高考生物必備知識點DNA的粗提取與鑒定

2019年考必知DNA的提與鑒定查字典生物網(wǎng)的小編各位考生整理了2019年高考生物必備知識點的提取與鑒定望對大家有所幫助。更多的資訊請持續(xù)關(guān)查字典生物網(wǎng)。小編推薦：高考成績理想，?？瞥煽円材苌媳究聘呖忌锉貍渲R點的粗提取與鑒定一、實驗原理DNA在氯化鈉溶液中溶解度，是隨著氧化鈉的濃度的變化而改變的。當氯化鈉物質(zhì)的量濃度為2mol／時，DNA的溶解度最大，濃度．14mol時，DNA的溶解度最低用這一原理使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。DNA不溶于95%酒溶液，但是細胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用一原理，可以進一步提取出含雜質(zhì)較少的。DNA中含有脫氧核糖能與二苯胺（沸水?。┓磻?yīng)生成藍色物質(zhì)，因此，二苯胺以作為鑒定DNA試劑。高考生物必備知識點的粗提取與鑒定二、目的要求1.會DNA粗提和鑒定的方法。2.察提取出來的物質(zhì)顏色和形狀。材料用具材料：活雞或鮮血雞。儀器：離心機、恒溫裕鍋、載玻片，玻璃棒，濾紙，滴管，1頁

量簡（100mL，個杯100l個，mL、500mL各2個管（20mL，個斗試管夾，紗布。試劑酒精的體積分為的溶（驗前置于冰箱內(nèi)冷卻24餾水，檬酸鈉的質(zhì)量濃度為0．1g／的溶液化鈉的物質(zhì)的濃度分別為2mol／和0015的溶液，二苯胺試劑高考生物必備知識點的粗提取與鑒定三、方法步驟實驗前需要制備雞血胞液（由教師完成制備的方法是：取檸檬酸鈉的質(zhì)量濃為1g／的溶液（抗凝劑）100mL置于500mL燒杯將宰殺活雞流出的雞（約180mL）注入燒杯中，同時用璃棒攪拌，使血液與檸檬酸鈉溶液充分混合，以免凝血。后，將血液倒入離心管內(nèi)，用1000r／的離心機離。此時血細胞沉淀于離心管底部。實驗時，用吸管除去。心管上部的澄清液，就可以得到雞血細胞液。1.提取雞血細胞的細核物質(zhì)將制備好的雞血細胞mL注入到50燒杯中。向燒杯中加入蒸餾水20mL同時用玻璃棒充分攪拌min，使血細胞加速破裂。后，用放有紗布的漏斗將血細胞液過濾至。取其濾。2.溶解細胞核內(nèi)的DNA將氯化鈉的物質(zhì)的量度為mol的液40mL入到濾液2頁

中，并搖動燒杯，使混合均勻，這時DNA溶液中呈溶解狀態(tài)。3.析出含的粘稠沿燒杯內(nèi)壁緩緩加入餾水，同時用玻璃棒不停地輕輕攪拌時燒杯中有絲物出現(xiàn)意觀察絲狀物呈什么顏色。繼續(xù)加入蒸餾水，溶中出現(xiàn)的粘稠物會越來越多。當粘稠物不再增加時停止加蒸餾水（這時溶液中氯化鈉的物質(zhì)的量濃度相當于0.14molL4.濾取含的粘稠用放有多層紗布的漏過濾步驟3中溶液至500mL的燒杯中，含DNA的粘稠被留在紗布上。5.將的粘稠物再解取1個mL燒杯向燒杯內(nèi)注入氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為2mol／L溶液20mL用鈍頭鑷子將紗布上的粘稠物夾至氯化鈉溶液中，用璃擇不停地攪拌，使粘稠物盡可能多地溶解于溶液中。6.過濾含有DNA的氯鈉溶液取1100mL燒杯用放有兩層紗布的漏斗過濾步驟5中的溶液。取其濾液，溶濾液中。7.提取含雜質(zhì)較少的DNA在上述濾過的溶液中入冷卻的精的體積分數(shù)為95％的溶液50mL（使用卻的酒精，對DNA的凝集效果較佳3頁

