生物技術(shù)實(shí)踐-2021屆高三生物模擬試卷分類匯編（12月刊）

專題19生物技術(shù)實(shí)踐

29.(安徽省池州市一中2020-2021學(xué)年高三上學(xué)期9月月考生物試題)某研究小組想利用細(xì)菌

快速繁殖的特點(diǎn)處理廢棄的淀粉殘?jiān)?，他們從土壤中篩選出淀粉透明圈分解菌，并用稀碘液

處理培養(yǎng)平板，對(duì)其分解淀粉的能力進(jìn)行研究，平板上菌落情況和測(cè)量數(shù)據(jù)如下圖、表所示。

請(qǐng)回答下列問題:

透明圈

菌落直徑C透明圈直徑H

菌種H/C

(mm)(mm)

細(xì)菌I5.1122.4

細(xì)菌n8.113.01.6

細(xì)菌ni8.20

(1)要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用培養(yǎng)基應(yīng)以為唯一碳源，此培養(yǎng)基稱作

(填用途)培養(yǎng)基。

(2)要想將土壤稀釋液均勻地涂在平板上，應(yīng)該使用法進(jìn)行接種。該方法還常

用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，但往往統(tǒng)計(jì)值比實(shí)際值偏低，原因是。一般選擇

菌落數(shù)在_________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

(3)在從土壤中分離目標(biāo)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上三種細(xì)菌都能生長并形成菌落(如上圖)。如

果要得到分解淀粉能力最強(qiáng)的目標(biāo)菌，應(yīng)選擇細(xì)菌(填“i”“II”或“ni”)的菌落進(jìn)一

步純化，選擇的依據(jù)是。分離得到該菌后，將其接種到固體斜面培養(yǎng)基上進(jìn)行

臨時(shí)保存，該保存方法的缺點(diǎn)是。

【答案】(1).淀粉(2).選擇(3).稀釋涂布平板(4),當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在

一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落(5).30-300(6).I(7).細(xì)菌I的H/C值

(周圍透明圈直徑與菌落直徑的比值)最大，說明其分解淀粉能力最強(qiáng)(8).保存時(shí)間不

長，菌種易被污染或產(chǎn)生變異

【解析】

【分析】

測(cè)定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目，可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)（或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)）法對(duì)培養(yǎng)液中的

微生物直接計(jì)數(shù)，也可用稀釋涂布平板法將微生物接種于滅菌后的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段

時(shí)間后，通過計(jì)數(shù)菌落數(shù)目計(jì)算培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目。由于采用第一種方法計(jì)數(shù)時(shí)不能剔

除死菌，采用第二種方法計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)

菌落，所以笫一種方法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目比實(shí)際活菌數(shù)目高，第二種方法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目比實(shí)際活菌數(shù)

目低。

題圖分析：圖示接種方法為稀釋涂布平板法，透明圈越大分解淀粉的能力更強(qiáng)。

【詳解】（1）為篩選淀粉分解菌，培養(yǎng)基中應(yīng)以淀粉為唯一碳源，按用途來分，該培養(yǎng)基屬

于選擇培養(yǎng)基。

（2）要想將土壤稀釋液均勻地涂在平板上，應(yīng)該使用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。該方法還

可用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，在統(tǒng)計(jì)過程中，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上

觀察到的只是一個(gè)菌落的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此統(tǒng)計(jì)的數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目偏低。

（3）由于淀粉分解菌能產(chǎn)生淀粉酶，從而分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)碘液處理，會(huì)出現(xiàn)以菌落

為中心的透明圈，圖中透明圈的大小與淀粉分解菌的數(shù)量和活性有關(guān)，圖中細(xì)菌I菌落最小,

而其透明圈的直徑與菌落直徑（H/C）的比值最大，說明該菌種降解淀粉能力最強(qiáng)，分離得

到該菌后，將其接種到固體斜面培養(yǎng)基上進(jìn)行臨時(shí)保存，該保存方法的缺點(diǎn)是保存時(shí)間不長,

菌種易被污染或產(chǎn)生變異。若要長期保存需要用到甘油管藏法。

【點(diǎn)睛】熟知微生物分離、純化的方法是解答本題的關(guān)鍵，熟知稀釋涂布平板法的應(yīng)用及其

計(jì)數(shù)的原理是解答本題的另一關(guān)鍵。

30.（安徽省池州市一中2020-2021學(xué)年高三上學(xué)期9月月考生物試題）下面是幾種傳統(tǒng)發(fā)酵技

術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐上的應(yīng)用

（1）藍(lán)莓果實(shí)中富含多種營養(yǎng)成分，具有保護(hù)視力、防止腦神經(jīng)老化、強(qiáng)心、抗癌、軟化

血管、增強(qiáng)機(jī)體免疫等功能。下面是獲取藍(lán)莓酒和藍(lán)莓醋的流程。

挑選一*與果膠酶混合-果汁

?ft??將f沖洗f榨汁一

藍(lán)?！咕凭l(fā)醉一醋酸發(fā)酵

4I

果酒果醋

釀制藍(lán)莓酒時(shí)，一般要先通氣的目的是o通常不需要對(duì)藍(lán)莓進(jìn)行嚴(yán)格的消

毒處理，是因?yàn)?。為鑒定藍(lán)莓果醋是否釀制成功，除可以通過觀察菌膜、

嘗、嗅之外，還可以通過檢測(cè)作進(jìn)一步的鑒定。

(2)《舌尖上的中國》一經(jīng)播出受到廣大觀眾的熱捧，其中介紹的腐乳是我國獨(dú)特的傳統(tǒng)發(fā)

酵食品。

豆腐

抱豆腐坯

擴(kuò)

蠹

毛

子

大

面

懸

斜

一

一

培一培一一裝_后一成

浮養(yǎng)與2瓶熟品

種

菌

養(yǎng)

液

當(dāng)豆腐上長出毛霉后，對(duì)豆腐要進(jìn)行A處理，是指.。腐乳制作的后期要加入酒和多

種香辛料配制的鹵湯，其中酒的含量一般控制左右，如果含量過高則會(huì)

(3)泡菜發(fā)酵過程中應(yīng)定期測(cè)定亞硝酸鹽的含量，檢測(cè)亞硝酸鹽含量的方法是

。在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與發(fā)生重氮化反應(yīng)，與N-1-蔡基乙

二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

【答案】(1).讓酵母菌在有氧條件下大量繁殖(2).在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵

母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。(3).發(fā)

酹前后的ph(4).加鹽腌制(5).12%(6).延長腐乳成熟期，影響口味(7).比

色法(8).對(duì)氨基苯磺酸

【解析】

【分析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)

氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變

為乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3、泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳

酸。

4,多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛

霉。霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將

脂肪水解為甘油和脂肪酸。

【詳解】(I)制作果酒時(shí)，一般要先通氣后密封，其中先通氣的目的是讓酵母菌在有氧條件

下大量繁殖。由于在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中絕大多數(shù)微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境而受抑制，

因此通常不需要對(duì)藍(lán)莓進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理。為鑒定藍(lán)莓果醋是否釀制成功，除可以通過觀

察菌膜、嘗、嗅之外，還可以通過檢測(cè)發(fā)酵前后的pH作進(jìn)一步的鑒定。

（2）當(dāng)豆腐上長出毛霉后，對(duì)豆腐要進(jìn)行加鹽腌制處理。酒精濃度過高則腐乳的成熟時(shí)間

會(huì)延長；酒精濃度過低，不足以抑制微生物的生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。因此腐乳制作的后

期酒的含量一般控制在12%左右。

（3）泡菜發(fā)酵過程中應(yīng)定期檢測(cè)亞硝酸鹽含量的方法是比色法。在鹽酸酸化條件下，亞硝

酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，與N-1-蔡基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

【點(diǎn)睛】本題考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較

多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)操作步驟等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意

積累。

9.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）用稀釋涂布平板法測(cè)定

同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正

確的是（）

A.涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230

B.涂布了兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和260,取平均值238

C.涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212和256,取平均值163

D.涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和250,取平均值233

【答案】D

【解析】

【分析】

檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)，常用的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法。

【詳解】用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要

涂布3個(gè)平板，確定對(duì)照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30?300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通

過計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)。

綜上所述，ABC不符合題意，D符合題意。

故選D。

【點(diǎn)睛】

10.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別

采用高壓蒸氣、酒精、火焰灼燒幾種不同處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌

A.接種環(huán)、手、培養(yǎng)基B.高壓鍋、手、接種環(huán)

C.培養(yǎng)基、手、接種環(huán)D.接種環(huán)、手、高壓鍋

【答案】C

【解析】

【分析】

消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生

物。消毒方法有煮沸消毒法和巴氏消毒法，此外也使用化學(xué)試劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙

手等。滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽抱和抱子。滅菌方

法有灼燒滅菌（接種工具：接種環(huán)、接種針等）、干熱滅菌（如玻璃器皿）和高壓蒸汽滅菌

（培養(yǎng)基）。

【詳解】A、接種環(huán)應(yīng)該進(jìn)行灼燒滅菌，手應(yīng)該用酒精消毒，培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,

A錯(cuò)誤；

B、高壓鍋是滅菌工具，手應(yīng)該用酒精消毒，接種環(huán)應(yīng)該進(jìn)行灼燒滅菌，B錯(cuò)誤；

C、培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，手應(yīng)該用酒精消毒，接種環(huán)應(yīng)該進(jìn)行灼燒滅菌，C正確;

D、接種環(huán)應(yīng)該進(jìn)行灼燒滅菌，手應(yīng)該用酒精消毒，高壓鍋是滅菌工具，D錯(cuò)誤。

故選C。

32.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種

環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是（）

①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線消毒⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法

A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥

C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤

【答案】A

【解析】

【分析】

使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽抱和抱子的過程稱為滅菌，常用的

方法有灼燒滅菌（主要適用于金屬接種工具）、干熱滅菌（主要適用于需要保持干燥的玻璃

器具）和高壓蒸汽滅菌（主要適用于培養(yǎng)基的滅菌）；消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方

法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、

紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。

【詳解】培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用

灼燒滅菌達(dá)到迅速徹底的滅菌效果；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦

拭雙手；空氣可用紫外線消毒；為不破壞其營養(yǎng)成分，對(duì)牛奶可采用巴氏消毒法，即A正

確。

故選A。

【點(diǎn)睛】

33.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）分離土壤中分解尿素

的細(xì)菌，對(duì)培養(yǎng)基的要求是（）

①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸

鹽⑧不加硝酸鹽

A.①③⑤⑧B.②④⑥⑧C.①③⑤⑦D.①?⑥

⑦

【答案】A

【解析】

【分析】

分離土壤中分解尿素的細(xì)菌的原理是在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上，只有能分解尿素的細(xì)

菌才能以尿素為氮源生長繁殖，不能分解尿素的細(xì)菌因缺乏氮源而無法生長繁殖。

【詳解】要分離分解尿素的細(xì)菌應(yīng)以尿素為唯一氮源，①正確、②錯(cuò)誤；分離土壤中分解尿

素的細(xì)菌用固體培養(yǎng)基需加入瓊脂，③正確，④錯(cuò)誤；培養(yǎng)基中需要加碳源即葡萄糖，⑤正

確，⑥錯(cuò)誤；不需要氮源，故不加硝酸鹽，⑦錯(cuò)誤，⑧正確；故符合題意的有①③⑤⑧，A

正確。

34.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）下列有關(guān)剛果紅染色

法的敘述，不正確的是

A.剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入

B.剛果紅可以在菌落形成后加入

C.剛果紅在菌落形成前倒平板時(shí)加入，加入的剛果紅不需要滅菌

D.在菌落形成后加入剛果紅時(shí)，剛果紅不需要滅菌

【答案】C

【解析】

【分析】

【詳解】AB、剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入，也可以在菌落形成后加入，A、

B項(xiàng)正確；

C、若在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入剛果紅，則所加剛果紅要進(jìn)行滅菌，以防雜菌的侵入,

影響纖維素分解菌菌落的形成，C項(xiàng)錯(cuò)誤；

D、若在菌落形成后加入剛果紅，則不需要滅菌，D項(xiàng)正確。

故選C

【點(diǎn)睛】

35.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）在玫瑰精油和橘皮精

油提取過程中，正確的是（）

A.玫瑰精油和橘皮精油都可用蒸儲(chǔ)、壓榨和萃取的方法提取

B.分離出的玫瑰精油油層還會(huì)含有一定的水分，可加入無水Na2SC）4吸水

C.新鮮的橘皮中含有大量的果蠟、果膠等，為了提高出油率，需用CaCCh水溶液浸泡

D.玫瑰精油和橘皮精油都有很強(qiáng)的揮發(fā)性，易溶于有機(jī)溶劑，其成分都是菇類化合物

【答案】B

【解析】

【詳解】A、橘皮易焦糊適宜用壓榨法提取，不能用蒸儲(chǔ)法提取，故A錯(cuò)誤；

B、提取玫瑰精油過程中，向油水混合物中加入NaCl以加速油水分層，分離的油層中還含

有一定的水分，需加入無水Na2s04將水除去，故B正確：

C、新鮮的橘皮中含有大量的果蠟、果膠等，如果直接壓榨，出油率低，為了提高出油率，

需用石灰水溶液浸泡，故C錯(cuò)誤；

D、大部分植物芳香油的主要成分是菇類化合物及其衍生物，但橘皮精油的主要成分是檸檬

烯,故D錯(cuò)誤.

故選Bo

36.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）關(guān)于固定化酶和一般

酶制劑在應(yīng)用效果上的說法，錯(cuò)誤的是（）

A.固定化酶生物活性強(qiáng)，可長久使用

B.一般酶制劑應(yīng)用后和產(chǎn)物混在一起，產(chǎn)物的純度不高

C.-一般酶制劑參加反應(yīng)后不能重復(fù)利用

D.固定化酶可以反復(fù)利用，降低生產(chǎn)成本，提高產(chǎn)量和質(zhì)量

【答案】A

【解析】

【分析】

【詳解】A、固定化酶與普通酷制劑相比，在活性上沒有多大差別，固定化醐的成分也是蛋白

質(zhì)，蛋白質(zhì)經(jīng)過一定的時(shí)間后會(huì)變性失活,所以固定化酶一般能使用半年，不可能長久使用，所

以A錯(cuò)誤：

B、一般酶制劑應(yīng)用后和產(chǎn)物混在一起，產(chǎn)物的純度不高，B正確；

C、一般酶制劑參加反應(yīng)后不能重復(fù)利用，C正確；

D、固定化前可以反復(fù)利用，降低生產(chǎn)成本，提高產(chǎn)量和質(zhì)量，所以D正確。

故選A

【點(diǎn)睛】

37.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）探究溫度對(duì)果膠酶活性

影響的實(shí)驗(yàn)中，得到如下實(shí)驗(yàn)結(jié)果。據(jù)此分析不正確的是（）

溫度

3035404550556065707580

（℃）

果汁量

3.54.68.610.912.311.710.15.43.94.85.6

（ml）

A.實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)先將蘋果泥和果膠酶分別調(diào)節(jié)到對(duì)應(yīng)溫度后再混合

B.為了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性，各組混合處理時(shí)間和過濾果汁時(shí)間均應(yīng)相同

C.應(yīng)在50?55℃之間設(shè)置更細(xì)溫度梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探究果膠酶最適溫度

D.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明高溫能使果膠酶失活，但高溫也可能促進(jìn)果膠分解

【答案】C

【解析】

【分析】

酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的具有生物催化能力的有機(jī)物，大多數(shù)是蛋白質(zhì)，少數(shù)是RNA；酶的催化

具有高效性（酶的催化效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于無機(jī)催化劑）、專一性（一種酶只能催化一種或一類化

學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行）、需要適宜的溫度和pH值（在最適條件下，酶的催化活性是最高的，低溫

可以抑制酶的活性，隨著溫度升高，酶的活性可以逐漸恢復(fù)，高溫、過酸、過堿可以使酶的

空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，使酶永久性的失活），據(jù)此分析解答。

【詳解】A、實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)先將蘋果泥和果膠酶分別調(diào)節(jié)到對(duì)應(yīng)溫度后再混合，A正確；

B、為了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性和控制單一變量，各組混合處理時(shí)間和過濾果汁時(shí)間均應(yīng)相同，

B正確；

C、實(shí)驗(yàn)中的溫度梯度跨度較大，要想確定最適溫度，需要設(shè)置更細(xì)溫度梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分

析數(shù)據(jù)，應(yīng)該在45?55℃之間設(shè)置更細(xì)溫度梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探究果膠酶的最適溫度，C錯(cuò)誤;

D、高溫可以使酶失活，由表格數(shù)據(jù)可以看出，高溫也可能促進(jìn)果膠分解，D正確。

故選Co

【點(diǎn)睛】

38.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）用平板劃線法或稀釋

涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)（）

①可以用相同的培養(yǎng)基②都需要使用接種針進(jìn)行接種③都需要在火焰旁進(jìn)行接種④

都可以用來計(jì)數(shù)活菌

A.①②B.③④C.①③D.②④

【答案】C

【解析】

【分析】

板劃線法或稀釋涂布平板法是純化微生物常用的接種與培養(yǎng)方法，稀釋涂布平板法可以用來

進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，而平板劃線法不能。

【詳解】①平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基，可以使用相同的培養(yǎng)基，①正

確；

②平板劃線法采用接種針進(jìn)行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作，②錯(cuò)誤；

③純化時(shí)，要進(jìn)行無菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基，③正確;

④平板劃線法一般用于分離而不是計(jì)數(shù)，④錯(cuò)誤。

綜上①③正確。

故選C。

39.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）如圖是微生物平板劃

線示意圖，劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5,下列操作方法正確的是（）

A.操作前要將接種環(huán)放在火焰旁滅菌

B.劃線操作須在火焰上進(jìn)行

C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌

D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌

【答案】D

【解析】

【分析】

平板劃線的操作的基本步驟是：

1.右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過

火焰，將以冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口過火焰丙塞上棉塞；

2左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處揩接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至

五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面；

3.燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂

溶化，表示未涼，稍等再試），從第?區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復(fù)以上操作,

在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連；

4.將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

【詳解】A、進(jìn)行平板劃線操作之前，用將接種環(huán)在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒火菌，A錯(cuò)誤；

B、平板劃線操作應(yīng)在火焰旁進(jìn)行，不能在火焰上進(jìn)行，B錯(cuò)誤；

C、由題圖可知，5區(qū)域是最后一個(gè)區(qū)域，有可能在5區(qū)域獲得所需要的菌落，在4區(qū)域也

有可能得到所需要的菌落，C錯(cuò)誤；

D、在1、2、3、4區(qū)域中劃線前都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，保證每次劃線的菌種來自上

一區(qū)域的末端，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】

40.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）通過實(shí)驗(yàn)測(cè)定土壤中的

