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本文格式為Word版,下載可任意編輯——生物化學(xué)第四版課后參考答案1緒論

1.生物化學(xué)研究的對象和內(nèi)容是什么?解答:生物化學(xué)主要研究:

(1)生物機體的化學(xué)組成、生物分子的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及功能;(2)生物分子分解與合成及反應(yīng)過程中的能量變化;(3)生物遺傳信息的儲存、傳遞和表達;(4)生物體新陳代謝的調(diào)理與控制。

2.你已經(jīng)學(xué)過的課程中哪些內(nèi)容與生物化學(xué)有關(guān)。

提醒:生物化學(xué)是生命科學(xué)的基礎(chǔ)學(xué)科,注意從不同的角度,去理解并運用生物化學(xué)的知識。

3.說明生物分子的元素組成和分子組成有哪些相像的規(guī)侓。

解答:生物大分子在元素組成上有相像的規(guī)侓性。碳、氫、氧、氮、磷、硫等6種是蛋白質(zhì)、核酸、糖和脂的主要組成元素。碳原子具有特別的成鍵性質(zhì),即碳原子最外層的4個電子可使碳與自身形成共價單鍵、共價雙鍵和共價三鍵,碳還可與氮、氧和氫原子形成共價鍵。碳與被鍵合原子形成4個共價鍵的性質(zhì),使得碳骨架可形成線性、分支以及環(huán)狀的多種多性的化合物。特別的成鍵性質(zhì)適應(yīng)了生物大分子多樣性的需要。氮、氧、硫、磷元素構(gòu)成了生物分子碳骨架上的氨基(-NH2)、羥基(-OH)、羰基()、羧基(-COOH)、巰基(-SH)、磷酸基(-PO4)等功能基團。這些功能基團因氮、硫和磷有著可變的氧化數(shù)及氮和氧有著較強的電負性而與生命物質(zhì)的大量關(guān)鍵作用密切相關(guān)。生物大分子在結(jié)構(gòu)上也有著共同的規(guī)律性。生物大分子均由一致類型的構(gòu)件通過一定的共價鍵聚合成鏈狀,其主鏈骨架浮現(xiàn)周期性重復(fù)。構(gòu)成蛋白質(zhì)的構(gòu)件是20種基本氨基酸。氨基酸之間通過肽鍵相連。肽鏈具有方向性(N端→C端),蛋白質(zhì)主鏈骨架呈\肽單位\重復(fù);核酸的構(gòu)件是核苷酸,核苷酸通過3′,5′-磷酸二酯鍵相連,核酸鏈也具有方向性(5′、→3′),核酸的主鏈骨架呈\磷酸-核糖(或脫氧核糖)\重復(fù);構(gòu)成脂質(zhì)的構(gòu)件是甘油、脂肪酸和膽堿,其非極性烴長鏈也是一種重復(fù)結(jié)構(gòu);構(gòu)成多糖的構(gòu)件是單糖,單糖間通過糖苷鍵相連,淀粉、纖維素、糖原的糖鏈骨架均呈葡萄糖基的重復(fù)。2蛋白質(zhì)化學(xué)

1.用于測定蛋白質(zhì)多肽鏈N端、C端的常用方法有哪些?基本原理是什么?解答:(1)N-末端測定法:常采用―二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。①―二硝基氟苯(DNFB或FDNB)法:多肽或蛋白質(zhì)的游離末端氨基與―二硝基氟苯(―DNFB)反應(yīng)(Sanger反應(yīng)),生成DNP―多肽或DNP―蛋白質(zhì)。由于DNFB與氨基形成的鍵對酸水解遠比肽鍵穩(wěn)定,因此DNP―多肽經(jīng)酸水解后,只有N―末端氨基酸為黃色DNP―氨基酸衍生物,其余的都是游離氨基酸。

