第二章核酸化學(xué)

第二章核酸化學(xué)第1頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一核酸的結(jié)構(gòu)與功能第一節(jié)核酸通論第二節(jié)核酸基本構(gòu)件單位—核苷酸第三節(jié)DNA的分子結(jié)構(gòu)第四節(jié)RNA的分子結(jié)構(gòu)第五節(jié)核酸的某些理化性質(zhì)及核酸研究常用技術(shù)第六節(jié)人類基因組計(jì)劃簡介第2頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一第一節(jié)核酸通論一、核酸的研究歷史和重要性二、核酸的種類和分布三、DNA儲存遺傳信息的證實(shí)第3頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一核酸的研究歷史和重要性1869

Miescher從膿細(xì)胞的細(xì)胞核中分離出了一種含磷酸的有機(jī)物，當(dāng)時稱為核素（nuclein）,后稱為核酸（nucleicacid）；此后幾十年內(nèi)，弄清了核酸的組成及在細(xì)胞中的分布。1944Avery等成功進(jìn)行肺炎球菌轉(zhuǎn)化試驗(yàn)；1952年Hershey等的實(shí)驗(yàn)表明32P-DNA可進(jìn)入噬菌體內(nèi)，證明DNA是遺傳物質(zhì)。1953

Watson和Crick建立了DNA結(jié)構(gòu)的雙螺旋模型，說明了基因的結(jié)構(gòu)、信息和功能三者間的關(guān)系，推動了分子生物學(xué)的迅猛發(fā)展。1958

Crick提出遺傳信息傳遞的中心法則，

60年代RNA研究取得大發(fā)展（操縱子學(xué)說，遺傳密碼，逆轉(zhuǎn)錄酶）。第4頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一核酸的研究歷史和重要性（續(xù)）歷史70年代建立DNA重組技術(shù)，改變了分子生物學(xué)的面貌，并導(dǎo)致生物技術(shù)的興起。80年代RNA研究出現(xiàn)第二次高潮：ribozyme、反義RNA、“RNA世界”假說等等。90年代以后實(shí)施人類基因組計(jì)劃（HGP）,開辟了生命科學(xué)新紀(jì)元。生命科學(xué)進(jìn)入后基因時代：功能基因組學(xué)（functionalgenomics）

蛋白質(zhì)組學(xué)（proteomics）

結(jié)構(gòu)基因組學(xué)（structuralgenomics）RNA組學(xué)（Rnomics）或核糖核酸組學(xué)（ribonomics）第5頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一

核酸分類和分布脫氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid,DNA）:遺傳信息的貯存和攜帶者，生物的主要遺傳物質(zhì)。在真核細(xì)胞中，DNA主要集中在細(xì)胞核內(nèi)，線粒體和葉綠體中均有各自的DNA。原核細(xì)胞沒有明顯的細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，DNA存在于稱為類核的結(jié)構(gòu)區(qū)。每個原核細(xì)胞只有一個染色體，每個染色體含一個雙鏈環(huán)狀DNA。核糖核酸（ribonucleicacid,RNA）：主要參與遺傳信息的傳遞和表達(dá)過程，細(xì)胞內(nèi)的RNA主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，少量存在于細(xì)胞核中，病毒中RNA本身就是遺傳信息的儲存者。另外在植物中還發(fā)現(xiàn)了一類比病毒還小得多的侵染性致病因子稱為類病毒，它是不含蛋白質(zhì)的游離的RNA分子，還發(fā)現(xiàn)有些RNA具生物催化作用（ribozyme）。第6頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一肺炎球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)圖解IIIS型細(xì)胞（有毒）IIR型細(xì)胞（無毒）破碎細(xì)胞DNAase降解后的DNAIIR型細(xì)胞接受IIIS型DNA只有IIR型大多數(shù)仍為IIR型少數(shù)IIR型細(xì)胞被轉(zhuǎn)化產(chǎn)生IIIS型莢膜S（光滑）SRRR（粗糙）+DNA第7頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一第二節(jié)核酸的基本結(jié)構(gòu)單位—核苷酸一、核苷酸的化學(xué)組成與命名1、堿基、核苷、核苷酸的概念和關(guān)系

2、常見堿基的結(jié)構(gòu)與命名法

3、常見（脫氧）核苷酸的基本結(jié)構(gòu)與命名4、稀有核苷酸5、細(xì)胞內(nèi)游離核苷酸及其衍生物二、核苷酸的生物學(xué)功能第8頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一5′-磷酸核苷酸的基本結(jié)構(gòu)OO（N=A、G、C、U、T）HH(O)H1′2′NOHCH2HH5′4′3′PO-OOO-核糖磷酸堿基第9頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一堿基、核苷、核苷酸的概念和關(guān)系

