生藥的質(zhì)量控制

生藥的質(zhì)量控制第1頁/共47頁藥品質(zhì)量標準評價項目藥品質(zhì)量標準是國家對藥品質(zhì)量規(guī)格及檢驗方法所作的技術(shù)規(guī)定，是藥品生產(chǎn)、經(jīng)營、使用、檢驗和管理部門共同遵循的法定依據(jù)。第2頁/共47頁優(yōu)良的藥品質(zhì)量標準應(yīng)該能夠保證控制藥品的安全性和有效性能夠起到促進藥品質(zhì)量提高的作用。對藥品質(zhì)量標準就有必要進行科學地評價。藥品質(zhì)量標準的“質(zhì)量”主要指所選項目的科學性與合理性；各項目指標（限度規(guī)定）的科學性與合理性兩個方面。藥品質(zhì)量標準的“質(zhì)量”不僅需要從藥品質(zhì)量標準本身去評價，還需要從藥品質(zhì)量標準的起草工作中研究水平的高低去評價。藥品質(zhì)量標準的“質(zhì)量”體現(xiàn)了制訂者在藥物分析領(lǐng)域和相關(guān)學科領(lǐng)域中的水平。第3頁/共47頁2.1原料（藥材）的質(zhì)量標準-1中藥材的法定標準有藥典標準、衛(wèi)生部部頒標準和省、自治區(qū)、直轄市的標準。前二者為國家藥品標準，后者為地方藥品標準。2.1.1

所用藥材必須符合質(zhì)量標準當新頒布的標準與舊標準不同或國家標準與地方標準不同時，應(yīng)滿足前者。如赤芍，1995年版藥典以分光光度法測定芍藥總苷含量，并規(guī)定不少于2%，而2000年版藥典以高效液相法測定芍藥苷含量，限度定為不少于1.8%。目前則應(yīng)以2000年版藥典為準。第4頁/共47頁2.1原料（藥材）的質(zhì)量標準-22.1.2

多基原藥材應(yīng)限定品種不同品種的藥材質(zhì)量差異往往較大，如葛根、黃柏、柴胡等。為保證藥品質(zhì)量同一、穩(wěn)定，應(yīng)限定品種。2000年版藥典已在這方面作了一些增訂。如葛根，有野葛、粉葛之分，二者所含葛根素可相差幾倍或幾十倍。為恰當評價其質(zhì)量，現(xiàn)規(guī)定野葛含葛根素不得少于2.4%，粉葛含葛根素不得少于0.3%。更應(yīng)引起注意的是，有些原列在同一名稱項下的多基原藥材，由于各自所含的化學成分不同，新版藥典已將其分別收載。如五味子，1995年版藥典五味子項下收載五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.和華中五味子S.sphenantheraRehd.etWils,而新版藥典則作為2個品種分別收載，即五味子、南五味子。第5頁/共47頁2.1原料（藥材）的質(zhì)量標準-32.1.3

藥材應(yīng)固定產(chǎn)地

藥材質(zhì)量常因產(chǎn)地不同而變化較大，因此，新藥所用的藥材應(yīng)固定產(chǎn)地。一些研制單位僅引用文獻說明產(chǎn)地，而并非實際產(chǎn)地，常會使實驗數(shù)據(jù)發(fā)生變化，影響結(jié)果的判斷。隨著指紋圖譜的逐步實施，固定藥材產(chǎn)地會更顯出其重要性。2.1.4

炮制方法應(yīng)符合規(guī)定須炮制的藥材，其炮制方法應(yīng)符合藥典規(guī)定或各地規(guī)定的炮制規(guī)范。如有特殊要求，亦可自擬炮制方法及炮制品的規(guī)格標準。但此方法應(yīng)合理，并能滿足大生產(chǎn)的需要。某些申報資料中出現(xiàn)五味子去皮、全蝎去鉤和足等炮制方法，顯然大生產(chǎn)不可行，應(yīng)改進。第6頁/共47頁2.1.3

藥材應(yīng)固定產(chǎn)地

藥材質(zhì)量常因產(chǎn)地不同而變化較大，因此，新藥所用的藥材應(yīng)固定產(chǎn)地。一些研制單位僅引用文獻說明產(chǎn)地，而并非實際產(chǎn)地，常會使實驗數(shù)據(jù)發(fā)生變化，影響結(jié)果的判斷。隨著指紋圖譜的逐步實施，固定藥材產(chǎn)地會更顯出其重要性。2.1.4

炮制方法應(yīng)符合規(guī)定須炮制的藥材，其炮制方法應(yīng)符合藥典規(guī)定或各地規(guī)定的炮制規(guī)范。如有特殊要求，亦可自擬炮制方法及炮制品的規(guī)格標準。但此方法應(yīng)合理，并能滿足大生產(chǎn)的需要。某些申報資料中出現(xiàn)五味子去皮、全蝎去鉤和足等炮制方法，顯然大生產(chǎn)不可行，應(yīng)改進。2.1原料（藥材）的質(zhì)量標準-3第7頁/共47頁生物質(zhì)量的控制與生藥

質(zhì)量標準的制訂

一、生物質(zhì)量控制的依據(jù)目前我國生藥質(zhì)量控制主要依據(jù)三級標準，即一級為國家藥典標準；二級為局（部）頒標準；三級為地方標準。

第8頁/共47頁（一）、國家藥典第一部《中國藥典》1953年版由衛(wèi)生部編印發(fā)行?！吨袊幍洹?963年版于1965年由衛(wèi)生部公布施行?！吨袊幍洹?977年版自1980年1月1日起執(zhí)行?！吨袊幍洹?985年版自1986年4月1日起執(zhí)行。《中藥藥典》1990年版自1991年7月1日起執(zhí)行。《中國藥典》1995年版自1996年4月1日起執(zhí)行。《中國藥典》2000年版自2000年7月1日起執(zhí)行。《中國藥典》2005年版自2005年7月1日起執(zhí)行。第9頁/共47頁2（局）部頒標準及地方標準《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準》中藥材（第一冊）收載了101種，于1991年12月10日頒布執(zhí)行。目前已經(jīng)頒布40余冊（含中成藥）各省、自治區(qū)、直轄市標準湖南省中藥材標準（1993年版）第10頁/共47頁

二、生藥質(zhì)量控制的主要內(nèi)容及方法植物類生藥檢查：根據(jù)生藥的具體情況確定對質(zhì)量有影響的檢查項目，其質(zhì)量控制內(nèi)容如下：如雜質(zhì)、水分、總灰分、酸不溶性灰分、膨脹度、水中不溶物、重金屬、砷鹽、吸收度、色度等。如可能混有其他有害物質(zhì)，應(yīng)酌情檢查，如農(nóng)藥殘留量等。動物生藥檢查：動物類生藥含較多水分，易霉壞變質(zhì)，故多規(guī)定水分檢查。其他如總灰分、重金屬、砷鹽雜質(zhì)等檢查可根據(jù)具體情況考慮。礦物類生藥檢查：檢查重金屬、砷鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋅鹽、干燥失重等項目。

第11頁/共47頁限量檢查：是指常規(guī)檢查項目，多數(shù)生藥均可使用，即共性內(nèi)容。定量檢查：是指與生藥臨床療效直接相關(guān)的項目。即個性內(nèi)容，如：有效成分的含量，生物活性的強度等。

二、生藥質(zhì)量控制的主要內(nèi)容及方法第12頁/共47頁（一）

生藥質(zhì)量的限量控制1.

水分含量測定（1）

烘干法（2）

甲苯法（3）

減壓干燥法

2．灰分含量測定：生藥的灰分測定分為總灰分測定及酸不溶性灰分測定。所謂總灰分，是指生藥本身經(jīng)過灰化后遺留的不揮發(fā)性的無機成成以及生藥表面附著的不揮發(fā)性無機成分的總和；酸不溶性是指總灰分中加10%鹽酸處理，得到不溶于10%鹽酸的灰分。測定酸不溶性灰分能較準確地表明生藥中外來雜質(zhì)。3．

浸出物的測定（1）水溶性浸出物的測定（2）醇溶性浸出物的測定（3）醚溶性浸出物的測定第13頁/共47頁4.揮發(fā)油測定5.有害物質(zhì)的控制(1)