②丹磺酰氯(DNS)法:多肽或蛋白質(zhì)的游離末端氨基與與丹磺酰氯(DNS―Cl)反應(yīng)生成DNS―多肽或DNS―蛋白質(zhì)。由于DNS與氨基形成的鍵對酸水解遠比肽鍵穩(wěn)定,因此DNS―多肽經(jīng)酸水解后,只有N―末端氨基酸為猛烈的熒光物質(zhì)DNS―氨基酸,其余的都是游離氨基酸。

③苯異硫氰酸脂(PITC或Edman降解)法:多肽或蛋白質(zhì)的游離末端氨基與異硫氰酸苯酯(PITC)反應(yīng)(Edman反應(yīng)),生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白質(zhì)。在酸性有機溶劑中加熱時,N―末端的PTC―氨基酸發(fā)生環(huán)化,生成苯乙內(nèi)酰硫脲的衍生物并從肽鏈上掉下來,除去N―末端氨基酸后剩下的肽鏈依舊是完整的。④氨肽酶法:氨肽酶是一類肽鏈外切酶或叫外肽酶,能從多肽鏈的N端逐個地向里切。根據(jù)不同的反應(yīng)時間測出酶水解釋放的氨基酸種類和數(shù)量,按反應(yīng)時間和殘基釋放量作動力學(xué)曲線,就能知道該蛋白質(zhì)的N端殘基序列。

(2)C―末端測定法:常采用肼解法、還原法、羧肽酶法。

肼解法:蛋白質(zhì)或多肽與無水肼加熱發(fā)生肼解,反應(yīng)中除C端氨基酸以游離形式存在外,其他氨基酸都轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的氨基酸酰肼化物。②還原法:肽鏈C端氨基酸可用硼氫化鋰還原成相應(yīng)的α―氨基醇。肽鏈完全水解后,代表原來C―末端氨基酸的α―氨基醇,可用層析法加以鑒別。

③羧肽酶法:是一類肽鏈外切酶,專一的從肽鏈的C―末端開始逐個降解,釋放出游離的氨基酸。被釋放的氨基酸數(shù)目與種類隨反應(yīng)時間的而變化。根據(jù)釋放的氨基酸量(摩爾數(shù))與反應(yīng)時間的關(guān)系,便可以知道該肽鏈的C―末端氨基酸序列。

2.測得一種血紅蛋白含鐵0.426%,計算其最低相對分子質(zhì)量。一種純酶按質(zhì)量計算含亮氨酸1.65%和異亮氨酸2.48%,問其最低相對分子質(zhì)量是多少?

3.指出下面pH條件下,各蛋白質(zhì)在電場中向哪個方向移動,即正極,負極,還是保持原點?

(1)胃蛋白酶(pI1.0),在pH5.0;(2)血清清蛋白(pI4.9),在pH6.0;(3)α-脂蛋白(pI5.8),在pH5.0和pH9.0;解答:(1)胃蛋白酶pI1.0<環(huán)境pH5.0,帶負電荷,向正極移動;(2)血清清蛋白pI4.9<環(huán)境pH6.0,帶負電荷,向正極移動;(3)α-脂蛋白pI5.8>環(huán)境pH5.0,帶正電荷,向負極移動;α-脂蛋白pI5.8<環(huán)境pH9.0,帶負電荷,向正極移動。4.何謂蛋白質(zhì)的變性與沉淀?二者在本質(zhì)上有何區(qū)別?

解答:蛋白質(zhì)變性的概念:自然蛋白質(zhì)受物理或化學(xué)因素的影響后,使其失去原有的生物活性,并伴隨著物理化學(xué)性質(zhì)的改變,這種作用稱為蛋白質(zhì)的變性。變性的本質(zhì):分子中各種次級鍵斷裂,使其空間構(gòu)象從緊湊有序的狀態(tài)變成松散無序的狀態(tài),一級結(jié)構(gòu)不破壞。

蛋白質(zhì)變性后的表現(xiàn):①?生物學(xué)活性消失;②?理化性質(zhì)改變:溶解度下降,黏度增加,紫外吸收增加,側(cè)鏈反應(yīng)加強,對酶的作用敏感,易被水解。蛋白質(zhì)由于帶有電荷和水膜,因此在水溶液中形成穩(wěn)定的膠體。假使在蛋白質(zhì)溶液中參與適當(dāng)?shù)脑噭?,破壞了蛋白質(zhì)的水膜或中和了蛋白質(zhì)的電荷,則蛋白質(zhì)膠體溶液就不穩(wěn)定而出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。沉淀機理:破壞蛋白質(zhì)的水化膜,中和表面的凈電荷。蛋白質(zhì)的沉淀可以分為兩類:

(1)可逆的沉淀:蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)未發(fā)生顯著的變化,除去引起沉淀的因素,蛋白質(zhì)仍能溶于原來的溶劑中,并保持自然性質(zhì)。如鹽析或低溫下的乙醇(或丙酮)短時間作用蛋白質(zhì)。

(2)不可逆沉淀:蛋白質(zhì)分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生重大改變,蛋白質(zhì)變性而沉淀,不再能溶于原溶劑。如加熱引起蛋白質(zhì)沉淀,與重金屬或某些酸類的反應(yīng)都屬于此類。

蛋白質(zhì)變性后,有時由于維持溶液穩(wěn)定的條件依舊存在,并不析出。因此變性蛋白質(zhì)并不一定都表現(xiàn)為沉淀,而沉淀的蛋白質(zhì)也未必都已經(jīng)變性。

5.以下試劑和酶常用于蛋白質(zhì)化學(xué)的研究中:CNBr,異硫氰酸苯酯,丹磺酰氯,脲,6mol/LHClβ-巰基乙醇,水合茚三酮,過甲酸,胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,其中哪一個最適合完成以下各項任務(wù)?

(1)測定小肽的氨基酸序列。(2)鑒定肽的氨基末端殘基。

(3)不含二硫鍵的蛋白質(zhì)的可逆變性。若有二硫鍵存在時還需加什么試劑?(4)在芳香族氨基酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。

(5)在甲硫氨酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。(6)在賴氨酸和精氨酸殘基側(cè)水解肽鍵。解答:(1)異硫氰酸苯酯;(2)丹黃酰氯;(3)脲;-巰基乙醇還原二硫鍵;(4)胰凝乳蛋白酶;(5)CNBr;(6)胰蛋白酶。6.由以下信息求八肽的序列。

(1)酸水解得Ala,Arg,Leu,Met,Phe,Thr,2Val。(2)Sanger試劑處理得DNP-Ala。

(3)胰蛋白酶處理得Ala,Arg,Thr和Leu,Met,Phe,2Val。當(dāng)以Sanger試劑處理時分別得到DNP-Ala和DNP-Val。

(4)溴化氰處理得Ala,Arg,高絲氨酸內(nèi)酯,Thr,2Val,和Leu,Phe,當(dāng)用Sanger試劑處理時,分別得DNP-Ala和DNP-Leu。

解答:由(2)推出N末端為Ala;由(3)推出Val位于N端第四,Arg為第三,而Thr為其次;溴化氰裂解,得出N端第六位是Met,由于第七位是Leu,所以Phe為第八;由(4),第五為Val。所以八肽為:Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe。

7.一個α螺旋片段含有180個氨基酸殘基,該片段中有多少圈螺旋?計算該α-螺旋片段的軸長。

解答:180/3.6=50圈,50×0.54=27nm,該片段中含有50圈螺旋,其軸長為27nm。8.當(dāng)一種四肽與FDNB反應(yīng)后,用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及其他3種氨基酸;當(dāng)這四肽用胰蛋白酶水解時發(fā)現(xiàn)兩種碎片段;其中一片用LiBH4(下標(biāo))還原后再進行酸水解,水解液內(nèi)有氨基乙醇和一種在濃硫酸條件下能與乙醛酸反應(yīng)產(chǎn)生紫(紅)色產(chǎn)物的氨基酸。試問這四肽的一級結(jié)構(gòu)是由哪幾種氨基酸組成的?解答:(1)四肽與FDNB反應(yīng)后,用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val,證明N端為Val。(2)LiBH4還原后再水解,水解液中有氨基乙醇,證明肽的C端為Gly。

(3)水解液中有在濃H2SO4條件下能與乙醛酸反應(yīng)產(chǎn)生紫紅色產(chǎn)物的氨基酸,說明此氨基酸為Trp。說明C端為Gly-Trp...

