檢測實驗室質(zhì)量控制關(guān)鍵點

檢測實驗室質(zhì)量控制關(guān)鍵點第1頁/共95頁檢測實驗室質(zhì)量控制的重要性和關(guān)鍵點檢測質(zhì)量是實驗室生存的保證；檢測質(zhì)量是占領(lǐng)市場的重要手段；檢測質(zhì)量是為客戶提供服務(wù)的前提;檢測質(zhì)量是衡量實驗室管理能力的標尺。

第2頁/共95頁認識誤區(qū)——有人員、有設(shè)備、有方法、有場地、有資質(zhì)，檢測質(zhì)量就有保證?！獧z測任務(wù)重、缺少專職的質(zhì)量管理人員，質(zhì)量控制就做不好?！蛻舨粚I(yè)、領(lǐng)導不精通，只要不出問題、沒有投訴就行。第3頁/共95頁

當檢測實驗室確認法人地位和資源保障后,應(yīng)明確檢測質(zhì)量控制的關(guān)鍵點人—人員機—設(shè)備料—樣品和消耗材料法—檢測方法環(huán)—設(shè)施和環(huán)境條件以上五個方面的控制效果通過測試的實施來體現(xiàn)第4頁/共95頁

測試結(jié)果

人

機料法環(huán)第5頁/共95頁一、人員質(zhì)量控制方法

在ISO/IEC17025標準《檢測和校準實驗室認可準則》中在“技術(shù)要素”中將“人員”歸結(jié)為決定實驗室檢測的正確性和可靠性的第一個因素，對檢測實驗室的人員從技術(shù)能力、經(jīng)驗、所需專業(yè)知識、教育培訓、工作職責和公正性等提出了嚴格的要求。第6頁/共95頁1、人員的技術(shù)能力確認重點關(guān)注——教育背景、專業(yè)技能、工作經(jīng)歷、現(xiàn)任崗位授權(quán)；確認證據(jù)——技術(shù)檔案、資格確認、上崗考核和授權(quán)、培訓記錄。特殊崗位的授權(quán)——感官評定、特種鍋爐容器、特殊設(shè)備、生物安全操作等。第7頁/共95頁2、人員的培訓計劃和實施重點關(guān)注——培訓計劃的可行性、實施記錄、培訓效果的評價。確認證據(jù)——全面的培訓計劃（包括各個崗位、各類人員、再教育）、培訓記錄（培訓鑒定、小結(jié)、現(xiàn)場考核）等。第8頁/共95頁制訂培訓計劃需要注意——計劃合理性、前瞻性、統(tǒng)一性。——明確需要培訓的崗位、項目、時段、實施機構(gòu)、結(jié)果評價依據(jù)?！腥藛T應(yīng)有文件證明其對工作及實驗室全部設(shè)施中潛在的風險受過培訓；——應(yīng)要求所有人員根據(jù)可能接觸的生物接受免疫以預(yù)防感染，應(yīng)保存免疫記錄。第9頁/共95頁3、人員的監(jiān)督重點關(guān)注——監(jiān)督人員資質(zhì)和授權(quán)、監(jiān)督計劃（選擇重點區(qū)域和人員）、被監(jiān)督人員、監(jiān)督記錄。確認證據(jù)——監(jiān)督計劃、監(jiān)督記錄、監(jiān)督結(jié)果的評價。第10頁/共95頁監(jiān)督是否充分？——不同專業(yè)和領(lǐng)域均有監(jiān)督員；——監(jiān)督人員比例恰當；——監(jiān)督過程和方法確定，有相應(yīng)的文件；——監(jiān)督記錄完整，是管理評審的輸入。第11頁/共95頁監(jiān)督人員的條件——熟悉檢測技術(shù)、經(jīng)驗豐富、有責任心、細致公正。避免不懂專業(yè)的行政領(lǐng)導擔任監(jiān)督員，以免發(fā)生外行走過場。第12頁/共95頁監(jiān)督目的——對各類人員的能力確認手段之一、保證持續(xù)改進。監(jiān)督方式——盲樣考核、操作演示、現(xiàn)場提問、留樣復測、人員比對、參加能力驗證、質(zhì)量控制圖、崗位輪換等。監(jiān)督記錄——真實、全面、發(fā)現(xiàn)問題和優(yōu)點。第13頁/共95頁實驗室對人員進行監(jiān)督時應(yīng)考慮：針對不同類型不同專業(yè)范圍應(yīng)配備符合資質(zhì)條件、有能力的監(jiān)督人員；應(yīng)有足夠比例的監(jiān)督人員；對監(jiān)督的內(nèi)容、方式、頻率有文件化的規(guī)定，每次監(jiān)督后應(yīng)對被監(jiān)督的人員或崗位的工作質(zhì)量做出評價。對監(jiān)督后表現(xiàn)不滿意的人員應(yīng)采取相應(yīng)的有效處理措施；監(jiān)督結(jié)果應(yīng)輸入管理評審。第14頁/共95頁二、儀器設(shè)備的質(zhì)量控制實驗室的儀器設(shè)備應(yīng)側(cè)重于日常管理、維護保養(yǎng)、狀態(tài)確認和安全防護。配備儀器設(shè)備應(yīng)考慮：實驗室應(yīng)配備的基本設(shè)備；根據(jù)實驗室開展項目的需要配備的特殊設(shè)備，如需要進行確證試驗，避免“假陽性”和“假陰性”結(jié)果的出現(xiàn)所需的設(shè)備如質(zhì)譜、三維光譜和紅外光譜等。第15頁/共95頁1、設(shè)備的日常使用和管理重點關(guān)注——設(shè)備唯一性標識（管理標識和校準標識）、設(shè)備檔案、操作人員能力、使用維護、設(shè)備溯源性。第16頁/共95頁確認證據(jù)——檔案信息完整性、操作人員培訓和授權(quán)、維護保養(yǎng)作業(yè)指導書和實施記錄、維修記錄和狀態(tài)確認、期間核查計劃和記錄、校準證書等。易忽視——相同型號設(shè)備的識別、測試樣品追溯、校準證書有效性的確認、故障設(shè)備處理和結(jié)果追溯。第17頁/共95頁2、設(shè)備的校準重點關(guān)注——校準機構(gòu)的選擇（資質(zhì)和能力、校準報告的信息）、校準計劃、校準證書確認、自校準規(guī)程和記錄、校準狀態(tài)標識。確認證據(jù)——校準計劃、外部合格供應(yīng)方評價和選擇、自校準規(guī)程、校準標識等。第18頁/共95頁測量儀器應(yīng)根據(jù)儀器的性能情況,加貼儀器狀態(tài)標志。合格標志——經(jīng)計量檢定或校準、驗證合格，確認其符合檢測技術(shù)規(guī)范規(guī)定的使用要求。準用標志——設(shè)備存在部分缺陷或部分功能喪失，但可在限定范圍內(nèi)使用；設(shè)備某一量程準確度不夠，但檢測所用量程合格，可降級使用。第19頁/共95頁停用標志——設(shè)備目前狀態(tài)不能使用（故障、經(jīng)檢定校準不合格、性能無法確定、超過周期未檢定校準、不符合技術(shù)規(guī)范規(guī)定的使用要求等），但經(jīng)檢定校準或修復后可以使用。第20頁/共95頁3、設(shè)備的期間核查設(shè)備的檢定/校準與期間核查的差異：

執(zhí)行的主體不同——設(shè)備檢定/校準是由國家法定機構(gòu)授權(quán)的校準機構(gòu)或授權(quán)部門來執(zhí)行，可以是計量院或是某個機構(gòu)內(nèi)的計量實驗室。而設(shè)備期間核查是由實驗室人員來完成，不需要經(jīng)過國家法定機構(gòu)的授權(quán)，只需實驗室授權(quán)。第21頁/共95頁

執(zhí)行的標準依據(jù)不同——設(shè)備檢定/校準依據(jù)的是國家已經(jīng)頒布的檢定/校準規(guī)程或經(jīng)過法定計量管理機構(gòu)備案批準的校準程序。設(shè)備期間核查依據(jù)的是實驗室自己制訂的設(shè)備期間核查作業(yè)指導書，不需要報法定計量部門備案。第22頁/共95頁

