消毒與滅菌遺傳與變異

消毒與滅菌遺傳與變異第1頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一1、名詞解釋：消毒、滅菌、抑菌、防腐、無菌2、了解常用的物理、化學消毒方法。

本章要點第2頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一根據(jù)作用的對象、殺滅的程度：消毒、滅菌、抑菌、防腐、無菌第3頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一消毒disinfection

殺死物體上病原微生物的方法（芽胞及非病原微生物不一定能殺死）。（非活組織）

滅菌sterilization

殺死物體上所有微生物的方法（包括所有細菌繁殖體及芽胞）。消毒滅菌概念抑菌bacteriostasis

抑制細菌在體內、外生長的方法(一般用于活組織）第4頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一●

防腐

antisepsis

防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法。（非活組織）有苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鉀、丙酸鈣●無菌asepsis

不含活菌。防止細菌進入機體或物品的技術，稱無菌操作。第5頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第一節(jié)物理消毒滅菌法一、常用方法1、熱力法（干熱、濕熱）2、輻射消毒（紫外線、電離幅射、微波）3、濾過除菌（除菌濾器、適用物品）4、超聲波（機制：裂解細菌，主要用于粉碎細胞、提取抗原）5、干燥與低溫抑菌

第6頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一

熱力滅菌法

一、物理消毒滅菌法高溫殺滅細菌焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼----直接用火焰滅菌方法干烤----加熱160-180℃2h干熱滅菌法第7頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一濕熱滅菌法加壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃20-30mim煮沸消毒法水煮100℃5mim(繁殖體)-2h(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法水蒸汽100℃15-30mim(繁殖體)反復多次流動蒸汽間歇加熱滅菌較低的溫度（61℃30mim/71℃30s）殺滅致病菌第8頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效果好原因1、濕熱中細菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱大3、濕熱的蒸汽有潛熱第9頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一輻射殺菌法

紫外線殺菌機理：波長240-300nm的紫外線具有殺菌作用,其中260-266nm殺菌作用最強干擾DNA的復制與轉錄紫外線穿透力較弱不耐熱物品的表面消毒特點：應用范圍：空氣消毒手術室、傳染病房、細菌實驗室

第10頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一殺菌機理：應用范圍：電離輻射包括高速電子、X射線和γ射線產生游離基,破壞DNA。一次性醫(yī)用塑料制品的消毒食品的消毒-不破壞其營養(yǎng)成分第11頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一濾過除菌法用物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌除去,以達到除菌目的濾菌器含有微細小孔<0.22μm,只允許液體或氣體及孔徑<0.22μm的顆粒通過，細菌不能濾過適用范圍血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌第12頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一不銹鋼濾器針式濾器第13頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第14頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第二節(jié)化學消毒滅菌法1、化學消毒劑的殺菌機制

2、常用消毒劑

3、影響消毒劑作用的因素第15頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一一、化學消毒劑作用機制1、促進菌體蛋白質變性凝固（酚、醇、醛、酸堿類）2、干擾細菌酶系統(tǒng)和代謝

（氧化劑、重金屬鹽類）

3、損傷細菌細胞膜，增加其通透性（表面活性劑、脂溶劑）

第16頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第17頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一70%~75%高錳酸鉀0.1%2%0.1%0.2%~0.3%2%~2.5%2%~4%第18頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第19頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一影響消毒劑作用的因素消毒劑種類濃度時間細菌菌齡種類

環(huán)境酸堿度有機物溫度第20頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一本章小結消毒滅菌抑菌防腐無菌高壓蒸汽滅菌最有效第21頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第四章遺傳與變異變異：親代與子代、子代與子代之間性狀出現(xiàn)差異第22頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一2023/4/1223變異：親代與子代、子代與子代之間性狀出現(xiàn)差異。遺傳：親代的生物學性狀相對穩(wěn)定地傳給子代，使物種得以延續(xù)。形態(tài)結構、生長代謝、致病性、耐藥性、抗原性等。遺傳性變異：非遺傳性變異：基因結構改變表型改變第23頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一名詞解釋

轉化接合轉導溶原性轉換本章要點第24頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一一、細菌變異的現(xiàn)象二、細菌遺傳變異的物質基礎三、細菌變異的機制主要內容

轉化接合轉導溶原性轉換第25頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第二節(jié)細菌遺傳變異一、細菌變異的現(xiàn)象

1.形態(tài)結構變異

L型菌；鞭毛（H-O變異）、莢膜、芽胞變異等

2.毒力變異

毒力增強-白喉棒狀桿菌

；毒力減弱-疫苗制備(BCG)

3.耐藥性變異

臨床治療中嚴重問題痢疾志賀菌–鏈霉素依賴菌

4.菌落變異從光滑型（S）

粗糙型（R）第26頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一細胞壁缺陷型——細菌L型細菌L型的命名細菌L型培養(yǎng)后菌落

