最強(qiáng)

(500—1000×IgG)

抗病毒抗外毒素目前四十五頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)IgA特點(diǎn):血清中含量第二

(血清型IgA，serumIgA)主要以分泌型存在(外分泌液中）.(secretoryIgA,sIgA)

sIgA通過初乳被動轉(zhuǎn)移給新生兒

唾液,

眼淚,乳汁,

鼻黏膜,

支氣管分泌液,

生殖道分泌物,

前列腺液,

小腸黏膜分泌液.

SCJchainIgAdimer目前四十六頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)sIgA功能：粘膜局部抗感染的主要抗體

阻止病原體粘附于粘膜細(xì)胞中和病毒和外毒素

傷寒沙門氏桿菌,

奈瑟氏淋球菌

脊髓灰質(zhì)炎病毒，流感病毒

抗菌作用抗病毒作用抗外毒素作用目前四十七頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)IgD分子的結(jié)構(gòu)IgD分子*在膜表面的表達(dá)是B細(xì)胞成熟的主要標(biāo)志；*膜型IgD作為BCR的組成部分，發(fā)揮信號傳導(dǎo)作用目前四十八頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)目前四十九頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)StructureofIgEmoleculeIgE特性1)含量最少2)與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的FcR受體結(jié)合親細(xì)胞性抗體:不與Ag結(jié)合，即可與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的FcR牢固結(jié)合3)不能激活補(bǔ)體目前五十頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)IgE①參與過敏反應(yīng)(I型超敏反應(yīng))

結(jié)合肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞導(dǎo)致各種生物活性的介質(zhì)的釋放嗜酸性粒細(xì)胞有IgE的FcR，嗜酸性粒細(xì)胞通過此受體結(jié)合包被在蠕蟲上的IgE的Fc段，最終殺死寄生蟲②抗寄生蟲感染作用目前五十一頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)人抗體分子的特性抗體類別IgGIgAIgMIgDIgE重鏈類別gamde重鏈亞類g1,g2,g3,g4a1,a2輕鏈類別k和

lk和

lk和

lk和

lk和

l分子式g2l2

或g2k2a2l2或(a2l2)5SCJa2k2或(a2k2)5SCJ(m2l2)5J或(m2k2)5Jd2l2

或d2k2e2l2

或e2k2分子量（kDa）150160或400900180190固定補(bǔ)體能力+0++++00血清濃度(mg/100ml)100020012030.05血清半衰期(天)236532穿過胎盤＋0000肥大細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞脫顆粒？000++++裂解細(xì)菌能力+++++??抗病毒能力+++++??目前五十二頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)2014-10-13目前五十三頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)抗體的多樣性及其產(chǎn)生機(jī)制抗體的多樣性抗體的多樣性產(chǎn)生的機(jī)制抗體的類別轉(zhuǎn)換目前五十四頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)1897年 PaulEhrlich提出側(cè)鏈學(xué)說1930年 Haurowitz提出直接模板學(xué)說1941年 Pauling提出間接模板學(xué)說1955年 NielsJerne提出自然選擇學(xué)說1958年 FMBurnet提出克隆選擇學(xué)說抗體生成理論的發(fā)展史目前五十五頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)目前五十六頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)（一）抗體的多樣性抗體/免疫球蛋白的基因結(jié)構(gòu)抗體基因的重排抗體基因的重排機(jī)制目前五十七頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)抗體的多樣性早期假說一：生殖細(xì)胞學(xué)說抗體的多樣性早期假說二：體細(xì)胞突變學(xué)說The