執(zhí)行的周期頻率不同——設(shè)備檢定的間隔周期執(zhí)行的是國家法定頒布的設(shè)備檢定周期，或是當設(shè)備經(jīng)過故障修復后需要送檢定/校準機構(gòu)重新檢定，帶有強制性質(zhì)。設(shè)備期間核查的周期頻率可以由實驗室根據(jù)設(shè)備的使用頻率、數(shù)據(jù)爭議程度、設(shè)備的新舊和穩(wěn)定水平自行確定，不帶有強制性。第23頁/共95頁

執(zhí)行的內(nèi)容覆蓋面不同——設(shè)備檢定/校準是對需檢定/校準的設(shè)備進行系統(tǒng)性檢查，對設(shè)備的穩(wěn)定性、精密度、靈敏度等整體功能或技術(shù)指標進行檢定或校準，在可能的情況下，還需要給出不確定度評定，出具檢定報告或校準證書。設(shè)備期間核查可以在某次核查過程中只對設(shè)備的個別或部分的功能或技術(shù)指標進行核查，并不一定需要給出不確定度的評定，也不需要出具校準報告。第24頁/共95頁是否所有設(shè)備都需要經(jīng)過期間核查？應(yīng)關(guān)注——設(shè)備的新舊和穩(wěn)定程度、使用頻率、操作人員熟練程度、所產(chǎn)生檢測結(jié)果的爭議程度、設(shè)備所處環(huán)境條件的優(yōu)劣等。---核查的方式可以標準物質(zhì)比對，設(shè)備穩(wěn)定性試驗、設(shè)備特征值偏離試驗和檢測靈敏度測試等。第25頁/共95頁儀器設(shè)備的期間核查應(yīng)選擇國家計量檢定規(guī)程中的主要檢定項目，一般選擇以下合適項目：零點檢查；靈敏度；準確度；分辨率；測量重復性；標準曲線線性；儀器內(nèi)置自校檢查；標準物質(zhì)或參考物質(zhì)測試比對；儀器說明書列明的技術(shù)指標。第26頁/共95頁微生物實驗室應(yīng)注意以下設(shè)備的交叉污染：a）一次性設(shè)備和重復使用的玻璃器皿應(yīng)潔凈，必要時應(yīng)消毒滅菌；b)建議實驗室使用專門處理污染物的高壓滅菌鍋。以下設(shè)備需要清潔、維護，定期進行損壞檢驗，必要時進行滅菌：a)一般設(shè)備：濾器、玻璃和塑料容器（瓶子、試管）、玻璃或塑料的帶蓋培養(yǎng)皿、取樣器具、鎳/鉻/鉑及一次性接種針或接種環(huán)等；b)測量器具：溫度計、計時器、天平、酸度計、菌落計數(shù)器等；c)定容設(shè)備：吸管、自動分液器、微量移液器等；d)其他設(shè)備：水浴鍋、培養(yǎng)箱、超凈工作臺或生物安全柜、高壓滅菌鍋、均質(zhì)器、冷藏箱、冷凍柜等。第27頁/共95頁化學實驗室應(yīng)注意以下設(shè)備的交叉污染：a）一次性設(shè)備和重復使用的玻璃器皿應(yīng)潔凈，必要時應(yīng)進行浸泡清洗；b)檢出高濃度樣品或存放標準物質(zhì)的儲液瓶若不易清洗處理，應(yīng)用后丟棄；c)高、低濃度的樣品測試設(shè)備應(yīng)盡量分開；d)易串味樣品的存放容器應(yīng)有良好的密封性能，注意及時從測試工作區(qū)或樣品儲存區(qū)域撤離。第28頁/共95頁三、樣品和消耗材料的質(zhì)量控制1、樣品的控制關(guān)注重點——數(shù)量代表性、方法適用性、制備有效性、傳遞可溯性。數(shù)量代表性——樣品抽取階段必須制定合適的抽樣方案，明確抽樣的數(shù)量和抽樣方式。方法適用性——檢測方法對檢測樣品的特殊要求。第29頁/共95頁制備有效性——采用適當?shù)闹苽浞椒ǎ苊獗粶y物的分解和樣品遭受污染，注意環(huán)境條件、制樣工器具的影響。傳遞可溯性——有效的包裝、標識、傳遞、儲存方式。第30頁/共95頁確認證據(jù)——合同評審記錄、樣品標識系統(tǒng)、樣品狀態(tài)、保存設(shè)施的監(jiān)控、樣品處理設(shè)施和記錄。易忽視——檢畢物品的處理、樣品的群組細分。第31頁/共95頁化學實驗室采樣需要注意——抽樣依據(jù)、抽樣所代表的樣品總量、抽樣方案、抽樣環(huán)境條件和空間情況、抽樣器具溯源和標識、樣品包裝容器等。第32頁/共95頁微生物檢驗采樣原則代表性原則：所采的樣本能真正反映被采樣的總體水平。典型性原則:

應(yīng)根據(jù)中毒癥狀，可疑中毒物性質(zhì)采集可能含毒量最多的樣本，如中毒者吃剩的食物、餐具（未洗刷）。適時性原則：及時采樣，盡快送檢。適量性原則：采樣數(shù)量應(yīng)根據(jù)檢驗項目和目的而定，但每份樣本不少于檢驗需要量的三倍，以便供檢驗和留樣備用。程序原則：采樣、送檢、留樣和出具報告必須按規(guī)定的程序進行，各階段都要有完整的手續(xù)，責任分明。第33頁/共95頁關(guān)于留樣和復驗食品中微生物的分布是不均勻的，并受環(huán)境變化的影響較大，一旦進行了樣品制備和目標微生物檢驗實驗室，食品中微生物的本底便發(fā)生了一些變化，國際社會一直認為對于食品微生物檢驗不能復驗，那么是否有必要保留樣品？對于是否有必要保留樣品，歐洲認可合作組織（EuropeanCo-operationForAccreditation，EA）在其認證文件EA-4/10(rev.02)《微生物實驗室認證》中規(guī)定，微生物實驗室應(yīng)制定樣品的保留和處理程序。要求樣品儲存至出具檢驗結(jié)果時，必要時應(yīng)保留更長時間。而其他國內(nèi)外權(quán)威組織（ISO、AOAC、NMKL等）和政府機構(gòu)（USAFDA、USDA等）均沒有明確規(guī)定。因此，如果客戶沒有特殊要求，可以不留樣。第34頁/共95頁2、消耗材料的控制關(guān)注重點——外部供應(yīng)商的評價和控制、采購驗收（符合性檢查）、標準物質(zhì)的保管和期間核查。確認證據(jù)——外部供應(yīng)商的評價記錄、采購控制記錄、符合性檢查記錄、標準物質(zhì)確認記錄和配制記錄、期間核查作業(yè)指導書和核查記錄。易忽視——用數(shù)量清點代替符合性檢查、標準物質(zhì)配制溯源過程、期間核查。第35頁/共95頁

一些重要消耗材料，如標準品、試劑盒、預(yù)處理小柱、層析填料、培養(yǎng)基等，可根據(jù)供貨商提供的性能指標進行初步驗證，作出進一步評價，并根據(jù)評價結(jié)果采取適當?shù)拇胧?。?6頁/共95頁

技術(shù)性驗證可采用色譜、光譜、質(zhì)譜、化學常規(guī)分析、生化鑒定等多種方法，具體可采用與原有標準物質(zhì)比對、濃度檢測、保留時間驗證、峰純度鑒別、官能團鑒別、分子離子峰檢索、血清學特征鑒別等技術(shù)。第37頁/共95頁

對檢測結(jié)果有重要影響的消耗品、使用頻率高的或有疑慮的標準物質(zhì)要用適當?shù)姆椒ㄟM行符合性檢查。符合性檢查手段——與另一標準物質(zhì)進行比對試驗；——用色譜、質(zhì)譜、光譜的特征峰、特征離子、特征譜圖進行確證；——利用化學特征反應(yīng)進行驗證。必要的儀器分析；——生化傳代、血清鑒別等。第38頁/共95頁標準物質(zhì)一級標準物質(zhì)（GBW）——由國家計量部門批準、頒布并授權(quán)生產(chǎn)，采用絕對測量法或兩種以上不同原理的準確可靠的方法定值，也可由多個實驗室采用同一種方法協(xié)同定值，計量準確度達到國內(nèi)最高水平，穩(wěn)定性在一年以上。二級標準物質(zhì)（GBW（E））——由國家計量部門批準、頒布并授權(quán)生產(chǎn)，采用與一級標準物質(zhì)相比較的方法或一級標準物質(zhì)的定值方法定值，計量準確度能滿足一般測量的需要，穩(wěn)定性在半年以上。第39頁/共95頁