(4)根據(jù)胰蛋白酶的專一性,得知N端片段為Val-Arg(Lys)...,以(1)、(2)、(3)結(jié)果可知道四肽的順序:N-Val-Arg(Lys)-Trp-Gly-C。9.概述測定蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的基本步驟。解答:(1)測定蛋白質(zhì)中氨基酸組成。(2)蛋白質(zhì)的N端和C端的測定。

(3)應(yīng)用兩種或兩種以上不同的水解方法將所要測定的蛋白質(zhì)肽鏈斷裂,各自滿到一系列大小不同的肽段。

(4)分開提純所產(chǎn)生的肽,并測定出它們的序列。

(5)從有重疊結(jié)構(gòu)的各個肽的序列中推斷出蛋白質(zhì)中全部氨基酸排列順序。

假使蛋白質(zhì)含有一條以上的肽鏈,則需先拆開成單個肽鏈再按上述原則確定其一級結(jié)構(gòu)。如是含二硫鍵的蛋白質(zhì),也必需在測定其氨基酸排列順序前,拆開二硫鍵,使肽鏈分開,并確定二硫鍵的位置。拆開二硫鍵可用過甲酸氧化,使胱氨酸部分氧化成兩個半胱氨磺酸。3核酸

1.①電泳分開四種核苷酸時,尋常將緩沖液調(diào)到什么pH?此時它們是向哪極移動?移動的快慢順序如何?②將四種核苷酸吸附于陰離子交換柱上時,應(yīng)將溶液調(diào)到什么pH?③假使用逐漸降低pH的洗脫液對陰離子交換樹脂上的四種核苷酸進行洗脫分開,其洗脫順序如何?為什么?

解答:①電泳分開4種核苷酸時應(yīng)取pH3.5的緩沖液,在該pH時,這4種單核苷酸之間所帶負電荷差異較大,它們都向正極移動,但移動的速度不同,依次為:

UMP>GMP>AMP>CMP;②應(yīng)取pH8.0,這樣可使核苷酸帶較多負電荷,利于吸附于陰離子交換樹脂柱。雖然pH11.4時核苷酸帶有更多的負電荷,但pH過高對分開不利。③當(dāng)不考慮樹脂的非極性吸附時,根據(jù)核苷酸負電荷的多少來決定洗脫速度,則洗脫順序為CMP>AMP>GMP>UMP,但實際上核苷酸和聚苯乙烯陰離子交換樹脂之間存在著非極性吸附,嘌呤堿基的非極性吸附是嘧啶堿基的3倍。靜電吸附與非極性吸附共同作用的結(jié)果使洗脫順序為:CMP>AMP>UMP>GMP。

2.為什么DNA不易被堿水解,而RNA簡單被堿水解?

解答:由于RNA的核糖上有2(-OH基,在堿作用下形成2(,3(-環(huán)磷酸酯,繼續(xù)水解產(chǎn)生2(-核苷酸和3(-核苷酸。DNA的脫氧核糖上無2(-OH基,不能形成堿水解的中間產(chǎn)物,故對堿有一定抗性。

3.一個雙螺旋DNA分子中有一條鏈的成分[A]=0.30,[G]=0.24,①請推測這一條鏈上的[T]和[C]的狀況。②互補鏈的[A],[G],[T]和[C]的狀況。

解答:①[T]+[C]=1-0.30-0.24=0.46;②[T]=0.30,[C]=0.24,[A]+[G]=0.46。4.對雙鏈DNA而言,①若一條鏈中(A+G)/(T+C)=0.7,則互補鏈中和整個DNA分子中(A+G)/(T+C)分別等于多少?②若一條鏈中(A+T)/(G+C)=0.7,則互補鏈中和整個DNA分子中(A+T)/(G+C)分別等于多少?