細(xì)菌數(shù)量，下列與此操作有關(guān)的敘述中，不正確的是（）

A.用蒸饋水配制牛肉膏蛋白族培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板

B.取104、105倍的土壤稀釋液0.1mL,分別涂布于各組平板上

C.將培養(yǎng)皿倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24?48小時(shí)

D.選擇菌落數(shù)在300個(gè)以上的培養(yǎng)皿進(jìn)行計(jì)數(shù)

【答案】D

【解析】

【分析】

用稀釋涂布平板法進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)的方法,用蒸鐳水配置培養(yǎng)基，常用高壓蒸汽滅菌法滅菌后，

取IO,1()5、io。倍的土壤稀釋液和無菌水各o」mL,分別涂布于各組平板上，將實(shí)驗(yàn)組和

對(duì)照組放置適宜條件培養(yǎng)，在確定對(duì)照組無菌后，選擇菌落在30-300的一組平板為代表進(jìn)

行計(jì)數(shù)。

【詳解】A、用蒸儲(chǔ)水配制牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌即高壓蒸汽滅菌后倒平

板，待冷卻后備用，A正確；

B、取10\105、io6倍的土壤稀釋液和無菌水各o.imL,分別涂布于各組平板上，B正確；

C、細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，要將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，防止冷凝水滴落到平板上造成污染，并置于37℃恒

溫箱中培養(yǎng)24?48小時(shí)，C正確；

D、計(jì)數(shù)時(shí)，選擇菌落數(shù)在30-300個(gè)的一組平板為代表進(jìn)行計(jì)數(shù)，而不是選擇菌落數(shù)在300

個(gè)以上的培養(yǎng)皿進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】

43.(安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題)乳糖酶能夠催化乳糖

水解為葡萄糖和半乳糖，具有重要應(yīng)用價(jià)值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下：

(1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí)，宜用作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中瓊脂的

作用是。從功能上講，這種培養(yǎng)基屬于。

(2)培養(yǎng)微生物L(fēng)前，宜采用方法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌。

(3)純化后的乳糖酶可用電泳法檢測(cè)其分子量大小。在相同條件下，帶電荷相同的蛋白質(zhì)

電泳速度越快，說明其分子量越o

【答案】(1).乳糖(2).凝固劑(3).選擇培養(yǎng)基(4).灼燒(5).小

【解析】

【分析】

選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對(duì)某理化因素抗性的原理而設(shè)計(jì)

的培養(yǎng)基。具有只允許特定的微生物生長，而同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長的功能。篩選

產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí)，宜用乳糖作為培養(yǎng)基中的唯一碳源制成選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。

電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子，如多肽、核酸

等都具有可解離的基團(tuán)，在一定的pH下，這些基團(tuán)會(huì)帶上正電或負(fù)電。在電場(chǎng)的作用下，

這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)。電泳利用了待分離樣品中各種分子帶

電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)

現(xiàn)樣品中各種分子的分離。

【詳解】（1）已知乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)

時(shí)，宜用乳糖作為培養(yǎng)基中的唯一碳源，培養(yǎng)基中瓊脂的作用是凝固劑，從功能上講，這種

培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）為了避免雜菌污染，在培養(yǎng)微生物前，對(duì)接種環(huán)等接種工具應(yīng)采用灼燒滅菌。

（3）用電泳法純化乳糖醉時(shí)，若在相同條件下分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子量越小,

電泳速度越快。

【點(diǎn)睛】熟知微生物的篩選原理是解答本題的關(guān)鍵，掌握電泳的原理是解答本題的另一關(guān)鍵,

正確辨析題中的實(shí)驗(yàn)流程是解答本題的前提。

44.（安徽省六安市城南中學(xué)2020-2021學(xué)年高三第一次月考生物試題）工業(yè)生產(chǎn)果汁時(shí)，常常

利用果膠酶破除果肉細(xì)胞的細(xì)胞壁以提高出汁率。為研究溫度對(duì)果膠酶活性的影響，某學(xué)生

②將步驟①處理后果膠酶和蘋果泥混合，再次在10℃水浴中恒溫處理lOmin（如圖中B）。

③將步驟②處理后的混合物過濾，收集濾液，測(cè)量果汁量（如圖中C）。

在不同溫度條件下重復(fù)以上實(shí)驗(yàn)步驟，并記錄果汁量，結(jié)果如下表：

溫度/℃1020304050607080

出汁量/mL813152515121110

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)分析并回答下列問題：

(1)果膠酶能破除細(xì)胞壁，是因?yàn)楣z酶可以促進(jìn)細(xì)胞壁中的水解。

(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在上述8組實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)溫度為時(shí)果汁量最多，此時(shí)果膠酶的活性

o當(dāng)溫度再升高時(shí)，果汁量降低，說明。

(3)實(shí)驗(yàn)步驟①的目的是o

【答案】(1).果膠(2).40C(3).最強(qiáng)(4).溫度升高，降低了酶的活性

(5).使果膠酶和蘋果泥處于同一溫度條件

【解析】

【分析】

1.果膠酶是分解果膠的一類酶總稱，包括半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶。

2.影響酶促反應(yīng)速率的因素主要有：溫度、pH、底物濃度和酶濃度。

(1)溫度(pH)能影響酶促反應(yīng)速率，在最適溫度(pH)前，隨著溫度(pH)的升高，

酶活性增強(qiáng)，酶促反應(yīng)速率加快；到達(dá)最適溫度(pH)時(shí)，酶活性最強(qiáng)，酶促反應(yīng)速率最

快；超過最適溫度(pH)后，隨著溫度(pH)的升高，酶活性降低，酶促反應(yīng)速率減慢。

另外低溫酶不會(huì)變性失活，但高溫、pH過高或過低都會(huì)使酶變性失活。

(2)底物濃度能影響酶促反應(yīng)速率，在一定范圍內(nèi)，隨著底物濃度的升高，醐促反應(yīng)速率

逐漸加快，但由于酶濃度的限制，酶促反應(yīng)速率達(dá)到最大值后保持相對(duì)穩(wěn)定。

(3)酶濃度能影響酶促反應(yīng)速率，在底物充足時(shí)，隨著酶濃度的升高，酶促反應(yīng)速率逐漸

加快。

【詳解】(I)果膠酶可將細(xì)胞壁中的果膠分解成半乳糖醛酸，因此果膠前能破除細(xì)胞壁。

(2)根據(jù)表中數(shù)據(jù)可知，溫度為40℃時(shí)果汁量最多，說明此時(shí)果膠酶的活性最大。當(dāng)溫度

再升高時(shí)，果汁量降低，說明溫度升高，降低/酶的活性。

(3)實(shí)驗(yàn)步驟①的目的是使果膠酶和蘋果泥處于同一溫度條件，避免混合過程中引起溫度

的變化。

【點(diǎn)睛】熟知果膠酶的化學(xué)本質(zhì)及其作用是解答本題的關(guān)鍵，能正確分析題中的關(guān)于溫度對(duì)

