新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基_第1頁
新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基_第2頁
新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基_第3頁
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文檔簡介

噬菌體增殖過程新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第1頁第四章微生物營養(yǎng)和培養(yǎng)基教學(xué)目標了解微生物營養(yǎng)類型特點及多樣性,以及依據(jù)不一樣微生物各自營養(yǎng)要求,配制對應(yīng)培養(yǎng)基對微生物培養(yǎng)理論知識,為今后對微生物研究與利用打下基礎(chǔ)。教學(xué)內(nèi)容微生物六大類營養(yǎng)要素、微生物營養(yǎng)類型、營養(yǎng)物質(zhì)進入細胞方式、培養(yǎng)基新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第2頁第四章微生物營養(yǎng)和培養(yǎng)基營養(yǎng)(nutrition)是指生物體從外部環(huán)境中攝取對其生命活動必需能量和物質(zhì),以滿足正常生長和繁殖需要一個最基本生理功效。所以,營養(yǎng)是生命活動起始點,它為一切生命活動提供了必需物質(zhì)基礎(chǔ)。有了營養(yǎng),才能夠深入進行代謝、生長和繁殖,并可能為人們提供種種有益代謝產(chǎn)物和特殊服務(wù)。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第3頁第四章微生物營養(yǎng)和培養(yǎng)基營養(yǎng)物(nutrient)指含有營養(yǎng)功效物質(zhì),在微生物學(xué)中,它還包含非常規(guī)物質(zhì)形式光輻射能在內(nèi)??傊?,微生物營養(yǎng)物可為它們正常生命活動提供結(jié)構(gòu)物質(zhì)、能量、代謝調(diào)整物質(zhì)和必要生理環(huán)境。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第4頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素微生物培養(yǎng)基如同微生物天天所吃飯,微生物培養(yǎng)基配方如同人們菜譜,新種類和花樣總是層出不窮。1930年《ACompilationofCultureMedia》記載了2500種培養(yǎng)基當前知道,不論從元素水平或營養(yǎng)要素水平來分析,微生物營養(yǎng)要求與攝食型動物(包含人類)和光合自養(yǎng)型綠色植物十分靠近,它們之間存在著“營養(yǎng)上統(tǒng)一性”;在元素水平上都需20種左右,且以碳、氫、氧、氮、硫、磷6種元素為主,在營養(yǎng)要素水平上則都在六大類范圍內(nèi)即碳源、氮源、能源、生長因子、無機鹽和水。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第5頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素一、碳源(carbonsource)一切能滿足微生物生長繁殖所需碳元素營養(yǎng)物,稱為碳源(carbonsource)。微生物細胞含碳量約占干重50%,故除水分外,碳源是需要量最大營養(yǎng)物,又稱大量營養(yǎng)物(macronutrients)。若把全部微生物看成一整體來考查,其可利用碳源范圍即碳源譜(spectrumofcarbonsources)是極其廣泛(表4-1)。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第6頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素二、氮源(nitrogensource)凡能提供微生物生長繁殖所需氮元素營養(yǎng)源,稱為氮源。氮是組成主要生命物質(zhì)蛋白質(zhì)和核酸等主要元素,氮占細菌干重12%-15%,故與碳源相同,氮源也是微生物主要營養(yǎng)物。若把微生物作為一個整體來考查,則它們能利用氮源范圍即氮源譜(spectrumofnitrogen)也是十分廣泛(表4-2)。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第7頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素二、氮源微生物氮源譜特點:1、顯著比動物或植物廣。普通地說,異養(yǎng)微生物對氮源利用次序是:“N·C·H·O”或“N·C·O·H·X”類優(yōu)于“N·H類,更優(yōu)于N·O”類,而最不易利用則是“N”類(只有少數(shù)固氮菌、根瘤菌和藍細菌等可利用它)。在微生物培養(yǎng)基成份中,最慣用有機氮源是牛肉浸出物(牛肉膏)、酵母膏、植物餅粕粉和蠶蛹粉等,由動、植物蛋白質(zhì)經(jīng)酶消化后各種蛋白胨尤為廣泛使用。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第8頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素二、氮源微生物氮源譜特點:2、氨基酸自養(yǎng)型生物(aminoacidautotrophs):一部分微生物是不需要利用氨基酸作氮源,它們能把尿素、銨鹽、硝酸鹽甚至氮氣等簡單氮源自行合成所需要一切氨基酸;氨基酸異養(yǎng)型生物(aminoacidheterotrophs):需要從外界吸收現(xiàn)成氨基酸作氮源微生物。全部動物和大量異養(yǎng)微生物屬于氨基酸異養(yǎng)型生物。而全部綠色植物和不少微生物都是氨基酸自養(yǎng)型生物。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第9頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素三、能源(energy)能為微生物生命活動提供最初能量起源營養(yǎng)物或輻射能。因為各種異養(yǎng)微生物能源就是其碳源,所以,它們能源就顯得十分簡單。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第10頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素三、能源(energy)單功效營養(yǎng)物:光輻射能;雙功效營養(yǎng)物:還原態(tài)無機物NH4+(能源、氮源);三功效營養(yǎng)物:氨基酸(碳源、氮源和能源)新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第11頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素四、生長因子(growthfactor)一類調(diào)整微生物正常代謝所必需,但不能用簡單碳、氮源自行合成有機物。因為它沒有能源和碳、氮源等結(jié)構(gòu)材料功效。所以需要量普通極少。廣義生長因子除了維生素外,還包含堿基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺類、C4~C6分支或直鏈脂肪酸,有時還包含氨基酸營養(yǎng)缺點突變株所需要氨基酸在內(nèi);狹義生長因子普通僅指維生素。生長因子雖為一主要營養(yǎng)要素,但它與碳源、氮源和能源有所區(qū)分,即并非任一詳細微生物都需要外界為它提供生長因子。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第12頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素四、生長因子(growthfactor)按照微生物對生長因子需要是否,把它們分成3種類型。(1)生長因子自養(yǎng)型微生物

