尿液中膀胱癌腫瘤標(biāo)記物的檢測

尿液中膀胱癌腫瘤標(biāo)記物的檢測膀胱癌是常見的惡性腫瘤之一，居男性泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤首位，且極易復(fù)發(fā)。傳統(tǒng)的診斷方法多有創(chuàng)傷性，而且檢測的方法或敏感性、特異性不高，或不能早期診斷。近幾年來采用免疫學(xué)、分子生物學(xué)等方法經(jīng)尿液檢測腫瘤標(biāo)記物診斷膀胱癌有了很多新進(jìn)展。一、免疫學(xué)方法1、有核絲分裂蛋白(Nuclearmitoticprotein,NMP)NMP是支持細(xì)胞核的一種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)蛋白。其中的NMP22是膀胱癌的診斷、術(shù)后復(fù)發(fā)有效的腫瘤標(biāo)記物。NMP22檢測試劑盒是通過雙抗體夾心ELISA法平檢測的。1996年Carpinito等用NMP22檢測試劑盒表明，移行細(xì)胞癌患者的NMP22水平與對比組(健康人或泌尿道良性疾病患者)有顯著差異，且腫瘤患者的NMP22水平不受化療、腫瘤惡性程度及范圍的影響，明顯優(yōu)于尿液細(xì)胞學(xué)檢查。Soloway等人用NMP22對膀胱移行細(xì)胞癌患者手術(shù)后復(fù)發(fā)進(jìn)行監(jiān)測，結(jié)果表明NMP22對膀胱癌復(fù)發(fā)者有很高的猜測性。其中陽性猜測率達(dá)86%。浸潤性癌100%?？偟年幮圆聹y率達(dá)70%。Carpinit。等對此有相同報道。用NMP22監(jiān)測膀胱癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的敏感性為73%,特異性為78.2%,精確性為76.9%，陽性猜測率58.6%，陰性猜測率87.8%O2、透亮質(zhì)酸及透亮質(zhì)酸酶透亮質(zhì)酸水平在膀胱癌患者中明顯上升，而透亮質(zhì)酸酶也可在高惡性的膀胱癌患者的尿液中監(jiān)測到。1997年，Pham等的檢測發(fā)覺，對G2/G3級膀胱癌患者尿液中透亮質(zhì)酸酶檢測的敏感性達(dá)100%,特異性達(dá)88.8%OLokeshwar等則對尿樣中透亮質(zhì)酸進(jìn)行檢測，對膀胱癌癥的診斷敏感性為91.9%,特異性92.8%。用簡潔的ELISA-Like法便可檢測到尿液中的透亮質(zhì)酸-透亮質(zhì)酸酶。二、分子生物學(xué)方法L端粒酶端粒酶是目前討論得最多的腫瘤標(biāo)記物，自1994年Kim等建立端粒重復(fù)擴增方法(TRAP)以來該法已被很多學(xué)者應(yīng)用。1997年Kinoshita等人檢測膀胱癌患者的尿液及膀胱沖洗液端粒酶活性，結(jié)果顯示陽性率為89%,而尿液細(xì)胞學(xué)檢查陽性率僅為42%e同期檢出的無癌患者皆為陰性。此外尿液端粒酶活性與癌細(xì)胞分級有關(guān)。G1陽性率為75%,G2為96%ODalbagni等對術(shù)后膀胱癌復(fù)發(fā)者的端粒酶活性檢測也得到相像結(jié)果。國內(nèi)也有同樣的報道。王翔等檢測膀胱癌患者的尿液及膀胱沖洗液中端粒酶陽性率為83.3%及87.5%0羅春麗等則對端粒逆轉(zhuǎn)酶(hTERT)進(jìn)行討論。結(jié)果表明膀胱癌患者尿脫落細(xì)胞hTERT表達(dá)陽性率為87.5%,特異性為86.7%,敏感性為87.5%。2、微衛(wèi)星灶(Micrisatellite)所謂"微衛(wèi)星”是指廣泛分布于基因組織中簡潔重復(fù)序列，采用PCR技術(shù)可以比較簡潔地檢測到微衛(wèi)星灶DNA的轉(zhuǎn)變。Mao等在采用尿液中的脫落細(xì)胞檢測原發(fā)性膀胱癌時敏感性可達(dá)95%,而相對應(yīng)的尿液細(xì)胞學(xué)檢查只有55%03、細(xì)胞分裂周期蛋白6(CDC6)CDC6在腫瘤組織中具有較高的表達(dá)。安成等應(yīng)用RT-PCR方法對膀胱癌患者尿液中脫落細(xì)胞的CDC6進(jìn)行檢測，結(jié)果陽性符合率為93.7%。而其它泌尿系統(tǒng)疾病患者和健康人尿液中CDC6檢測率只有16.7%04、CD44CD44是一種細(xì)胞外粘附分子，在尿液脫落癌細(xì)胞中CD44基因也有特別轉(zhuǎn)錄。Western雜交試驗發(fā)覺75%的膀胱癌患者的尿液細(xì)胞溶解物中可發(fā)覺幾種高分子量提CD44(>160KD),又寸比組貝［無。三、其它方法膀胱腫瘤抗原(bladdertumor.BTA)是由膀胱腫瘤上分別下來的獨特高分子蛋白水解降解復(fù)合物。Sarosdy等發(fā)覺采納BTA尿液檢測法對膀胱癌復(fù)發(fā)的診斷比尿液細(xì)胞更敏感。且特異性高達(dá)95.7%0對低度