LC-MS-MS法測定吸煙者和被動吸煙者尿液中的煙堿及其代謝物

第第頁LC_MS_MS法測定吸煙者和被動吸煙者尿液中的煙堿及其代謝物

煙草科技/TobaccoScience尿液;煙堿;代謝物

<810%),-40℃下存放煙堿及其

代謝物也較穩(wěn)定

[15,20]

(測定量變化<710%)。因此,常溫下應在48h內(nèi)完成尿樣測定,或先于-40℃下存

放而后測定。2.8吸煙者和被動吸煙者尿樣中煙堿及其代謝物含量比較

采用LC-MS/MS法測定了10名日抽吸20支相同品牌卷煙的吸煙者和5名工作環(huán)境中存在ETS的被動吸煙者24h尿液中煙堿及其9種代謝物的濃度。結(jié)果(表5)表明:①雖然抽吸相同品牌相同支數(shù)的卷煙,但各吸煙者尿中煙堿及其9種代謝物的含量卻存在較大差異,可能是抽吸習慣不同或煙堿實際攝入量

和代謝方式的差異[1,16]

造成的;②被動吸煙者24h尿液中都檢測出煙堿、可替寧、反3’-羥基可替寧,部分檢出可替寧糖苷、降煙堿、煙堿氮氧化物,且前3種物質(zhì)的濃度稍高,但都遠遠低于吸煙者。因此,煙堿、可替寧、反3’-羥基可替寧有可能作為人尿液中被動吸煙的生物標記物。

表2煙堿及其代謝物的標準曲線、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢測限

待測物①

線性方程

線性范圍

(μg/L)相關(guān)系數(shù)

(R2)檢測限②

(μg/L)煙堿Y=6.7E-03X+0.0142.0～8000.00.99921.0可替寧

Y=4.6E-03X+4E-032.0～8000.01.00000.5反3’-羥基可替寧Y=2.9E-03X+2E-032.0～8000.01.00001.3煙堿糖苷Y=7.6E-03X+4E-031.0～4000.00.99990.4可替寧糖苷

Y=3.5E-05X+5E-042.0～8000.01.00000.5反3’-羥基可替寧糖苷Y=8.3E-04X+8E-055.0～4000.00.99992.7降煙堿Y=1.5E-03X+5E-031.0～4000.00.99960.2降可替寧Y=2.0E-04X+6E-0510.0～4000.00.99864.2可替寧氮氧化物Y=5.9E-04X+4E-051.0～4000.00.99930.4煙堿氮氧化物

Y=6.5E-03X+8E-03

1.0～4000.0

0.9993

0.1

注:①煙堿及其糖苷以煙堿-d3作內(nèi)標,可替寧及其糖苷、降煙堿、降可替寧、可替寧氮氧化物、煙堿氮氧化物以可替寧-d3作內(nèi)標,反3’-羥基可替寧及其糖苷的內(nèi)標為反3’-羥基可替寧-d3;②以信噪比S/N=3對應濃度確定。

2

4?1994-2023ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.6fc4a7d876a20239bd642d4a

表3不同濃度下煙堿及其代謝物的精密度和回收率(n=6)

化合物濃度

(μg/L)精密度

(%)回收率

(%)煙堿

10003.1981506.694108.278可替寧10002.81011504.7104104.2109反3’-羥基可替寧10003.81031503.7102106.7106煙堿糖苷5003.71051503.7109103.9116可替寧糖苷10002.1841503.49510

9.3

93

化合物

濃度

(μg/L)精密度

(%)回收率

(%)反3’-羥基可替寧糖苷

5002.81001503.7100104.597降煙堿

5002.71021503.892107.496降可替寧

5003.5971503.0100107.3105可替寧氮氧化物

5003.3951503.591104.395煙堿氮氧化物

5002.6991504.411010

3.3

116表4尿樣中煙堿及其代謝物的測定量隨存放條件的變化①

(%)

時間

溫度NNic

②

NicNCotOHCotNNOCNOCotOHCot-GCot-G

Nic-G48h

-40℃

5.54.05.6

6.73.05.84.91.3-1.82.94℃

-7.02.3-2.3-0.7-2.2-3.2-1.1-7.4-4.92.4室溫

-6.13.1-1.00.1-3.2-3.0-0.5-6.2-5.35.1一周

-40℃-2.92.8-1.23.5-2.6-2.12.2-2.9-3.3-0.54℃-11.3-4.8-5.8-7.2-5.1-9.3-6-8.4-7-3.4室溫

-15.6

-9.5

-7.6

-8.5

-9.3

-11.5

-10.6

-12.4

-13.7

-14.1

①(不同存放條件下的測定值-取樣時的測定值)/取樣時的測定值;②NNic,降煙堿;Nic,煙堿;NCot,降可替寧;OHCot,反

3’-羥基可替寧;NNO,煙堿氮氧化物;CNO,可替寧氮氧化物;Cot,可替寧;Nic-G,煙堿糖苷;OHCot-G,反3’-羥基可替寧糖

苷;Cot-G,可替寧糖苷;下同。

表5部分吸煙者和被動吸煙者尿液中的煙堿及其9種代謝物的濃度①

(μg/L)

尿樣②

NicCotOHCotNic-GCot-GOHCot-GNNicNcotNNOCNO1#

238.0

②

300.1452.058.847.230.114.428.241.230.62#324.8910.23040.0380.01648.0664.045.6102.8552.0332.63#736.0701.51072.0488.0920.0304.441.180.8612.0190.64#544.01092.21036.0343.2632.0181.242.276.41076.0114.65#228.0114.9164.062.0101.670.416.223.159.642.36#464.0839.22348.037.415

.01020.036.475.6288.0229.27#836.01491.85840.0420.01944.01776.050.0102.4420.0500.08#1176.0595.01428.0254.8784.0338.848.653.6375.6159.59#480.01274.3880.0636.0904.0184.056.617.2972.0179.510#177.2131.3366.454.046.054.74.918.318.031.711#10.021.639.2nd

③

5.1nd3.4nd2.6nd12#28.019.240.8nd8.4nd2.5nd1.6nd13#18.418.755.2nd7.2nd9.3nd5.6nd14#7.410.320.6ndndnd4.7ndndnd15#

21.2

11.1

34.3

nd

nd

nd

nd

nd

2.0

nd

①3次平行測定的平均值;②1#～10#為吸煙者尿樣,11#～15#為被動吸煙者尿樣;③nd未檢出。

3

4?1994-2023ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrig