（浙江專用）高考生物第二輪復習 專題十 生物技術實踐 浙教版

PAGE16-專題十生物技術實踐考綱點擊知識內(nèi)容要求1－1微生物的利用掌握程度參考生物考試說明中的：一、考試的能力要求（二）實驗與探究能力大腸桿菌的培養(yǎng)和別離別離以尿素為氮源的微生物1－2酶的應用果汁中的果膠和果膠酶α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測1－3生物技術在食品加工中的應用果酒及果醋的制作泡菜的腌制和亞硝酸的測定1－4淺嘗現(xiàn)代生物技術植物組織培養(yǎng)考場傳真1．（2023·浙江自選模塊，17）幽門螺桿菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進展別離培養(yǎng)。實驗根本步驟如下：請答復以下問題。（1）在配制培養(yǎng)基時，要參加尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有________，它能以尿素作為氮源；假設有Hp，那么菌落周圍會出現(xiàn)________色環(huán)帶。（2）以下對尿素溶液進展滅菌的最適方法是__________滅菌。A．高壓蒸汽 B．紫外燈照射C．70%酒精浸泡 D．過濾（3）步驟X表示______________。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液______________到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得______菌落。（4）在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在______________中。假設不倒置培養(yǎng)，將導致______________。（5）臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其根本原理是Hp能將14C標記的______________分解為NH3和14CO2．（2023·浙江自選模塊，17）楊梅是浙江省的特色水果之一，為對其進展深加工，某廠進展了楊梅酒和楊梅醋的研制，根本工藝流程如下：請答復以下問題。（1）在制備楊梅酒過程中，為了提高楊梅的出汁率，在壓榨前可參加一定濃度的纖維素酶和______________酶。甲罐頂上彎管中加水的主要目的是____________。發(fā)酵一定時間后，觀察到發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有____________，說明發(fā)酵根本完畢。（2）在制備楊梅醋過程中，乙罐內(nèi)先填充經(jīng)__________處理的木材刨花，然后參加含__________菌的培養(yǎng)液，使該菌____________在刨花上，再讓甲罐中發(fā)酵完畢的楊梅酒流入乙罐進展楊梅醋發(fā)酵，楊梅醋的pH可通過控制楊梅酒的____________來調(diào)節(jié)。（3）假設甲罐中的楊梅酒全部流經(jīng)乙罐制成楊梅醋，那么乙罐中CO2的產(chǎn)生量是______。A．甲罐的兩倍 B．與甲罐的相等C．甲罐的一半 D．幾乎為零（4）在楊梅酒和楊梅醋發(fā)酵的整個過程中，某物質(zhì)濃度隨時間變化的示意圖如右，該物質(zhì)是______。3．（2023·浙江自選模塊，17）某同學進展蘋果汁制作實驗，工藝如以下圖所示。請答復以下問題。（1）圖中用KMnO4溶液浸泡蘋果的目的是______。黑曲霉提取液中含有的______可水解果膠，從而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通過______方式將酶固定化，酶被固定后用蒸餾水洗滌固定化柱是為了除去______。（2）實驗中，操作流程A和B的先后次序為______。在蘋果汁澄清過程中，應關閉的流速調(diào)節(jié)閥是______。要測定從固定化柱流出的蘋果汁中是否還有果膠，可取一定量的果汁與等量的______混合，如果出現(xiàn)______現(xiàn)象，說明果膠還沒有被完全水解。為使果膠完全水解，應將流速調(diào)______。（3）實驗后，將洗滌過的固定化柱在低溫環(huán)境中保存假設干天，該固定化柱仍可用于蘋果汁制作實驗，說明固定化酶可被______使用?？枷蚍治稣憬呖甲赃x模塊選修一試題歷年來立足課本，主要考察課本七個實驗的根底知識，試題常與本省生產(chǎn)、生活實際相結合，并結合生產(chǎn)裝置圖來呈現(xiàn)題干，給人以新的面目，但其根底知識仍在課本。2023年考察了別離以尿素為氮源的微生物，2023年考察了果酒、果醋制作，2023年結合蘋果汁生產(chǎn)工藝圖考察了固定化酶的相關知識。2023年是食醋和泡菜制作相關知識。試題題型前兩年是10個填空，每空1分，從2023年開場改為8個填空，加1個2分的單項選擇題。由上可見，選修一模塊試題總體難度不高，但跨度較大，考察知識面較廣，要求學生具備將課本知識應用于生產(chǎn)、生活實際的能力。復習時首先要掌握課本七個實驗的相關知識，并注意各實驗間的聯(lián)系和綜合應用。知識網(wǎng)絡熱點例析熱點一微生物的培養(yǎng)與應用1．無菌技術（1）獲得純潔培養(yǎng)物的關鍵是防止外來雜菌入侵。