農(nóng)藥殘留量測定，如中國藥典2000年版規(guī)定，甘草、黃芪含有機氯農(nóng)藥殘留量六六六（總BHC）不得過百萬分之零點二，滴滴涕（總DDT）不得過百成分之零點二；五氯硝基苯（PCNB）不得過成萬分之零點一。(2)

重金屬：常以鉛鹽計(3)

砷鹽檢查(4)

其他有害物質(zhì)的檢查：黃曲霉菌、活螨(5)

雜質(zhì)6.藥用部分比例：為保證藥品質(zhì)量，有的生藥需規(guī)定藥用部分的比例。例如穿心蓮規(guī)定穿心蓮葉不得低于35%7.酸敗度第14頁/共47頁（二）

生藥質(zhì)量的定量控制1.

以化學成分為對象2.

化學成分的定量分析(1)

含量測定方法選擇(2)

含量測定方法選定1)

提取條件的選定2)

分離、純化3)

測定條件的選擇4)

線性關(guān)系的考察5)

測定方法的穩(wěn)定性試驗6)

精密度試驗7)

重復(fù)性試驗8)

回收率試驗9)

樣品測定

(3)含量限（幅）度的制定3.

生物檢定第15頁/共47頁

生藥質(zhì)量標準的制定名稱、漢語拼音、藥材拉丁名，按中藥命名原則要求制定來源:來源包括原植（動、礦）物的科名、中文名、拉丁學名、藥用部分、采收季節(jié)和產(chǎn)地加工等，礦物藥包括礦物的類、族、礦石名或巖石名、主要成分及產(chǎn)地加工。性狀:鑒別檢查浸出物測定含量測定炮制性味與歸經(jīng)、功能與主治、用法與用量、注意與貯藏等項，根據(jù)該藥材研究結(jié)果制訂。有關(guān)質(zhì)量標準的書寫格式，參照現(xiàn)行版《中國藥典》

第16頁/共47頁影響生藥質(zhì)量的因素生藥品種對品質(zhì)的影響

植物生長發(fā)育對生藥品質(zhì)的影響

植物的遺傳與變異因素對生藥品質(zhì)的影響

環(huán)境因素對生藥品質(zhì)的影響

其他因素第17頁/共47頁一、生藥品種對品質(zhì)的影響

枳實和枳殼：它們的植物基源涉及4種植物，即枸橘Poncirustrfoliate(L.)Raf、宜昌橙Citrusichangensis、酸橙C.auratlumL.和香橙C.junosSieb.exTanaks。來源不同的枳殼和枳實質(zhì)量因種而異。枳實中有效成分辛弗林和N-甲酪胺的含量，枸桔最低（均分0.017%），酸橙最高（分別為0.068%和0.025%），總黃酮含量后者比前者幾乎要高1倍。柴胡：傳統(tǒng)品種有南北之分，柴胡BupleurumchinenseDC.為北柴胡，狹葉柴胡B.scozoneri-foliumWilld.為南柴胡，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)柴胡屬植物種類甚多，根多數(shù)入藥，云南產(chǎn)的多枝柴胡B.polyc-lonum、韭葉柴胡蘿卜B.kunmingense、瀘西柴胡B.luxiense的皂苷含量均比正品北柴胡高1倍以上。金銀花：以往只收載忍冬LonicerajaponicaThunb，為正品，例如在中南地區(qū)灰氈毛忍冬L.macranthoidesHand.-Mazz、紅腺忍冬L.hypoglaucaMiq.的花蕾含量最高，分別為12%和10%左右，而產(chǎn)于山東的忍冬花蕾只有5.6%。紅腺忍冬、山銀花L.confusaDC.和毛花柱忍冬L.dasystylaRehd.的花蕾與傳統(tǒng)正品忍冬同等入藥。鉤藤：鉤藤(Uncariarhynhcophylla(Miq.)Jacks);大葉鉤藤(UncariamacrophyllaWall.);毛鉤藤(UncariahirsutaHavil.);華鉤藤(Uncariasinensis(Oliv.)Havil);無柄果鉤藤(UncariasessilifructsRoxb)。第18頁/共47頁二、植物生長發(fā)育對生藥品質(zhì)的影響