解答:①設(shè)DNA的兩條鏈分別為α和β則:Aα=Tβ,Tα=Aβ,Gα=Cβ,Cα=Gβ,由于:(Aα+Gα)/(Tα+Cα)=(Tβ+Cβ)/(Aβ+Gβ)=0.7,所以互補鏈中(Aβ+Gβ)/(Tβ+Cβ)=1/0.7=1.43;在整個DNA分子中,由于A=T,G=C,所以,A+G=T+C,(A+G)/(T+C)=1;②假設(shè)同(1),則Aα+Tα=Tβ+Aβ,Gα+Cα=Cβ+Gβ,所以,(Aα+Tα)/(Gα+Cα)=(Aβ+Tβ)/(Gβ+Cβ)=0.7;在整個DNA分子中,(Aα+Tα+Aβ+Tβ)/(Gα+Cα+Gβ+Cβ)=2(Aα+Tα)/2(Gα+Cα)=0.7

5.T7噬菌體DNA(雙鏈B-DNA)的相對分子質(zhì)量為2.5×107,計算DNA鏈的長度(設(shè)核苷酸對的平均相對分子質(zhì)量為640)。

解答:0.34×(2.5×107/640)=1.3×104nm=13μm。

6.假使人體有1014個細胞,每個體細胞的DNA含量為6.4×109個堿基對。試計算人體DNA的總長度是多少?是太陽―地球之間距離(2.2×109km)的多少倍?已知雙鏈DNA每1000個核苷酸重1×10-18g,求人體DNA的總質(zhì)量。

解答:每個體細胞的DNA的總長度為:6.4×109×0.34nm=2.176×109nm=2.176m,人體內(nèi)所有體細胞的DNA的總長度為:2.176m×1014=2.176×1011km,這個長度與太陽―地球之間距離(2.2×109km)相比為:2.176×1011/2.2×109=99倍,每個核苷酸重1×10-18g/1000=10-21g,所以,總DNA6.4×1023×10-21=6.4×102=640g。

7.有一個X噬菌體突變體的DNA長度是15μm,而正常X噬菌體DNA的長度為17μm,計算突變體DNA中丟失掉多少堿基對?解答:(17-15)×103/0.34=5.88×103bp8.概述超螺旋DNA的生物學(xué)意義。

解答:①超螺旋DNA比松弛型DNA更緊湊,使DNA分子的體積更小,得以包裝在細胞內(nèi);②超螺旋會影響雙螺旋分子的解旋能力,從而影響到DNA與其他分子之間的相互作用;③超螺旋有利于DNA的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制及表達調(diào)控。9.為什么自然界的超螺旋DNA多為負超螺旋?

解答:環(huán)狀DNA自身雙螺旋的過度旋轉(zhuǎn)或旋轉(zhuǎn)不足都會導(dǎo)致超螺旋,這是由于超螺旋將使分子能夠釋放由于自身旋轉(zhuǎn)帶來的應(yīng)力。雙螺旋過度旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致正超螺旋,而旋轉(zhuǎn)不足將

導(dǎo)致負超螺旋。雖然兩種超螺旋都能釋放應(yīng)力,但是負超螺旋時,假使發(fā)生DNA解鏈(即氫鏈斷開,部分雙螺旋分開)就能進一步釋放應(yīng)力,而DNA轉(zhuǎn)錄和復(fù)制需要解鏈。因此自然界環(huán)狀DNA采取負超螺旋,這可以通過拓撲異構(gòu)酶的操作實現(xiàn)。10.真核生物基因組和原核生物基因組各有哪些特點?