NitrogenousbasePentosesugarHOCH2HOHDoxyribose(inDNA)HOCH2HOOHRibose(inRNA)PhosphatePyrimidinesCytosineThymineUracilCUTPurihesAdenineGuanineAG核酸磷酸核苷戊糖堿基第10頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一基本堿基結(jié)構(gòu)和命名嘌呤嘧啶Adenine

(A)Guanine

(G)Cytosine(C)Uracil(U)Thymine(T)第11頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一核苷酸的結(jié)構(gòu)和命名腺嘌呤核苷酸（AMP）

Adenosine

monophosphate脫氧腺嘌呤核苷酸（dAMP）Deoxyadenosine

monophosphate鳥嘌呤核苷酸（GMP）胞嘧啶核苷酸（CMP）尿嘧啶核苷酸（UMP）脫氧鳥嘌呤核苷酸（dGMP）脫氧胞嘧啶核苷酸（dCMP）脫氧胸腺嘧啶核苷酸（dTMP）HOH第12頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一PPPPPPPP常見（脫氧）核苷酸的結(jié)構(gòu)和命名鳥嘌呤核苷酸（GMP）尿嘧啶核苷酸（UMP）胞嘧啶核苷酸（CMP）腺嘌呤核苷酸（AMP）脫氧腺嘌呤核苷酸（dAMP）脫氧鳥嘌呤核苷酸（dGMP）脫氧胞嘧啶核苷酸（dCMP）脫氧胸腺嘧啶核苷酸（dTMP）第13頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一幾種稀有核苷假尿苷（）二氫尿嘧啶（DHU）AmCH3CH3H3Cm26GHH5HH第14頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一幾種稀有核苷酸假尿苷（）二氫尿嘧啶（DHU）AmCH3CH3H3Cm26GHH5HH第15頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一細(xì)胞內(nèi)游離核苷酸及其衍生物多磷酸核苷酸環(huán)核苷酸輔酶類核苷酸。第16頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一

5′-NMP5′-NDP5′-NTPN=A、G、C、U

5′-dNMP5′-dNDP5′-dNTPN=A、G、C、T腺苷酸及其多磷酸化合物

AMPAdenosine

monophosphate

ADPAdenosine

diphosphate

ATPAdenosine

triphosphate第17頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一OPOOHOA(G)OOOHCH2HHHHcAMP(cGMP)的結(jié)構(gòu)

Cyclicadenylie(Guanine)acid第18頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一二、核苷酸的生物學(xué)功能作為核酸的單體細(xì)胞中的攜能物質(zhì)（如ATP、GTP、CTP、GTP）酶的輔助因子的結(jié)構(gòu)成分（如NAD）細(xì)胞通訊的媒介（如cAMP、cGMP）第19頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一

第二節(jié)DNA的分子結(jié)構(gòu)

一、核酸分子中的共價(jià)鍵二、DNA一級結(jié)構(gòu)三、DNA堿基組成的Chargaff規(guī)則四、DNA的二級結(jié)構(gòu)五、DNA的三級結(jié)構(gòu)六、DNA與蛋白質(zhì)復(fù)合物的結(jié)構(gòu)第20頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一5533核酸分子中核苷酸之間的共價(jià)鍵3-5磷酸二酯鍵第21頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一二、DNA的一級結(jié)構(gòu)

DNA分子中各脫氧核苷酸之間的連接方式（3′-5′磷酸二酯鍵）和排列順序叫做DNA的一級結(jié)構(gòu)，簡稱為堿基序列。一級結(jié)構(gòu)的走向的規(guī)定為5′→3′。不同的DNA分子具有不同的核苷酸排列順序，因此攜帶有不同的遺傳信息。

一級結(jié)構(gòu)的表示法結(jié)構(gòu)式，線條式，字母式5′3′第22頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA一級結(jié)構(gòu)的表示法5′3′結(jié)構(gòu)式5′3′

p

p

p

pOH3′ACTG1′線條式5′

ACTGCATAGCTCGA3′字母式第23頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一三、DNA堿基組成的Chargaff規(guī)則