從黃花蒿ArtemisiaannuaL.分離出的抗瘧有效成分青蒿素，其含量隨株和葉的生長發(fā)育程度而改變。同一時間采集幾株青蒿，按上、中、下分成三段，取其葉分別測定青蒿素的含量，結(jié)果上部為0.60%，中部為0.55%，下部為0.26%，植物頂尖部為（1/4）可以達0.96%。

玄參：根、側(cè)根、須根、地上部分含量不一致鉤藤：多年生、當年生、老葉、嫩葉、側(cè)枝含量差別大。第19頁/共47頁三、植物的遺傳與變異因素對生藥品質(zhì)的影響

植物會產(chǎn)生種內(nèi)次生代謝產(chǎn)物的多型性，又稱化學變種（chemovarietas）或化學型（chemo-types）。毛莨科的小唐松草Thalic-trumminus的生理變種B，動物實驗表明，其降血壓效果顯著，而生理變種A就無此效果。這種差異是由化學成分不同所致，在生理變種B中含唐松草拉賓（thalirabine）和唐松草西賓（thalira-cebine）兩種具降血壓活性的生物堿。蛇床Cnidiummonnieri(L).Guss.種內(nèi)香豆素成分的變化與其他地理分布具有相關(guān)性，或?qū)⑸叽卜譃?個化學型：類型1：以蛇床子素和線型呋喃香豆素為主要成分；分布于福建、浙江、江蘇等亞熱帶常綠闊葉林區(qū)域。類型2：以角型呋喃香豆素為主要成分；分布于遼寧、黑龍江、內(nèi)蒙古等溫帶針闊混交林區(qū)域。類型3：蛇床子素、線型和角型呋喃香豆素同時存在，屬于混合的過渡類群；分布于河南、河北、山西等暖溫帶落葉闊葉林區(qū)域的過渡地帶。

第20頁/共47頁四、環(huán)境因素對生藥品質(zhì)的影響-1

不同的植物種類要求的生態(tài)環(huán)境不同，有的以光或溫度或土壤為主導(dǎo)因子光照對藥用植物活性成分積累的影響：光是植物光合作用的主要因子，也是影響各種化學成分在植物體內(nèi)積累的首要因素。顛茄露天栽培阿托品含量為0.703%，而蔭蔽條件下栽培含量為0.380%。紅車軸草在向陽與背陽含量有差異環(huán)境溫度對藥用植物活性成分積累的影響：溫度的改變能影響植物體內(nèi)酶的活性和生化反應(yīng)速度，從而影響植物的生長發(fā)育和有效成分的形成。顛茄、秋水仙、歐烏頭Aconitumnapellus、紫花洋地黃和歐薄荷Menthaplperlta等植物的有效成分含量都與年平均溫度成正的相關(guān)性。

第21頁/共47頁降水量對藥用植物活性成分積累的影響：降水量與環(huán)境的濕度和土壤含水量密切相關(guān)。在大陸溫暖干旱自然條件下，有利于植物生物堿的積累。土壤條件對藥用植物活性成分積累的影響：甘草是鈣質(zhì)土壤的指示植物，它的分布基本上限于北緯40度的平行線兩側(cè)。工業(yè)區(qū)起我國的東北、內(nèi)蒙，西至地中海沿岸。其他條件的影響：海撥高度和地球緯度主要是通過光照條件和氣溫對藥用植物產(chǎn)生影響。如浙江的浙八味：麥冬、玄參、郁金、元胡、白術(shù)、白芍、抗白菊、浙貝母。河南的四大懷藥：山藥、菊花、牛膝、地黃。海南的四大南藥：砂仁、益智、檳榔、巴戟天。以及甘肅的當歸、青海的大黃、寧夏的枸杞、云南的三七、四川的黃連、廣東的春砂仁和東北的人參等名貴藥材。

四、環(huán)境因素對生藥品質(zhì)的影響-2

第22頁/共47頁生藥指紋圖譜及其在生藥

質(zhì)量控制中的應(yīng)用第23頁/共47頁藥物質(zhì)量控制模式模仿化學合成藥物質(zhì)量控制模式：即以已知的某一單一活性成分或有效成分為質(zhì)量控制指標，給予定性或定量分析，從而判斷藥是否“合格”。缺陷：屬線性思維取向的質(zhì)量控制模式，適合于構(gòu)效關(guān)系清晰、作用靶點明確的以單一活性成分作成的藥物或復(fù)方。當前中藥質(zhì)量控制的新取向：向綜合控制模式轉(zhuǎn)變。第24頁/共47頁