標準物質(zhì)證書應(yīng)給出標準物質(zhì)的名稱、編號、定值日期、定值方法、特性值、測量不確定度、有效期和貯存要求。當只能使用不具有溯源性的標準物質(zhì)時，應(yīng)獲取由生產(chǎn)廠商出具的能說明其特性的有效證明，并進行必要的驗證試驗或比對試驗。第40頁/共95頁標準溶液的配制——注意信息可追溯；——按標準規(guī)定配制；GB/T601-2002《化學試劑標準滴定溶液的制備》；GB/T602-2002《化學試劑雜質(zhì)測定用標準溶液的制備》——雙人八平行、極差分析。——有效期限。第41頁/共95頁培養(yǎng)基制備和質(zhì)量控制購置驗收要求(CNAS-CL01：4.6.2)生產(chǎn)企業(yè)提供資料實驗室外觀檢查記錄儲存、使用、棄置要求（CNAS-CL11：5.9)成品的質(zhì)量控制(概述第2部分.重點為菌株)物理指標:培養(yǎng)基外觀微生物指標:重點提到對測試菌株的要求SN/T1538.1-2005培養(yǎng)基制備指南第1部分實驗室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則

第42頁/共95頁常規(guī)質(zhì)量控制要求物理指標:外觀控制微生物指標:污染;生長率;選擇性;特異性(CNAS-CL01:20064.6.2;CNAS/CL09：2006)性能測試方法舉例對質(zhì)量控制要求的補充說明和詳細實例參考SN/T1538.2-2007培養(yǎng)基制備指南第2部分:培養(yǎng)基性能測試實用指南

GB/T27405-2008實驗室質(zhì)量控制規(guī)范

食品微生物檢測第43頁/共95頁四、檢測方法的質(zhì)量控制1、關(guān)注重點——檢測方法的現(xiàn)行有效、方法確認、非標方法的建立、方法的偏離、驗證和審批。確認證據(jù)——方法查新和跟蹤、方法確認記錄、非標方法確認記錄、方法偏離的技術(shù)驗證、作業(yè)指導書。第44頁/共95頁2、方法選擇關(guān)注——對檢測樣品的適用性、準確性和靈敏性。SOP（作業(yè)指導書）——當缺少指導書可能影響檢測和/或校準結(jié)果，實驗室可對所有相關(guān)設(shè)備的使用和操作、檢測和/或校準樣品的準備（或者二者兼有）、關(guān)鍵性操作步驟編制指導書。第45頁/共95頁應(yīng)由專人定期對檢測標準進行有效性查詢，及時更新作廢標準。國內(nèi)國家標準、行業(yè)標準、國外標準查詢：國家標準化管理委員會；中國標準信息網(wǎng)，，；

www.F;第46頁/共95頁3、SOP的建立當因檢測時效、試劑、設(shè)備、檢測靈敏度等原因，需要對標準方法進行改進，以滿足檢測需求時，應(yīng)對標準方法做偏離性確認，經(jīng)過批準并形成SOP。