Chargaff首先注意到DNA堿基組成的某些規(guī)律性，在１９５０年總結(jié)出DNA堿基組成的規(guī)律：

腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩爾數(shù)相等，即A=T。

鳥嘌呤和胞腺嘧啶的摩爾數(shù)也相等，即G=C。

含氨基的堿基總數(shù)等于含酮基堿基總數(shù)，即

A+C=G+T。嘌呤的總數(shù)等于嘧啶的總數(shù)，即A+G=C+T。第24頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA、RNA的一級結(jié)構(gòu)

DNA一級結(jié)構(gòu)5′3′OHOHOH5′3′RNA一級結(jié)構(gòu)第25頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一四、DNA的二級結(jié)構(gòu)

（1）DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)(Watson-Crick模型)（2）

DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)特征及意義（3）DNA雙螺旋的多態(tài)性（4）DNA的三股螺旋（tripkex）第26頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)的形成5′3′5′3′5′3′5′3′磷酸核糖堿基T-A堿基對C-G堿基對第27頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA的雙螺旋模型特點(diǎn)

a.兩條反向平行的多聚核苷酸鏈沿一個假設(shè)的中心軸右旋相互盤繞而形成。

b.磷酸和脫氧核糖單位作為不變的骨架組成位于外側(cè)，作為可變成分的堿基位于內(nèi)側(cè)，鏈間堿基按A—T，G—C配對（堿基配對原則，Chargaff定律）

c.螺旋直徑2nm，相鄰堿基平面垂直距離0.34nm,螺旋結(jié)構(gòu)每隔10個堿基對（basepair,bp）重復(fù)一次，間隔為3.4nm第28頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一

氫鍵堿基堆集力磷酸基上負(fù)電荷被胞內(nèi)組蛋白或正離子中和堿基處于疏水環(huán)境中DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定因素

第29頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)的意義

該模型揭示了DNA作為遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性特征，最有價(jià)值的是確認(rèn)了堿基配對原則，這是是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄的分子基礎(chǔ)，亦是遺傳信息傳遞和表達(dá)的分子基礎(chǔ)。該模型的提出是本世紀(jì)生命科學(xué)的重大突破之一，它奠定了生物化學(xué)和分子生物學(xué)乃至整個生命科學(xué)飛速發(fā)展的基石。第30頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA雙螺旋的不同構(gòu)象

第31頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一三種DNA雙螺旋構(gòu)象比較A-DNAZ-DNAB-DNAABZ外型粗短適中細(xì)長螺旋方向右手右手左手螺旋直徑2.55nm2.37nm1.84nm堿基直升0.23nm0.34nm0.38nm堿基夾角32.7034.6060.00每圈堿基數(shù)1110.412軸心與堿基對關(guān)系2.46nm3.32nm4.56nm堿基傾角1901090糖苷鍵構(gòu)象反式反式C、T反式，G順式大溝很窄很深很寬較深平坦小溝很寬、淺窄、深較窄很深第32頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA分子內(nèi)的三鏈結(jié)構(gòu)多聚嘌呤多聚嘧啶DNA分子間的三鏈結(jié)構(gòu)DNA三鏈間的堿基配對T-A-TC-G-C第33頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一五、DNA的三級結(jié)構(gòu)

1．超螺旋DNA（supercoiledDNA）2．拓樸異構(gòu)酶（topoisomerase）

(1)超螺旋DNA的形成(2)超螺旋狀態(tài)的定量描述(３)DNA超螺旋結(jié)構(gòu)形成的重要意義

(1)兩類拓樸異構(gòu)酶(2)拓樸異構(gòu)酶作用機(jī)理

DNA的三級結(jié)構(gòu)指雙螺旋DNA分子通過扭曲和折疊所形成的特定構(gòu)象，包括不同二級結(jié)構(gòu)單元間的相互作用、單鏈和二級結(jié)構(gòu)單元間的相互作用以及DNA的拓?fù)涮卣鳌５?4頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一螺旋和超螺旋電話線螺旋超螺旋第35頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一L=25,T=25,W=0松弛環(huán)形1152010523L=23,T=23,W=0解鏈環(huán)形15101520231510152025L=23,T=25,W=–2負(fù)超螺旋121482316131510152023右手旋轉(zhuǎn)擰松兩匝后的線形DNADNA超螺旋的形成超螺旋的拓?fù)鋵W(xué)公式：L=T+W或=+第36頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一超螺旋狀態(tài)的定量描述