特征（圖）細菌L型的臨床意義細菌L型菌落：A細菌型菌落

B荷包蛋樣L型菌落

C顆粒型L型菌落

D絲狀型L型菌落第27頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一二、細菌變異的物質基礎

染色體質粒轉座子第28頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一（一）細菌染色體

細菌染色體為一環(huán)狀雙股DNA鏈，呈超螺旋形式纏繞成團，構成核質（染色體長度約為菌體總長1000倍）。內含細菌主要的遺傳信息。目前，已完成約80種細菌全基因序列測定，對深入研究細菌致病機制及進化有重要意義。二細菌遺傳的物質基礎第29頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一（二）質粒plasmid概念：質粒為細菌染色體外的遺傳物質，環(huán)狀雙股DNA。質粒攜帶有遺傳信息，控制某些特定的遺傳性狀，可獨立復制，與細菌的遺傳變異有關。第30頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一種類：致育質粒/F質粒-(fertilityplasmid)F質粒，產生性菌毛---F+耐藥質粒-(resistanceplasmid)R質粒毒力質粒-(virulenceplasmid)Vi質粒，產生相應毒素細菌素質粒-Col質粒，產生細菌素代謝質粒-編碼產生相關酶，如脲酶、枸櫞酸鹽利用酶等第31頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一特征：①自我復制-可與染色體同步/不同步②決定細菌某些生物學性狀③可自行丟失及消除，不影響細菌存活④可轉移性-可以各種方式轉移到其它菌⑤相容性-幾種質?？纱嬖谟谕痪w內，稱相容性質粒第32頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一三、轉座因子概念：是一類在細菌染色體、質粒上可自行移動的特異性的獨立的DNA片段。種類：1.插入序列2.轉座子3.整合子第33頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一意義：①改變遺傳物質的核苷酸序列②影響插入點附近基因的表達（失活）均能造成細菌性狀的變異第34頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一轉座第35頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一噬菌體感染細菌的一類病毒第36頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一毒性噬菌體：殺死細菌溫和噬菌體/前噬菌體：其基因整合到細菌基因組中第37頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一噬菌體生活周期前噬菌體形成第38頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一三、細菌變異的機制基因突變與修復基因的轉移與重組第39頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一（一）基因突變概念突變mutation

指細菌遺傳物質的結構突然發(fā)生的穩(wěn)定性的改變，可遺傳子代。根據(jù)涉及基因的多少分為點突變及染色體畸變二種基因突變第40頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一（二）基因突變的規(guī)律：1、突變率低2、自發(fā)性和隨機性基因突變第41頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一3、回復突變野生型（自然環(huán)境下的表型株）突變型（發(fā)生了基因突變的菌株）

突變回復突變野生型突變型第42頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一

基因的轉移與重組二個細菌間部分遺傳基因，可以發(fā)生轉移（genetransfer)和重組(recombination)，使受體菌獲得新的遺傳性狀。細菌基因轉移和重組的方式：轉化（transformation)接合(conjugation)轉導(transduction)溶原性轉換(lysogenicconversion)原生質體融合（protoplastfusion)基因的來源與載體第43頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一（一）轉化transformation概念

供體菌游離的DNA片段直接被受體菌攝取，使受體菌獲得新的性狀

小鼠體內肺炎球菌轉化經典試驗第44頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一有莢膜肺炎鏈球菌（活菌）IIIS無莢膜肺炎鏈球菌（活菌）IIR有莢膜肺炎鏈球菌（死菌）IIISIIR活菌+IIIS死菌或IIR活菌+提取的IIISDNA分離出IIIS型有莢膜的活菌小鼠體內肺炎鏈球菌轉化試驗Griffith(1928)分離出IIIS第45頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一轉化的DNA片段稱轉化因子轉化因子分子量小，不超過10~20個基因，才可能被受體菌攝取攝入的供體菌DNA片段與受體菌相應DNA重組

重組菌；重組菌繁殖時，就可形成重組突變株，獲得供體菌的某些性狀。第46頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第47頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一（二）接合conjugation概念

供體菌通過性菌毛將遺傳物質（質粒）傳遞給受體菌（通過接合傳遞的質粒有F質粒、R質粒、Col質粒、毒力質粒）

第48頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一細菌接合示意圖掃描電鏡15000×第49頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一接合★F因子的傳遞—

F因子經接合傳遞后在受體菌中可有三種存在方式：第50頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一①F質粒在受體菌中單獨存在，使F-

菌轉變?yōu)镕+

菌，長出性菌毛。第51頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第52頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一②F質粒經接合傳遞后,與染色體重組,整合后的細菌能高效地轉移染色體上的基因，故稱高頻重組株

highfrequencyrecombinant,Hfr。

Hfr的細菌，基染色體上帶有F質粒，因此，也可產生性菌毛

第53頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第54頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一形成高頻重組株：F質粒與細菌染色體整合，并使細菌長出性菌毛高頻重組株Hfr第55頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一③Hfr中的F質粒有時也可從Hfr中脫離下來，又形成了質粒。脫離下來的F質粒上可以帶有染色體上鄰近的一些基因，這種質粒稱為F’質粒

第56頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一F因子轉移與復制①形成高頻重組株②HfrHfrHfr③形成F’質粒F’從Hfr上脫離的F’第57頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一因此，帶有F質粒、Hfr、F’質粒的細菌均是F+陽性菌，有性菌毛，可與F-

菌接合第58頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一★R質粒的傳遞

目前，臨床上多重耐藥菌株的出現(xiàn)與R質粒通過接合傳遞密切有關。

R質粒組成：

①耐藥傳遞因子（resistancetransferfactor,RTF)

RTF類似F因子，可編碼產生性菌毛并以接合方式轉移。

②耐藥決定因子（r決定因子）

第59頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一RTFISR決定因子Tn9Tn4Tn5Tn9耐氯霉素Tn4耐氨芐青霉素、鏈霉素等Tn5耐卡那霉素R質粒組成示意圖第60頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一第61頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一（三）轉導transduction

概念

以溫和噬菌體為載體，將供體菌的遺傳物質轉移到受體菌中，使受體菌獲得新的遺傳性狀。噬菌體種類

毒性噬菌體\溫和噬菌體(復習)

第62頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一轉導方式（普遍性轉導、局限性轉導）⒈普遍性轉導-轉導的DNA片段可以是供體菌染色體中任何部分。第63頁，共70頁，2023年，2月20日，星期一普遍性轉導示意圖整合成功完全轉導整合失敗流產轉導噬菌體DNA細菌DNA細菌被裂解感染新的細菌供體菌DN