genomecontainsmanylociencodingantibodymolecules.Bcellexpressoneoftheseloci.DifferentBcellsexpressdifferentloci.ThereareasmallnumberofantibodygeneswhichundergomutationastheBcellmatures,thusgivingrisetoBcellsexpressingantibodyofdifferentspecificity.目前五十八頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)1971年Kabat基因嵌入模型利根川進(jìn)：抗體的基因重排理論目前五十九頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)免疫球蛋白的基因結(jié)構(gòu)目前六十頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)目前六十一頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)目前六十二頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)Inheavychains,theV,DandJsegmentsencodethevariabledomainwhiletheCsegmentencodestheconstantdomain.Inlightchains,theVandJsegmentsencodethevariabledomainwhiletheCsegmentencodestheconstantdomain.目前六十三頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)抗體基因的重排目前六十四頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)DuringBcellmaturation,immunoglobulingenesundergorearrangement.目前六十五頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)DuringBcellmaturation,immunoglobulingenesundergorearrangement.目前六十六頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)DuringBcellmaturation,immunoglobulingenesundergorearrangement.目前六十七頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)DuringBcellmaturation,immunoglobulingenesundergorearrangement.目前六十八頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)Thekappaandlambdalociundergosimilarrearrangement.SincetherearenoDsegments,thereisasingleV-->Jrearrangement.Inbothheavyandlightchainrearrangement,anumberofJsegmentsmayremainbetweentheV(D)andCsegments.TheseareincludedintheRNAtranscriptbutaresplicedoutduringRNAprocessing.ThefinallightchainmRNAcontainsoneVJCunit.KubyFigure5-4目前六十九頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)KubyFigure5-4目前七十頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)目前七十一頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)抗體基因重排的機(jī)制目前七十二頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)（1）重組信號序列(recombinationsignalsequence,RSS)在VH和VL基因3’端、J基因5’端和D基因兩端有高度保守的核苷酸序列，包括一個7核苷酸組成的七聚體(heptamer)和一個9核苷酸組成的九聚體(nonamer)，兩者間隔121或231個核苷酸，稱為RSS。目前七十三頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)只有間隔12個堿基對和間隔23個堿基對的RSS之間發(fā)生重組，而間隔長度相等的RSS之間不發(fā)生重組，這就是12/23堿基對規(guī)律(12/23basepairrule)，也叫做1+2圈規(guī)律(1+2turnrule)。目前七十四頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)KubyFigure5-3目前七十五頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)Recombinationsignalsequences-conservedsequencesinregionsjustupstreamordownstreamofgenesegments.Consistofaconservedheptamerandnonamerwitha12or23bpspacer.KubyFigure5-3目前七十六頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)Theone-turn/two-turnrule(12/23rule)-recombinationoccursonlybetweenasegmentwitha12bpspacerandasegmentwitha23bpspacer.RecombinationSignalSequencesDirectRecombination目前七十七頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)RecombinationActivatingGenes(encodeRAG-1andRAG-2)RAG-1andRAG-2mediaterecognitionofsignalsequencesandrearrangementofDNAsegments.MicedeficientinRAG-1orRAG-2areunabletorearrangeheavyorlightchaingenes.ThesemicehavenomatureBcells.-->BcellswillnotmatureiftheycannotexpressaBCR.（2）重組活化基因RecombinationActivatingGenes目前七十八頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)RAG-deficientmicealsolackmatureTcells.-->TheTcellreceptorisalsoencodedbylocicontaininggenesegmentsthatmustberearrangedbeforetheTCRcanbeexpressed.TcellswillnotmatureiftheycannotexpressaTCR.SCID(severecombinedimmunedeficency)micealsohaveadefectthataffectsrearrangementofBCRandTCRloci.TheyalsohavenomatureTorBcells.目前七十九頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)Flowcytometryofnormalvs.RAG-1deficientmice:LymphnodecellsFITCanti-CD19(Bcellmarker)andPEanti-CD3(Tcellmarker)NormalmiceRAG-1-deficientmice目前八十頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)HowrecombinationintheVregionsofantibodyhappens?目前八十一頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)目前八十二頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)目前八十三頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)目前八十四頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)AGCTTATA目前八十五頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)Terminaldeoxynucleotidyltransferase(Tdt)Anenzymethatrandomlyaddsinnucleotidesduringjoiningofheavychain(NOTlightchain)segments.目前八十六頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)ReadKubypages113-115:GeneSegmentsAreJoinedbyRecombinases目前八十七頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)ProductiveandnonproductiverearrangementsJoiningofsegmentsisnotpreciseandmayresultinlossofthecorrectreadingframe.Thismayleadtointroductionofstopcodons-->nonproductiverearrangements.目前八十八頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)RSSRSSRSS:recombinationsignalsequenceRAG:recombinationactivatinggene目前八十九頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)P-核苷酸和N-核苷酸的加入片段斷端形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)TCAGDTAATJ內(nèi)切酶切開發(fā)夾結(jié)構(gòu)產(chǎn)生P-核苷酸TCGADATATJTdT酶加入N-核苷酸TCGACTCDGAGCGATATJ通過DNA修復(fù)，斷端連接，恢復(fù)雙鍵結(jié)構(gòu)TCGACTCGCTATAAGCTGAGCGATATDJPNP目前九十頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)Twoallelesareavailableateachlocus(maternalandpaternal).ABcellexpressesonlyoneheavyandlightchainallele.

-ALLELICEXCLUSION目前九十一頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)First,onealleleoftheheavychainisrearranged.Iftherearrangementissuccessful,theotherallelewillnotberearranged.Iftherearrangementisnonproductive,theotherallelewillberearranged.Onceaheavychainallelerearrangementisproductive,lightchainrearrangementwillbegin.Ifrearrangementofbothheavychainallelesisnonproductive,theBcellwillnotmaturefurtherbutwilldieofapoptosiswithinthebonemarrow.目前九十二頁\總數(shù)一百零三頁\編于六點(diǎn)Ifaheavychainalleleissuccessfullyrearranged,lightchainrearrangementbegins.Inhumans,thekappalocusisrearrangedfirst.Rearrangementoccursatonealleleatatimeandcontinuesuntilaproductiverearrangementoccurs.Ifbothkappaallelesrearrangenonproductively,rearrangementwillbeginatthelambdalocus.Ifall4alleles(bothkappaallelesandbothlambdaalleles)rearrangementsare