它們不需要從外界吸收任何生長因子。多數(shù)真菌、放線菌和不少細菌,如E.coli等都屬這類。(2)生長因子異養(yǎng)型微生物

它們需要從外界吸收各種生長因子才能維持正常生長.如各種乳酸菌、動物致病菌、支原體和原生動物等。如支原體需要甾醇等

(3)生長因子過量合成微生物少數(shù)微生物在其代謝活動中,能合成并大量分泌一些維生素等生長因子,所以,可作為相關(guān)維生素生產(chǎn)菌種。比如,可用阿舒假囊酵母或棉阿舒囊霉生產(chǎn)維生素B2;可用謝氏丙酸桿菌、若干鏈霉菌和產(chǎn)甲烷菌生產(chǎn)維生素B12等。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第13頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素五、無機鹽(mineralsalts)無機鹽或礦質(zhì)元素主要可為微生物提供除碳、氮源以外各種主要元素。大量元素:凡生長所需濃度在10-3~10-4mol/L范圍內(nèi)元素,如P、S、K、Mg、Na和Fe等微量元素:凡生長所需濃度在10-6~10-8mol/L范圍內(nèi)元素,如Co、Zn、Mn、Mo、Co、Ni、Sn和Se等。

新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第14頁第一節(jié)微生物6大類營養(yǎng)要素六、水(water)除藍細菌等少數(shù)微生物能利用水中氫來還原CO2以合成糖類外,其它微生物并非真正把水看成營養(yǎng)物。即使如此,因為水在微生物代謝活動中不可缺乏性,故仍應(yīng)作為營養(yǎng)要素來考慮。原因以下:水是地球上整個生命系統(tǒng)存在和發(fā)展必要條件。首先它是一個最優(yōu)良溶劑,可確保幾乎一切生物化學(xué)反應(yīng)進行;其次它可維持各種生物大分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性,并參加一些主要生物化學(xué)反應(yīng);另外,它還有許多優(yōu)良物理性質(zhì),諸如高比熱、高汽化熱、高沸點以及固態(tài)時密度小于液態(tài)等,都是確保生命活動十分主要特征。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第15頁第二節(jié)微生物營養(yǎng)類型營養(yǎng)類型是指依據(jù)微生物生長所需要主要營養(yǎng)要素即能源和碳源不一樣,而劃分微生物類型。微生物營養(yǎng)類型劃分方法很多(表4-3),較多是按它們對能源、氫供體和基本碳源需要來區(qū)分4種類型,具休內(nèi)容可見表4-4。有機物日光輻射能還原態(tài)無機物新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第16頁第二節(jié)微生物營養(yǎng)類型營養(yǎng)類型是指依據(jù)微生物生長所需要主要營養(yǎng)要素即能源和碳源不一樣,而劃分微生物類型。微生物營養(yǎng)類型劃分方法很多(表4-3),較多是按它們對能源、氫供體和基本碳源需要來區(qū)分4種類型,具休內(nèi)容可見表4-4。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第17頁光能無機營養(yǎng)型(光能自養(yǎng)型)利用光作為生活所需要能源,利用CO2作為碳源,以無機物作為供氫體以還原CO2合成細胞有機物,比如,紅硫細菌、綠硫細菌等,它們細胞內(nèi)都含有光合色素,它們完全能夠在無機環(huán)境中生長。細菌光合作用與高等綠色植物光合作用相同,所不一樣是高等綠色植物以水作為CO2還原劑,同時放出氧;而光合細菌則是從H2S、Na2S2O3等無機硫化物中得到氫還原CO2,并析出硫。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第18頁光能無機營養(yǎng)型(光能自養(yǎng)型)實例能源氫供體基本碳源藍細菌光H2OCO2紫硫細菌光H2SCO2綠硫細菌光H2SCO2藻類光H2OCO2新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第19頁光能有機營養(yǎng)型(光能異養(yǎng)型)利用光作為能源,利用有機物作為供氫體還原CO2合成細胞有機物。如紅螺細菌能利用異丙醇作為供氫體進行光合作用,并積累丙酮。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第20頁化能無機營養(yǎng)型(化能自養(yǎng)型)這類微生物能源來自無機物氧化所產(chǎn)生化學(xué)能,碳源是CO2(或碳酸鹽)。它們能夠在完全無機環(huán)境中生長發(fā)育,如硫細菌、鐵細菌、硝化細菌、氫細菌等。硝化細菌、硫細菌就是利用這種方式來合成有機物。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第21頁化能無機營養(yǎng)型(化能自養(yǎng)型)實例能源氫供體基本碳源硝化細菌NH4+、NO2-H2OCO2硫化細菌S、FeS2