（2）無菌技術除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還能有效防止操作者自身被微生物感染。（3）消毒和滅菌的區(qū)別條件結果常用方法應用范圍消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體外表或內(nèi)部一局部對人體有害的微生物煮沸消毒法一般物品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源等滅菌強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌接種工具干熱滅菌玻璃器皿、金屬工具高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基及容器的滅菌特別提醒（1）高溫加熱滅菌，其原理就是使細菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，而到達殺滅細菌的作用。（2）化學藥劑的滅菌、消毒方法，其作用原理也是使細菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，但是化學物質(zhì)很難透過孢子或芽孢的堅硬外層進入細胞內(nèi)，因此化學方法難以消滅孢子和芽孢。（3）體積分數(shù)為70%的乙醇殺菌效果最強，其原因是濃度過低，殺菌力弱，濃度過高，使菌體外表蛋白質(zhì)凝固形成一層保護膜，乙醇分子不能滲入其內(nèi)，因此殺菌效果受影響。對剛洗刷后未干的器皿，那么可選擇75%的酒精進展消毒。2．劃線別離法與涂布別離法操作考前須知（1）劃線操作時在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，在劃線操作完畢時，仍然需要灼燒接種環(huán)。劃線別離法幾次灼燒滅菌的目的比擬第一次操作每次劃線之前劃線完畢目的殺死接種環(huán)上原有的微生物，防止污染培養(yǎng)物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種，防止細菌污染環(huán)境和感染操作者在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進展劃線，以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。在做第二次以及其后的劃線操作時，要從上一次劃線的末端開場劃線。每次劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開場，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。（2）涂布別離操作時，先將涂布器末端浸入70%酒精中，使用時滴盡酒精后，火焰灼燒涂布器，冷卻后進展涂布。3．恒溫培養(yǎng)時，將培養(yǎng)皿倒置原因假設正放培養(yǎng)皿，形成的水滴會落入培養(yǎng)基外表，菌落隨水擴散而散開，造成菌落間相互影響，無法到達別離的目的。因此需倒置。4．大腸桿菌培養(yǎng)與別離5．別離以尿素為氮源的微生物實驗剖析（1）土樣的獲得：在有哺乳動物排泄物的地方取得。（2）實驗步驟。（3）實驗剖析。①用瓊脂糖代替瓊脂配制固體培養(yǎng)基。瓊脂是未被純化的混合物，內(nèi)含一定量的含氮化合物，不利于以尿素為氮源的細菌的篩選。②培養(yǎng)基中的酸堿指示劑產(chǎn)生顏色變化（變紅），標志著存在脲酶水解尿素的作用，從而證明這一菌株可以以尿素為氮源。紅色環(huán)狀區(qū)域的大小代表脲酶活性的強弱和含量的多少。綠色區(qū)域越大，說明菌株利用尿素的能力越強。③與全營養(yǎng)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)比擬，尿素培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌落，這一現(xiàn)象說明能利用尿素的細菌在土壤菌群中只占有極少數(shù)量?！纠?】（2023·浙江紹興一模）尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌的分解作用，才能被植物吸收利用。某同學要別離出土壤中能分解尿素的細菌，并嘗試進展計數(shù)，培養(yǎng)基配方如下：K2HPO4NaClH2O葡萄糖尿素酚紅瓊脂0.12g0.12g15mL0.025g2.0g0.25mg0.5g（1）分解尿素的細菌都能合成______，該種細菌在生態(tài)平衡中起到什么作用？__________________。寫出細菌分解尿素的方程式：__________。（2）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學能否別離出土壤中分解尿素的細菌？______（填“能”或“不能”），原因是________________________。（3）別離得到分解尿素的細菌后，如果要擴大培養(yǎng)，那么應選擇______培養(yǎng)基進展培養(yǎng)。培養(yǎng)一段時間后，使用________________對微生物細胞進展計數(shù)。計數(shù)過程中，以下哪種行為會影響計數(shù)的準確性？（）A．