藥物質(zhì)量控制模式WHO西太平洋地區(qū)“傳統(tǒng)醫(yī)學地區(qū)戰(zhàn)略草案”達成共識：天然藥物在許多方面有別與化學合成藥物。天然藥物含多種成分，其質(zhì)量控制方法有別與單一成分的化學合成藥物。第25頁/共47頁

藥物質(zhì)量控制模式傳統(tǒng)中醫(yī)藥學術(shù)思想和思維方式：餛飩的整體性和樸素的整體性思維認識世界信息時代思維方式的改變：信息反饋：強調(diào)互為因果的雙向聯(lián)系系統(tǒng)思維：突出了思維的統(tǒng)一性不確定思維：反映了思維的科學性，因為事物總是存在隨機性和模糊性，并非非此即彼。全方位思維：包括順向和逆向，橫向和縱向，邏輯與非邏輯，收斂與發(fā)散，求異思維等。第26頁/共47頁

藥物質(zhì)量控制模式線性質(zhì)量控制模式的不足天然藥物的特點是非線性（Non-linearity）和不確定性(Uncertainty)，現(xiàn)行質(zhì)量標準難以執(zhí)行。如綠原酸定性、定量含量第27頁/共47頁中藥指紋圖譜的概念、特點及其意義

第28頁/共47頁概念:指紋圖譜（fingerprint）系指某種中藥材或中成藥經(jīng)適當處理后采用一定的分析手段得到的能夠標示該中藥特征的色譜、光譜或其他圖譜。建立中藥指紋圖譜的目的:全面反映所含化學成分的種類與數(shù)量，進而反映中藥的質(zhì)量。國際認可度:美國FDA、英國草藥典、印度草藥典、德國藥用植物學會、加拿大藥用植物學會等均接受指紋圖譜的質(zhì)量控制方法。第29頁/共47頁

指紋圖譜必須具備指紋性：①專屬性:應(yīng)是該中藥獨具的、反映其內(nèi)在化學成分信息的圖譜。②穩(wěn)定性:品質(zhì)相近的樣品圖譜中的共有峰或特征峰應(yīng)相對穩(wěn)定。③重現(xiàn)性:即在規(guī)定條件下以規(guī)定的方法由不同的人員制備的圖譜應(yīng)再現(xiàn)指紋圖譜的指紋特征（如共有峰數(shù)目、大小、位置、形態(tài)等），其誤差應(yīng)在允許的范圍內(nèi)，這樣的指紋圖譜才具有通用性和實用性。第30頁/共47頁

中藥指紋圖譜的特點是突破了傳統(tǒng)的線性思維，采用多學科、多領(lǐng)域的先進分析技術(shù)、著眼于宏觀規(guī)律性研究，建立客觀、整體和多指標的綜合評價體系，在闡明中藥的活性成分的同時，闡明其中的其他成分，能夠展示各類成分的全貌，是當前國際公認的、最有效的質(zhì)量控制技術(shù)，能夠?qū)χ兴幉摹⒅谐伤帲òò氤善芳俺善罚┵|(zhì)量的真?zhèn)蝺?yōu)劣與穩(wěn)定性作出全面系統(tǒng)的評價。第31頁/共47頁指紋圖譜的內(nèi)容1.

名稱、漢語拼音2.

來源3.

供試品的制備4.

參照物的制備5.

檢測方法穩(wěn)定性試驗精密度試驗重現(xiàn)性試驗第32頁/共47頁1.

指紋圖譜及技術(shù)參照(1)

指紋圖譜

(2)

共有指紋峰的標定

(3)

共有指紋面積的比值應(yīng)根據(jù)10批次以上供試品圖譜中各式各有脂紋峰面積的計算，計算平均比值，列出各批次供試品的檢測數(shù)據(jù)。(4)

非共有峰面積第33頁/共47頁指紋圖譜的研究方法薄層色譜指紋圖譜（TLC-fingerprint）用于定性、