H2OCO2鐵細菌Fe2+H2SO4CO2氫細菌H2H2H2CO3硫磺細菌H2S、SH2SCO2新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第22頁課后作業(yè)共性問題周質(zhì)空間新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第23頁第三節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)進入細胞方式除原生動物(吞噬營養(yǎng)型)外,其它各大類有細胞微生物都是經(jīng)過細胞膜滲透和選擇吸收作用而從外界吸收營養(yǎng)物。細胞膜運輸營養(yǎng)物質(zhì)有4種方式,即單純擴散、促進擴散、主動運輸和基團移位。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第24頁一、單純擴散(simplediffusion)又稱被動運輸(passivetransport),指疏水性雙分子層細胞膜(包含孔蛋白在內(nèi))在無載體蛋白參加下,單純依靠物理擴散方式讓許多小分子、非電離分子尤其是親水性分子被動經(jīng)過一個物質(zhì)運輸方式。經(jīng)過這種方式運輸物質(zhì)種類不多,主要是O2、CO2、乙醇和一些氨基酸分子、因為單純擴散對營養(yǎng)物運輸缺乏選擇能力和逆濃度梯度“濃縮”能力,所以不是細胞獲取營養(yǎng)物主要方式。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第25頁二、促進擴散(facilitateddiffusion)指溶質(zhì)在運輸過程中,必須借助存在于細胞膜上底物特異載體蛋白幫助,但不消耗能量一類擴散性運輸方式。載體蛋白有時稱作滲透酶、移位酶或移位蛋白。普通經(jīng)過誘導(dǎo)產(chǎn)生,它借助本身構(gòu)象改變,在不耗能條件下可加速把膜外高濃度溶質(zhì)擴散到膜內(nèi),直至膜內(nèi)外該溶質(zhì)濃度相等為止。比如釀酒酵母對各種糖、氨基酸和維生素吸收,以及E.coli對甘油吸收等。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第26頁三、主動運輸(activetransport)指一類須提供能量(包含ATP、質(zhì)子動勢或“離子泵”等)并經(jīng)過細胞膜上特異性載體蛋白構(gòu)象改變,而使膜外環(huán)境中低濃度溶質(zhì)運入膜內(nèi)一個運輸方式。因為它能夠逆濃度梯度運輸營養(yǎng)物,所以對許多生存于低濃度營養(yǎng)環(huán)境中貧養(yǎng)菌(或稱寡養(yǎng)菌)生存極為主要。主動運輸例子很多,主要有沒有機離子、有機離子和一些糖類(乳糖、葡萄糖、麥芽糖或蜜二糖)等。在E.coli中、經(jīng)過主動運輸,1分子乳糖約花費0.5分子ATP,而運輸1分子麥芽糖則要花費10-12ATP。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第27頁四、基團移位(grouptranslocation)指一類既需特異性載體蛋白參加,又需耗能一個物質(zhì)運輸方式。其特點是溶質(zhì)在運輸前后還會發(fā)生分子結(jié)構(gòu)改變,所以不一樣于普通主動運輸?;鶊F移位主要用于運輸各種糖類(葡萄糖、果糖、甘露糖和N-乙酰葡糖胺等)、核苷酸、丁酸和腺嘌呤等物質(zhì)。其運輸機制在E.coli中研究得較為清楚,主要靠磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng),即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)進行。此系統(tǒng)由24種蛋白組成,運輸某一詳細糖最少有4種蛋白參加。其特點是每輸入一個葡萄糖分子,就要消耗一個ATP能量。熱穩(wěn)載體蛋白新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第28頁四、基團移位(grouptranslocation)新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第29頁第四節(jié)培養(yǎng)基培養(yǎng)基(medium,復(fù)數(shù)為media;或culturemedium)指由人工配制、適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用混合營養(yǎng)料。任何培養(yǎng)基都應(yīng)具備微生物生長所需要六大營養(yǎng)要素,且其間百分比是適當。絕大多數(shù)微生物都可在人工培養(yǎng)基上生長,只有少數(shù)稱作難養(yǎng)菌(fastidiousmicroorganisms)寄生或共生微生物,比如類支原體、類立克次氏體和少數(shù)寄生真菌等,至今還不能在人工培養(yǎng)基上生長。