解答:不同點:①真核生物DNA含量高,堿基對總數(shù)可達1011,且與組蛋白穩(wěn)定結(jié)合形成染色體,具有多個復(fù)制起點。原核生物DNA含量低,不含組蛋白,稱為類核體,只有一個復(fù)制起點。②真核生物有多個呈線形的染色體;原核生物只有一條環(huán)形染色體。③真核生物DNA中含有大量重復(fù)序列,原核生物細胞中無重復(fù)序列。④真核生物中為蛋白質(zhì)編碼的大多數(shù)基因都含有內(nèi)含子(有斷裂基因);原核生物中不含內(nèi)含子。⑤真核生物的RNA是細胞核內(nèi)合成的,它必需運輸穿過核膜到細胞質(zhì)才能翻譯,這樣嚴(yán)格的空間間隔在原核生物內(nèi)是不存在的。⑥原核生物功能上密切相關(guān)的基因相互靠近,形成一個轉(zhuǎn)錄單位,稱操縱子,真核生物不存在操縱子。⑦病毒基因組中普遍存在重疊基因,但近年發(fā)現(xiàn)這種狀況在真核生物也不少見。一致點:都是由一致種類的核苷酸構(gòu)成的的雙螺旋結(jié)構(gòu),均是遺傳信息的載體,均含有多個基因。

11.如何對待RNA功能的多樣性?它的核心作用是什么?

解答:RNA的功能主要有:①控制蛋白質(zhì)合成;②作用于RNA轉(zhuǎn)錄后加工與修飾;③參與細胞功能的調(diào)理;④生物催化與其他細胞持家功能;⑤遺傳信息的加工;⑥可能是生物進化時比蛋白質(zhì)和DNA更早出現(xiàn)的生物大分子。其核心作用是既可以作為信息分子又可以作為功能分子發(fā)揮作用。

12.什么是DNA變性?DNA變性后理化性質(zhì)有何變化?

解答:DNA雙鏈轉(zhuǎn)化成單鏈的過程稱變性。引起DNA變性的因素好多,如高溫、超聲波、強酸、強堿、有機溶劑和某些化學(xué)試劑(如尿素,酰胺)等都能引起變性。DNA變性后的理化性質(zhì)變化主要有:①自然DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈變成單鏈的無規(guī)則線團,生物學(xué)活性喪失;②自然的線型DNA分子直徑與長度之比可達1∶10,其水溶液具有很大的黏度。變性后,發(fā)生了螺旋-線團轉(zhuǎn)變,黏度顯著降低;③在氯化銫溶液中進行密度梯度離心,變性后的DNA浮力密度大大增加,故沉降系數(shù)S增加;④DNA變性后,堿基的有序堆積被破壞,堿基被暴露出來,因此,紫外吸收值明顯增加,產(chǎn)生所謂增色效應(yīng)。⑤DNA分子具旋光性,旋光方向為右旋。由于DNA分子的高度不對稱性,因此旋光性很強,其[a]=150。當(dāng)DNA分子變性時,比旋光值就大大下降。13.哪些因素影響Tm值的大???

解答:影響Tm的因素主要有:①G-C對含量。G-C對含3個氫鍵,A-T對含2個氫鍵,故G-C對相對含量愈高,Tm亦越高(圖3-29)。在0.15mol/LNaCl,0.015mol/L檸檬酸鈉溶液(1×SSC)中,經(jīng)驗公式為:(G+C)%=(Tm-69.3)×2.44。②溶液的離子強度。離子強度較低的介質(zhì)中,Tm較低。在純水中,DNA在室溫下即可變性。分子生物學(xué)研究工作中需核酸變性時,常采用離子強度較低的溶液。③溶液的pH。高pH下,堿基廣泛去質(zhì)子而喪失形成氫鍵的有力,pH大于11.3時,DNA完全變性。pH低于5.0時,DNA易脫嘌呤,對單鏈DNA進行電泳時,常在凝膠中參與NaOH以維持變性關(guān)態(tài)。④變性劑。甲酰胺、尿素、甲醛等可破壞氫鍵,阻礙堿堆積,使Tm下降。對單鏈DNA進行電泳時,常使用上述變性劑。

14.哪些因素影響DNA復(fù)性的速度?