公式1：L=T+WL——連環(huán)數(shù)（linkingnumber），DNA雙螺旋中一條鏈以右手螺旋與另一條鏈纏繞的次數(shù)。

T——DNA分子中的螺旋數(shù)（twistingnumber）W——超螺旋數(shù)或纏繞數(shù)（writhingnumber）公式2：λ=（L-L0）/L0λ——超螺旋度（degreeofsupercoiling）L0——松馳態(tài)DNA連環(huán)數(shù)L=25,T=25,W=0松弛環(huán)形1152010523L=23,T=25,W=–2負(fù)超螺旋12148231613第37頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA超螺旋結(jié)構(gòu)形成的意義

使DNA形成高度致密狀態(tài)從而得以裝入核中；推動DNA結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)化以滿足功能上的需要。如負(fù)超螺旋分子所受張力會引起互補(bǔ)鏈分開導(dǎo)致局部變性，利于復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。第38頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一原核生物兩類拓?fù)洚悩?gòu)酶

除連環(huán)數(shù)（L）不同外其他性質(zhì)均相同的DNA分子稱為拓?fù)洚悩?gòu)體（topoisomerase）。DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶通過改變DNA的L值而影響其拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)。

拓?fù)洚悩?gòu)酶I通過使DNA的一條鏈發(fā)生斷裂和再連接，能使超螺旋DNA轉(zhuǎn)變成松弛型環(huán)狀DNA，每催化一次可消除一個負(fù)超螺旋，即使L增加１，反應(yīng)無需供給能量。拓?fù)洚悩?gòu)酶II則剛好相反，可使松弛型環(huán)狀DNA轉(zhuǎn)變成負(fù)超螺旋DNA，每催化一次，L減少２，可引入負(fù)超螺旋。拓?fù)洚悩?gòu)酶II亦稱促旋酶，它可以使DNA的兩條鏈同時斷裂和再連接，當(dāng)它引入超螺旋時需要ATP提供能量。細(xì)胞內(nèi)兩類拓?fù)洚悩?gòu)酶的含量受嚴(yán)格的控制，使細(xì)胞內(nèi)DNA保持在一定的超螺旋水平。第39頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一

原核拓?fù)洚悩?gòu)酶I的作用機(jī)制連接數(shù)=n連接數(shù)=n+1穿越斷口和使兩端連接切割abcd第40頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一

DNA雙鏈重新連接DNA雙鏈穿過DNA的釋放重復(fù)起始DNA雙鏈斷裂拓?fù)洚悩?gòu)酶II的作用機(jī)制

第41頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一拓?fù)洚悩?gòu)酶第42頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一

六、DNA與蛋白質(zhì)復(fù)合物的結(jié)構(gòu)

生物體內(nèi)的核酸通常都與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物，以核蛋白（nucleoprotein）的形式存在。DNA分子十分巨大，與蛋白質(zhì)結(jié)合后被組裝到有限的空間中。１、病毒２、細(xì)菌擬核３、真核染色體第43頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一噬菌體T2結(jié)構(gòu)頭部頸圈尾部基板尾絲尖釘?shù)?4頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一動物病毒切面模式圖

被膜（脂蛋白、碳水化合物）衣殼（蛋白質(zhì)）核酸突起（糖蛋白）病毒粒第45頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一細(xì)菌擬核（nucleoid）的突環(huán)結(jié)構(gòu)

RNA-蛋白質(zhì)核心突環(huán)由雙鏈DNA結(jié)合堿性蛋白質(zhì)組成平均一個突環(huán)含有約40kpDNA第46頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一組蛋白與DNA的結(jié)合核小體第47頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA的念珠狀結(jié)構(gòu)第48頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一核小體盤繞及染色質(zhì)示意圖第49頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一真核生物染色體DNA組裝不同層次的結(jié)構(gòu)

DNA（2nm）核小體鏈（11nm，每個核小體200bp）纖絲（30nm，每圈6個核小體）突環(huán)（150nm，每個突環(huán)大約75000bp）玫瑰花結(jié)（300nm，6個突環(huán)）螺旋圈（700nm，每圈30個玫瑰花）染色體（1400nm，

每個染色體含10個玫瑰花200bp）第50頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一第四節(jié)

RNA的分子結(jié)構(gòu)

一、RNA一級結(jié)構(gòu)和類別二、tRNA的分子結(jié)構(gòu)三、rRNA的分子結(jié)構(gòu)四、mRNA的分子結(jié)構(gòu)第51頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一RNA的類別