計數(shù)時直接從靜置培養(yǎng)的試管底部取培養(yǎng)液進展計數(shù)B．如果方格內(nèi)微生物細胞數(shù)量多于300個，培養(yǎng)液先稀釋后再計數(shù)C．如果微生物細胞有粘連，要數(shù)出團塊中的每一個細胞D．壓在方格線上的細胞只計左線和上線上的細胞數(shù)（4）為了提高尿素肥效，可以將分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”。為了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用__________技術。解析：（1）含有脲酶的細菌通過降解尿素為氨作為其生長的氮源，從而也起到維持生物圈氮元素的平衡作用。（2）從培養(yǎng)基的成分看因為含有瓊脂，所以不能別離出分解尿素的細菌，因為瓊脂是一種未被純化的混合物，內(nèi)含一定量的含氮化合物，不利于以尿素為氮源的細菌的篩選。（3）擴大培養(yǎng)需要使用液體培養(yǎng)基，對微生物或者酵母菌等進展計數(shù)時常用血細胞計數(shù)板進展計數(shù)，再通過計數(shù)得到比擬準確的數(shù)量。計數(shù)過程需要注意操作標準，如A選項所述的操作會影響計數(shù)的準確性，應該把試管上下倒轉(zhuǎn)數(shù)次，使細菌分布均勻。（4）固定化酶技術可以提高酶的利用率。答案：（1）脲酶參與了氮循環(huán)（或維持氮平衡）CO（NH2）2＋H2Oeq\o(→,\s\up7(脲酶))2NH3＋CO2（2）不能瓊脂是未被純化的混合物，內(nèi)含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物（3）液體血細胞計數(shù)板A（4）固定化酶觸類旁通1（2023·浙江寧波二模）請答復微生物培養(yǎng)和別離的有關問題。（1）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進展________（填“消毒”或“滅菌”）；操作者的雙手需要進展清洗和________（填“消毒”或“滅菌”）。假設用大腸桿菌進展實驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過________（填“消毒”或“滅菌”）處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。（2）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是________________________。（3）欲從土壤中別離出能利用尿素的細菌：以______________為唯一氮源且參加了____________指示劑的培養(yǎng)基，用____________法別離細菌。假設培養(yǎng)基平板上有菌落存活且顏色變__________，那么說明別離成功。（4）別離以尿素為氮源的細菌和別離大腸桿菌都使用了LB培養(yǎng)基，其成分______。A．前者含瓊脂，后者不含瓊脂和瓊脂糖B．兩者都含有瓊脂C．前者含有瓊脂糖，后者不含瓊脂糖但含瓊脂D．兩者都不含瓊脂和瓊脂糖熱點二微生物在傳統(tǒng)發(fā)酵技術中的應用1．幾種發(fā)酵菌種的比擬2.果酒、果醋及泡菜的制作的比擬特別提醒果酒、果醋制作過程中防止雜菌污染的措施①榨汁機和發(fā)酵瓶等都需清洗干凈，且發(fā)酵瓶要進展消毒。②清洗葡萄時要先清洗后除枝梗。③發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管，不用直管。【例2】山楂酒具有活血、補氣、健脾等成效，對恢復體力、增加精力、促進食欲有較顯著的成效。以下為山楂酒制作的有關過程。分析答復以下問題。主要原料山楂設備榨汁機、發(fā)酵桶、地下室、大鍋等制作過程山楂經(jīng)充分水洗，用榨汁機榨汁。將山楂汁倒入發(fā)酵桶中，經(jīng)7～10d的發(fā)酵，即成果酒。將經(jīng)過發(fā)酵的果酒濾出，倒入發(fā)酵容器內(nèi)，存在地下室里，進展30d的再發(fā)酵。并繼續(xù)放置在陰涼的地下室進展陳釀，陳釀期間，要堅持倒桶（換桶），并保持酒桶常滿，即得原汁山楂酒（1）請寫出山楂酒制作的原理（用反響式表示）：______________________________。（2）與山楂酒發(fā)酵有關的微生物主要是____________，在山楂酒制作中菌種的主要來源是____________________。（3）發(fā)酵的溫度應該在________℃，在發(fā)酵過程中要先通氣后密封，先通氣的目的是__________________________________________。（4）檢驗是否產(chǎn)生酒精可在______條件下，用________試劑檢測。（5）假設要進一步制作果醋，應在發(fā)酵液中參加________菌種。解析：此題考察果酒和果醋的制作。果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進展需氧呼吸大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌能進展酒精發(fā)酵，反響式如下：C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2C2H5OH＋2CO2。