果膠酶活性影響的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是解答本題的另一關(guān)鍵。

30.(甘肅省白銀市會(huì)寧縣一中2020-2021學(xué)年高三上學(xué)期第三次月考生物試題)在20世紀(jì)

50年代，酶已經(jīng)大規(guī)模地應(yīng)用于各個(gè)生產(chǎn)領(lǐng)域，到70年代又出現(xiàn)了固定化酶與固定化細(xì)胞

的技術(shù)。

（1）在實(shí)際生產(chǎn)中，固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是。與固定化酶技術(shù)相

比，固定化細(xì)胞固定的是。

（2）制備固定化酵母細(xì)胞，常用的包埋材料是一，使用了如圖所示的方法［］一（填

出號(hào)碼與名稱）。

①②③

（3）制作固定化酵母細(xì)胞時(shí)，充分混合均勻的酵母細(xì)胞溶液可在飽和一溶液中形成凝膠

珠。部分同學(xué)實(shí)驗(yàn)制得的凝膠體不是圓形或橢圓形，其主要原因是。

（4）制備固定化酶不宜用包埋法的原因。

【答案】（1）.酶既能與反應(yīng)物接觸，又容易與產(chǎn)物分離，固定在載體上的酶能反復(fù)利用

多酶系統(tǒng)（或一系列酶、多種醐）（2）.海藻酸鈉（3）.③（4）.包埋法（5）.CaCb

（6）.海藻酸鈉溶液濃度過高（或針筒口離液面過近，高度不夠）（7）.酶分子較小，容易

從包埋材料中漏出

【解析】

【分析】

固定化細(xì)胞的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，制作過程中的注意事項(xiàng)：（1）酵母細(xì)胞的活化。（2）配置氯化鈣

溶液：要用蒸儲(chǔ)水配置。（3）配制海藻酸鈉溶液：小火、間斷加熱、定容，如果加熱太快，

海藻酸鈉會(huì)發(fā)生焦糊。（4）海藻酸鈉溶液與酶母細(xì)胞混合：冷卻后再混合，注意混合均勻，

不要進(jìn)入氣泡。（5）制備固定化酵母細(xì)胞：高度適宜，并勻速滴入。

【詳解】（1）固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是酶既能與反應(yīng)物接觸，又容易與產(chǎn)物分離，固定在載體

上的酶能被反復(fù)利用。與固定化酶技術(shù)相比，固定化細(xì)胞固定的是多酶系統(tǒng)。

（2）制備固定化酵母細(xì)胞，常用的包埋材料是海藻酸鈉，使用的方法是［③］包埋法。

（3）制備固定化酵母細(xì)胞時(shí)，充分混合均勻的酵母細(xì)胞溶液可在CaCb溶液中形成凝膠珠。

凝膠珠不是圓形或橢圓形的主要原因是海藻酸鈉濃度過高。

（4）因?yàn)槊阜肿雍苄?，容易從包埋材料中漏出，因此制備固定化酶不宜用包埋法?/p>

【點(diǎn)睛】本題考查固定化酵母細(xì)胞，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原

理、實(shí)驗(yàn)操作步驟、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意積累。

21..（湖南省長沙市長沙縣九中2020-2021學(xué)年高三9月月考生物試題）牛奶消毒不過關(guān)容易

攜帶細(xì)菌。根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)（GB19645—2010）規(guī)定，每亳升合格的牛奶細(xì)菌總數(shù)不能超過

50000個(gè)。某興趣小組利用恒溫水浴鍋對(duì)新鮮牛奶進(jìn)行消毒然后檢測(cè)消毒的效果，如下圖所

O

5mL生牛奶-

肉阡

牛

白陳

蛋

培

bi卷基

無由恒溫水浴鍋

試管80%15min

（1）圖中步驟①對(duì)牛奶的消毒的方法是,一般采用對(duì)牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進(jìn)

行滅菌，蛋白陳的作用有（寫兩點(diǎn)）。

（2）步驟②將牛奶進(jìn)行梯度稀釋的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培養(yǎng)基表

面形成。步驟③的接種方法是，這種方法可以用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目,

其原理是

（3）興趣小組通過步驟①?③接種了3個(gè)平板和1個(gè)未接種的平板放入恒溫培養(yǎng)箱，在適

宜的溫度條件下培養(yǎng)48h,然后統(tǒng)計(jì)出4個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是57、53、55和9。根據(jù)這

樣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果（填“能''或"不能”）判斷該興趣小組消毒后的牛奶細(xì)菌超標(biāo)，原因是

（4）如果要檢測(cè)牛奶中是否含有大腸桿菌，需要在培養(yǎng)基中加入（填物質(zhì)），觀察是

否出現(xiàn)黑色（或藍(lán)黑色）的菌落。

【答案】（1）.巴氏消毒（2）.高壓蒸汽滅菌（3）.提供碳源、氮源等（4）.單個(gè)

菌落（5）.稀釋涂布平板法（6）.當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌

落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測(cè)出樣品中大約含有

多少活菌（7）.不能（8）.因?yàn)槲唇臃N的培養(yǎng)基上有菌落出現(xiàn)，說明培養(yǎng)基滅菌不徹

底，則其它培養(yǎng)基上的菌落數(shù)不能表示牛奶中細(xì)菌數(shù)量（9）.伊紅美藍(lán)

【解析】

【分析】

（1）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、

實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、

灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。

（2）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微

生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體，即菌落。

【詳解】（1）圖中步驟①對(duì)牛奶的消毒方法是巴氏消毒，既可以殺滅牛奶中的微生物，又可

以使牛奶中的營養(yǎng)成分不會(huì)被破壞。對(duì)牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌常用高壓蒸汽滅菌法，