SOP應(yīng)經(jīng)過審核批準并列入受控范疇。第47頁/共95頁實驗室編制SOP的內(nèi)容應(yīng)滿足5W1H原則：What——此項作業(yè)的名稱及內(nèi)容是什么；Why——此項作業(yè)的目的是干什么；Where——即在哪里使用該作業(yè)指導書；Who——什么樣的人使用該作業(yè)指導書；When——此項作業(yè)什么時候做；How——如何按步驟完成作業(yè)。第48頁/共95頁實驗室應(yīng)關(guān)注以下四個方面SOP的編制：1．方法類：包括食品檢驗方法中不詳細或不完善部分的補充，期間核查、方法確認及比對等；2．設(shè)備類：重要或復雜設(shè)備的使用、操作規(guī)范（如設(shè)備制造商提供的技術(shù)說明書不夠明細等）；3．樣品類：取樣、制樣和樣品處置的“實施細則”等；4．數(shù)據(jù)類：定量檢測結(jié)果的表達、異常數(shù)據(jù)的剔除、測量結(jié)果不確定度的評定等等。第49頁/共95頁實驗室SOP的編制格式和內(nèi)容應(yīng)符合GB/T1.1-2009《標準化工作導則第一部分標準的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則》和GB/T20001.4-2001《標準編寫規(guī)則第4部分化學分析方法》的規(guī)定。避免以論文和規(guī)章制度的形式書寫。第50頁/共95頁4、方法驗證與方法確認正確理解方法的驗證和確認驗證

verification——針對的是標準方法?！炞C實驗室人員、設(shè)備、材料和樣品、方法文本環(huán)境等資源和條件滿足標準要求的能力，以及操作標準的實際能力。第51頁/共95頁確認

confirmation——針對非標準方法、實驗室設(shè)計（制定）的方法、超出其預(yù)定范圍使用的標準方法、擴充和修改過的標準方法。——確認實驗室制定的非標準方法、實驗室設(shè)計（制定）的方法、超出其預(yù)定范圍使用的標準方法、擴充和修改過的標準方法是否具有方法的科學性、有效性和適用性。第52頁/共95頁方法驗證——文本評價——關(guān)鍵性技術(shù)能力重現(xiàn)。方法確認——實驗——技術(shù)參數(shù)確立——與經(jīng)典方法比較或?qū)嶒灡葘Α纬蒘OP。第53頁/共95頁方法確認的技術(shù)性確認涉及安全、衛(wèi)生、環(huán)保等低含量檢測項目時，要考慮檢測方法的最低檢出限（LOD值）是否能夠達到該物質(zhì)的最高殘留限量值（MRL值），如方法的LOD值>MRL值，則不能將該方法作為檢測方法使用，必須重新選擇檢測靈敏度更高的方法。第54頁/共95頁方法確認試驗——做方法的標準曲線、添加標準回收率試驗、最低檢出限試驗和精密度試驗等，并考慮方法的特異性和耐用性，如果可能，還應(yīng)進行不確定度評估。應(yīng)用實驗數(shù)據(jù)真實地證明方法的適用性、準確性和靈敏性。第55頁/共95頁化學分析方法確認的具體技術(shù)指標校準曲線——數(shù)學方程以及校準曲線的工作范圍，濃度范圍盡可能覆蓋一個數(shù)量級，至少作5個點（不包括空白）。對于篩選方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.98，對于確證方法，相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.99。測試溶液中被測組分濃度必須在校準曲線的線性范圍內(nèi)。第56頁/共95頁回收率試驗——對于禁用物質(zhì)，回收率應(yīng)在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限進行三水平試驗；對已制定最高殘留限量MRL的，回收率應(yīng)在方法測定低限、MRL、選一合適點進行三水平試驗；對于未制定MRL的，回收率應(yīng)在方法測定低限、常見限量指標、選一合適點進行三水平試驗。

第57頁/共95頁被測組分含量回收率范圍（mg/kg）（%）＞10095～1051～10090～1100.1～180～110

＜0.160～120第58頁/共95頁精密度試驗——對于禁用物質(zhì)，精密度試驗應(yīng)在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限三個水平進行；對于已制定MRL的，精密度試驗應(yīng)在方法測定低限、MRL、選一合適點三個水平進行；對于未制定MRL的，精密度試驗應(yīng)在方法測定低限、常見限量指標、選一合適點三個水平進行。重復測定次數(shù)>6。第59頁/共95頁被測組分含量室內(nèi)變異系數(shù)（CV，%）

1μg/kg3010μg/kg21100μg/kg151mg/kg1110mg/kg7.5100mg/kg5.31000mg/kg3.81%2.710%2.0100%1.3第60頁/共95頁測定低限——方法的測定低限按下式計算：