解答:影響復(fù)性速度的因素主要有:①復(fù)性的溫度,復(fù)性時單鏈隨機碰撞,不能形成堿基配對或只形成局部堿基配對時,在較高的溫度下兩鏈重又分開,經(jīng)過屢屢試探性碰撞才能形成正確的互補區(qū)。所以,核酸復(fù)性時溫度不宜過低,Tm-25℃是較適合的復(fù)性溫度。②單鏈片段的濃度,單鏈片段濃度越高,隨機碰撞的頻率越高,復(fù)性速度越快。③單鏈片段

一個核苷酸的缺失所恢復(fù)?解釋原因。

解答:一個編碼蛋白質(zhì)的基因,假使插入4個核苷酸序列,就會發(fā)生移碼突變,即從插入處開始此蛋白質(zhì)的氨基酸順序都發(fā)生了變化,導(dǎo)致此蛋白質(zhì)功能的喪失。但假使在此插入段相鄰處缺失一個核苷酸,此蛋白質(zhì)僅在插入處的幾個氨基酸發(fā)生了改變,假使此變異不是蛋白質(zhì)發(fā)揮功能必需的部位,那么此蛋白質(zhì)可能恢復(fù)其功能。2.一個雙螺旋DNA片段的模板鏈含有順序:5(GTTAACACCCCTGACTTCGCGCCGTCG3(

(a)寫出從這條鏈轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA的堿基順序;

(b)從(a)中的mRNA的5(-末端開始翻譯產(chǎn)生的肽鏈的氨基酸順序是什么(?參考密碼表)(c)合成此多肽需消耗多少ATP解答:(a)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA的堿基順序為:5(-CGACGGCGCGAAGUCAGGGGUGUUAAC-3(

(b)Arg-Arg-Arg-Glu-Val-Arg-Gly-Val-Lys(不考慮起始密碼和終止密碼)(c)在蛋白質(zhì)合成過程中,每個氨基酸活化消耗2個高能鍵(ATP→AMP),進位和轉(zhuǎn)肽各需要1個GTP,每往肽鏈中參與1個氨基酸要消耗4個ATP,所以以上肽鏈合成需要9×4=36個ATP(不考慮起始和終止)。

3.原核生物是如何區(qū)分AUG是起始密碼還是多肽鏈內(nèi)部Met的密碼的?解答:原核生物在起始密碼上游約10個核苷酸處(即-10區(qū))尋常有一段富含嘌呤的序列,稱為SD序列(Shine-Dalgainsequence)。SD序列可以與小亞基16SrRNA3′-末端的序列互補,使mRNA與小亞基結(jié)合,使得核糖體能夠識別正確的起始密碼AUG。而多肽鏈內(nèi)部Met的密碼前沒有SD序列。

4.原核生物蛋白質(zhì)合成體系由哪些物質(zhì)組成?各起什么作用?解答:原核生物蛋白質(zhì)合成體系的物質(zhì)組成和作用。詳見15.1。5.簡述蛋白質(zhì)合成的起始、延長和終止過程。解答:詳見15.2.3,15.2.4,15.2.5。

6.試比較原核生物與真核生物在蛋白質(zhì)合成上的差異。解答:(1)原核生物轉(zhuǎn)錄和翻譯同步進行,真核生物轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物要加工后才進行翻譯。(2)原核生物核糖體為70S,由50S與30S兩個亞基組成;真核生物核糖體為80S,由60S與40S兩個亞基組成。(3)原核生物的蛋白質(zhì)合成起始于甲酰甲硫氨酸,需起始因子IF-1、IF-2、IF-3及GTP、Mg2+參與。真核生物的蛋白質(zhì)合成起始于甲硫氨酸,起始因子為eIF-1、eIF-2、eIF-3、eIF-4、eIF-5和eIF-6。(4)原核生物在起始密碼上游的SD序列可以與小亞基16SrRNA3′-末端的序列互補,從而確定起始密碼的位置。真核生物核糖體與mRNA5′-末端的帽子結(jié)構(gòu)結(jié)合之后,通過消耗ATP的掃描機制向3(端移動來尋覓起始密碼。