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第30頁第四節(jié)培養(yǎng)基一、選取和設(shè)計培養(yǎng)基標準和方法(一)4個標準1、目標明確2、營養(yǎng)協(xié)調(diào)碳氮比(即C/N比):碳源與氮源含量之比。3、理化適宜指培養(yǎng)基pH值、滲透壓、水活度和氧化還原勢等物理化學(xué)條件較為適宜。4、經(jīng)濟節(jié)約新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第31頁第四節(jié)培養(yǎng)基一、選取和設(shè)計培養(yǎng)基標準和方法(二)4種方法1、生態(tài)模擬直接取用某種微生物大量生長繁殖環(huán)境中自然基質(zhì)(經(jīng)過滅菌)或模擬這類自然條件,就可取得一個“初級”天然培養(yǎng)基,比如可用肉湯培養(yǎng)細菌,用果汁培養(yǎng)酵母菌,用潤濕麩皮、米糠培養(yǎng)霉菌以及用米飯或面包培養(yǎng)根霉等。2、參閱文件3、精心設(shè)計借助于優(yōu)選法或正交試驗設(shè)計等數(shù)學(xué)工具,可顯著提升工作效率。4、經(jīng)濟節(jié)約試驗規(guī)模普通都遵照由定性到定量、由小到大、由試驗室到工廠等逐步擴大標準。比如,可先在培養(yǎng)皿瓊脂平板上測試某微生物營養(yǎng)要求,然后作搖瓶培養(yǎng)或臺式發(fā)酵罐培養(yǎng)試驗,最終才擴大到試驗型并深入放大到生產(chǎn)型發(fā)酵罐中進行試驗。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第32頁第四節(jié)培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基種類(一)按對培養(yǎng)基成份了解作分類1、天然培養(yǎng)基(complexmedia,undefinedmedia)指一類利用動、植物或微生物體包含用其提取物制成培養(yǎng)基,這是一類營養(yǎng)成份既復(fù)雜又豐富、難以說出其確切化學(xué)組成培養(yǎng)基。比如培養(yǎng)各種細菌所用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,培養(yǎng)酵母菌麥芽汁培養(yǎng)基等。天然培養(yǎng)基優(yōu)點是營養(yǎng)豐富、種類多樣、配制方便、價格低廉;缺點是成份不清楚、不穩(wěn)定。在試驗室中配制這類培養(yǎng)基時,還慣用商品形式天然材料,包含酪蛋白、大豆蛋白、牛肉膏、酵母粉以及它們酶解或酸解產(chǎn)物(如各種蛋白陳)等。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第33頁第四節(jié)培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基種類(一)按對培養(yǎng)基成份了解作分類2、組合培養(yǎng)基(chemicallydefinedmedium)又稱合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基,是一類按微生物營養(yǎng)要求準確設(shè)計后用各種高純化學(xué)試劑配制成培養(yǎng)基。比如培養(yǎng)E.coli等細菌用葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基,培養(yǎng)一些鏈霉菌淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基(常稱“高氏一號培養(yǎng)基”),培養(yǎng)真菌蔗糖硝酸鹽培養(yǎng)基(即察氏培養(yǎng)基)等。組合培養(yǎng)基優(yōu)點是成份準確、重演性高,缺點是價格較貴、配制麻煩,且微生物生長比較普通,所以,通常僅適合用于營養(yǎng)、代謝、生理、生化、遺傳、育種、菌種判定或生物測定等對定量要求較高研究工作中。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第34頁第四節(jié)培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基種類(一)按對培養(yǎng)基成份了解作分類3、半組合培養(yǎng)基(semi-definedmedia)指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或一些天然成份培養(yǎng)基,比如,培養(yǎng)真菌馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基等。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第35頁第四節(jié)培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基種類(二)按培養(yǎng)基外觀物理狀態(tài)作分類1、液體培養(yǎng)基(liquid