CL=3Sb/b

式中：CL

——方法的測定低限；Sb

——空白值標準偏差（一般平行測定20次得到）；b

——方法校準曲線的斜率。也可采用標準加入試驗法確定。第61頁/共95頁準確度——重復分析標準物質(zhì)（實物標樣）或水平測試樣品，測定含量（經(jīng)回收率校正后），得出平均值與真值的偏差（變異系數(shù)）。

第62頁/共95頁真值含量（mg/kg）變異系數(shù)（%）＜0.001-50～

+200.001～0.01-30～+100.010～10-20～+1010～1000＜151000～10000＜10

＞10000＜5第63頁/共95頁特異性試驗——對于檢測篩選方法和確證方法特異性必須予以規(guī)定，尤其對于確證方法必須盡可能清楚地提供待測物的化學結(jié)構(gòu)信息，僅基于色譜分析而沒有使用分子光譜測定的方法，不能用于確證方法。

第64頁/共95頁確證方法：（1）氣相色譜-質(zhì)譜；（2）液相色譜-質(zhì)譜；（3）免疫親和色譜/氣相色譜-質(zhì)譜；（4）氣相色譜-紅外光譜；（5）液相色譜-免疫層析；（6）標準菌株；（7）特征生化鑒別。第65頁/共95頁用于驗證和確認食品微生物檢驗方法性能的試驗技術(shù)包括：

①使用標準/參考菌株進行核實；②與其他方法所得的結(jié)果進行比較；③實驗室間比對；④對影響結(jié)果的因素作系統(tǒng)性評審；⑤根據(jù)對方法的理論原理和實踐經(jīng)驗的科學理解，對所得結(jié)果不確定度進行評定。第66頁/共95頁以上驗證和確認食品微生物檢驗方法性能的試驗技術(shù)，可概略分為兩大類：實驗室間驗證/確認試驗（協(xié)作試驗）和實驗室內(nèi)驗證/確認試驗（單一試驗）。

實驗室間驗證/確認試驗是指在若干實驗室內(nèi)由不同操作者進行的驗證/確認試驗，而實驗室內(nèi)確認試驗是僅在特定的實驗室內(nèi)進行的驗證/確認試驗。

第67頁/共95頁食品微生物檢驗方法的驗證建議實驗室在以下情況下對檢驗方法進行嚴格的驗證：

1.擬用經(jīng)過完整確認的標準方法以及經(jīng)過嚴格確認的并被審批的非標準方法時；

2.培養(yǎng)基供應(yīng)商、人員、設(shè)備、儀器/試劑盒等發(fā)生變動時。

第68頁/共95頁微生物檢驗方法驗證和確認的依據(jù)①美國官方分析化學家協(xié)會(AOAC)，執(zhí)行標準為：“AOACInternationalMethodsCommmitteeGuidelinesforValidationofQualitativeandQuantitativeFoodMicrobiologicalOfficialMethodsofAnlysis-2002”；②國際標準化組織(ISO)，執(zhí)行標準為：ISO/TR13843：2000《Waterquality--Guidanceonvalidationofmicrobiologicalmethods》和ISO16140:2003《Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs--Protocolforthevalidationofalternativemethods》；第69頁/共95頁③NordVal：NV-DOC.D–2005-01-01《Protocolforthevalidationofalternativemicrobiologicalmethods》；④新加坡認可委員會(SAC)：C&BandENV002《MethodValidationofMicrobiologicalMethods》。第70頁/共95頁5、非標方法的控制和使用下列情況時，需要制訂非標準方法：——經(jīng)檢索無發(fā)布的標準方法和經(jīng)批準使用的非標準方法可供選用；——對現(xiàn)有的標準方法作較大改動；——需要制定快速測試方法。第71頁/共95頁6、正確掌握不確定度評估的方法實驗室應(yīng)建立測量不確定度評定程序，根據(jù)需要進行不確定度評定。測量不確定度的評定與表示方法按《

