培養(yǎng)基制備技術(shù)課件

培養(yǎng)基制備技術(shù)教學對象：高等醫(yī)學院校衛(wèi)生檢驗專業(yè)學生實驗課時：4學時課程類型：專業(yè)實驗課課程要求：必修每組人數(shù)：2人實驗目的和要求掌握常用培養(yǎng)基制備的基本過程。熟悉常用培養(yǎng)基的種類及用途。熟悉高壓蒸汽滅菌的使用。一、培養(yǎng)基的種類（按用途分類）基礎培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基培養(yǎng)基的種類（按物理性狀分類）液體培養(yǎng)基：不含凝固劑，用于增菌和接種純種細菌。半固體培養(yǎng)基：含0.3％～0.5％瓊脂。用于觀察細菌動力、保存菌種。固體培養(yǎng)基：平板、斜面。含2％～2.5％瓊脂。平板：用于細菌的分離培養(yǎng)。斜面：用于純培養(yǎng)、保存菌種。二、培養(yǎng)基制備的一般程序調(diào)配溶化矯正pH過濾澄清分裝滅菌檢定保存二、培養(yǎng)基制備的一般程序調(diào)配：按照培養(yǎng)基配方正確稱取各種原料放于搪瓷杯中。另用量筒量取所需蒸餾水量。溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒攪勻，加熱溶解。加瓊脂溶化：加熱過程中要不斷攪拌，可適當補水。調(diào)pH值：用1NNaOH或1NHCl調(diào)至培養(yǎng)基規(guī)定的pH值，用pH試紙對照。分裝量的要求液體培養(yǎng)基分裝量約為試管高度的1/4～1/3，加塞后滅菌直立；半固體培養(yǎng)基分裝量為試管高度的1/4～1/3，加塞后滅菌趁熱直立凝固；斜面培養(yǎng)基分裝量約為試管高度的1/4～1/3，加塞后滅菌，趁熱擺成斜面；滅菌后斜面擺放斜面長度約為試管長度的2/3，且下端有1cm柱高；分裝包扎培養(yǎng)基滅菌耐熱培養(yǎng)基（如普通營養(yǎng)瓊脂平板）：常用高壓蒸汽滅菌，條件為103.43kPa，15-20min；含糖培養(yǎng)基以68.95kPa，10-15min；不耐熱培養(yǎng)基：如糖類、明膠和牛乳等。常用間歇蒸汽滅菌；富含蛋白質(zhì)的培養(yǎng)基：用血清凝固器滅菌；對含高營養(yǎng)不耐熱培養(yǎng)基：如血清,細胞培養(yǎng)液等。用濾過除菌。

三、高壓蒸汽滅菌器的使用當壓力達1.05kg/cm2時，此時滅菌器內(nèi)的溫度為121℃，維持30min。對熱不穩(wěn)定的培養(yǎng)基如含有葡萄糖、氨基酸等物時，應適當降低壓力，延長時間。滅菌時間一到，切斷電源，待壓力降至零時，才能打開排氣閥，然后打開滅菌器蓋，取出物品。高壓蒸汽滅菌器使用注意事項無菌包不宜過大，不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹中央。消毒前，打開貯槽或盒的通氣孔，有利于蒸汽流通。而且排氣時使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。消毒滅菌完畢，關(guān)閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態(tài)。高壓蒸汽滅菌器使用注意事項布類物品應放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