發(fā)酵需在一定的溫度條件下進展。無論在有氧還是在無氧條件下，酵母菌代謝均產(chǎn)生CO2，因此要適時排氣。答案：（1）C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2C2H5OH＋2CO2（2）酵母菌野生的酵母菌（3）25～30使酵母菌在有氧條件下大量繁殖，增加菌種數(shù)量（4）酸性重鉻酸鉀（5）醋酸菌方法歸納酵母菌是一種比擬特殊的微生物，屬于兼性厭氧菌，在有氧條件下進展需氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下進展厭氧呼吸產(chǎn)生酒精，所以常用于釀酒。在釀酒時要注意溫度、氧氣等條件的控制。觸類旁通2（2023·杭州二模）生物技術在食品加工中的應用十分廣泛，如果酒、果醋制作是常見的例子。請答復以下有關果酒、果醋制作的問題。（1）果酒、果醋制作中，都需要大量純種發(fā)酵微生物，所以首先要對發(fā)酵微生物進展培養(yǎng)，在微生物培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、______、滲透壓等條件；為防止雜菌污染，還需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進展______（填“消毒”或“滅菌”）；操作者的雙手需要進展清洗和______；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是______________。（2）以下圖是果酒制果醋的發(fā)酵裝置。醋酸發(fā)酵在__________瓶中進展，發(fā)酵所需的微生物是___________。假設乙瓶中流出液明顯呈酸性，那么說明流出液中有__________生成。向乙瓶中通入空氣的主要原因是__________。A．果酒生成醋酸時需要氧氣B．通入空氣可使乙瓶中的鋸末呈松散狀C．使乙瓶中流出的液體緩慢滴入丙瓶中D．使甲瓶中流出的液體緩慢滴入乙瓶中（3）如果將該裝置改為酒精的發(fā)酵裝置，需要修改的地方是。熱點三酶的應用1．果汁中果膠與果膠酶。（1）果膠與果膠酶?；瘜W組成作用特性、來源果膠半乳糖醛酸甲酯、半乳糖醛酸植物細胞壁主要成分之一。將植物細胞黏合在一起不溶于乙醇，可鑒別果膠果膠酶蛋白質(zhì)、果膠酶、果膠甲酯酶把果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，使渾濁的果汁變得澄清黑曲酶、蘋果青霉（2）研究溫度對果膠酶活性影響的實驗。①實驗方案：確定溫度梯度→探討控制溫度的方法和措施。②實驗程序：制備水果泥→制備果膠酶→水果泥與果膠酶分別水浴保溫→將水果泥和果膠酶混合保溫→過濾出果汁→記錄果汁量→改變不同溫度后，重復上面實驗。③記錄實驗數(shù)據(jù)，并填入表格。④得出結論：獲得的果汁越多，或果汁越澄清，說明果膠酶的活性越高。2．α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測（1）固定化酶的含義：將水溶性的酶用物理或化學的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑的方法。（2）固定化的方法：吸附法、共價偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。（3）α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測。①α淀粉酶的固定化（如圖）。5mgα淀粉酶溶于4mL蒸餾水，參加5mg石英砂，攪拌30min。固定化酶柱示意圖②將石英砂裝入含氣門芯并用夾子封住的注射器中。用40mL蒸餾水用流速1mL/min來洗滌除去未吸附的游離淀粉酶。③使淀粉溶液以0.3mL/min的流速過柱，在流出5mL后接收0.5mL流出液。參加1～2滴KII2溶液，觀察顏色變化。④實驗預期結果：水解產(chǎn)物糊精遇碘呈紅色?！纠?】（2023·杭州二中熱身考）固定化酶是從20世紀60年代迅速開展起來的一種技術。東北農(nóng)業(yè)大學科研人員利用雙重固定法，即采用戊二醛作交聯(lián)劑（使酶相互連接），海藻酸鈉作為包埋劑來固定小麥酯酶，研究固定化酶的性質(zhì)，并對其最正確固定條件進展了探究。以下圖顯示的是局部研究結果（注：酶活力為固定化酶催化化學反響的總效率，包括酶活性和酶的數(shù)量），分析答復以下問題。（1）從對溫度變化適應性和應用范圍的角度分析，如果僅用一種包埋劑包埋酯酶，而不用交聯(lián)劑，固定化酶________（填“會”或“不會”）優(yōu)于游離酶。而甲圖所示結果可以得出的結論是__________________________________________________________________。（2）乙圖曲線說明濃度為________的海藻酸鈉包埋效果最好，當海藻酸鈉濃度較低時，酶活力較低的原因是______________________________________；濃度較高時，酶活力也降低的原因是___________________________________________________________________。（3）固定化酶的活力隨使用次數(shù)的增多而下降，由丙圖可知，固定化酯酶一般可重復使用________次，酶活力明顯下降。