蛋白陳含多種有機(jī)物，能為微生物提供碳源、氮源、維生素等。

（2）步驟②將牛奶進(jìn)行梯度稀釋的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培養(yǎng)基表

面形成單個(gè)菌落。步驟③的接種方法是稀釋涂布平板法，這種方法可以用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌

的數(shù)目，其原理是樣品稀釋度足夠高時(shí)，稀釋液中的一個(gè)活菌可在平板上長出一個(gè)單菌落，

通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。

（3）由于未接種的平板上也有菌落，說明培養(yǎng)基滅菌不合格，則其它培養(yǎng)基上的菌落數(shù)不

能表示牛奶中細(xì)菌數(shù)量，故不能由上述平板上菌落數(shù)計(jì)算消毒后的牛奶細(xì)菌是否超標(biāo)。

（4）伊紅美藍(lán)可使大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，所以要檢測(cè)牛奶中是否含有大腸桿菌，需要

在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)，觀察是否出現(xiàn)黑色（或藍(lán)黑色）的菌落。

【點(diǎn)睛】本題考查無菌技術(shù)、微生物的接種方法以及微生物的計(jì)數(shù)等知識(shí)，意在考查考生對(duì)

所學(xué)知識(shí)的理解和應(yīng)用能力。

30..（湖南省長沙市長沙縣九中2020-2021學(xué)年高三上學(xué)期10月月考生物試題（）一種廣泛

使用的除草劑（含氮有機(jī)物）在土壤中不易被降解，長期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草

劑污染的土壤，可用一定方法選育能降解該除草劑的細(xì)菌（己知該除草劑在水中溶解度低，

含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）。

Q）現(xiàn)有一升土壤浸出液，為了對(duì)土壤中的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，各取0.1mL已稀釋IO,倍的

水樣分別接種到三個(gè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。接種需選擇下圖工具中的進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

計(jì)數(shù)結(jié)束記錄上述三個(gè)培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)分別為55、56、57,則每升原土壤浸出液中菌

體數(shù)為o

H

（2）在培養(yǎng)基上形成的菌落中，有透明圈菌落利用的氮源主要是一，據(jù)此可篩選出目的菌。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如右上圖顯示的A?E五種菌株中，一是最理想菌株，判斷依據(jù)是

（3）該方法能成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是選擇恰當(dāng)?shù)?統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)通常比實(shí)際數(shù)

目低的原因是。

【答案】（1）.B（2）.5.6x109（3）.該除草劑（4）.E（5）.降解圈直徑與菌落

直徑比值最大（6）.稀釋度（7）.當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察到的是一

個(gè)菌落

【解析】

【分析】

微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)培養(yǎng)時(shí)常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法可以

用于計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)的原理是平板上的一個(gè)菌落其實(shí)來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。

【詳解】（1）常用稀釋涂布平板法對(duì)土壤中細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，涂布平板法要用B涂布器進(jìn)行

操作；每升土壤浸出液中菌體數(shù)為（55+56+57）+3X）.1x103x1（）4=5.6x109個(gè)。

（2）有透明圈意味著除草劑被利用了，這種除草劑是含氮物質(zhì)，因此有透明圈的菌落利用

的氮源主要是該除草劑；圖中E菌株降解圈直徑與菌落直徑比值最大，故是最理想的菌株;

（3）用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)的關(guān)鍵是平板上的一個(gè)菌落就代表培養(yǎng)液中的一個(gè)活菌，

因此成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是選擇恰當(dāng)?shù)南♂尪?；統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)通常比實(shí)際數(shù)目低的原因

是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察到的是一個(gè)菌落。

【點(diǎn)睛】本題的難點(diǎn)在于（D中土壤浸出液中菌體數(shù)的計(jì)算，需要注意取平均值，且注意

單位之間的換算。

20.（江蘇省揚(yáng)州中學(xué)2020-2021學(xué)年高三開學(xué)檢測(cè)生物試題）生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常常遇到篩選問

題，以下篩選不能夠成功的是（）

A.用同位素示蹤技術(shù)篩選融合的原生質(zhì)體

B.用抗原一抗體雜交技術(shù)篩選特定的雜交瘤細(xì)胞

C.含高濃度鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng)愈傷組織篩選耐鹽突變體

D.利用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌

【答案】A

【解析】

【分析】

本題考查課本中多個(gè)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理和方法，需要明確各實(shí)驗(yàn)方法中是否有選擇作用，然后

分析選項(xiàng)進(jìn)行判斷。

【詳解】A、同位素示蹤技術(shù)是從外面加入與生物體內(nèi)的元素或物質(zhì)完全共同運(yùn)行的示蹤物,

用以追蹤生物體內(nèi)某兀素或某物質(zhì)的運(yùn)行或變化的一種方法，不能起篩選作用，A符合題意;

B、單克隆抗體的制備過程中，可用抗原一抗體雜交技術(shù)篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)

胞，B不符合題意；

C、在高濃度鹽的培養(yǎng)基上能生長的細(xì)胞是耐鹽的細(xì)胞，所以可用含高濃度鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng)

愈傷組織篩選耐鹽突變體，C不符合題意；

D、在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上，能產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素的細(xì)菌能正常生長和增

殖，不能產(chǎn)生纖維素酶的細(xì)菌不能存活，因此可以用于篩選纖維素分解菌，D不符合題意。

故選Ao

31.(江蘇省揚(yáng)州中學(xué)2020-2021學(xué)年高三開學(xué)檢測(cè)生物試題)下面是果酒和果醋制作的實(shí)驗(yàn)

流程和發(fā)酵裝置。根據(jù)圖示回答下列問題：

挑選陸萄—沖洗f榨汁

-*酒精發(fā)酵-*一

果酒果醋

圖1果酒、果醋制作流程圖2果酒、果醋制作裝置

(1)完成圖］中的實(shí)驗(yàn)流程O

(2)圖2裝置中的充氣口在________過程中要關(guān)閉，否則可能發(fā)生使發(fā)酵液變酸的反應(yīng)