JJF1059-1999測量不確定度評定與表示》進行。

ISO/TS19036食品和動物飼料微生物學–定量檢驗的不確定度評估指南第72頁/共95頁需要進行不確定評估，并在檢測報告中給出不確定度值——：檢測方法有要求；測量不確定度與檢測結(jié)果的有效性或應(yīng)用領(lǐng)域有關(guān)；客戶提出要求；當測試結(jié)果處于規(guī)定指標臨界值附近時，測量不確定度對判斷結(jié)果符合性會產(chǎn)生影響。

第73頁/共95頁五、設(shè)施和環(huán)境條件的質(zhì)量控制1、設(shè)施和環(huán)境條件的評價重點關(guān)注——檢測標準對環(huán)境的要求、監(jiān)控設(shè)施和使用記錄、區(qū)域隔離和進入。確認證據(jù)——現(xiàn)場檢查、監(jiān)控記錄。第74頁/共95頁實驗室的設(shè)施及環(huán)境條件的控制主要應(yīng)考慮足夠的空間、合理的布局、條件的控制和安全低風險等。易忽視——區(qū)域隔離、限制進入、監(jiān)控設(shè)施有效性確認和使用記錄。第75頁/共95頁實驗室應(yīng)具有進行食品微生物和化學檢測所需的適宜、充分的設(shè)施條件。典型的實驗室應(yīng)有檢測設(shè)施（專用于微生物、化學檢測和相關(guān)活動）及輔助設(shè)施（大門、走廊、管理區(qū)、樣品室、清潔間、儲存室、試劑室、氣體室、文檔室等）。某些檢測設(shè)備可能需要特殊的環(huán)境條件,并對其環(huán)境條件進行監(jiān)控。第76頁/共95頁依據(jù)所檢測微生物的不同等級，實驗室應(yīng)對授權(quán)進入的人員采取嚴格限制措施，并明確告知有關(guān)人員相關(guān)內(nèi)容。應(yīng)根據(jù)具體檢測活動（如檢測種類和數(shù)量等），有效分隔不相容的業(yè)務(wù)活動。應(yīng)采取措施將交叉污染的風險降低到最小。第77頁/共95頁日常檢查——良好的通風和采光、溫濕度監(jiān)控、相互干擾區(qū)域的隔離、檢驗廢棄物的處置等。第78頁/共95頁

實驗室應(yīng)制訂科學合理的微生物實驗室環(huán)境監(jiān)測程序（如空氣落菌平板計數(shù)和表面棉拭子涂抹計數(shù)）。設(shè)定可接受的背景菌落數(shù)量，并且有文件化的程序來處理背景菌落總數(shù)超標情況。數(shù)據(jù)分析應(yīng)傾向于能夠確定污染水平。重點監(jiān)測區(qū)域：樣品接收和儲藏區(qū)；樣品前處理區(qū)（如應(yīng)在被隔離的區(qū)域處理極易被嚴重污染的粉狀產(chǎn)品）；無菌區(qū)/生物安全柜。第79頁/共95頁六、實驗室質(zhì)量控制的實施質(zhì)量控制（qualitycontrol）是指為達到質(zhì)量要求所采取的作業(yè)技術(shù)和活動。質(zhì)量控制的目的——控制樣品檢測的各個環(huán)節(jié)和服務(wù)產(chǎn)生、形成或?qū)崿F(xiàn)過程中的各個程序并使它們達到規(guī)定的要求，把不符合控制在其形成的早期并加以消除。

第80頁/共95頁

檢測實驗室的質(zhì)量控制應(yīng)嚴格執(zhí)行實驗室的各項程序文件的規(guī)定和檢測工作的作業(yè)指導書。不僅控制檢測過程的結(jié)果，而且應(yīng)控制影響檢測結(jié)果產(chǎn)生過程質(zhì)量的各種因素，尤其是要控制其中的關(guān)鍵因素，如人員的能力、環(huán)境的條件、設(shè)備的準確度、外部采購供應(yīng)的材料等。

第81頁/共95頁內(nèi)部質(zhì)量控制——技術(shù)質(zhì)量控制和工作質(zhì)量控制。技術(shù)質(zhì)量控制包括：測定方法、操作水平、儀器設(shè)備校準、材料核查、實驗環(huán)境等。工作質(zhì)量控制包括：遵守實驗室程序文件規(guī)定、下一道工序?qū)ι弦坏拦ば虻臋z查、及時糾