（4）固定小麥酯酶不采用海藻酸鈉直接包埋，而是同時用戊二醛作交聯(lián)劑，這是因為_____________________________________________________________________________。（5）（多項選擇）請選出該過程涉及的固定化方法（）。A．吸附法 B．偶聯(lián)法 C．交聯(lián)法 D．包埋法解析：固定化酶使酶載體結合，使酶分子的性能更穩(wěn)定，應用范圍更廣泛。當包埋載體的海藻酸鈉濃度較低時由于包埋不嚴密，酶分子容易漏出，使酶活力下降。當酶分子較小時，可以采用戊二醛等交聯(lián)劑與酶分子結合，使酶分子不易從包埋材料中漏出。答案：（1）不會固定化酯酶比游離酯酶對溫度變化適應性更強且應用范圍較廣（2）3%海藻酸鈉濃度較低時包埋不嚴密，酶分子容易漏出，數(shù)量缺乏沒有酶活性的海藻酸鈉的比例增高，導致酶量下降（3）3（4）酶分子很小，很容易從包埋材料中漏出（5）CD方法歸納（1）酶與固定化酶比擬。兩者不完全相同，固定化酶是酶的衍生物。酶是活細胞產(chǎn)生的具有催化作用的一類有機物，它是生物體內(nèi)各種化學反響的催化劑，而固定化酶是將水溶性的酶用物理或化學方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。固定化酶也具有酶的特性。（2）固定化酶的優(yōu)點。①酶固定化后有一定的機械強度，催化反響的過程可管道化、連續(xù)化和自動化。②酶不溶解在催化反響的溶液中，產(chǎn)物更易純化。③固定化酶可反復使用，更經(jīng)濟，更利于工廠化生產(chǎn)。④固定化酶提高了酶的穩(wěn)定性，可較長時間地貯存和使用。觸類旁通3（2023·浙江高三調(diào)研）以下是有關固定化酶及細菌培養(yǎng)與別離的問題。（1）固定化酶是將水溶性的酶用物理或__________的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為__________而又有酶活性的制劑?？捎胈_________法將α淀粉酶固定在石英砂上形成固定化酶柱。（2）為獲取土壤中的芽孢桿菌，某同學進展了相關實驗，操作流程如下。上圖中步驟A為__________，步驟B為__________。要判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，可采用的方法是__________________________。（3）以下消毒滅菌方法中，常用于接種環(huán)滅菌的是______________。A．70%酒精浸泡 B．紫外線照射C．灼燒 D．高壓蒸汽（4）請分析劃線別離法能得到單菌落的原因：______。熱點四植物的組織培養(yǎng)1．菊花的組織培養(yǎng)（1）原理：植物細胞的全能性。（2）根本流程2．影響植物組織培養(yǎng)的因素（1）內(nèi)因：植物種類，同一植物的年齡、部位、保存時間等。（2）外因②植物激素對組織培養(yǎng)的影響生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素；二者的作用受使用順序和用量比例的影響。a．使用順序不同，結果不同使用順序?qū)嶒灲Y果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于細胞分裂，但細胞不分化先使用細胞分裂素，后使用生長素細胞既分裂又分化同時使用分化頻率提高b．用量比例不同，結果也不同eq\f(生長素用量,細胞分裂素用量)的值eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(高：利于根的分化、抑制芽的形成,低：利于芽的分化、抑制根的形成,適中：促進愈傷組織的形成))特別提醒（1）外植體在培養(yǎng)過程中被污染的原因：①外植體消毒不徹底；②培養(yǎng)基滅菌不徹底；③接種中被雜菌污染；④錐形瓶密封性差等。（2）進展植物組織培養(yǎng)時應注意的問題：①所有實驗用具應嚴格滅菌。②接種過程要求嚴格的無菌操作。③愈傷組織培養(yǎng)，最初避光培養(yǎng)，后期見光培養(yǎng)。④試管苗培養(yǎng)：要先進展生芽培養(yǎng)，再進展生根培養(yǎng)，試管苗培養(yǎng)要在光照條件下進展?！纠?】（2023·杭州一模）當今能源緊缺，污染嚴重。酒精成為備受關注的“綠色能源”。利用玉米等植物秸稈生產(chǎn)燃料酒精已成為大勢所趨。（1）利用植物組織培養(yǎng)可實現(xiàn)玉米的大規(guī)?？焖俜敝常瑘D解如下，由外植體通過植物組織培養(yǎng)技術培育成完整植物，這項技術利用了____________原理。圖中A、B代表________、______；過程Ⅰ、Ⅱ分別表示______和______。（2）在植物組織培養(yǎng)中關于消毒和滅菌操作的表達，正確的選項是______。A．只要不碰外植體，操作者的雙手可以不消毒B．離體幼莖可以用酒精消毒C．鑷子等器械需用酒精滅菌D．接種后培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌（3）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精發(fā)酵菌種，對野生酵母菌進展誘變后通過篩選可以得到具有這些特性的突變菌，誘變及篩選過程如下：第一步：野生菌液體培養(yǎng)一段時間后承受紫外線照射誘變處理。