并用玻璃棒攪拌，溶中會出現(xiàn)含雜質(zhì)較少的絲狀物。用玻璃棒將絲狀物卷起，用濾紙吸取上面的水分。這種絲狀物的主要成分就是。意觀察絲狀物是什么顏色的。8.DNA的鑒定取兩支mL試管入化鈉的物質(zhì)的量濃度為0mol／L的溶液5mL，絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物解。然后，向兩支試管中各加入4mlL的二苯胺試劑混合勻后將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，觀察且比較兩支試管中溶液顏色的變化。將觀察的結(jié)果填寫在實驗報告冊》上。高考生物必備知識點的粗提取與鑒定1.DNA的粗提取與鑒實驗原理(1)粗提取原理：在NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時，DNA的溶解度隨NaCl溶液度的增加而降低;在0.14mol/L時，DNA的溶解度最小當NaCl溶濃度繼續(xù)增加時，DNA溶解度又增大。(2)純化原理DNA不于酒精但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。(3)鑒定DNA原理在沸浴條件下DNA遇二苯胺會被染成藍色。2.實驗材料的選擇及理(1)不選擇豬血等哺動物的血液，因為哺乳動物成熟的紅4頁

細胞無細胞核。(2)需要在雞血中加抗凝劑——檸檬酸鈉溶液，防止血液凝固。(3)需除去雞血中的漿，因為血漿中無DNA。特別提醒：不同生物組織中DNA含不同在選取材料時，應(yīng)本著DNA量高、料易得、便于提取的原則。3.生物實驗過程步驟：提取細胞核物→溶解核內(nèi)DNA→析出DNA粘稠物→濾取含DNA粘稠物DN粘稠物的再溶解→過濾含有DNA的氯化鈉溶液→提取雜質(zhì)較少的DNA→DNA鑒定。操作要點(1)2加餾水一次是在是為了使血細胞吸水膨脹破裂，加水后須充分攪拌使血細胞充分破裂第二次加蒸餾水是為了稀氯化鈉溶液。(2)3次加氯化鈉溶液第一次加氯化鈉后必須充分晃動燒杯，使二者混合均勻加速染色質(zhì)中DNA與蛋白質(zhì)分離，使DNA充分游離并溶解氯化鈉溶液中第二次加氯化鈉溶液也是為了的再溶，這時溶液中的蛋白質(zhì)含量已很少;第三次加氯化鈉溶液是為溶解DNA。(3)6次攪拌除最后次攪拌外前5次攪拌均朝一個方向:，并且在析出DNA、再溶和提取中，各步攪拌都要輕緩玻璃棒，不要直插燒底部防止DNA子斷裂。(4)3次過濾：第一次濾，留濾;第二次過濾，留粘稠;5頁

第三次過濾，留濾液注意這3次濾都用紗布，獲得沉淀物或粘稠物的通常為層，獲得濾液的紗布層數(shù)適當減少。特別提醒：若以植物實驗材料，步驟上大致相同，在材料的處理上有幾點不同一是增加研磨步驟，目的是破壞細胞壁二是加入洗滌劑目的是溶解細胞膜及核膜;三是加食鹽，可加速細胞膜及膜的破裂。4.DNA的粗提取與鑒實驗注意事項(1)用冷酒精濃縮和淀DNA時用的95%酒精須經(jīng)過充分預(yù)冷后才能使用酒精與含DNA氯化鈉溶液體積比是2：。如果用冷酒處理后，懸浮于溶液中的絲狀物較少，可將混合液放于冰箱再冷卻幾分鐘，然后再用玻璃棒卷起絲狀物。(2)雞血細胞破碎以釋放的DNA容易被玻璃容器吸附由于細胞內(nèi)的含量來就比較少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA