高三生物一輪復(fù)習(xí)課件【 備課精講精研 + 能力拓展提升】 微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

第一單元

發(fā)酵工程第一講微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用考點(diǎn)分析：1闡明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的前提2闡明無菌技術(shù)是在操作過程中，保持無菌物品與無菌區(qū)域不被微生物污染的技術(shù)3舉例說明通過調(diào)整培養(yǎng)基的配方可有目的地培養(yǎng)某種微生物4概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行微生物分離和純化的常用方法5概述稀釋涂布平板法和顯微鏡計(jì)數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法01預(yù)學(xué)案一、發(fā)酵工程的培養(yǎng)基1、培養(yǎng)基的概念培養(yǎng)基是為人工培養(yǎng)微生物而制備的，適合微生物等生長、繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。①按成分組織微生物提取物牛肉膏蛋白胨取材營養(yǎng)配制營養(yǎng)成分重復(fù)性2、類型一、發(fā)酵工程的培養(yǎng)基①按成分準(zhǔn)確蒸餾水成分含量可重復(fù)性繁瑣較高瓊脂基礎(chǔ)特殊3．營養(yǎng)構(gòu)成：（1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基一般含有

、

、

和

。（2）在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對(duì)

、

以及O2的要求。例如：培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供

條件。一、發(fā)酵工程的培養(yǎng)基水碳源氮源無機(jī)鹽pH特殊營養(yǎng)物質(zhì)無氧一、發(fā)酵工程的培養(yǎng)基過濾加熱補(bǔ)足水5.5污染1/5滅菌自然傾斜名稱高壓蒸汽滅菌鍋100kPa121200g20g15-20g4、配制馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基

第一單元

發(fā)酵工程第一講微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用二、發(fā)酵工程的無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)：是發(fā)酵工程的重要技術(shù)之一，是指在操作過程中，保持物品與操作區(qū)域的

狀態(tài)并不被

污染的技術(shù)，其核心是

。獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。無菌微生物滅菌二、發(fā)酵工程的無菌技術(shù)比較項(xiàng)目消毒滅菌作用強(qiáng)度較為__________的物理或化學(xué)方法作用對(duì)象操作空間、操作者雙手等接種環(huán)、移液管、培養(yǎng)基等作用結(jié)果_____殺死所有微生物(如細(xì)菌_____)能殺死物體內(nèi)外的_____微生物，包括_____和孢子常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法等干熱滅菌法、濕熱滅菌法等溫和強(qiáng)烈不能芽孢所有芽孢（一）主要方法——消毒與滅菌典型例題【典例2】(

)(2021·天津卷)下列操作能達(dá)到滅菌目的的是A.用免洗酒精凝膠擦手B.制作泡菜前用開水燙洗容器C.在火焰上灼燒接種環(huán)D.防疫期間用石炭酸噴灑教室C典型例題4．()下列關(guān)于滅菌和消毒的敘述，錯(cuò)誤的是A．接種環(huán)、接種針用灼燒的方法滅菌B．滅菌是殺死物體內(nèi)外所有微生物C．消毒是殺死物體內(nèi)外絕大多數(shù)的微生物D．高壓蒸汽滅菌的原理是使細(xì)菌DNA變性D二、發(fā)酵工程的無菌技術(shù)①應(yīng)用：常用于

的玻璃器皿(如

、離心管、移液管)、

用具(如鑷子、手術(shù)刀)和其他耐高溫的物品(如菌種保藏采用的沙土管、石蠟油、碳酸鈣)的滅菌。②優(yōu)點(diǎn)：使滅菌器皿保持

。③缺點(diǎn)：帶有

或

的物品、液體及固體

一般不能采用電熱鼓風(fēng)干燥箱干熱滅菌?？张囵B(yǎng)皿金屬干燥膠皮塑料培養(yǎng)基（二）發(fā)酵工程的滅菌設(shè)備

1）電熱鼓風(fēng)干燥箱——干熱滅菌二、發(fā)酵工程的無菌技術(shù)2）高壓蒸汽滅菌鍋——濕熱滅菌水位標(biāo)記線排氣閥冷空氣103kPa121“0”溫度典型例題【變式2】()(2021·常州前黃)下列有關(guān)使用高壓蒸汽滅菌鍋的操作，錯(cuò)誤的是A.加水時(shí)，水面應(yīng)與三角擱架平齊B.加蓋時(shí)，將排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)C.加熱時(shí)，待冷空氣完全排盡后關(guān)上排氣閥D.切斷電源后，打開排氣閥使壓力表降到零后開蓋D二、發(fā)酵工程的無菌技術(shù)1.培養(yǎng)基滅菌為什么采用高壓蒸汽滅菌而不采用干熱滅菌？干熱滅菌箱內(nèi)的高溫會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基的水分散失，而高壓蒸汽鍋內(nèi)的濕度較大，不會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基的水分散失。2.如何制備一瓶無菌水？對(duì)一瓶有菌水進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理。3.某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是什么？未將鍋內(nèi)冷空氣排盡。4.某同學(xué)從高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)拿出培養(yǎng)基后發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基已經(jīng)濺滿了錐形瓶的瓶壁，最可能的原因是什么？高壓蒸汽滅菌鍋的壓力表指針還未降至“0”點(diǎn)，就提前打開了高壓蒸汽滅菌鍋。二、發(fā)酵工程的無菌技術(shù)3）空氣除菌設(shè)備：常采用

的方法，即讓含菌空氣通過無菌干燥的過濾介質(zhì)，以

空氣中所含微生物?？諝膺^濾除菌阻截三、發(fā)酵工程的無菌操作器具(1)接種器具①接種：在

條件下將微生物轉(zhuǎn)入

的操作過程。②常用接種器具包括玻璃涂布器、

、接種環(huán)等。③應(yīng)用：玻璃涂布器常用于

接種，接種針用于

接種，接種環(huán)用于

接種或在平板培養(yǎng)基上

接種。無菌培養(yǎng)基接種針平板稀釋涂布穿刺斜面劃線三、發(fā)酵工程的無菌操作器具(2)轉(zhuǎn)移器具①移液管的應(yīng)用：一般用于轉(zhuǎn)移部分

培養(yǎng)物、

微生物或

化學(xué)試劑。②刻度移液管：具有

的直形玻璃管，在需要控制試劑

時(shí)使用。③微量取液器：取液量

時(shí)(如0.1mL)使用。液體系列稀釋分裝刻度加入量很少三、發(fā)酵工程的無菌操作器具(3)超凈工作臺(tái)①概念：超凈工作臺(tái)是一種經(jīng)過

凈化而形成高潔凈操作環(huán)境的設(shè)備。②凈化原理：是利用工作臺(tái)內(nèi)

的殺菌作用，并通過

過濾確保工作臺(tái)內(nèi)空氣的無菌、無污染。③注意事項(xiàng)：超凈工作臺(tái)開機(jī)殺菌30min后，需先關(guān)掉

，約

后方可使用。空氣紫外線燈空氣過濾器三、發(fā)酵工程的無菌操作器具(3)超凈工作臺(tái)①概念：超凈工作臺(tái)是一種經(jīng)過

凈化而形成高潔凈操作環(huán)境的設(shè)備。②凈化原理：是利用工作臺(tái)內(nèi)

的殺菌作用，并通過

過濾確保工作臺(tái)內(nèi)空氣的無菌、無污染。③注意事項(xiàng)：超凈工作臺(tái)開機(jī)殺菌30min后，需先關(guān)掉

，約

后方可使用。空氣紫外線燈空氣過濾器紫外線燈10min四、微生物接種和傳代1.菌種的傳代和保存要考慮菌種的

、

特性，盡量讓菌種在人工創(chuàng)造的條件下，

細(xì)胞的代謝水平，使細(xì)胞基本處于

狀態(tài)，即微生物的生長繁殖受到抑制但又不至于

。2.菌種保存的重要條件：

。3.穿刺接種和斜面接種(1)厭氧微生物接觸氧氣會(huì)受到抑制、損傷甚至死亡，常采用

接種。(2)

是常用的菌種傳代和低溫下保存菌種的方法。生理生化降低休眠死亡低溫、干燥、真空穿刺斜面接種四、微生物接種和傳代4.菌種保存(1)臨時(shí)保藏：挑選典型菌落→接種在斜面培養(yǎng)基上→培養(yǎng)使其

生長→試管用牛皮紙包扎→置于

左右的冰箱中保存(目的：減緩培養(yǎng)基的____

，延長

)。每隔2～3個(gè)月

接種一次，再繼續(xù)保存。(2)長期保存：采用

的方法，放在

℃的冷凍箱中保存。充分4℃水分蒸發(fā)保存時(shí)間重新甘油冷凍管藏-20五、微生物的分離、純化和培養(yǎng)1、菌落：由

繁殖而來的肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。2、純化微生物（獲得單菌落）的方法

和

。3、原理：單個(gè)細(xì)胞微生物群單個(gè)菌落連續(xù)劃線分散或稀釋生長繁殖單個(gè)或少數(shù)微生物平板劃線法稀釋涂布平板法1234平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面。

（用于菌種分離、純化，最終獲得單個(gè)菌落）五、微生物的分離、純化和培養(yǎng)五、微生物的分離、純化和培養(yǎng)4、實(shí)例——純化酵母菌濕熱滅菌法平板劃線法未接種倒置探究三、斜面接種和培養(yǎng)酵母菌的操作步驟及其目的或分析說明順序接種操作步驟目的或分析說明①接種環(huán)滅菌將接種環(huán)的環(huán)端和接種時(shí)可能進(jìn)入試管的部分放在酒精燈火焰上，來回灼燒多次將接種環(huán)滅菌，避免污染菌種②試管口滅菌迅速將試管口通過火焰2～3次灼燒滅菌，防止試管口上的微生物污染培養(yǎng)基③挑取菌體將滅過菌的接種環(huán)伸入菌種管，先將環(huán)部接觸培養(yǎng)基斜面頂端或其他無菌體的培養(yǎng)基部位使接種環(huán)冷卻，避免殺死菌種抽出接種環(huán)時(shí)，帶菌部位不要觸及管壁或通過火焰防止菌種沾于管壁；防止菌種被殺死探究三、斜面接種和培養(yǎng)酵母菌的操作步驟及其目的或分析說明順序接種操作步驟目的或分析說明④接種在培養(yǎng)基斜面上由底部向上輕輕劃“Z”型折線，但不要將培養(yǎng)基的表面劃破劃破培養(yǎng)基不利于后續(xù)的繼續(xù)劃線，長出的菌落不標(biāo)準(zhǔn)將試管口與試管塞分別通過火焰2～3次，迅速塞緊試管防止雜菌污染⑤培養(yǎng)將接種過菌種的試管，放在恒溫箱(28℃)中培養(yǎng)24h培養(yǎng)酵母菌，觀察接種和培養(yǎng)的結(jié)果五、微生物的分離、純化和培養(yǎng)①為什么要將平板倒置？②為什么要同時(shí)放入未接種的平板？③在瓊脂平板表面多次做“由點(diǎn)到線”的稀釋劃線的目的是什么？既可以防止培養(yǎng)基表面的水分揮發(fā)；又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染作對(duì)照，該培養(yǎng)皿無菌落說明培養(yǎng)基沒有污染使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。五、微生物的分離、純化和培養(yǎng)a.操作第一步即取菌種之前以及每次劃線之前都需要將接種環(huán)進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的如下表：第一次劃線每次劃線前劃線結(jié)束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)量減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者5、平板劃線操作的注意事項(xiàng)五、微生物的分離、純化和培養(yǎng)b．灼燒接種環(huán)之后，要等其

后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。c．在第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的

開始劃線。d．劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與

相連。e．劃線用力要大小適當(dāng)，防止用力過大將

劃破。5、平板劃線操作的注意事項(xiàng)冷卻末端第一區(qū)域培養(yǎng)基典型例題【變式4】()如右圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列操作方法正確的是。A．操作前要將接種環(huán)放在火焰旁滅菌B．劃線操作須在火焰上進(jìn)行C．在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D．在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌D典型例題6．()在分離、純化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)中，劃線接種(甲)、培養(yǎng)結(jié)果(乙)如下圖。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A．接種前應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落C．接種過程中至少需要對(duì)接種環(huán)灼燒5次D．甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置D稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。

（用于菌種分離、計(jì)算）五、微生物的分離、純化和培養(yǎng)稀釋涂布平板法的操作過程——系列稀釋操作101102103104105106(1)將分別盛有9mL水的試管滅菌并編號(hào)。(2)用移液管吸取1mL培養(yǎng)的菌液，注入第二支試管中，輕壓橡皮頭，吹吸三次使之充分混勻。(3)從101倍稀釋的試管中吸取1mL稀釋液，注入102倍稀釋的試管中，重復(fù)步驟2，直到第六支試管。注意：移液管需要經(jīng)過滅菌，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1-2cm處稀釋涂布平板法的操作過程——涂布平板操作②取0.1mL菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。③將涂布器放在火焰上灼燒，待酒精燃盡、涂布器冷卻后，再進(jìn)行涂布。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使涂布均勻。待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后，將平板倒置，培養(yǎng)典型例題2．()平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法，下列描述正確的是A．都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B．平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面C．稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)D．都能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落D典型例題【變式5】()如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是A．3號(hào)試管的稀釋倍數(shù)為103倍B．5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109個(gè)C．5號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)恰為4號(hào)試管的10倍D．該方法和平板劃線法都可對(duì)微生物進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù)B（一）篩選菌株——利用選擇培養(yǎng)基分離。在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。例如：以

為唯一氮源的培養(yǎng)基可篩選出尿素分解菌；以

為唯一碳源的培養(yǎng)基可篩選出纖維素分解菌；以

為唯一碳源的培養(yǎng)基可篩選出石油分解菌；缺乏有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可篩選出

微生物；缺乏氮源的培養(yǎng)基可篩選出

微生物；加入抗生素的培養(yǎng)基可篩選出酵母菌、霉菌等真菌。尿素纖維素石油自養(yǎng)固氮典型例題【典例6】（）通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出：①大腸桿菌②霉菌③放線菌④固氮細(xì)菌A．④②③B．①②③C．①③④D．③④A（二）微生物計(jì)數(shù)方法1、

（活菌計(jì)數(shù)法）①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作：

a.設(shè)置

組，同一稀釋度下至少涂布

個(gè)平板，排除偶然因素對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)說服力和準(zhǔn)確性；b.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在

的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。c.設(shè)置對(duì)照：主要目的是排除

對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，例如為了排除培養(yǎng)基是否被雜菌污染了，需以培養(yǎng)未接種(或接種等量無菌水)的培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。③結(jié)果：統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目

，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是

。間接計(jì)數(shù)法重復(fù)330-300雜菌少一個(gè)菌落典型例題【典例5】()用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確的是。A．涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B．涂布了兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和260，取平均值238C．涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163D．涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和250，取平均值233D（二）微生物計(jì)數(shù)方法2、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法（總菌計(jì)數(shù)法）①主要用具：

和

。②血細(xì)胞計(jì)數(shù)板使用方法：先蓋蓋玻片，后滴培養(yǎng)液，再用吸水紙吸。③計(jì)算方法：每克樣品中的菌株數(shù)＝小方格中細(xì)胞平均數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)(個(gè)/mL)。注：計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)統(tǒng)計(jì)方格內(nèi)、相鄰兩邊及頂角上的細(xì)胞數(shù)。④結(jié)果：估算值比實(shí)際值偏

，因?yàn)樵摲椒ú荒軈^(qū)分細(xì)胞的死活。顯微鏡血球計(jì)數(shù)板或細(xì)菌計(jì)數(shù)板大典型例題(4)步驟⑤中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和______供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細(xì)胞密度，將發(fā)酵液稀釋1000倍后，經(jīng)等體積臺(tái)盼藍(lán)染液染色，用25×16型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)，理論上______色細(xì)胞的個(gè)數(shù)應(yīng)不少于________，才能達(dá)到每毫升3×109個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度。①分離原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣蒧______，這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程中起______作用。菌種篩選使用以尿素為唯一______的選擇培養(yǎng)基分離方法______________法實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣→__________→培養(yǎng)與觀察菌種鑒定以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入______指示劑稀釋涂布平板樣品稀釋酚紅脲酶催化氮源（三）土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)尿素分解尿素的細(xì)菌脲酶PH升高變紅酚紅指示劑氨土壤取樣→富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層土→以尿素為唯一氮源（選擇培養(yǎng)基）→不同微生物，稀釋度不同，以保證菌落數(shù)在30～300之間、適于計(jì)數(shù)的平板→培養(yǎng)溫度30-37℃→菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等→稀釋涂布平板法配制土壤溶液和培養(yǎng)基樣品梯度稀釋接種培養(yǎng)計(jì)數(shù)計(jì)算②實(shí)驗(yàn)流程（三）土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)（三）土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)02探究案1．培養(yǎng)基的種類探究一、培養(yǎng)基分類標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基特點(diǎn)作用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基外觀呈固態(tài)微生物的分離、計(jì)數(shù)等半固體培養(yǎng)基容器放倒不致流出，劇烈振動(dòng)則破散觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種等液體培養(yǎng)基呈液態(tài)常用于工業(yè)生產(chǎn)探究一、培養(yǎng)基1．培養(yǎng)基的種類用途基礎(chǔ)培養(yǎng)基含水、碳源、氮源、無機(jī)鹽等最基本物質(zhì)提供基本需求特殊培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基允許特定種類的微生物生長；抑制或殺死其他微生物選擇、分離鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒定、分離和篩選加富培養(yǎng)基加入有利于某些微生物生長和繁殖所需的特殊物質(zhì)增加所需分離的微生物的數(shù)量成分來源天然培養(yǎng)基化學(xué)成分還不清楚適用于工業(yè)化生產(chǎn)合成培養(yǎng)基化學(xué)成分及其含量明確多用于研究和育種探究一、培養(yǎng)基2.幾種選擇培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)特性主要用途設(shè)計(jì)原理加入青霉素、四環(huán)素分離酵母菌或霉菌等真菌青霉素能抑制細(xì)菌和放線菌生長，對(duì)真菌無作用不加氮源分離固氮微生物固氮微生物能利用空氣中的氮?dú)獠患犹荚捶蛛x自養(yǎng)型微生物自養(yǎng)型微生物能利用無機(jī)碳源探究一、培養(yǎng)基3.幾種常用的鑒別培養(yǎng)基名稱主要用途主要化學(xué)物質(zhì)特征性變化伊紅—亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌伊紅、亞甲藍(lán)出現(xiàn)帶金屬光澤的深紫色菌落剛果紅培養(yǎng)基鑒別纖維素分解菌剛果紅、纖維素纖維素被分解后出現(xiàn)透明圈油脂培養(yǎng)基鑒別產(chǎn)脂肪酶菌株食用油、吐溫、中性紅指示劑由淡紅色變成深紅色淀粉培養(yǎng)基鑒別產(chǎn)淀粉酶菌株可溶性淀粉淀粉被水解后出現(xiàn)淀粉水解圈溴甲酚紫培養(yǎng)基鑒別產(chǎn)酸微生物溴甲酚紫培養(yǎng)基顏色由紫色轉(zhuǎn)為黃色探究一、培養(yǎng)基3.幾種常用的鑒別培養(yǎng)基大腸桿菌（伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基）加入剛果紅的培養(yǎng)基加入酚紅指示劑的培養(yǎng)基探究二、消毒和滅菌的主要方法和應(yīng)用范圍項(xiàng)目主要方法應(yīng)用范圍巴氏消毒法62～65℃消毒30min或80～90℃處理30s～1min牛奶、啤酒、果酒和醬油等液體煮沸消毒法100℃煮沸5～6分鐘家庭餐具等生活用品化學(xué)試劑滅法用適宜濃度的甲醛、氯、高錳酸鉀等滅菌劑滅菌皮膚、傷口、空氣、手術(shù)器械、塑料等射線滅菌波長為200～300nm的紫外線、X射線、γ射線等一般用于表面和空氣的滅菌探究二、消毒和滅菌的主要方法和應(yīng)用范圍項(xiàng)目主要方法應(yīng)用范圍干熱滅菌法干熱空氣滅菌：140～160℃，2～3h培養(yǎng)皿、接種針、移液管等火焰灼燒法接種等操作過程濕熱滅菌法采用飽和蒸汽進(jìn)行滅菌：121℃，100kPa，維持15～20min培養(yǎng)基及多種器材、物品過濾除菌法采用過濾裝置除去微生物空氣、料液，及在高溫下不穩(wěn)定的物質(zhì)探究三、斜面接種和培養(yǎng)酵母菌的操作步驟及其目的或分析說明順序接種操作步驟目的或分析說明①接種環(huán)滅菌將接種環(huán)的環(huán)端和接種時(shí)可能進(jìn)入試管的部分放在酒精燈火焰上，來回灼燒多次將接種環(huán)滅菌，避免污染菌種②試管口滅菌迅速將試管口通過火焰2～3次灼燒滅菌，防止試管口上的微生物污染培養(yǎng)基③挑取菌體將滅過菌的接種環(huán)伸入菌種管，先將環(huán)部接觸培養(yǎng)基斜面頂端或其他無菌體的培養(yǎng)基部位使接種環(huán)冷卻，避免殺死菌種抽出接種環(huán)時(shí)，帶菌部位不要觸及管壁或通過火焰防止菌種沾于管壁；防止菌種被殺死探究三、斜面接種和培養(yǎng)酵母菌的操作步驟及其目的或分析說明順序接種操作步驟目的或分析說明④接種在培養(yǎng)基斜面上由底部向上輕輕劃“Z”型折線，但不要將培養(yǎng)基的表面劃破劃破培養(yǎng)基不利于后續(xù)的繼續(xù)劃線，長出的菌落不標(biāo)準(zhǔn)將試管口與試管塞分別通過火焰2～3次，迅速塞緊試管防止雜菌污染⑤培養(yǎng)將接種過菌種的試管，放在恒溫箱(28℃)中培養(yǎng)24h培養(yǎng)酵母菌，觀察接種和培養(yǎng)的結(jié)果探究四、微生物的純化培養(yǎng)(1)原理：在培養(yǎng)基上將微生物

或

成

，使其長成

，這個(gè)菌落就是一個(gè)純化的微生物菌落。稀釋分散單個(gè)細(xì)胞單個(gè)菌落探究