第二步：制備選擇培養(yǎng)基。在根本培養(yǎng)基的根底上，還要添加______________，加瓊脂后滅菌，制成固體平板。第三步：將紫外線照射后的菌液稀釋涂布平板。第四步：根據(jù)____________篩選出突變菌。（4）隨著生物技術的開展，生物學家可以“創(chuàng)造”出某些特定的、以前從未自然存在過的生物體。有科學家將其他生物組織的基因植入細菌設計并制造出一種獨特的大腸桿菌，能夠?qū)⒄崽寝D(zhuǎn)化為石油燃料，這種可遺傳變異來源于________________。解析：（1）利用植物細胞的全能性可以把外植體培養(yǎng)成完整的植株。外植體通過脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再經(jīng)過再分化形成胚狀體。（2）操作者的雙手和離體幼莖需要用酒精進展消毒，而鑷子等器械那么需要滅菌處理，接種后的培養(yǎng)基不能進展滅菌處理了，否那么微生物都會死亡。（3）從本小題的題干信息可知，制備的選擇培養(yǎng)基除了常規(guī)的營養(yǎng)成分外，還需要參加高濃度的蔗糖提供營養(yǎng)，再適當調(diào)低pH，加瓊脂后再滅菌處理。突變菌可以在配制的高濃度糖溶液的培養(yǎng)基中存活，從而篩選得到這種突變菌。（4）轉(zhuǎn)基因的原理是基因重組。答案：（1）植物細胞全能性愈傷組織胚狀體脫分化再分化（2）B（3）高濃度蔗糖（或葡萄糖）、調(diào)低pH（加酸）是否能在該培養(yǎng)基上生長（4）基因重組觸類旁通4組織培養(yǎng)是近幾年開展起來的一種植物無性繁殖技術，特別在繁殖名貴經(jīng)濟作物、珍稀瀕危植物方面。以下是實驗室進展植物組織培養(yǎng)的一般過程，請答復以下問題。（1）植物組織培養(yǎng)的各個步驟應嚴格執(zhí)行____________技術，所以在生產(chǎn)時為了防止污染，植物組織必須先進展____________，常用的試劑是：70%酒精和______________。各種器皿和培養(yǎng)基等通常用____________法滅菌。（2）與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)基中要添加生長素和____________，兩者的物質(zhì)的量濃度比決定組織是生根，還是發(fā)芽。一般先用____________培養(yǎng)基進展培養(yǎng)，使之長出較多的叢狀苗，然后將叢狀苗分株培養(yǎng)。（3）將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時間后，單株鮮重和光合作用強度的變化如右圖。據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，光合作用強度的變化趨勢是逐漸減小，單株鮮重的變化趨勢是___________。據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機物的量________（填“能”或“不能”）滿足自身最正確生長的需要。（4）據(jù)圖推測，假設要在誘導試管苗生根的過程中提高其光合強度，應__________培養(yǎng)基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。A．降低 B．增加C．不改變 D．先降低后增加1．（2023·浙江金華十校一模）微生物與人類的生活、安康有著密切的聯(lián)系。請答復以下有關微生物的問題。（1）無菌技術主要通過消毒和滅菌來防止雜菌的污染。常用的滅菌方法有________________滅菌、干熱滅菌和________________滅菌。在組織培養(yǎng)過程中通常利用____________對外植體進展消毒。（2）在果醋、泡菜的制作過程中，需要氧氣的是____________________的制作；在制作果醋過程中，榨取的果汁非常渾濁，解決的方法是______________________。（3）根據(jù)微生物的特點，可以利用相應的培養(yǎng)基進展別離或培養(yǎng)，例如用______________培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細菌；用______________培養(yǎng)基培養(yǎng)蘋果青霉，以提高果膠酶的產(chǎn)量。（4）在微生物培養(yǎng)或別離過程中，以下操作不恰當?shù)氖莀_____。A．在超凈臺中進展接種時應該關閉紫外燈B．擴大培養(yǎng)時必須保證氧氣的供給C．控制液體培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度D．空白的平板培養(yǎng)基需進展無菌實驗（5）從土壤中別離能分解尿素的細菌時，通常在尿素培養(yǎng)基中添加酚紅，用以指示脲酶的分泌情況，其原理是尿素被脲酶分解產(chǎn)生的____________可以使酚紅變色。2．以下圖為“大腸桿菌的培養(yǎng)和別離”實驗的根本流程，請答復以下問題。（1）A過程配制的是通用細菌培養(yǎng)基，稱為______培養(yǎng)基。配制時除了參加特定的營養(yǎng)物質(zhì)以外，還要參加一定量的氯化鈉，以維持______。