media)一類呈液體狀態(tài)培養(yǎng)基,在試驗室和生產(chǎn)實踐中用途廣泛,尤其適合用于大規(guī)模地培養(yǎng)微生物。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第36頁第四節(jié)培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基種類(二)按培養(yǎng)基外觀物理狀態(tài)作分類2、固體培養(yǎng)基(solid

media)一類外觀呈固體狀態(tài)培養(yǎng)基。依據(jù)固態(tài)性質(zhì)又可分為:(1)固化培養(yǎng)基

常稱“固體培養(yǎng)基”,由液體培養(yǎng)基中加入適量凝固劑而成,比如加有1.5%-2%瓊脂或5%-12%明膠液體培養(yǎng)基,就可制成遇熱可融化、冷卻后則呈凝固態(tài)用途最廣固化培養(yǎng)基。除瓊脂和明膠外,海藻酸膠、脫乙酰吉蘭糖膠和多聚醇F127也能夠用作凝固劑。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第37頁第四節(jié)培養(yǎng)基2、固體培養(yǎng)基(solid

media)(2)非可逆性固化培養(yǎng)基指一類一旦凝固后不能再重新融化固化培養(yǎng)基,如血清培養(yǎng)基或無機硅膠培養(yǎng)基等。后者專門用于化能自養(yǎng)細菌分離和純化等方面。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第38頁第四節(jié)培養(yǎng)基2、固體培養(yǎng)基(solid

media)(3)天然固態(tài)培養(yǎng)基由天然固態(tài)基質(zhì)直接配制成培養(yǎng)基,比如培養(yǎng)真菌用由麩皮、米糠、木屑、纖維或稻草粉配制成培養(yǎng)基;由馬鈴薯片,胡蘿卜條,大米,麥粒,大豆,面包或動、植物組織直接制備培養(yǎng)基等。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第39頁第四節(jié)培養(yǎng)基2、固體培養(yǎng)基(solidmedia)(4)濾膜(membranefilter)