(寫出該反應(yīng)式)，而排氣口在該過程中應(yīng)開放，排氣口要通過一個(gè)長而彎曲

的膠管與瓶身連接，目的是。

(3)葡萄酒呈現(xiàn)紅色的原因是,重鋁酸鉀在酸性條件下與酒精反應(yīng)呈_____色。

(4)果酒和果醋的制作分別利用了酵母菌和兩種微生物的發(fā)酵原理，后者在結(jié)構(gòu)上

的主要特點(diǎn)是。

【答案】(1).醋酸發(fā)酵(2).酒精發(fā)酵(3).C2H5OH+O2—->CH3COOH+H2O

(4).避免空氣中其他微生物進(jìn)入發(fā)酵裝置(防止空氣中的微生物污染)(5).紅色葡萄皮中

的色素溶解在發(fā)酵液中(6).灰綠(7).醋酸菌(8).無以核膜為界限的細(xì)胞核

【解析】

【分析】

分析圖1：圖1是果酒和果醋制作的實(shí)驗(yàn)流程，酒精發(fā)酵后還可以進(jìn)行果醋發(fā)酵。

分析圖2：圖2是果酒和果醋的發(fā)酵裝置圖，其中排料口的作用是出料、檢測(cè)；充氣口的作

用是在果醋制作時(shí)通入氧氣的;排氣孔是排氣，其彎彎曲曲的好處是防止雜菌和浮塵的污染。

【詳解】(1)圖1表示果酒、果醋制作的實(shí)驗(yàn)流程：挑選葡萄-沖洗-榨汁-酒精發(fā)酵-醋酸發(fā)

酵。

(2)圖2裝置中的充氣口在酒精發(fā)酵過程中要關(guān)閉，否則可能發(fā)生醋酸發(fā)酵，使發(fā)酵液變

酸的反應(yīng)C2H5OH+O2—->CH3coOH+H2O,而排氣口在該過程中應(yīng)開放，為了防止空氣

中的微生物污染，裝置中排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的膠管與瓶身相連。

(3)由于紅葡萄皮的色素進(jìn)入發(fā)酵液，所以葡萄酒呈現(xiàn)深紅色，果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)

生，可用重絡(luò)酸鉀來檢驗(yàn)，在酸性條件下呈現(xiàn)灰綠色證明有酒精產(chǎn)生。

(4)果酒制作利用酵母菌進(jìn)行發(fā)酵，果醋制作利用醋酸菌進(jìn)行發(fā)酵，酵母菌屬于真核生物，

醋酸菌屬于原核生物，真核生物和原核生物在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是原核生物沒有由核膜包

圍的細(xì)胞核。

【點(diǎn)睛】本題考查果酒和果醋的制作，意在考查考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記、理解和掌握程度，要

求考生具有扎實(shí)的基礎(chǔ)知識(shí)和一定的判斷能力，能構(gòu)建一定的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。

32.(江蘇省揚(yáng)州中學(xué)2020-2021學(xué)年高三開學(xué)檢測(cè)生物試題)藥物敏感試驗(yàn)簡稱藥敏試驗(yàn)，旨

在了解病原微生物對(duì)各種抗生素的敏感程度，以指導(dǎo)臨床合理選用抗生素.紙片擴(kuò)散法

(Kirby-Bauertest)是藥敏試驗(yàn)一種常用的方法，它將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種

測(cè)試菌的瓊脂平板上，紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后便不斷向紙片周圍區(qū)域擴(kuò)

散，形成遞減的梯度濃度，在紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的細(xì)菌生長被抑制，形成透明的抑菌

圈。

(平板的制備)

(1)關(guān)于藥敏試驗(yàn)所用的瓊脂平板制備過程，正確的順序是

A.稱量、溶解、定容、調(diào)pH、倒平板、滅菌

B.稱量、溶解、調(diào)pH、定容、倒平板、滅菌

C.稱量、溶解、定容、調(diào)pH、滅菌、倒平板

D.稱量、溶解、調(diào)pH、定容、滅菌、倒平板

（2）培養(yǎng)基的滅菌條件應(yīng)該設(shè)定為.

（測(cè)試菌接種）

（3）若使用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，在平板制備及測(cè)試菌接種環(huán)節(jié)，無需使用的工具是

D.

（抑菌圈觀察）

某研究小組將含有相同濃度抗生素I?iv的四個(gè)紙片分別貼放在生長有測(cè)試菌的瓊脂平板

上，在合適的溫度條件下孵育16h,結(jié)果如圖所示：

-含抗菌藥物的紙片

抑菌圈中的菌落

miv

（4）MIC是藥敏試驗(yàn)中評(píng)價(jià)抗生素藥效的常用指標(biāo)，其定義為某種抗生素對(duì)測(cè)試菌的最低

抑制濃度。根據(jù)上圖的試驗(yàn)結(jié)果可知，對(duì)于該試驗(yàn)所用測(cè)試菌而言，抗生素I的

MIC（選填“大于”“小于”或“等于"）抗生素III的MIC,

（5）在相關(guān)試驗(yàn)操作均嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范的情況下，在含有抗生素IV的紙片周圍出現(xiàn)了較大的抑菌

圈，抑菌圈中存在有若干個(gè)測(cè)試菌的菌落。試對(duì)上述現(xiàn)象的成因作出分析：

【答案】（1）.C（2）.lOOKPa,121℃,15?30min（3）.D（4）.大于（5）.抗

生素IV對(duì)于野生型測(cè)試菌具有較強(qiáng)的抑制作用，但測(cè)試菌中已經(jīng)出現(xiàn)能抵抗抗生素IV的

抗性突變株

【解析】

【分析】

1.制備牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng)基

其基本過程為計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。

2.純化大腸桿菌

（1）原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長成單個(gè)的菌落，這個(gè)單個(gè)菌

落就是一個(gè)純化的細(xì)菌菌落。

（2）微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。

在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成

單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可

形成單個(gè)菌落。

【詳解】（1）培養(yǎng)基制備的基本過程為計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板，因此關(guān)

于藥敏試驗(yàn)所用的瓊脂平板制備過程，正確的順序稱量、溶解、定容、調(diào)pH、滅菌、倒平

板。故選Co

（2）培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌，其滅菌條件一般在壓力為100kPa,溫度為121℃的條

2

件下,維持15?30min,而100kPa相當(dāng)于l.05kg/cmo

（3）該實(shí)驗(yàn)中，測(cè)試菌接種需要利用涂布平板的方法，因此首先需要利用培養(yǎng)皿倒平板，

然后用涂布器涂布平板，而涂布器滅菌時(shí)需要酒精燈燃燒殘余的酒精，ABC都需要，D的

接種工具接種環(huán)用于平板劃線法，故選D。

（4）MIC是藥敏試驗(yàn)中評(píng)價(jià)抗生素藥效的常用指標(biāo)，其定義為某種抗生素對(duì)測(cè)試菌的最低

抑制濃度。分析圖解可知，抗生素I的透明圈明顯小于抗生素HI,因此對(duì)于該試驗(yàn)所用測(cè)試

菌而言，抗生素I的MIC大于抗生素III的MIC。

（5）在相關(guān)試驗(yàn)操作均嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范的情況下，在含有抗生素IV的紙片周圍出現(xiàn)了較大的抑