對培養(yǎng)基酸堿度的調(diào)節(jié)，應該在B過程的______（填“前面”或“后面”）。（2）D過程與C過程相比，培養(yǎng)基中增加的物質(zhì)是______。E過程所需的溫度是______。（3）D過程后，一個菌體便會形成一個______，這種別離方法是______的通用方法，也是篩選特定菌株的最簡便方法之一。（4）植物組織培養(yǎng)時，先配制MS培養(yǎng)基，再參加一定比例的植物激素。當生長素相對較多時，可促進______。（5）植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)都需要無菌操作，以下不適宜用高壓蒸汽滅菌的是______。A．接種環(huán)和鑷子 B．三角瓶和廣口瓶C．發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基 D．用于培養(yǎng)的幼莖和幼芽3．釀造工業(yè)中經(jīng)常使用酵母菌，某科研小組對固定化技術在釀酒酵母上的應用做了一些研究。下表是海藻酸鈉濃度和氯化鈣濃度對固定化酵母的影響實驗數(shù)據(jù)表，以下圖是在相同的發(fā)酵條件下，固定化酵母與游離酵母3次循環(huán)發(fā)酵的糖度變化比擬曲線圖，請分析答復以下問題。海藻酸鈉與氯化鈣濃度對固定化酵母的影響海藻酸鈉/%22.5322.5322.53CaCl2/%222333444eq\f(固定化強度,(g·30－1·個－1))930950990103011001140117011701160酒精量/%6.76.56.56.76.46.26.76.46.2殘?zhí)橇?%2.52.752.752.602.652.652.652.752.75a第一次循環(huán)發(fā)酵糖度變化b第二次循環(huán)發(fā)酵糖度變化c第三次循環(huán)發(fā)酵糖度變化固定化酵母與游離酵母發(fā)酵性能的比擬（1）固定酵母細胞的方法常用______法，實驗中要注意將剛?cè)芑玫暮Ｔ逅徕c溶液______后，參加已活化的酵母細胞，進展充分攪拌。（2）Ca2＋是決定海藻酸鈉固定化酵母機械強度的重要因素，根據(jù)表中數(shù)據(jù)分析，隨著Ca2＋濃度的增加，固定化酵母的強度______，最終選擇海藻酸鈉與氯化鈣的濃度分別為______時固定化效果好。海藻酸鈉是一種多孔性載體，在一定濃度范圍內(nèi)選擇較低的海藻酸鈉的濃度進展固定化酵母，產(chǎn)生酒精量較高的原因是______________。（3）由比擬曲線圖可以看出，____________發(fā)酵速度較快，游離酵母在重復使用______次后，其活性完全喪失，由此也可見固定酵母細胞的優(yōu)點是________________。4．（2023·課標全國理綜，39）有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。答復以下問題：（1）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。（2）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即________和________________。（3）為了篩選出高效菌株，可比擬單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力________。（4）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、________和__________________。無菌技術要求實驗操作應在酒精燈________附近進展，以防止周圍環(huán)境中微生物的污染。5．以下圖是利用花藥進展離體培養(yǎng)過程的示意圖，請利用所學知識答復相關問題。（1）該過程利用的現(xiàn)代生物技術稱為__________，其原理是___________________；在培養(yǎng)過程中需要向e、f中添加一些植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，主要是______________________。（2）假設h中是純合二倍體，那么g中需要用__________處理，該育種方法的優(yōu)點是_________________；育種中假設產(chǎn)生了變異，其可遺傳的變異類型有________________。（3）假設利用此項技術培育相關組織制造治療燙傷、割傷的藥物——紫草素，培養(yǎng)將進展到（填字母）______；假設想制作人工種子，應該選用（填字母）______。參考答案命題調(diào)研·明晰考向考場傳真1．解析：（1）幽門螺桿菌中的脲酶能催化尿素分解產(chǎn)生氨，氨溶于水變成氫氧化銨，導致培養(yǎng)基變成堿性，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色，因此在菌落周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶。（2）對尿素溶液進展滅菌應用G6玻璃漏斗過濾的方法滅菌；如果用高壓蒸汽滅菌會造成尿素的分解；紫外燈照射不適用于對溶液進展滅菌；用70%酒精浸泡不能到達滅菌的目的，會有一局部芽孢存活。