信使RNA（messengerRNA，mRNA）：在蛋白質(zhì)合成中起模板作用；核糖體RNA（ribosoalRNA，rRNA）：與蛋白質(zhì)結(jié)合構(gòu)成核糖體（ribosome）,核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所；轉(zhuǎn)移RNA（transforRNA，tRNA）：在蛋白質(zhì)合成時起著攜帶活化氨基酸的作用。第52頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一RNA的一級結(jié)構(gòu)

RNA分子中各核苷之間的連接方式（3′-5′磷酸二酯鍵）和排列順序叫做RNA的一級結(jié)構(gòu)OHOHOH5′3′

RNA與DNA的差異

DNA

RNA糖脫氧核糖核糖堿基AGCTAGCU不含稀有堿基含稀有堿基第53頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一tRNA的結(jié)構(gòu)二級結(jié)構(gòu)特征：單鏈三葉草葉形四臂四環(huán)三級結(jié)構(gòu)特征：在二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上進(jìn)一步折疊扭曲形成倒L型第54頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一酵母tRNAAla

的二級結(jié)構(gòu)

DHU環(huán)IGC反密碼子反密碼環(huán)氨基酸臂可變環(huán)TψC環(huán)CCAAla3′5′第55頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一tRNA的三級結(jié)構(gòu)第56頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一

rRNA的分子結(jié)構(gòu)特征：單鏈，螺旋化程度較tRNA低

與蛋白質(zhì)組成核糖體后方能發(fā)揮其功能5sRNA的二級結(jié)構(gòu)第57頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一

mRNA的分子結(jié)構(gòu)原核生物mRNA特征：

先導(dǎo)區(qū)+翻譯區(qū)（多順反子）+末端序列真核生物mRNA特征：

“帽子”（m7G-5′ppp5′-N-3′p）+單順反子+“尾巴”（PolyA）第58頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一原核細(xì)胞mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)5′3′順反子順反子順反子插入順序插入順序先導(dǎo)區(qū)末端順序第59頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一真核細(xì)胞mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)AAAAAAA-OH5′“帽子”PolyA

3′

順反子m7G-5′ppp-N-3′p第60頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一第五節(jié)核酸的某些理化性質(zhì)及

核酸研究常用技術(shù)

一、核酸的兩性解離性質(zhì)

二、核酸的紫外吸收（λmax=260nm）三、核酸的變性、復(fù)性和分子雜交

四、核酸的熔解溫度（Tm）五、核酸的沉降性質(zhì)第61頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一核苷酸的解離曲線pK1=0.9第一磷酸基pK3=6.2第二磷酸基pK2=3.7含氮環(huán)腺嘌呤核苷酸pK1=0.7第一磷酸基pK3=6.1第二磷酸基pK2=3.7含氮環(huán)烯醇式羥基鳥嘌呤核苷酸pK1=0.8第一磷酸基pK3=6.3第二磷酸基pK2=4.3含氮環(huán)胞嘧啶核苷酸pK1=1.0第一磷酸基pK3=6.4第二磷酸基烯醇式羥基尿嘧啶核苷酸pH離子化程度小牛胸線DNA的滴定曲線pH第62頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA的紫外吸收光譜天然DNA變性DNA核苷酸總吸收值1232202402602800.10.20.30.4波長（nm）光吸收123第63頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一DNA的變性過程加熱部分雙螺旋解開無規(guī)則線團(tuán)鏈內(nèi)堿基配對第64頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一核酸的變性、復(fù)性和雜交變性（加熱）探針雜交（緩慢冷卻）復(fù)性（緩慢冷卻）

變性：在物理、化學(xué)因素影響下，DNA堿基對間的氫鍵斷裂，雙螺旋解開，這是一個是躍變過程，伴有A260增加（增色效應(yīng)）,DNA的功能喪失。復(fù)性：在一定條件下，變性DNA單鏈間堿基重新配對恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)，伴有A260減小（減色效應(yīng)）,DNA的功能恢復(fù)。第65頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一Southern印跡法DNA分子限制片段限制性酶切割瓊脂糖電泳轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上與放射性標(biāo)記DNA探針雜交放射自顯影帶有DNA片段的凝膠凝膠濾膜用緩沖液轉(zhuǎn)移DNA吸附有DNA片段的膜第66頁，共72頁，2023年，2月20日，星期一分子雜交的原理示意圖

不同來源的DNA單鏈間或單鏈DNA與RNA之間只要有堿基配對的區(qū)域，在復(fù)性時可形成局部雙螺旋區(qū)，稱核酸分子雜交（hybridization）制備特定的探針（pr