菌圈，抑菌圈中存在有若干個(gè)測(cè)試菌的菌落。這種現(xiàn)象可能是由于抗生素IV對(duì)于野生型測(cè)

試菌具有較強(qiáng)的抑制作用，但測(cè)試菌中已經(jīng)出現(xiàn)能抵抗抗生素IV的抗性突變株。

【點(diǎn)睛】本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生具有一定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作

能力，識(shí)記培養(yǎng)基制備的方法以及滅菌的方法和條件，能夠結(jié)合圖示中抑菌圈的大小確定抗

生素的抑菌效果。

45.（內(nèi)蒙古通遼市開魯縣一中2020-2021學(xué)年高三上學(xué)期第二次階段性考試生物試題）水果

可以用來加工制作果汁、果酒和果醋等?；卮鹣铝袉栴}：

（1）制作果汁時(shí)，可以使用果膠酶、纖維素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果膠酶是分

解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、（答出2種即可）。纖維素酶可

以分解植物（填細(xì)胞膜或細(xì)胞壁）中的纖維素。

（2）用果膠酶處理果泥時(shí)，為了提高出汁率，需要控制反應(yīng)的溫度，原因是

（3）現(xiàn)有甲乙丙三種不同來源的果膠酶，某同學(xué)擬在果泥用量、溫度、pH等所有條件都相

同的前提下比較這三種酶的活性。通常，酶活性的高低可用來表示。

（4）獲得的果汁（如蘋果汁）可以用來制作果酒或者果醋，制作果酒需要

菌，這一過程中也需要02,的作用是。制作果醋需要醋酸菌，醋酸

菌屬于（填好氧或厭氧）細(xì)菌。

【答案】（1）.果膠分解酶、果膠酯酶（2）.細(xì)胞壁（3）.溫度對(duì)果膠酶活性有影響，

在最適溫度下酶活性最高，出汁率最高（4）.在一定條件下，單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中反

應(yīng)物的消耗量或者產(chǎn)物的增加量（5）.酵母（6）.促進(jìn)有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖

（7）.好氧

【解析】

【分析】

1、果膠是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物，不溶于水，在果汁加工中，果膠不

僅會(huì)影響出汁率，還會(huì)使果汁混濁。果膠酶能分解果膠，使榨取果汁變得更容易，也使得渾

濁的果汁變得澄清。果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解

酶和果膠酯酶等。

2、果酒的制作離不開酵母菌。酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧

呼吸，大量繁殖。在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。

3、醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。當(dāng)氧氣、糖源都

充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再?/p>

乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】（1）由分析可知，果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。植物

細(xì)胞壁由纖維素和果膠構(gòu)成，故可用纖維素酶分解細(xì)胞壁。

（2）酶發(fā)揮催化作用需要適宜的溫度和pH條件，在最適溫度下，果膠酶的活性最高，出

汁率最高。

（3）酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力，酶活性的高低可以用在一定條件下，單位

時(shí)間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的消耗量或者產(chǎn)物的增加量來表示。

（4）由分析可知，果酒的制作離不開酵母菌，在初期通入氧氣，可以促進(jìn)酵母菌的有氧呼

吸，使其大量繁殖；醋酸菌是一種好氧細(xì)菌。

【點(diǎn)睛】本題考查果酒、果醋的制作和果膠酶的相關(guān)內(nèi)容，要求考生識(shí)記制作果酒、果醋的

原理，掌握果汁生產(chǎn)中果膠酶的作用，并結(jié)合題干信息解題。

30.(云南省文山州2020-2021學(xué)年高三10月教學(xué)質(zhì)量檢測(cè)生物試題)桑甚果實(shí)富含多種營養(yǎng)

成分及黃酮類化合物，傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，桑甚能補(bǔ)益肝腎，黑發(fā)明目、養(yǎng)血生津，具有多種保

健功能。目前以桑意為原料開發(fā)的桑虞酒深受大眾歡迎。請(qǐng)回答下列問題：

(I)酵母菌的代謝類型為型，為篩選出適宜桑其果酒釀造的酵母菌株，應(yīng)

選擇(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基。

(2)在桑甚發(fā)酵的過程中，可以用來檢測(cè)是否有酒精生成，若要獲得對(duì)酒

精耐受能力強(qiáng)的酵母菌，可以通過(填"選擇”或"鑒別”)培養(yǎng)基采集存活下來

的菌株。

(3)在酵母菌培養(yǎng)過程中，需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，在倒平板時(shí)應(yīng)在

旁進(jìn)行。酵母菌在-20℃條件長期保存時(shí)，菌液中常需加入一定量的

(填“蒸儲(chǔ)水”或甘油”)。

(4)桑意中的黃酮甘一般難溶或不溶于水，易溶于乙醇等有機(jī)溶劑，若要提取桑甚中的黃

酮昔可以采用(填“蒸鐲”或“萃取”)的方法。

(5)傳統(tǒng)食品發(fā)酵技術(shù)都巧妙地利用了天然菌種及其代謝原理來實(shí)現(xiàn)人們的要求。例如，

桑甚酒的制作主要利用酵母菌的酒精發(fā)酵；果醋的制作利用的是；腐

乳的制作利用的主要是毛霉分泌的;泡菜制作利用的是乳酸菌的乳

酸發(fā)酵。

【答案】(1).兼性厭氧(2).固體(3).酸性的重銘酸鉀(4).選擇(5).高

壓蒸汽(6).酒精燈火焰(7).甘油(8).萃取(9).醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)化為醋酸

的代謝(10).蛋白酶、脂肪酶等

【解析】

【分析】

酵母菌為兼性厭氧型微生；配制成的液體狀態(tài)的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的

基質(zhì)稱為固體培養(yǎng)基。毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和

氨基酸：脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。在酸性條件下，用重銘酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)

灰綠色來檢測(cè)是否產(chǎn)生酒精。對(duì)于需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法。在3mL

的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻

后，放在-20℃的冷凍箱中保存。萃取是利