（3）在培養(yǎng)基上接種微生物，用稀釋涂布平板法能將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，從而在培養(yǎng)基外表形成單個菌落。（4）對微生物進展培養(yǎng)應在恒溫培養(yǎng)箱中進展，將培養(yǎng)皿倒置既可防止因冷凝水過多造成的單菌落連片（不能獲得單菌落），也可防止雜菌孢子落到培養(yǎng)基上。（5）幽門螺桿菌中的脲酶能將尿素分解形成NH3和CO2,14C標記的尿素被分解后產(chǎn)生的14CO2答案：（1）脲酶紅（2）D（3）接種涂布單（4）恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落（5）尿素2．解析：（1）纖維素酶和果膠酶可水解細胞壁，提高出汁率。酵母菌無氧發(fā)酵生成酒精，當發(fā)酵完畢后不再產(chǎn)生CO2，發(fā)酵罐液面不再有氣泡冒出。（2）填充好木材刨花需經(jīng)滅菌處理，制備楊梅醋的菌種是醋桿菌。乙罐的pH可通過控制楊梅酒的流速控制。（3）由楊梅酒發(fā)酵生成楊梅醋的過程不產(chǎn)生CO2。（4）在整個發(fā)酵過程中，先生成酒精，再由酒精生成醋，因此酒精的量先增多后減少。答案：（1）果膠防止空氣進入氣泡冒出（2）滅菌醋桿附著流速（3）D（4）酒精3．解析：（1）KMnO4能消毒，殺死蘋果外表的微生物。黑曲霉提取液中含有果膠酶，能水解果膠。石英砂能將果膠吸附在外表，可用蒸餾水將未吸附的酶洗去。（2）實驗中應先提取果膠酶，做成固定化酶，再制蘋果汁。在蘋果汁澄清過程中，應關閉閥1，防止從固定化柱流出的蘋果汁混有黑曲霉提取液。果膠不溶于乙醇，可用于鑒定果膠。假設果膠沒有完全水解，可將流速調(diào)慢，延長反響時間，使反響更充分。（3）固定化酶可重復使用，降低了生產(chǎn)本錢。答案：（1）消毒果膠酶吸附未被固定的酶等（2）AB閥1乙醇渾濁（沉淀）慢（3）重復體系構建·聚焦熱點熱點例析【觸類旁通1】解析：（1）實驗操作的空間、操作者的衣著和手等通常進展消毒，而微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等那么需要進展滅菌，以便殺死物體內(nèi)外所有的微生物。（2）檢測培養(yǎng)基是否被污染，只需放置培養(yǎng)基一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生就行。（3）別離能利用尿素的細菌，只需以尿素為唯一氮源，加酚紅作指示劑，采用涂布別離法別離細菌，只要培養(yǎng)基中的指示劑變紅，標志著存在脲酶水解尿素的作用，證明菌株可以以尿素為氮源。（4）別離以尿素為氮源的細菌培養(yǎng)基應含有瓊脂糖，而別離大腸桿菌時那么不含瓊脂糖而含瓊脂。答案：（1）滅菌消毒滅菌（2）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生（3）尿素酚紅涂布別離（或涂布）紅（4）C【觸類旁通2】解析：（1）培養(yǎng)微生物需要同時考慮溫度、pH、滲透壓等外界條件，對培養(yǎng)涉及的器材和培養(yǎng)基等都需要進展滅菌，而對操作者與實驗接觸的雙手那么用70%的酒精進展消毒處理，紫外線通過使蛋白質(zhì)變性也可以殺滅空氣中的微生物。（2）圖中的乙瓶為發(fā)酵瓶，內(nèi)有醋化醋桿菌在進展發(fā)酵，假設該瓶流出的液體呈酸性，說明流出液中已經(jīng)有醋酸生成。在乙瓶進展的把乙醇發(fā)酵成醋酸的過程需要氧氣，醋桿菌進展的是需氧呼吸。（3）酒精發(fā)酵需要在無氧條件下才能進展，所以不需要通入空氣。答案：（1）酸堿度滅菌消毒紫外線能使蛋白質(zhì)變性（2）乙醋桿菌醋酸A（3）不需要通入空氣【觸類旁通3】解析：（1）固定化酶常用化學結合法和物理吸附法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑?？捎梦锢砦椒▽ⅵ恋矸勖腹潭ㄔ谑⑸吧闲纬晒潭ɑ钢?。（2）配制的固體培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后就可以倒平板，制成固體平面培養(yǎng)基，劃線別離后，把培養(yǎng)皿放在適宜的溫度條件下進展培養(yǎng)。培養(yǎng)基滅菌是否徹底只需讓滅菌好的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間后，觀察有無菌落出現(xiàn)即可。（3）接種環(huán)常用灼燒滅菌，微生物的培養(yǎng)器皿那么用高壓蒸汽滅菌。劃線別離法之所以能夠獲得單菌落的原因就是在不斷地劃線過程中，接種環(huán)上的菌液越來越少，到劃線最后局部細菌間距離加大，經(jīng)培養(yǎng)后能得到單菌落。答案：（1）化學不溶于水吸附（2）制平板培養(yǎng)將滅菌后的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間后觀察是否出現(xiàn)菌落（3）C（4）劃線過程中接種環(huán)上的菌液逐漸減少，到劃線最后局部細菌間距離加大，經(jīng)培養(yǎng)后能得到單菌落【觸類旁通4】解析：組織培養(yǎng)過程需要在無菌條件下，才能有較高的成功率。植物組織不能進展滅菌處理，只能進展消毒，酒精和次氯酸鈉都是常用的消毒劑。參加生長素和細胞分裂素有助于生根和發(fā)芽。從圖中可以看出不加蔗糖時