是一個堅韌且?guī)в袥]有數(shù)微孔醋酸纖維薄膜。若把濾膜制成圓片覆蓋在營養(yǎng)瓊脂或浸有液體培養(yǎng)基纖維素襯墊上,就形成含有固化培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)條件。濾膜主要用于對含菌量極少水中微生物進行過濾、濃縮,然后揭下濾膜,把它放在含有適當液體培養(yǎng)基襯墊上培養(yǎng),待長出菌落后,就可計算單位水樣中實際含菌量。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第40頁第四節(jié)培養(yǎng)基2、固體培養(yǎng)基(solidmedia)固體培養(yǎng)基在科學(xué)研究和生產(chǎn)實踐上用途很廣,比如,可用于菌種分離、判定、菌落計數(shù)、檢驗雜菌、選種、育種、菌種保藏、生物活性物質(zhì)生物測定、獲取大量真菌袍子,以及用于微生物固體培養(yǎng)和大規(guī)模生產(chǎn)等。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第41頁第四節(jié)培養(yǎng)基3、半固體培養(yǎng)基(semi-solidmedia)指在液體培養(yǎng)基中加入少許凝固劑而配制成半固體狀態(tài)培養(yǎng)基,比如“稀瓊脂”,它們在小型容器倒置時不會流出,但在猛烈振蕩后則呈破散狀態(tài)。普通可在液體培養(yǎng)基中加入0.5%左右瓊脂制成。半固體培養(yǎng)基可放入試管中形成“直立柱”,把它用于細菌動力觀察,趨化性研究,厭氧菌培養(yǎng)、分離和計數(shù),以及細菌和酵母菌菌種保藏等,若用于雙層平板法中,還可測定噬菌體效價。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第42頁第四節(jié)培養(yǎng)基4、脫水培養(yǎng)基(dehydratedmedia)又稱脫水商品培養(yǎng)基(dehydratedcommercialmedia)或預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水以外一切成份商品培養(yǎng)基,使用時只要加入適量水分并加以滅菌即可,是一類現(xiàn)有成份準確又使用方便等優(yōu)點當代化培養(yǎng)基。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第43頁第四節(jié)培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基種類(三)按培養(yǎng)基對微生物功效做分類1、選擇性培養(yǎng)基(selected

media)一類依據(jù)某微生物特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理原因抗性而設(shè)計培養(yǎng)基,含有使混合菌樣中劣勢菌變成優(yōu)勢菌功效,廣泛用于菌種篩選等領(lǐng)域。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第44頁第四節(jié)培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基種類(三)按培養(yǎng)基對微生物功效做分類1、選擇性培養(yǎng)基(selectedmedia)選擇性培養(yǎng)基是19世紀末由荷蘭M.W.Beijerinck和俄國S.N.Vinogradsky所創(chuàng)造。我國人民在12世紀宋代,就已依據(jù)紅曲霉含有耐酸和耐高溫特征,采取明礬調(diào)整酸度和用酸米抑制雜菌高溫培養(yǎng)法,取得了純度很高紅曲,這實際上就是應(yīng)用選擇性培養(yǎng)基先例;我國民間流傳至今泡菜制作,也是利用選擇性培養(yǎng)基和培養(yǎng)法一個實例。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第45頁第四節(jié)培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基種類(三)按培養(yǎng)基對微生物功效做分類1、選擇性培養(yǎng)基(selectedmedia)加富性選擇培養(yǎng)基(enrichedselectedmedia)采取了這類“投其所好”策略后,就可使原先極少許篩選對象很快在數(shù)量上靠近或超出原試樣中其它占優(yōu)勢微生物,因而到達了富集或增殖目標。抑制性選擇培養(yǎng)基(inhibitedselectedmedia)采取“投其所抗”原理新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第46頁山西新源華康化工股份有限企業(yè)側(cè)耳液體深層發(fā)酵試驗菌株分離與純化請結(jié)合大學(xué)期間做過微生物學(xué)試驗:微生物菌種分離與純化這一節(jié)試驗知識來處理現(xiàn)實生活中碰到微生物問題?假如你是該企業(yè)一名微生物學(xué)試驗技術(shù)工作者,請問你怎樣從已經(jīng)污染側(cè)耳素發(fā)酵液中分離純化出側(cè)耳這種真菌?新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第47頁第四節(jié)培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基種類(三)按培養(yǎng)基對微生物功效做分類1、選擇性培養(yǎng)基(selectedmedia)用作加富營養(yǎng)物主要是一些特殊碳源或氮源,如甘露醇可富集自生固氮菌,纖維素可畜集纖維分解菌,石蠟油可畜集分解石油微生物,較濃糖酒可用來富集酵母菌等;用作抑制它種微生物選擇性抑菌劑有染料(結(jié)晶紫等)、抗生素、脫氧膽酸鈉和疊氮化鈉等;用于選擇性其它理化原因還有溫度、氧、pH和滲透壓等。新版微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基第48頁第四節(jié)培養(yǎng)基二、培養(yǎng)基種類(三)按培養(yǎng)基對微生物功效做分類2、判別性培養(yǎng)基(differentialmedia)一類在成份中加有能與目標菌無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)指示劑,從而到達只須用肉眼區(qū)分顏色就能方便地從近似

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