(5)原核生物的延長因子有EF-Ts、EF-Tu和EF-G。真核生物的延長因子是eEF-1和eEF-2。

(6)肽鏈合成的終止需要有肽鏈釋放因子。原核生物釋放因子有3種:RF-1、RF-2、RF-3。RF-1識別終止密碼UAA、UAG,RF-2識別終止密碼UAA、UGA,RF-3是一種與GTP形成復(fù)合體的GTP結(jié)合蛋白,它不參與終止密碼的識別,但是可促進核糖體與RF-1、RF-2的結(jié)合。在真核生物中,僅1種釋放因子eRF,它可以識別3種終止密碼。7.何謂信號肽理論?解答:蛋白質(zhì)的定向轉(zhuǎn)運機制,普遍被人接受的是D.Salatini和G.Blobel提出的信號肽理論。此理論認為多肽鏈中的信號序列控制蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)移與定位。詳見15.5。

8.密碼子的簡并性和搖擺性有何生物學(xué)意義?

解答:tRNA上的反密碼子與mRNA的密碼子配對時,密碼子的第一位、其次位堿基是嚴(yán)格依照堿基配對原則進行的,而第三位堿基配對則可以不依照堿基配對原則進行,這種現(xiàn)象稱為搖擺性(wobble)。詳見15.1.1.2。由于搖擺性的存在,合理的解釋了密碼子的簡并性,同時也使基因突變造成的危害程度降至最低。9.蛋白質(zhì)合成后的加工有哪些方式?解答:蛋白質(zhì)合成后要經(jīng)歷下述加工過程才能成為有生物活性的蛋白質(zhì)。①N端甲?;騈端氨基酸的切除;②信號肽的切除;③氨基酸的修飾;④二硫鍵的形成;⑤糖鏈的連接;⑥蛋白質(zhì)的剪切;⑦輔基的附加;⑧多肽鏈的正確折疊。詳見15.3。16物質(zhì)代謝的調(diào)理控制

1.哪些化合物是聯(lián)系糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸代謝的重要物質(zhì)?為什么?解答:詳見本章引言和圖16-1,并結(jié)合各代謝章節(jié)的內(nèi)容加以總結(jié)歸納。2.舉例說明代謝途徑的反饋調(diào)理。解答:反饋調(diào)理主要是指在酶促反應(yīng)系統(tǒng)中的最終產(chǎn)物對起始步驟的酶活性的調(diào)理作用。凡最終產(chǎn)物抑制起始步驟酶的活性的作用稱為負反饋或反饋抑制;凡最終產(chǎn)物激活起始步驟酶的活性的作用稱為正反饋。詳見16.1.1.1\反饋調(diào)理\。3.何謂酶活性的共價修飾調(diào)理。

解答:共價調(diào)理酶可通過其他酶對其肽鏈上某些基團進行共價修飾,使酶處于活性與無活性的互變狀態(tài),從而調(diào)理酶的活性,這種調(diào)理方式稱為共價修飾調(diào)理作用。目前已知有6種類型的可逆共價修飾作用,(1)磷酸化/脫磷酸化;(2)乙?;撘阴;?;(3)腺苷?;撓佘挣;?;(4)尿苷?;撃蜍挣;?5)甲基化/脫甲基化;(6)S-S/SH相互轉(zhuǎn)變。詳見16.1.1.3\共價修飾調(diào)理作用\。

4.何謂操縱子?根據(jù)操縱子模型說明酶合成的誘導(dǎo)和阻遏。

解答:所謂操縱子是原核細胞基因表達的協(xié)調(diào)單位。操縱子由一組在功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因和控制位點所組成??刂莆稽c包括啟動基因和操縱基因。此控制位點可受調(diào)理基因產(chǎn)物的調(diào)理。詳見16.1.2.1\原核生物基因表達調(diào)理乳糖操縱子和色氨酸操縱子模型\。5.說明衰減子的作用機制和生物學(xué)意義。

解答:色氨酸合成途徑中除了阻遏蛋白對操縱基因的阻遏調(diào)理外,還存在色氨酸操縱子

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